TGF-β受体及其信号转导分子Smad4在大鼠纤维化肝脏的表达及意义

目的 为了探讨TGF β受体及其信号转导分子Smad4在大鼠肝纤维化中的表达及作用。方法 采用原位杂交和免疫组化技术检测TGF β受体及其信号转导分子Smad4的表达。 结果 肝纤维化时TGF βⅡ和Ⅰ型受体及其信号转导分子Smad4的表达显著增加 ,Smad4的表达主要位于门脉系统纤维间隔和肝小叶之间的非实质细胞 ,而TGF βⅡ和Ⅰ型受体的表达主要位于汇管区、窦周和纤维间隔。另外 ,仅有少量肝细胞表达Ⅱ型受体。结论 随着肝纤维化的发展TGF β受体及其信号转导分子Smad4的表达明显增加 。

LPS信号转导分子TLR_4表达与小鼠肝损伤的关系

目的 :探讨脂多糖 (lipopolysaccharide ,LPS)信号转导分子TLR4(Toll likereceptor 4 ,TLR4)与肝脏损伤的关系。方法 :小鼠腹腔注射LPS后不同时间点取肝脏组织 ,HE染色观察病理改变 ,RT PCR法检测肝组织TLR4mRNA的表达。结果 :腹腔注射LPS后 2 4h小鼠肝脏出现明显炎性浸润、坏死 ,肝组织TLR4mRNA的表达在注射LPS后 6 ,1 2h明显抑制 ,2 4h则基本恢复。结论 :LPS致肝损伤呈时间依从性 ;

日本血吸虫信号转导分子14-3-3蛋白epsilon亚型基因的克隆与序列分析

目的 克隆日本血吸虫 14 - 3- 3蛋白 epsilon亚型的编码基因 ,以研究其在血吸虫信号传导及其在免疫预防的作用。方法 以日本血吸虫成虫总 RNA为模板逆转录合成 c DNA链 ,设计合成引物 ,用 PCR法扩增14 - 3- 3蛋白 epsilon亚型基因编码序列 ,将其克隆入 p GEM- T载体 ,并用双酶切和以质粒为模板的 PCR进行鉴定。结果 RT- PCR扩增出一条约 75 3bp大小的特异性条带 ,重组质粒的双酶切和以质粒为模板的 PCR均获得了一条与 RT- PCR扩增出大小相同条带 ,序列测定结果表明其具有 75 3bp的开放阅读框 ,并具蛋白激酶、酪氨酸激酶磷酸化位点。结论 成功构建了日本血吸虫 14 - 3- 3蛋白 epsilon亚型重组 p GEM- T克隆载体 ,为进一步的研究提供了条件。

熟地及有效成分对老年学习记忆减退的信号转导分子变化的影响

学习记忆功能逐渐减退是衰老的显著特征之一。熟地及其复方常被作为防止记忆退化的益智药物使用,但熟地发挥益智作用的具体成分并不清楚。本文从信号转导分子方面综述中药熟地对老年学习记忆减退的影响及熟地有效成分对其可能影响。

茉莉酸甲酯:一种重要的植物信号转导分子

作为一种信号转导分子,茉莉酸甲酯在植物生长发育、代谢调节、抗病、耐逆、防御相关基因的诱导表达等方面均起着重要的作用。由于茉莉酸甲酯所具有的上述多效性,其作用与机制受到人们的广泛关注。本文简要介绍了植物中茉莉酸甲酯信号转导作用的相关研究进展。

G蛋白亚单位基因家族等信号转导分子研究进展

本文主要针对以G蛋白亚单位基因家族等信号转导分子研究进展为基础的创新药物分子设计新策略进行概述。就G蛋白的分子结构及其亚单位基因分类 ;G蛋白亚单位的基因结构特点 ;G蛋白活性的调节包括G蛋白激活剂、G蛋白拮抗剂和G蛋白信号转导调节因子 ;基于信号转导分子的药物设计策略 ,包括G蛋白分子与药物作用靶点、Ras和其他小分子量G蛋白、细胞周期分子、核受体与转录因子、信号转导的抑制剂等进行讨论 ,并对其前景进行了展望。

