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利用RIG质粒在大肠杆菌中有效表达转录因子类蛋白
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作者 何云刚 赖建华 +2 位作者 钱伟 陈瑶 谭德勇 《云南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 2002年第2期130-133,共4页
大肠杆菌是常用的基因工程蛋白表达系统宿主菌 ,而密码子偏倚性常常成为某些异种蛋白质在大肠杆菌中成功表达的障碍 .利用含有编码多种稀有tRNA的重组质粒RIG ,一个含有大量稀有密码子的人类线粒体转录终止因子样蛋白成功地在大肠杆菌... 大肠杆菌是常用的基因工程蛋白表达系统宿主菌 ,而密码子偏倚性常常成为某些异种蛋白质在大肠杆菌中成功表达的障碍 .利用含有编码多种稀有tRNA的重组质粒RIG ,一个含有大量稀有密码子的人类线粒体转录终止因子样蛋白成功地在大肠杆菌中得到表达 .证明使用RIG质粒是克服大肠杆菌密码子偏倚性的有效手段 . 展开更多
关键词 稀有密码 密码子偏倚性 RIG质粒 大肠杆菌 基因表达 转录因子类蛋白
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肾透明细胞癌组织中转录因子19基因选择性剪接异构体的类型和表达特点 被引量:1
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作者 钱涛 林丽萍 +6 位作者 常文军 曹廷虎 徐兴兴 杨印辉 张宏伟 侯建国 曹广文 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期706-710,共5页
目的探讨人肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)是否存在与细胞生长调节相关的转录因子19(TCF19)选择性剪接异构体,探索其表达特点及其与ccRCC发生的关系。方法通过选择性剪接数据库(alternative Spli-cing Database,A... 目的探讨人肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)是否存在与细胞生长调节相关的转录因子19(TCF19)选择性剪接异构体,探索其表达特点及其与ccRCC发生的关系。方法通过选择性剪接数据库(alternative Spli-cing Database,ASD)对TCF19基因可能存在的选择性剪接异构体种类进行预测。设计可能存在的5种异构体引物,采用RT-PCR技术,在32例原发肾透明细胞癌的混合样本及癌旁组织的混合样本中分别检测预测异构体的表达,并对电泳所获条带进行克隆、测序。应用RT-PCR定量检测在各个组织样本中异构体TCF19-1、TCF19-3在原发肾癌及癌旁组织的表达差异。结果 ccRCC组织中存在2种新型TCF19替换剪接异构体(TCF19-1、TCF19-3)。RT-PCR检测结果发现这2种异构体在癌和癌旁组织中均表达,但TCF19-1在原发癌组织中表达率高于癌旁组织(P<0.001);TCF19-3在癌旁组织中的表达率与原发癌组织比较,差异无统计学意义(P=0.082)。结论首次发现ccRCC组织中存在2种TCF19选择性剪接异构体TCF19-1和TCF19-3,其中TCF19-1的表达可能与ccRCC有关。 展开更多
关键词 转录因子类 肾肿瘤 选择性剪接 异构体
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类转录激活因子效应物核酸酶(TALEN)介导的基因组定点修饰技术 被引量:52
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作者 沈延 肖安 +3 位作者 黄鹏 王唯晔 朱作言 张博 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期395-409,共15页
