重组人前脑啡肽原基因腺相关病毒载体的构建

目的 构建重组人前脑啡肽原基因(hPPE)腺相关病毒载体(AAV)。方法 构建质粒骨架上含有新霉素抗性基因表达盒的重组腺相关病毒(rAAV)载体质粒pSNAV-hPPE并酶切鉴定,转染金黄地鼠胚胎肾细胞(BHK 21),后用G418筛选培养形成稳定携带rAAV载体的混合细胞株BHK／SH1;再用HSV1-rc／△UI2感染、包装此细胞株并收获病毒载体rAAV-hPPE,并行DNA探针点杂交测定病毒滴度。结果 酶切鉴定pSNAV-hPPE重组成功,病毒滴度为2.5×1012v.g.／ml。结论 获得的rAAV-hPPE滴度高,感染性好,可以用于转基因镇痛的实验研究。

腺病毒载体的新进展和在生物镇痛中的应用

慢性疼痛的治疗在药物研究方面尚未取得明显突破。多年的实验证实，转基因细胞移植镇痛具有广阔的发展前景及潜在的巨大优势。载体是这项生物技术的核心，其发展与完善直接促进了生物镇痛的研究进展。近几年，作为载体重要分支之一的病毒载体技术更新较快，尤其是腺病毒载体的研究，有了重大突破，被广泛应用于基因治疗领域，取得较大成果。本文在总结腺病毒载体研究所取得的进展的基础上，对腺病毒载体应用于靶向性转基因细胞镇痛的近况做一综述。