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转座子挽救法对苜蓿中华根瘤菌与耐盐有关基因的定位
被引量:
4
1
作者
李小红
杜秉海
+2 位作者
章晓庆
王磊
杨苏声
《Acta Genetica Sinica》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2004年第1期91-96,共6页
用含Tn5转座子的质粒pRL10 6 3a诱变苜蓿中华根瘤菌 (Sinorhizobiummeliloti) 0 4 2BM ,得到盐敏感突变株0 4 2BML 2。采用转座子挽救法对Tn5插入位点两边的序列进行克隆与测序 ,获得了 1179bp的转座子插入位点侧翼DNA序列。在GenBank...
用含Tn5转座子的质粒pRL10 6 3a诱变苜蓿中华根瘤菌 (Sinorhizobiummeliloti) 0 4 2BM ,得到盐敏感突变株0 4 2BML 2。采用转座子挽救法对Tn5插入位点两边的序列进行克隆与测序 ,获得了 1179bp的转座子插入位点侧翼DNA序列。在GenBank中进行序列同源性和基因定位分析 ,结果表明 :转座子插入在一个功能未知的基因内部 ,此基因长 6 2 70bp。研究证明 :该基因与 0 4 2BM的耐盐性有关 ,并定名为rtsC。氨基酸疏水性分析表明 ,在RtsC蛋白的N端有两个跨膜区 ,该蛋白与细菌趋化性相关蛋白的功能域有同源性。并对RtsC蛋白在苜蓿中华根瘤菌0 4
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关键词
苜蓿中华根瘤菌
耐盐
转座子挽救法
跨膜蛋白
RtsC
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职称材料
转座子挽救法对转座子突变菌株中插入位点的定位分析
被引量:
4
2
作者
阮红
Bernhard Eikmanns
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第3期326-330,共5页
为寻找谷氨酸棒杆菌转座子插入突变菌株中的转座子插入位点 ,采用了转座子挽救法对转座子及其插入位点附近的序列进行分离 ,并测定插入位点相邻DNA序列 ,获得了三个转座子插入位点DNA序列 ,其中一个是柠檬酸合成酶基因 ,另两个为目前未...
为寻找谷氨酸棒杆菌转座子插入突变菌株中的转座子插入位点 ,采用了转座子挽救法对转座子及其插入位点附近的序列进行分离 ,并测定插入位点相邻DNA序列 ,获得了三个转座子插入位点DNA序列 ,其中一个是柠檬酸合成酶基因 ,另两个为目前未知基因 ,暂命名为orfA和orfB。该方法简便易行 。
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关键词
转座子挽救法
转座子
突变菌株
插入位点
定位分析
插入突变
谷氨酸棒杆菌
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职称材料
转座子挽救法克隆鞘氨醇单胞菌CDS-1中呋喃丹水解酶相关基因
3
作者
徐剑宏
洪青
+2 位作者
武俊
严秋香
李顺鹏
《应用与环境生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第5期677-681,共5页
用含Tn5转座子的自杀性质粒pSC123诱变呋喃丹降解菌Sphingomonas agrestis CDS-1,获得失去呋喃丹降解功能的突变株CDS-M1.以pMD18-T为载体在E. coli DH5α中构建了CDS-M1的基因组文库,采用转座子挽救法对Tn5插入位点两侧翼的序列进行克...
用含Tn5转座子的自杀性质粒pSC123诱变呋喃丹降解菌Sphingomonas agrestis CDS-1,获得失去呋喃丹降解功能的突变株CDS-M1.以pMD18-T为载体在E. coli DH5α中构建了CDS-M1的基因组文库,采用转座子挽救法对Tn5插入位点两侧翼的序列进行克隆与测序,根据测序结果(共4551个碱基)设计引物,从CDS-1的基因组中扩增到同样大小的片段,把该片断克隆到广宿主载体pPZP201上,得到重组质粒pCDZ1,通过三亲接合的方法把pCDZ1导入CDS-M1中进行功能互补实验,结果显示CDS-M1的呋喃丹水解功能得到了恢复,表明该片断中包含呋喃丹水解酶相关基因.