人工构建的序列特异性核酸内切酶能够识别并切割特定的DNA靶序列,造成双链断裂,从而引起基因组结构的定点改变。人工核酸内切酶技术使得研究人员有可能对任意物种的基因组进行定点修饰,开启了反向遗传学研究的新天地。类转录激活因子效... 人工构建的序列特异性核酸内切酶能够识别并切割特定的DNA靶序列,造成双链断裂,从而引起基因组结构的定点改变。人工核酸内切酶技术使得研究人员有可能对任意物种的基因组进行定点修饰,开启了反向遗传学研究的新天地。类转录激活因子效应物核酸酶(Transcription activator-like effector nuclease,TALEN)自2010年底开始成功应用于基因打靶,很快成为一种比锌指核酸酶(Zinc-finger nuclease,ZFN)更容易设计、特异性更高和毒性更低的人工核酸内切酶。文章综述了TALEN技术的研究进展及应用前景,重点介绍TALEN的结构、作用机制与构建方法和利用TALEN进行基因组定点修饰的策略,以及目前利用这一技术已成功实现突变的物种及内源基因,特别是在斑马鱼中的应用,为开展这一领域的研究工作提供参考。 展开更多
关键词 转录激活因子效应物(TALE) 转录激活因子效应物核酸酶(TALEN) 人工核酸内切酶(EEN) 基因组编辑 基因组定点修饰
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花生中DREB类转录因子PNDREB1的克隆及鉴定 被引量:9
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作者 张梅 刘炜 +1 位作者 毕玉平 王自章 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1973-1980,共8页
脱水响应元件结合因子(DREB)是一类对多个抗逆相关基因表达起调控作用的植物特有的转录因子,在植物抗逆能力综合改良方面具有重要作用。本研究通过筛选花生未成熟种子的cDNA文库,分离到一个DREB类基因——PNDREB1(FM955398)。该基因序... 脱水响应元件结合因子(DREB)是一类对多个抗逆相关基因表达起调控作用的植物特有的转录因子,在植物抗逆能力综合改良方面具有重要作用。本研究通过筛选花生未成熟种子的cDNA文库,分离到一个DREB类基因——PNDREB1(FM955398)。该基因序列长度为687bp,推测编码蛋白含有229个氨基酸残基,相对分子量为24.7kD,理论等电点为5.97,与其他物种中该类转录因子序列同源性较高。利用酵母单杂交系统,对花生PNDREB1与DRE元件的特异识别和结合能力及其C-末端转录激活活性进行检测,显示,转入含有该基因及阳性对照基因的载体均可使酵母菌株正常生长,且具有显色反应,而转入空载体的酵母菌株不能生长,证明基因PNDREB1中的AP2结构域具有和DRE元件特异性结合的能力;同时,只有转入含有该基因C-末端片段及阳性对照基因的载体可使酵母菌株正常生长,并具有显色反应,而转入空载体的酵母菌株不能生长,说明其C-末端片段具有转录激活活性,该基因为DREB类转录因子。基因表达模式分析显示,PNDREB1为组成型表达,且被低温强烈、迅速诱导表达,并对干旱胁迫也有一定程度的响应,但对高盐和ABA处理没有响应。 展开更多
关键词 花生 DREB转录因子 PNDREB1 酵母单杂交 表达模式 低温 干旱
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ERF类转录因子OPBP1基因的超表达提高烟草的耐盐能力 被引量:26
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作者 刘文奇 陈旭君 +2 位作者 徐晓晖 凌建群 郭泽建 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 2002年第6期473-478,共6页
ERF是植物中的一类重要的转录因子 ,参与调节植物的生长、发育以及抗胁迫等过程。对一烟草OPBP1基因 (属于ERF类基因 )的烟草转化 ,获得了该基因超表达的植株 ,转基因植株明显地增加了耐盐能力。Northern杂交结果表明 ,OPBP1基因有不同... ERF是植物中的一类重要的转录因子 ,参与调节植物的生长、发育以及抗胁迫等过程。对一烟草OPBP1基因 (属于ERF类基因 )的烟草转化 ,获得了该基因超表达的植株 ,转基因植株明显地增加了耐盐能力。Northern杂交结果表明 ,OPBP1基因有不同程度的表达 ,而且表达丰度与其耐盐性有一定的正相关性。凝胶阻滞实验结果证明OPBP1融合蛋白能特异地与含GCC盒的DNA序列结合。这些结果说明OPBP1基因可能作为一转录因子来调节烟草耐盐相关的基因。 展开更多
