积雪草酸调控白细胞介素-6/信号转导子和转录激活子3/核转录因子-κB通路对哮喘小鼠Treg/Th17免疫平衡的影响

目的:探讨积雪草酸调控白细胞介素(IL)-6/信号转导子和转录激活子3(STAT3)/核转录因子-κB(NF-κB)通路对哮喘小鼠Treg/Th17免疫平衡的影响。方法:采用卵清蛋白(OVA)致敏和激发来制备哮喘小鼠模型,随机分为模型组、积雪草酸低剂量组(54 mg/kg)、积雪草酸高剂量组(108 mg/kg)、积雪草酸高剂量(108 mg/kg)+Colivelin(IL-6/STAT3/NF-κB激活剂,2 mg/kg)组,每组各10只。另选10只小鼠在致敏和激发阶段给予等剂量生理盐水设为对照组,用积雪草酸和Colivelin分组处理各组小鼠后检测其肺组织病理形态,肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞计数,外周血Treg/Th17,BALF和血清中Treg、Th17细胞分泌因子水平,肺组织IL-6/STAT3/NF-κB通路相关蛋白表达。结果:与对照组比较,模型组小鼠肺组织发生明显病理损伤,外周血Treg细胞占比和Treg/Th17,BALF和血清IL-10、IL-35水平降低(P<0.05)。肺部炎症评分,BALF中白细胞计数与嗜酸粒细胞计数,外周血Th17细胞占比,BALF和血清IL-17、IL-6水平,肺组织IL-6蛋白表达与p-STAT3/STAT3、p-NF-κB p65/NF-κB p65升高(P<0.05)。低、高剂量积雪草酸可逆转哮喘模型小鼠上述病理变化,且高剂量积雪草酸作用更强。Colivelin可减弱积雪草酸对哮喘模型小鼠上述病理变化的作用。结论:积雪草酸可通过减弱IL-6表达与STAT3、NF-κB的磷酸化,抑制哮喘小鼠炎症细胞及炎症因子产生,从而减轻气道炎症及肺组织损伤,改善肺功能。

GRIM-19在卵巢癌细胞株中的高表达及其意义

将高表达GRIM-19的重组质粒经脂质体转染到卵巢癌细胞株(SK-OV-3)中,构建稳定高表达GRIM-19的SK-OV-3/GRIM-19细胞株,并设SK-OV-3/Control对照细胞株。通过逆转录聚合酶链反应和免疫印迹法检测GRIM-19及其下游基因信号转导和转录激活子3(STAT3)的表达,运用四甲基偶氮唑蓝法检测细胞增殖情况。结果成功建立了高表达GRIM-19的SK-OV-3/GRIM-19细胞株,并发现STAT3的表达明显下调;MTT检测结果显示,SK-OV-3/GRIM-19细胞株增殖较SK-OV-3/Control细胞株明显下调(P<0.05)。提示GRIM-19的高表达可以抑制卵巢癌细胞株的增殖,并且下调STAT3的表达。