RhoA以及下游ROCK信号转导分子在前列腺癌中的研究进展

前列腺癌是西方国家威胁男性健康的最常见肿瘤。随着人口老龄化加剧，近年来前列腺癌在我国的发病率也呈上升趋势。在前列腺癌的发生及发展过程中涉及多种信号通路的复杂调控。目前已经证实了MAPK、P13K／Akt／mTOR通路以及TGF—f3／Smad等多种信号通路参与了前列腺癌的发生和发展以及转移。Ras超家族成员的RhoA激酶及下游的ROCK信号转导分子在肿瘤的发生和发展过程中具有多种效应，目前是研究前列腺癌发生及发展机制和靶点治疗热点之一。

信号转导分子smad4基因表达抑制体外培养人血管平滑肌细胞的增殖

目的:探讨细胞内转化生长因子β信号通路中信号转导分子Smad4与平滑肌细胞的增殖关系。方法:实验于2003-08/10在哈尔滨医科大学医学遗传学研究室完成。①取体质量200g左右的健康雄性SD大鼠,常规胶原酶消化法原代培养大鼠血管平滑肌细胞。用体积分数为0.2和0.05(去血清培养)胎牛血清和的Dulbecco改良的Eagle培养基,37℃,体积分数0.05CO2进行培养,2.5g/L胰酶消化传代。血管平滑肌细胞经锥虫蓝染色,存活细胞数在98%以上。形态学上出现典型的“峰和谷”样生长状态,抗平滑肌特异α-肌动蛋白免疫组织化学染色阳性。取3～8代细胞用于实验。②观察项目:转染前后细胞增殖能力和细胞凋亡能力的检测应用流式细胞分析仪和脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法凋亡检测试剂盒完成。smad4的表达及部分与细胞周期调控相关基因(p16、细胞周期调控激酶4和细胞周期因子E)和细胞凋亡基因(半胱天冬酶2和半胱天冬酶3)表达变化应用免疫印迹法和荧光免疫组化方法检测。结果:①转染前后细胞增殖能力和细胞凋亡能力流式细胞分析仪和脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法测定结果:smad4基因过表达调控人血管平滑肌细胞增殖能力下降DNA合成前期细胞明显增加[(72.33±4.35)%],正常培养细胞DNA合成前期细胞数相对较少[(45.88±1.58)%]。②smad4的表达及部分与细胞周期调控相关基因免疫印迹法和荧光免疫组化方法检测结果:转染后细胞凋亡能力增加;细胞周期抑制基因p16表达增加,细胞周期调控激酶4和细胞周期因子E表达下降,凋亡相关基因半胱天冬酶2和半胱天冬酶3表达增加。结论:smad4基因对血管平滑肌细胞增殖能力的抑制作用主要通过抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡的发生而实现。转化生长因子β信号传导通路对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用除了能够有效阻滞细胞周期的演进外,还能够诱导细胞凋亡。

磷脂酶C-γ1信号转导分子和肿瘤

磷脂酶C -γ1 (PLC -γ1 )是一个重要的信号转导分子 ,体内、体外的试验都发现PLC -γ1的过度表达能促进细胞转化、增加肿瘤细胞的侵袭性 ,而阻断PLC -γ1的表达可逆转恶性细胞的表型及减少其侵袭性 ,揭示PLC -γ1与肿瘤发生、发展密切相关 ,也预示着PLC