关键词 ERF转录因子 OPBP1基因 超表达 烟草 耐盐能力
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MYB类转录因子在植物细胞生长发育中的作用及其应用 被引量:6
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作者 刘忠丽 丛悦玺 +2 位作者 苟维超 王响 陈坤明 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2012年第1期174-179,共6页
MYB是植物中重要的转录因子家族之一,它在调节花色素形成,抵抗逆境胁迫,调节棉花纤维发育等过程中发挥着重要的作用,且上述过程以MYB为中心,相互制约和影响。文章简要综述了人们近年来对于MYB在花色素形成、环境胁迫应答以及棉花纤维发... MYB是植物中重要的转录因子家族之一,它在调节花色素形成,抵抗逆境胁迫,调节棉花纤维发育等过程中发挥着重要的作用,且上述过程以MYB为中心,相互制约和影响。文章简要综述了人们近年来对于MYB在花色素形成、环境胁迫应答以及棉花纤维发育的过程中的作用。 展开更多
关键词 MYB转录因子 花色素 干旱 棉花纤维
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烟草中NAC类转录因子基因的克隆及分析 被引量:4
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作者 戚元成 王菲菲 +1 位作者 刘卫群 高美娟 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期2225-2233,共9页
【目的】克隆烟草NAC类转录因子基因,分析其序列特征和表达特性,为深入研究NAC类转录因子对烟草打顶后根系的生长发育与烟碱生物合成之间的关系奠定基础。【方法】采用电子克隆结合RT-PCR获得烟草NtNAC-R1全长cDNA序列,并进行生物信息... 【目的】克隆烟草NAC类转录因子基因,分析其序列特征和表达特性,为深入研究NAC类转录因子对烟草打顶后根系的生长发育与烟碱生物合成之间的关系奠定基础。【方法】采用电子克隆结合RT-PCR获得烟草NtNAC-R1全长cDNA序列,并进行生物信息学分析,用pRESTB原核表达系统进行该基因的原核表达。分别采用RT-PCR和Northern杂交对烟草打顶前、后根尖组织中NtNAC-R1的表达模式进行分析。【结果】烟草NtNAC-R1开放性阅读框架长度为936 bp,编码311个氨基酸,具有NAC转录因子家族典型的保守结构域。系统进化分析表明,该基因与矮牵牛NAC亲缘关系较近,属茄科植物特异NAC家族,在原核细胞中具有表达活性。该基因在烟草根中的表达水平最高,在烟草打顶后2—4 h表达水平下降,随后上升。【结论】从烟草根尖组织中克隆了一个NAC转录因子基因NtNAC-R1,该基因在根系中具有高水平表达,在烟草打顶后2—4 h表达水平显著降低,具有响应烟草打顶所导致的信号传递作用。 展开更多
关键词 烟草 NAC转录因子 RT-PCR NORTHERN杂交 组织表达
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植物中DREBs类转录因子及其在非生物胁迫中的作用 被引量:26
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作者 张梅 刘炜 毕玉平 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期236-244,共9页