苦参碱调节IL-6/STAT3/NF-κB信号通路对炎症性肠病大鼠Th17/Treg平衡的影响

目的探讨苦参碱(MT)调节白细胞介素-6(IL-6)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)/核转录因子κB(NF-κB)通路对炎症性肠病大鼠辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡的影响。方法按照随机数字表法将SD大鼠分为空白对照组(CK组)、Model组,低、中、高剂量MT组(MT-L组,50 mg/kg;MT-M组,100 mg/kg;MT-H组,200 mg/kg),美沙拉嗪组(MSLM组,0.42 g/kg)、MT-H+rIL-6(IL-6激活剂)组(200 mg/kg+0.05 mg/kg),每组18只。除CK组外,其余组大鼠均采用50 g/L三硝基苯磺酸(20 mg/kg)缓冲液与500 mL/L乙醇按照1∶1比例混匀后灌肠以构建炎症性肠病大鼠模型,建模成功后,分别进行给药处理,每天1次,持续7周。分别在给药1、3、5、7周时对大鼠进行体质量的测量;比较各组大鼠结肠长度的变化;HE染色检测大鼠结肠组织病理损伤;ELISA法检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-17(IL-17)、IL-10水平;流式细胞术检测大鼠外周血中Th17、Treg细胞比例;Western blotting检测大鼠结肠组织中维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)、叉头框蛋白P3(Foxp3)、IL-6、p-STAT3、p-NF-κB p65蛋白表达。结果与CK组比较,Model组大鼠结肠组织病理损伤严重,体质量(3、5、7周时)、IL-10水平、Treg细胞比例、Foxp3蛋白表达降低,结肠变短,TNF-α、IL-17水平、Th17细胞比例、Th17/Treg比值、RORγt、IL-6、p-STAT3、p-NF-κB p65蛋白表达增高(P<0.05);与Model组比较,MT-L组、MT-M组、MT-H组、MSLM组对应指标变化趋势与上述相反(P<0.05);rIL-6减弱了高剂量MT对炎症性肠病大鼠Th17/Treg平衡的促进作用。结论MT可能通过抑制IL-6/STAT3/NF-κB信号通路,促进炎症性肠病大鼠Th17/Treg平衡。

转录因子和转录激活因子4人细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4和染色体9p21．3遗传多态性与闽南地区人群类风湿关节炎相关性研究

目的探讨转录因子和转录激活因子4（STAT4）rs7574865、人细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4（CTLA-4）rs3087243基因以及染色体9p21.3 rs1333049单核苷酸多态性（SNPs）与闽南地区人群RA的关联。方法选取119例RA患者和125名健康对照者，应用三引物扩增法（AS-PCR）对RA相关的3个SNPs位点进行基因分型，并应用SPSS 18.0统计软件分析不同基因型与RA发病的相关性。采用χ2检验和Logistic回归模型进行分析。结果RA组STAT4 rs7574865各基因型分布频率与健康对照组比较，差异有统计学意义（P〈0.01），与G/T杂合基因型相比，TT与GG纯合性携带者患病风险要低（OR=0.498和0.300，P=0.018和P=0.002）；CTLA-4 rs3087243各基因型分布频率与健康对照组比较，差异无统计学意义（χ^2=4.083，P=0.130），但根据计算，其中与A/G基因型相比，GG型携带者患病风险要低（OR=0.580，P=0.04）；9p21.3上的SNP（rs1333049）无论基因型还是等位基因在RA与健康志愿者组间差异无统计学意义，但是经计算发现与GG基因型携带者相比，CC和GC携带者发病风险要低（OR=0.565，P=0.049 5）。结论STAT4 rs7574865和CTLA-4 rs3087243和rs1333049与闽南地区人群RA发病均有一定相关性。

6BIO通过JAK1-STAT3信号转导通路抑制小鼠B16恶性黑色素瘤细胞的增殖

目的研究（2’Z，3’E）-6-溴靛玉红-3’-肟衍生物（6BIO）对小鼠B16恶性黑色素瘤细胞增殖能力的影响。方法免疫组化法检测6BIO处理不同时间（24、36、48h）后B16细胞增殖指数Ki67的表达；Western blot法检测6BIO处理不同时间（1、6、12、24h）后B16细胞中磷酸化JAK激酶1蛋白（p-JAK1）和磷酸化信号转录子和转录激活子3蛋白（p-STAT3）的表达。结果6BIO处理不同时间后B16细胞增殖指数Ki67的表达均呈时间依赖性降低（P〈0．01）。6BIO能够时间依赖性抑制B16细胞中p-JAK1和p—STAT3蛋白的表达（P〈0．01）。结论6BIO能够通过抑制JAK1-STAT3信号转导通路抑制小鼠B16恶性黑色素瘤细胞的增殖。