细胞内信号转导分子——Smad7在人牙胚发育中的表达和意义

目的 探讨Smad7在TGF_β调节牙胚发育过程中的作用。方法 采用免疫组化ABC法观察Smad7在人牙胚发育各个时期的表达分布及其变化情况。结果 人牙胚发育各个时期均表达Smad7,但各期分布模式有所不同。Smad7在不同发育时期牙胚中的分布与TGF_β及其特异的信号转导分子Smad2、3有相似之处。 结论 Smad7可能在TGF_β调节成釉细胞和成牙本质细胞分化的信号转导通路中起一定的作用。

黄芩汤联合二甲双胍治疗2型糖尿病疗效及对肠道菌群构成、胰岛素信号转导分子水平影响

目的:探讨黄芩汤辅助西药治疗糖尿病患者的疗效及对肠道菌群构成、胰岛素信号转导分子水平影响。方法:选取80例2型糖尿病门诊患者临床资料进行前瞻性研究,根据患者就诊的先后顺序,采用随机数字表达法将所有2型糖尿病患者分为治疗组与对照组,每组各40例。对照组采用基础西药治疗,治疗组在基础西药治疗基础上加黄芩汤治疗。比较两组患者的疗效、肠道菌群构成情况、胰岛素信号转导分子水平情况。结果:治疗组总有效率明显高于对照组(87.50%>60.00%),差异有统计学意义(P<0.05),结果提示,黄芩汤可以明显的改善糖尿病患者的临床症状。肠道菌群构成的结果提示,黄芩汤改变糖尿病患者的厚壁菌门(Firmicutes)和拟杆菌门(Bacteroidetes)两种细菌的构成。进一步对两组患者的胰岛素信号转导分子水平表达情况进行测定结果发现,黄芩汤对糖尿病患者胰岛素受体底物-1(IRS-1)、胰岛素受体底物-2(IRS-2)的上调和细胞因子信号转导抑制因子-3(SOCS-3)的下调均起到了加速的作用。结论:黄芩汤可能通过调控肠道菌群构成改善2型糖尿病,同时可改善胰岛素信号转导分子水平。

信号转导分子与支气管哮喘气道炎症

支气管哮喘(简称哮喘)是一种以气道慢性炎症为特征的异质性疾病。气道结构细胞和炎症细胞分泌的多种炎症介质和细胞因子的相互作用构成了一个复杂的网络,最终导致气道慢性炎症。信号转导通路中的关键分子在气道炎症反应中起着分子开关的作用,参与调控细胞内外的信息传递及气道炎症反应持续的时间和强度。探讨这些信号转导分子在哮喘气道炎症网络中的作用对于阐明哮喘发病机制、研发新型抗炎药物有着重要意义。

Toll样受体2、4及其转导分子MyD88和炎性复合体在肾小管间质性肾病中的重要作用

肾小管间质性肾炎（TIN）会导致肾功能的降低以及间质性炎症并且最终引起肾脏纤维化。黄嘌呤脱氢酶（XDH）可以将腺嘌呤转换成不溶性的化合物，在肾小管中析出，引起。肾结石以及广泛的肾小管扩张、坏死和凋亡。因此过量的含腺嘌呤类食物的摄入可引起慢性TIN，并伴有纤维化沉积。先天免疫传感器，如Toll样受体（TLR）和炎性复合体，在炎症的引发环节发挥至关重要的作用。

