受病原物诱导的植物启动子PPPs在转基因辣椒中的活性

按GenBank中受病原物诱导的植物启动子(PPPs)的碱基序列设计3对引物,从烟草基因组中扩增到3个启动子PPP1,PPP2和PPP3.用PPPs替换pBI121中与uidA基因(编码β-葡萄糖醛酸酶GUS)相连的35S启动子,再将重组质粒导入农杆菌GV3101,构建了PPPs和uidA相连的转化单元.通过农杆菌介导法将受PPPs控制的uidA基因导入辣椒.对转基因辣椒叶片接种青枯菌无致病性菌株(AVRS1),24 h后检测GUS活性.结果表明,接种AVRS1后,PPPs启动了uidA的表达,GUS活性显著增强.

T_3代抗菌肽转基因辣椒的PCR检测及青枯病抗性测定

对T3代抗茵肽转基因辣椒的11个株系进行了PCR分子生物学检测,证明 T3代抗菌肽转基因辣椒仍保持外源抗菌肽基因;对T3代转基因辣椒群体进行了抗 枯病测定试验,转基因辣椒群体抗病力提高,表明在转基因辣椒中蚕抗菌肽D、B 基因得到了有效表达,从而缓减了青枯病症状。

抗CMV转基因辣椒实时荧光PCR检测方法研究

针对辣椒中转基因成分建立快速、高效、准确的实时荧光PCR检测方法,以缩短检测周期,提高检出率。结果表明,针对转基因辣椒的内源基因CaATL1和外源基因CMV建立的检测方法,具有很好的特异性,二者检测灵敏度均可达0.01%。本研究建立的检测方法特异性、灵敏度和准确度高,也比较方便快速,同时使用的是全部闭管操作,大大降低了普通PCR带来的污染,为转基因辣椒的检测提供了新的检验方法。

黄瓜花叶病毒和烟草花叶病毒在双抗转基因线辣椒内的增殖

本试验以转化CMV CP和TMV CP基因的转基因线辣椒纯合系植株作为研究试材 ,比较了单独或混合接种CMV和TMV后 ,转化线辣椒的抗病性表达特点 ,并测定了两种病毒在植株体内的病毒含量。结果表明 :转化线辣椒不仅能抵抗CMV和TMV的单独侵染 ,而且还能抵抗CMV和TMV的复合侵染。转化线辣椒表现为系统症状延迟出现 7 15d ,显症株率和病害严重度级别大幅度降低 ,CMV和TMV在接种叶、新生叶中的病毒含量明显减低。转基因线辣椒原生质体作为研究试材接种CMV ,测定病毒含量结果表明 :CMV病毒的增殖在转基因线辣椒原生质体内受到明显抑制。在CMV接种浓度为 4 0 μg/mL ,感染原生质体 4 8h后 ,CP(- )植株原生质体内CMV是CP(+)的 4 .2倍。这一结果揭示了转基因线辣椒具有抑制病毒增殖的抗病性。

转基因T5代线辣椒的毒理学安全性评价

转基因T5代线辣椒是一种新型转基因蔬菜，具有抗病毒、利于植物生长等特点。为确保食用安全，我们根据食品安全性评价程序，对其进行急性、亚慢性毒性及致突变性试验研究。结果如下： 一、急性毒性 通过霍恩氏法测得其大、小鼠急性经口毒性LD(50)均大于10000mg／kg，属实际无毒级。……

转基因食品安全性检验的核酸检测技术研究

以国际市场上转基因食品的主流产品转基因大豆及玉米和我国生产的转基因辣椒为材料 ,以PCR方法为基础 ,研究适用于转基因食品安全性检验的核酸检测技术。针对抗除草剂 (孟山都公司 )GM 大豆 ,转Bt 176玉米 (Novartis Ciba Geigy公司 )及转抗菌肽辣椒 (华农 )产品的插入基因及调控序列设计不同引物进行PCR检测。建立了转基因大豆、玉米、辣椒的鉴别和相关标记基因、目的基因检测的技术 ,该方法简便快速 ,检测结果与标准及申报材料相符。