种子萌发调控的研究进展

种子萌发是植物生命周期的起始.在萌发过程中,干燥种子从静止状态迅速恢复代谢活性,导致胚突破周围结构以完成萌发.种子萌发是一个复杂的多步骤过程,受许多内源和外源因子的调控,在物种生存与繁衍和作物生产中具有重要的生物学和经济意义,但其分子调控机制目前还不完全清楚.近年来,种子萌发及其调控的研究已取得了许多重要的成就.本文在此基础上综述了种子萌发调控的研究进展,主要包括种子萌发的生理调节、植物激素特别是脱落酸和赤霉素的作用、基因转录和转录后控制、特异性调控因子以及表观遗传的调控,并提出了在本领域需要进一步研究的科学问题,试图为深入理解种子萌发的分子机制,从而为提高种子萌发活力和防止穗萌发提供参考.

阿芬太尼对心肌缺血再灌注老龄大鼠心肌细胞凋亡及STAT3/OPA1通路的影响

目的探讨阿芬太尼对心肌缺血再灌注(MIR)老龄大鼠心肌细胞凋亡及信号转导和转录活化因子(STAT)3/视神经萎缩(OPA)1通路的影响。方法将老龄大鼠随机分为假手术组、模型组、阿芬太尼低、中、高剂量(5、10、20μg/kg)组和阳性对照组(美托洛尔,5μg/kg),造模结束后处死大鼠。进行2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色,并用Image Pro Plus6.0软件计算大鼠心肌梗死体积百分比,采用TUNEL法检测心肌活性氧(ROS)阳性细胞率,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平,Western印迹法检测心肌STAT3、p-STAT3、OPA1、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3蛋白表达水平。结果与假手术组比较,其余各组心肌梗死体积百分比、ROS、MDA水平、Bax和Caspase-3蛋白表达升高,SOD水平、p-STAT3/STAT3、OPA1和Bcl-2蛋白表达降低,差异显著(P<0.05)。与模型组比较,各阿芬太尼剂量组心肌梗死体积百分比、ROS、MDA水平、Bax和Caspase-3蛋白表达降低,SOD水平、p-STAT3/STAT3、OPA1和Bcl-2蛋白表达升高,且随着阿芬太尼剂量增加,各指标呈明显剂量依赖性,差异显著变化(P<0.05)。与阳性对照组比较,各阿芬太尼剂量组心肌梗死体积百分比、ROS、MDA水平、Bax和Caspase-3蛋白表达升高,SOD水平、p-STAT3/STAT3、OPA1和Bcl-2蛋白表达降低,差异显著(P<0.05)。结论阿芬太尼通过激活STAT3/OPA1通路,抑制MIR损伤老年大鼠心肌细胞凋亡,对MIR损伤具有一定的保护作用。

STAT3在宫颈鳞状上皮病变组织中的表达及意义

目的探讨信号转录和转录活化因子3(Signal transducer and activator transcription3,STAT3)在宫颈鳞状上皮病变组织中的表达及意义。方法采用RT-PCR方法检测13例宫颈炎组织、12例宫颈上皮内瘤变(Cervical intraepithelialneoplasia,CIN)Ⅰ级、17例CINⅡ-Ⅲ级及33例宫颈鳞状上皮细胞癌(squamous cell carcinoma,SCC)组织中STAT3mR-NA表达.结果 STAT3的表达与宫颈上皮病变的级别和临床分期无关(P均>0.10),与病理分级呈正相关(r=0.52,P<0.05),有脉管浸润和淋巴结转移组及浸润深度>3mm组显著高于无脉管浸润和淋巴结转移组及浸润深度≤3mm组,(P均<0.05);Cox回归分析结果显示STAT3的表达与宫颈癌的不良预后无关。结论 STAT3不能直接促进SCC的发生、发展,但对SCC的浸润、转移、分化起直接的促进作用,STAT3能否成为宫颈癌基因治疗的靶点有待于进一步研究。