微小RNA-182-5p和信号转导分子7在翼状胬肉中的表达及临床意义

目的检测微小RNA-182-5p(miR-182-5p)和信号转导分子7(SMAD7)在翼状胬肉中的表达情况,探讨二者与患者临床病理特征及预后的相关性。方法选择2018年6月—2021年6月在本院眼科进行手术切除的原发性翼状胬肉组织标本150例进行研究,另选择同期因白内障手术获取的正常球结膜标本60例作为对照。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测标本miR-182-5p、SMAD7 mRNA表达水平;采用免疫组织化学染色检测SMAD7蛋白表达水平;采用Pearson法分析翼状胬肉组织中miR-182-5p与SMAD7 mRNA表达水平的相关性;采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-182-5p和SMAD7的靶向关系。结果翼状胬肉组织中,miR-182-5p表达水平为(2.26±0.45),高于正常结膜组织的(1.05±0.12);SMAD7 mRNA表达水平为(0.67±0.12),低于正常结膜组织的(1.03±0.15);SMAD7蛋白阳性表达率为23.33%,低于正常结膜组织的71.67%;上述组间差异均有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示,翼状胬肉组织中miR-182-5p与SMAD7 mRNA表达呈负相关(r=-0.536,P<0.05);双荧光素酶报告基因实验结果证实miR-182-5p与SMAD7存在靶向关系;miR-182-5p在进展期表达水平高于静止期,SMAD7在进展期阳性表达低于静止期,差异有统计学意义(P<0.05);与治愈组比较,复发组翼状胬肉组织miR-182-5p表达水平较高,SMAD7 mRNA表达水平及SMAD7阳性表达率较低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论翼状胬肉组织中,miR-182-5p呈高表达,SMAD7呈低表达,且二者均与患者临床病理特征和预后有关,或可成为翼状胬肉的治疗靶点。

混合式教学在《细胞信号转导的分子机理》教学中的实践研究

目的探讨线上线下混合式教学模式对《细胞信号转导的分子机理》课程教学效果的影响。方法选择采取混合式和线上两种教学方式的2022级博士生(n=697)为研究对象,分别采取线下或线上教学方式的2021级博士生(n=692)为对照,对学生的期末成绩和调查问卷满意度进行分析和统计,评估教学效果。结果2022级线上线下混合教学效果优于2021级线下教学;在采用混合式教学改革的班级中,约90%的博士生对课程的目标、内容的应用性和添加最新研究进展方面满意,认为该课程有助于学生科研思维的培养和课题研究的开展。结论混合式教学模式能够提高本课程的教学效果,促进学生对理论知识的深入理解和应用,得到了学生们的认可。

转化生长因子β1及其信号转导分子Smad4,Smad7在人脑胶质瘤中的表达及其意义

目的 探讨转化生长因子 β1及其超家族肽类的细胞内转导分子Smad4和Smad7在人脑胶质瘤中的表达及其意义。方法 采用免疫组织化学方法 ,对经过石蜡包埋的 3 0例胶质瘤和8例正常脑组织标本进行定位和定性检测。结果 TGF β1,Smad4和Smad7蛋白在胶质瘤中均有不同程度的表达 ,Smad4的表达水平随着胶质瘤恶性程度的增高而降低 ,且在正常脑组织、低、高级别胶质瘤组中的表达差异有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ;TGF β1,Smad7在正常脑组织中几乎不表达 ,在低级别胶质瘤 (Ⅰ Ⅱ级 )中表达较少 ,在高级别胶质瘤 (Ⅲ Ⅳ级 )中表达较多 ,两者在正常脑组织及高、低级别胶质瘤中的表达两两比较差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。且TGF β1与Smad7的表达水平呈正相关 (r =0 .78,P <0 .0 1) ;TGF β1与Smad4的表达水平呈负相关(r =-0 .67,P <0 .0 1)。结论 TGF β1,Smad7蛋白的阳性表达与组织学分级密切相关 ,它们参与了在人脑胶质瘤细胞的恶性转化 ,而Smad4对胶质瘤的进展有抑制作用。