低温、干旱、高盐等非生物胁迫能够严重影响植物的生长及作物的产量。最近发现了许多调控多种与逆境相关基因表达的转录因子,其中DREBs类转录因子能够通过与含有DRE/CRT顺式作用元件的抗逆相关基因启动子区相互作用,进而调控一系列抗逆... 低温、干旱、高盐等非生物胁迫能够严重影响植物的生长及作物的产量。最近发现了许多调控多种与逆境相关基因表达的转录因子,其中DREBs类转录因子能够通过与含有DRE/CRT顺式作用元件的抗逆相关基因启动子区相互作用,进而调控一系列抗逆基因的表达,使植物品质得到综合改良从而提高植物对非生物胁迫耐受力。文章通过对DREBs的结构、表达调控、作用方式及机理进行总结,并结合其在植物胁迫信号通路中的作用以及提高转基因植株胁迫耐受性的最新研究成果加以综述,并对其在农业生产中的应用前景进行展望。 展开更多
关键词 非生物胁迫 DREBs转录因子 DRE/CRT顺式作用元件 表达调控
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NAC类转录因子在玉米未成熟雌穂发育中的作用 被引量:3
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作者 朱昀 付俊杰 +1 位作者 李朝炜 王国英 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2011年第7期21-25,共5页
为了研究转录因子在玉米雌穗早期发育阶段的差异表达情况,探讨其生物学功能,利用Arizona大学的玉米芯片对未成熟玉米雌穂的早期关键发育阶段进行全基因组表达谱分析。数据标准化之后对差异基因中的转录因子家族进行超几何分析,挑选并分... 为了研究转录因子在玉米雌穗早期发育阶段的差异表达情况,探讨其生物学功能,利用Arizona大学的玉米芯片对未成熟玉米雌穂的早期关键发育阶段进行全基因组表达谱分析。数据标准化之后对差异基因中的转录因子家族进行超几何分析,挑选并分析差异明显的转录因子家族。结果表明,在玉米雌穗发育早期,有1 844个基因差异表达,有7个转录因子家族基因变化达到显著性差异,其中NAC类转录因子家族的变化最为显著,P值为5.6E-05。从生长锥伸长期到小穗分化期,该家族有9个基因上调表达,有6个成员下调表达。说明NAC类转录因子家族对玉米雌穗早期发育起到一定作用。 展开更多
关键词 玉米 雌穂 发育 芯片 NAC转录因子
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棉花中一个新的类DREB转录因子(GhDREB2B)的克隆、序列特征及表达分析 被引量:6
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作者 李付振 邱新棉 刘传亮 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2010年第5期564-569,共6页
棉花是盐碱地改良的重要作物。文章利用盐胁迫处理棉花耐盐品种‘中棉所49’,筛选棉花EST数据库并对目标EST序列进行整合与分析,利用RT-PCR的方法,克隆了一个新的棉花类DREB转录因子,命名为GhDREB2B(GenBank登录号为GQ848094)。该基因编... 棉花是盐碱地改良的重要作物。文章利用盐胁迫处理棉花耐盐品种‘中棉所49’,筛选棉花EST数据库并对目标EST序列进行整合与分析,利用RT-PCR的方法,克隆了一个新的棉花类DREB转录因子,命名为GhDREB2B(GenBank登录号为GQ848094)。该基因编码351个氨基酸残基,分子量约39 kD,推导的氨基酸序列与杨树、番茄、大豆、拟南芥等物种中的DREB基因家族成员之间存在一定程度的同源性,均含AP2/ERF保守结构域,推测该基因在棉花中是一个新的DREB类转录因子。利用荧光定量RT-PCR对该转录因子表达特征的分析表明:GhDREB2B在棉花苗期经盐胁迫诱导后表达量迅速升高,在0.7%的NaC l胁迫诱导下,表达量达到最高值,但该转录因子并不受ABA的诱导。推测GhDREB2B在棉花受到干旱和盐胁迫条件下发挥重要功能。 展开更多
关键词 棉花 DREB转录因子 GhDREB2B 荧光定量 盐胁迫 ABA处理
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人类新型Krppel类转录因子hBKLF的cDNA克垄、亚细胞定位及表达特征 被引量:3