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关键词
SPHINGOMONAS
agrestis
CDS-1
呋喃丹
转座子挽救法
基因克隆
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职称材料
题名
转座子挽救法对苜蓿中华根瘤菌与耐盐有关基因的定位
被引量:
4
1
作者
李小红
杜秉海
章晓庆
王磊
杨苏声
机构
中国农业大学生物学院微生物学系农业部微生物资源与应用重点实验室
出处
《Acta Genetica Sinica》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2004年第1期91-96,共6页
基金
国家重点基础研究发展规划项目 ( 0 0 1CB10 890 5 )
欧盟科技合作项目 (ICA4 CT 2 0 0 1 10 0 5 6)资助~~
文摘
用含Tn5转座子的质粒pRL10 6 3a诱变苜蓿中华根瘤菌 (Sinorhizobiummeliloti) 0 4 2BM ,得到盐敏感突变株0 4 2BML 2。采用转座子挽救法对Tn5插入位点两边的序列进行克隆与测序 ,获得了 1179bp的转座子插入位点侧翼DNA序列。在GenBank中进行序列同源性和基因定位分析 ,结果表明 :转座子插入在一个功能未知的基因内部 ,此基因长 6 2 70bp。研究证明 :该基因与 0 4 2BM的耐盐性有关 ,并定名为rtsC。氨基酸疏水性分析表明 ,在RtsC蛋白的N端有两个跨膜区 ,该蛋白与细菌趋化性相关蛋白的功能域有同源性。并对RtsC蛋白在苜蓿中华根瘤菌0 4
关键词
苜蓿中华根瘤菌
耐盐
转座子挽救法
跨膜蛋白
RtsC
Keywords
Sinorhizobium meliloti
salt tolerance
transposon rescue
transmembrane protein
RtsC
分类号
S144 [农业科学—肥料学]
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职称材料
题名
转座子挽救法对转座子突变菌株中插入位点的定位分析
被引量:
4
2
作者
阮红
Bernhard Eikmanns
机构
浙江大学生命科学学院
Ulm大学微生物与生物技术学系
出处
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第3期326-330,共5页
基金
德国政府DAAD奖学金
国家教育部联合资助
文摘
为寻找谷氨酸棒杆菌转座子插入突变菌株中的转座子插入位点 ,采用了转座子挽救法对转座子及其插入位点附近的序列进行分离 ,并测定插入位点相邻DNA序列 ,获得了三个转座子插入位点DNA序列 ,其中一个是柠檬酸合成酶基因 ,另两个为目前未知基因 ,暂命名为orfA和orfB。该方法简便易行 。
关键词
转座子挽救法
转座子
突变菌株
插入位点
定位分析
插入突变
谷氨酸棒杆菌
Keywords
Transposon rescue, Insertion mutagenesis, Corynebacterium glutamicum
分类号
Q933 [生物学—微生物学]
下载PDF
职称材料
题名
转座子挽救法克隆鞘氨醇单胞菌CDS-1中呋喃丹水解酶相关基因
3
作者
徐剑宏
洪青
武俊
严秋香
李顺鹏
机构
江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所
南京农业大学生命科学学院
出处
《应用与环境生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第5期677-681,共5页
基金
国家自然科学基金项目(No.30400013)资助~~
文摘
用含Tn5转座子的自杀性质粒pSC123诱变呋喃丹降解菌Sphingomonas agrestis CDS-1,获得失去呋喃丹降解功能的突变株CDS-M1.以pMD18-T为载体在E. coli DH5α中构建了CDS-M1的基因组文库,采用转座子挽救法对Tn5插入位点两侧翼的序列进行克隆与测序,根据测序结果(共4551个碱基)设计引物,从CDS-1的基因组中扩增到同样大小的片段,把该片断克隆到广宿主载体pPZP201上,得到重组质粒pCDZ1,通过三亲接合的方法把pCDZ1导入CDS-M1中进行功能互补实验,结果显示CDS-M1的呋喃丹水解功能得到了恢复,表明该片断中包含呋喃丹水解酶相关基因.
关键词
SPHINGOMONAS
agrestis
CDS-1
呋喃丹
转座子挽救法
基因克隆
Keywords
Sphingomonas agrestis CDS-1
carbofuran
transposon rescue
gene cloning
分类号
X172 [环境科学与工程—环境科学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
转座子挽救法对苜蓿中华根瘤菌与耐盐有关基因的定位
李小红
杜秉海
章晓庆
王磊
杨苏声
《Acta Genetica Sinica》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2004
4
下载PDF
职称材料
2
转座子挽救法对转座子突变菌株中插入位点的定位分析
阮红
Bernhard Eikmanns
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002
4
下载PDF
职称材料
3
转座子挽救法克隆鞘氨醇单胞菌CDS-1中呋喃丹水解酶相关基因
徐剑宏
洪青
武俊
严秋香
李顺鹏
《应用与环境生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
0
下载PDF
职称材料
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