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真核RNA聚合酶Ⅱ无细胞体外转录体系的构建及其应用
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作者 王永俊 琦祖和 沈珝琲 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1993年第1期68-71,共4页
近年来,研究真核基因的转录调控已成为分子生物学的热点之一。为了研究 DNA 元件或蛋白质因子在转录过程中的作用,建立无细胞体外转录体系是十分必要的。到目前为止,发现至少有六种必需的蛋白质因子参与 RNA 聚合酶Ⅱ的起始转录。绝大部... 近年来,研究真核基因的转录调控已成为分子生物学的热点之一。为了研究 DNA 元件或蛋白质因子在转录过程中的作用,建立无细胞体外转录体系是十分必要的。到目前为止,发现至少有六种必需的蛋白质因子参与 RNA 聚合酶Ⅱ的起始转录。绝大部分RNA 聚合酶Ⅱ的无细胞转录体系来自哺乳动物或果蝇的组织培养细胞的提取物。本文研究了人的白介素-2受体α链基因(IL-2Rα)在 HeLa 细胞提取物中的转录。 展开更多
关键词 全细胞提取物 无细胞 转录体系
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真核转录的分子基础——2006年诺贝尔化学奖成果简介 被引量:1
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作者 姜琳 殷勤伟 《科技导报》 CAS CSCD 2006年第12期8-11,共4页
美国斯坦福大学医学院教授RogerD.Kornberg被授予2006年度诺贝尔化学奖,以表彰他在“真核转录的分子基础”研究领域所作出的杰出贡献。Kornberg的贡献在于,其花费10年时间构建了体外酵母细胞转录体系,并将结晶学与生化知识相结合,描述了... 美国斯坦福大学医学院教授RogerD.Kornberg被授予2006年度诺贝尔化学奖,以表彰他在“真核转录的分子基础”研究领域所作出的杰出贡献。Kornberg的贡献在于,其花费10年时间构建了体外酵母细胞转录体系,并将结晶学与生化知识相结合,描述了RNA聚合酶II及包括通用转录因子、调节器、DNA和RNA在内的复合物结构图。此外,他还首先在分子水平上阐明了真核细胞中转录机制的全过程。现有的证据表明转录分子机制的研究对于各种疾病的治疗以及干细胞的分化调节均具有重大的实际意义。 展开更多
关键词 诺贝尔化学奖 真核转录 RNA聚合酶Ⅱ 调节器 酵母细胞转录体系
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小麦芽依赖于DNA的RNA聚合酶Ⅱ不能转录绒毛烟斑驳病毒及其拟病毒
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作者 于平 卢文筠 +1 位作者 康良仪 田波 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1989年第2期145-149,共5页
小麦芽经过匀浆、沉淀、高速及超速离心、透析以及DE_(52)离子交换层析等步骤,纯化小麦芽依赖于DNA的RNA聚合酶。用α-鹅膏蕈碱抑制试验,证明得到RNA聚合酶Ⅱ。用此聚合酶Ⅱ组建的体外转录体系的研究结果表明,绒毛烟斑驳病毒的拟病毒和... 小麦芽经过匀浆、沉淀、高速及超速离心、透析以及DE_(52)离子交换层析等步骤,纯化小麦芽依赖于DNA的RNA聚合酶。用α-鹅膏蕈碱抑制试验,证明得到RNA聚合酶Ⅱ。用此聚合酶Ⅱ组建的体外转录体系的研究结果表明,绒毛烟斑驳病毒的拟病毒和卫星RNA(黄瓜花叶病毒相关RNA_3)都不能利用该体系进行转录,类病毒PSTV可进行转录,但转录效率明显低于小牛胸腺DNA;α-鹅膏簟碱可抑制类病毒的转录。绒毛烟斑驳病毒拟病毒和卫星RNA都不能被转录,表明他们的复制方法与类病毒不同。 展开更多
关键词 烟斑驳病毒 休外转录体系 聚合酶
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Two Retroviruses Packaged in One Cell Line can Combined Inhibit the Replication of HIV-1 in TZM-bl Cells 被引量:1
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作者 Zhipin Liang Zhiyuan Guo +2 位作者 Xin Wang Xiaohong Kong Chang Liul 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2012年第6期339-344,共6页
The cellular protein tetherin tethers the HIV-1 viral particles on the cellular membrane to inhibit the replication of HIV-1. However, the HIV-1 accessory protein Vpu counteracts the antiviral function of tetherin. In... The cellular protein tetherin tethers the HIV-1 viral particles on the cellular membrane to inhibit the replication of HIV-1. However, the HIV-1 accessory protein Vpu counteracts the antiviral function of tetherin. In this study, two retroviral vector plasmids were constructed. One inhibited the vpu gene expression; the other one over-expressed the tetherin. Both retroviral vector plasmids could be packaged in the packaging cell line PT67 to obtain the corresponding retroviruses. The retroviral vector plasmids' functions of tetherin over-expression or vpu-RNAi were detected at the cell level. Retroviral vector plasmids were transfected to PT67 cells at different ratios from 0T3V to 3TOV, and then mixed retroviruses were harvested. The antiviral functions of mixed retroviruses were detected in HIV-1 infected TZM-bi cells. The results showed that packaged mixed retroviruses could repress the replication of HIV-1 in TZM-bl cells. 展开更多