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作者 王茫桔 瞿祥虎 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第1期1-9,共9页
人胎肝cDNA文库FLD4585克隆可能编码一种造血相关的转录因子,本文旨在从22周孕龄人胎肝中获得其编码基因的全长cDNA序列,分析其编码蛋白的功能域、基因组结构、染色体定位、亚细胞定位及表达谱特征。采用5′RACE方法获得FLD4585克隆... 人胎肝cDNA文库FLD4585克隆可能编码一种造血相关的转录因子,本文旨在从22周孕龄人胎肝中获得其编码基因的全长cDNA序列,分析其编码蛋白的功能域、基因组结构、染色体定位、亚细胞定位及表达谱特征。采用5′RACE方法获得FLD4585克隆全长;生物信息学方法确定hBKLF基因结构、染色体定位及功能域特征;GFP融合蛋白技术确定hBKLF亚细胞定位;Northern杂交、RT-PCR、Western印迹方法分析其表达谱。结果获得了Fld4585克隆编码的hBKLFcDNA全长序列,它含1810bp,编码345个氨基酸,与小鼠BKLF同源,C端含3个特征性C2H2结构的锌指,是KLF转录因子家族的新成员。HBKLF基因跨越33kb,含6个外显子和5个内含子,位于4号染色体4p15.2-p16.1。GFP-hBKLF融合蛋白在COS-7细胞中呈细小点状分布于核内,核仁区无分布。HBKLF含有两个转录本,大小为4.4kb-7.5kb和1.35kb-2.4kb。大转录本在成人及胎儿组织广泛表达,小转录本在外周血白细胞、肝脏和骨髓表达量最高,红系和粒系细胞均表达hBKLF。HBKLF表达量随肝脏发育成熟而下降,随红系、粒系成熟而升高。以上研究提示hBKLF可能是一种在体内广泛发挥作用的转录因子,在造血的调控中可能有重要作用。 展开更多
关键词 新型Krueppel转录因子 hBKLF CDNA克隆 亚细胞定位 表达特征
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MHCⅡ类分子转录激活因子锤头状核酶的生物学活性 被引量:1
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作者 郭荣 蒋海玉 +5 位作者 张敏 邹萍 杜欣 陆泽生 林伟 黄梓伦 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期294-297,共4页
目的探讨MHCⅡ类分子转录激活因子(CⅡTA)锤头状核酶抑制细胞表面MHCⅡ类分子的表达。方法设计并克隆针对CⅡTA第464位点的锤头状核酶(Rz464)及其相应的CⅡTA靶基因,分别插入pGEM-T载体,进行细胞外切割活性鉴定,进一步将Rz464亚克隆入... 目的探讨MHCⅡ类分子转录激活因子(CⅡTA)锤头状核酶抑制细胞表面MHCⅡ类分子的表达。方法设计并克隆针对CⅡTA第464位点的锤头状核酶(Rz464)及其相应的CⅡTA靶基因,分别插入pGEM-T载体,进行细胞外切割活性鉴定,进一步将Rz464亚克隆入真核表达载体pIRES2-EGFP(pIRES2-EGFP-Rz464,pRz464),并稳定转染Raji细胞株,流式细胞术检测经典的MHCⅡ(HLA-DR-、DP-、DQ)类抗原表达,RT-PCR分析CⅡTA mRNA水平。结果细胞外活性鉴定表明,Rz464具有明显的切割活性。细胞内切割实验显示:pRz464阳性Raji细胞表面HLA-DR、DP、DQ抗原表达分别降低了75.93%、64.14%、78.32%;同时CⅡTA的mRNA含量降低(P<0.05)。结论抗CⅡTA锤头状核酶Rz464可有效抑制MHCⅡ类抗原的表达。 展开更多
关键词 MHCⅡ分子转录激活因子 核酶 自身免疫性疾病 基因疗法
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类转录激活因子效应物及其在生物技术领域的应用 被引量:1
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作者 吴伦英 景晓辉 沈雁 《热带生物学报》 2013年第4期386-392,共7页