小儿脓毒症Toll样受体信号途径转导分子及调节因子的变化研究

目的探讨Toll样受体（TLRs）信号途径转导分子及调节因子在小儿脓毒症异常炎症免疫反应发病机制中的可能作用。方法选择脓毒症患儿10例、严重脓毒症患儿13例及同期健康体检儿童17例。采用实时荧光定量聚合酶链反应（real—time PCR）检测前炎症细胞因子[肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）]，以及TLRs信号途径转导分子和调节因子的mRNA表达；采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测前炎症细胞因子蛋白水平。结果与健康对照组比较，脓毒症组TNF-α、IL-1β和IL-6的mRNA和蛋白表达均增加，TLRs信号途径转导分子TLR2、TLR4、髓样细胞分化蛋白-88（MyD88）、TNF相关因子6（TRAF6）、IL-1受体相关激酶4（IRAK4）、转化生长因子-β活化激酶1（TAK1）、TAK1结合蛋白2（TAB2）的mRNA表达以及TLRs信号途径正性调节因子TLR4相关蛋白（PRAT4B）、信号转换接头蛋白2（STAP2）的mRNA表达均明显增高（P均〈0．01），且严重脓毒症组较脓毒症组升高更显著（P均〈0．01）。脓毒症组TLRs信号途径负性调节因子IL-1受体相关激酶3（IRAK—M）、核转录因子-κB抑制性锌指蛋白（Triad3A）的mRNA表达均明显增高（P均〈0．01），严重脓毒症组表达则明显低于脓毒症组（P均〈0．01）。结论TLRs信号途径转导分子／调节因子异常表达可能是脓毒症时全身炎症反应的原因之一。

清心开窍方及皂苷对AD大鼠学习记忆能力及脑组织凋亡信号转导分子,Aβ及βAPP表达的影响

目的:探讨清心开窍方及其皂苷成分对Aβ25-35杏仁核注射诱导AD大鼠学习记忆能力及脑组织凋亡信号转导分子,Aβ及βAPP表达的影响。方法:雄性SD大鼠40只,随机分为正常组、模型组、安理申组、清心开窍方组和皂苷组,每组8只。采用双侧杏仁核注射Aβ25-35(10 g.L-1)制造AD大鼠模型,造模后第2天起,分别灌胃给药安理申(1.67 mg.kg-1)、清心开窍方水煎剂(12.67 mL.kg-1)、皂苷(6.30 mg.kg-1)及双蒸水,2周后,观察大鼠水迷宫空间记忆能力,并通过免疫组化方法研究脑组织Caspase-3,Aβ及βAPP的表达。结果:中药各组能明显改善AD大鼠学习记忆能力,与对照组比较有显著性差异(P<0.05,P<0.01);清心开窍方组、皂苷组大鼠大脑皮层、海马区Caspase-3,Aβ及βAPP表达水平降低,与模型组比较差异非常显著(P<0.01,P<0.05)。结论:清心开窍方及其皂苷能显著改善AD大鼠学习记忆的能力,可能是通过降低皮质、海马Caspase-3,Aβ及βAPP表达发挥作用。

转化生长因子-β信号转导分子Smads在染石英小鼠肺组织中的表达

目的 观察染石英小鼠肺组织Smads蛋白的表达情况,探讨其与矽肺肺纤维化的联系。方法 采用暴露式气管内注入法给小鼠一次性染石英(0.2 g/kg体重)。染石英后第1、3、5、7、14、28天分批取小鼠肺组织,用免疫组织化学技术结合图像定量分析检测其TGF-β1、Smad2/3、Smad4和Smad7蛋白的表达。结果 小鼠Smad2/3蛋白表达在染石英后第3天[(39.7±2.9)PU]开始增高,与对照组[(35.6±1.7)PU]的差异有统计学意义(P<0.05),第14天达到高峰[(42.2±2.4)PU],而后呈现下降趋势;Smad4蛋白表达在染石英后第5天开始增高,同样在第14天达到高峰[(40.0±1.8)PU],而后逐渐下降;Smad7蛋白表达开始呈现下降趋势,第28天回升,其表达水平最低在第14天[(33.5±3.3)PU],但仍低于对照组。小鼠Smad2/3和Smad4的表达分别与TGF-β1蛋白表达呈明显相关(r分别为0.91、0.71,P<0.05),Smad7则未见相关。Smad2/3的表达在染石英后第1-14天之间与肺组织羟脯氨酸含量呈正相关(r=0.85,P<0.05)。结论Smads蛋白与矽肺肺纤维化可能有一定的联系。