关键词 HIV- 1 VPU TETHERIN Gene therapy
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清痹片对类风湿关节炎KLF6-FRP调控体系的干预作用 被引量:8
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作者 刘维 吴沅皞 +3 位作者 刘晓亚 张磊 薛斌 陈英俊 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期2862-2865,共4页
目的:探讨清痹片对KLF6-FRP调控体系的干预作用,为中医药治疗类风湿关节炎(RA)的机制研究和推广应用提供依据。方法:复制胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠模型,随机分为空白组,模型组,清痹片低剂量组、中剂量组、高剂量组,并以甲氨蝶呤(MTX)... 目的:探讨清痹片对KLF6-FRP调控体系的干预作用,为中医药治疗类风湿关节炎(RA)的机制研究和推广应用提供依据。方法:复制胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠模型,随机分为空白组,模型组,清痹片低剂量组、中剂量组、高剂量组,并以甲氨蝶呤(MTX)治疗组作为阳性对照,致炎第21天起每天给药干预。分别于第35天和第49天各处死一半动物,取腕关节行免疫印迹法检测Kruppel样转录因子6(KLF6)、卵泡抑素相关蛋白(FRP),踝关节行免疫组化法实验检测转化生长因子β1(TGFβ1)、肿瘤坏死因子α(TNFα)、白细胞介素1β(IL-1β)、基质金属蛋白酶3(MMP-3),比较各组间各炎性蛋白表达的差异。结果:成功复制CIA模型,模型组KLF6、FRP、TGFβ1、TNFα、IL-1β、MMP-3蛋白表达水平较空白组升高(P<0.01);清痹片中、高剂量组KLF6蛋白表达水平与模型组相比较低而FRP较高(P<0.01),并显示出一定的量效依赖关系;清痹片中、高剂量组FRP蛋白表达水平与MTX组相比较高(P<0.01);清痹片各剂量组、MTX组TGFβ1、TNFα、IL-1β、MMP-3表达水平均低于模型组;清痹片高剂量组TNFα、IL-1β、MMP-3表达水平低于MTX组(P<0.01)。结论:清痹片可能通过提高TGFβ1的下游产物FRP表达水平以及直接或间接抑制KLF6及其下游靶基因TGFβ1、炎性细胞因子IL-1β、TNFα和MMP-3等炎症介质的基因表达,从而干预KLF6-FRP调控体系,控制相关因子对RA病变过程的影响。 展开更多
关键词 清痹片 解毒通络法 类风湿关节炎 胶原诱导型关节炎 Kruppel样转录因子6-卵泡抑素相关蛋白调控体系
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Metastasis-related genes in hepatocellular carcinoma cell-lines are clustered on chromosome territories predicted by transcriptome and proteome
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作者 Li Feng Hong Li +7 位作者 Yang Zhang Huali Shen Hongxiu Yu Fan Zhong Lunxiu Qin Fuchu He Pengyuan Yang Zhaoyou Tang 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS CSCD 2016年第3期380-382,共3页
Recently, we have analyzed expressional transcriptome and proteome for a number of cancer cell lines, including 8 hepatocellular carcinoma (HCC) ones [1,2]. These 8 HCC cell lines consist of 6 metastatic (all with ... Recently, we have analyzed expressional transcriptome and proteome for a number of cancer cell lines, including 8 hepatocellular carcinoma (HCC) ones [1,2]. These 8 HCC cell lines consist of 6 metastatic (all with mutant p53) and 2 non-metastatic (with a mutant and a lost p53) ones, being all HBV traceable for relatively close genetic-backgrounds. We have analyzed the related dataset and obtained transcrip- tome (16353 genes) and proteome (7861 proteins) of these 8 HCC cell lines, and explored a group of up-regulated and down-regulated genes [3]. 展开更多
关键词 Cell culture Chromosomes GENES PATHOLOGY
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