综述了类转录激活因子效应物(TALEs)技术的研究进展及生物技术应用前景,重点介绍TALEs的结构特征、作用机理、广谱抗性基因的人工构建及利用类转录激活因子效应物核酸酶(Transcription activator like effector nucleases,TALENs)进行... 综述了类转录激活因子效应物(TALEs)技术的研究进展及生物技术应用前景,重点介绍TALEs的结构特征、作用机理、广谱抗性基因的人工构建及利用类转录激活因子效应物核酸酶(Transcription activator like effector nucleases,TALENs)进行基因组定点修饰的策略。 展开更多
关键词 转录激活因子效应物 转录激活因子效应物核酸酶 结构特征 生物技术应用前景
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急性心肌梗死患者两种血清因子水平及临床意义
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作者 张莹 赵锦彤 +2 位作者 于天平 燕涛 潘平 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2024年第1期38-41,共4页
目的探讨Y染色体性别决定区相关高迁移率组盒蛋白6(SOX6)、第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)在急性心肌梗死(AMI)患者血清中的表达及临床意义。方法选取2021年1月至2022年3月淄博市第一医院和淄博市中心医院收治的AMI... 目的探讨Y染色体性别决定区相关高迁移率组盒蛋白6(SOX6)、第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)在急性心肌梗死(AMI)患者血清中的表达及临床意义。方法选取2021年1月至2022年3月淄博市第一医院和淄博市中心医院收治的AMI患者100例为研究组,根据主要不良心血管事件(MACE)发生情况将患者分为MACE组52例和非MACE组48例,选取同期于淄博市第一医院和淄博市中心医院进行健康体检的志愿者110例为对照组。检测血清PTEN和SOX6水平,用Pearson相关性分析AMI患者血清PTEN和SOX6与临床指标的相关性,用ROC曲线分析PTEN和SOX6水平对AMI及预后的诊断价值。结果与对照组比较,研究组血清SOX6 mRNA水平显著降低(0.69±0.14 vs 1.03±0.16,P<0.01),血清PTEN mRNA水平显著升高(1.56±0.15 vs 1.05±0.08,P<0.01)。与非MACE组比较,MACE组血清SOX6 mRNA水平显著降低(0.61±0.15 vs 0.78±0.13,P<0.01),血清PTEN mRNA水平显著升高(1.74±0.18 vs 1.37±0.12,P<0.01)。Pearson相关性分析显示,AMI患者血清PTEN水平与cTnI、CK-MB、Gensini评分呈正相关,血清SOX6水平与cTnI、CK-MB、Gensini评分呈负相关(P<0.01)。ROC曲线分析显示,血清SOX6和PTEN联合诊断AMI的曲线下面积为0.932(95%CI:0.889~0.962),二者联合预测AMI患者发生MACE的曲线下面积为0.933(95%CI:0.866~0.974)。结论AMI患者血清中SOX6水平下调,PTEN水平上调,二者联合检测有助于诊断AMI及预测MACE。 展开更多
关键词 心肌梗死 SOXD转录因子类 诊断 第10号染色体缺失的编码与磷酸酶和张力蛋白同源的基因
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ERF类转录因子OPBP1基因重组质粒的构建及蛋白质表达
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作者 刘文奇 郭泽建 《湖南文理学院学报(自然科学版)》 CAS 2004年第1期37-38,共2页
探讨了OPBP1基因的蛋白质表达方法 .利用DNA重组技术 ,将pGEM -OPBP1和pET - 32a分别进行SalⅠ和NotⅠ双酶切 ,连接 ,获得了重组质粒pET -OPBP1质粒 .IPTG诱导其蛋白质表达 .