转抗菌肽基因辣椒蛋白质检测技术研究

以转抗菌肽BD基因辣椒为材料 ,研究建立转基因食品中外源目的蛋白的检测技术 ,并建立对其忠实表达状况和安全性进行评价的模式。以柞蚕蛹免疫血淋巴作为标准 ,对照检测转抗菌肽辣椒目的蛋白表达的忠实性 ,采用针对转基因食品技术特点而预先设计的技术路线进行分析检测。研究和检测步骤为 :目的蛋白经粗提 ,达到初步纯化。再用两次CM Sepharose FF离子交换柱层析进行中度纯化。纯化产物通过测定抗菌活性、电泳及生物自显影、质谱进行鉴定。系统的检测结果表明 ,以抗菌肽目的基因构建的重组体在导入辣椒后 ,所表达的外源目的蛋白与对照标准蛋白的理化性质、抗菌活性、分子量一致 ,说明在该转基因辣椒中抗菌肽目的基因的表达是忠实的 ,与期望值相符。本研究建立了目的蛋白抗菌肽D的分离纯化及鉴定技术 ,建立了转基因辣椒外源目的蛋白的鉴定方法。

CP基因转化的线辣椒抗卡那霉素和抗CMV特性的遗传

利用根癌土壤杆菌 ,采用叶盘法转化线辣椒 (Capsicum annuum var.longunt)优良品种陕 82 12 ,建成了能同时表达 CMV和 TMV外壳蛋白基因 (CP基因 )的 T1 代纯合系。以其自交 T2 ～ T4代 ,以及 T2 代植株与未转化陕 82 12杂交的 F1 代和 F2 代群体为试材 ,研究了抗卡那霉素和抗黄瓜花叶病毒 (CMV)特性的遗传传递规律。结果发现 ,抗卡那霉素标记基因和抗病性基因在自交和杂交各代都能稳定地高效表达 ;两者在自交各代纯合 ;在杂交 F1 代抗药性和抗病性都表现为显性 ;在杂交 F2 代 ,抗药植株对敏感植株 ,以及抗病植株对感病植株的分离比都符合 3∶ 1的理论比例。

转CP基因线辣椒对CMV和CMV-RNA的抗病性比较

本试验以转化 CMV- CP和 TMV- CP基因线辣椒纯合系作试材 ,比较了接种 CMV粒体和CMV- RNA后的发病特点和叶片中的病毒含量。结果表明 :转化线辣椒不仅能抵抗 CMV粒体的侵染 ,而且还能抵抗 CMV- RNA的侵染。不论接种 CMV粒体或 CMV- RNA,CP(+ )线辣椒的系统症状都延迟出现 ,显症株率和病害严重度级别大幅度降低 ,病毒增殖和运转受到抑制 ,接种叶片与新生叶片中的病毒含量明显减低。这一结果证实 CMV- RNA不能克服线辣椒由 CP基因介导的抗病性。

信息选萃

农一师培育出长绒棉新品种 我国长绒棉育种又有了新的突破 ,经过 10年努力攻关 ,农一师农科所培育的 94— 2 0 6和 32 87两个长绒棉新品系 ,近日 ,通过了有关专家审定 ,它们分别被命名为新海 17号和新海 18号。新海 17号和新海 18号长绒棉品种 ,是农一师农科所科研人员在以往研究成果的基础上 ,杂交培育的新品种。其生长期均在 140天 ,株高 90～10 0 cm,在自治区第七次区域实验中 ,平均 6 6 6 .7m2 产籽棉分别为 2 96 .1kg和 2 81.9kg,比对照的其它品种增产35 .87%和 2 9.37% ,霜前花率高达90 % 。