关键词 ERF转录因子 基因克隆 蛋白质表达 GCC盒 DNA重组
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谷子MYB类转录因子SiMYB42提高转基因拟南芥低氮胁迫耐性 被引量:14
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作者 丁庆倩 王小婷 +10 位作者 胡利琴 齐欣 葛林豪 徐伟亚 徐兆师 周永斌 贾冠清 刁现民 闵东红 马有志 陈明 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期327-338,共12页
Myeloblastosis(MYB)类转录因子是高等植物中最大的转录因子家族之一,在植物发育及防御反应过程中发挥重要作用,还参与植物对干旱等非生物胁迫的响应。谷子(Setaria italica L.)起源于中国,具有抗旱、耐瘠薄的特性,是研究单子叶作物非... Myeloblastosis(MYB)类转录因子是高等植物中最大的转录因子家族之一,在植物发育及防御反应过程中发挥重要作用,还参与植物对干旱等非生物胁迫的响应。谷子(Setaria italica L.)起源于中国,具有抗旱、耐瘠薄的特性,是研究单子叶作物非生物胁迫抗性的理想材料。本研究对耐低氮胁迫谷子品种郑204经低氮处理后进行转录组分析,鉴定出一个在低氮胁迫条件下明显上调的MYB类转录因子SiMYB42。系统发育树结果表明,SiMYB42属于R2R3-MYB亚族,具有2个MYB保守域;表达模式分析显示,SiMYB42在低氮、高盐、干旱和ABA胁迫条件下表达量显著上调;亚细胞定位、quantitative real-time PCR及转录激活活性分析结果表明,SiMYB42蛋白定位于植物的细胞核和细胞膜中,主要在谷子的叶部或根部表达,具有转录激活活性;基因功能分析结果表明,在正常条件下,转SiMYB42基因拟南芥与野生型Columbia-0拟南芥(WT)无明显差异,但在低氮条件下,转SiMYB42基因拟南芥的主根长、根系表面积及鲜重均显著高于WT,结果证明SiMYB42基因可以提高转基因植物对低氮胁迫的耐性;下游基因表达分析结果显示,在转SiMYB42基因拟南芥中,参与植物氮素转运的硝酸盐转运基因NRT2.1、NRT2.4和NRT2.5的表达水平均高于WT,启动子分析结果显示NRT2.1、NRT2.4和NRT2.5基因启动子序列中均具有MYB结合位点。以上结果证明,SiMYB42可以通过调控下游硝酸盐转运体基因的表达提高植物在低氮条件下的耐性。本研究揭示了SiMYB42基因在低氮胁迫反应途径中的作用,为进一步了解谷子低氮胁迫响应的调控网络奠定了基础。 展开更多
关键词 谷子(Setaria ITALICA L.) MYB转录因子 低氮胁迫 基因表达分析 基因功能分析
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基于类转录激活因子效应物(TALEs)的基因组定点操控技术 被引量:1
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作者 赵美威 段承俐 刘江 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期509-518,共10页
基于类转录激活因子效应物(transcription activator-like effectors,TALEs)的基因组定点操控技术能够对基因组功能体系的反向遗传操作于基因及转录水平进行精确操控。TALEs是来源于植物病原菌—黄单胞杆菌(Xanthomonas spp.)的DNA结合... 基于类转录激活因子效应物(transcription activator-like effectors,TALEs)的基因组定点操控技术能够对基因组功能体系的反向遗传操作于基因及转录水平进行精确操控。TALEs是来源于植物病原菌—黄单胞杆菌(Xanthomonas spp.)的DNA结合蛋白,其结合域通常由包含34个氨基酸残基的重复模块串联而成。根据编码规则,可人为重新编排重复模块顺序使其能够识别新的DNA序列。该人工设计TALEs对基因组的定点操控(包括转录调控和基因组编辑)已在体外培养的人类细胞和多种模式生物中得到了成功应用,为模式生物基因功能研究,农作物性状改善及人类遗传性疾病治疗等开辟了新时代。 展开更多
关键词 转录激活因子效应物 转录调控
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类转录激活因子效应物核酸酶介导的E-cad和Bmi-1基因联合干预鼻咽癌的体外研究 被引量:8
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作者 罗婷婷 严爱芬 +6 位作者 刘连 蒋泓 冯翠兰 刘冠男 刘芳 唐冬生 周天鸿 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期229-239,共11页
目的:检测类转录激活因子效应物核酸酶(transcription activator-like effector nuclease,TALEN)介导的E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)、B细胞特异性莫洛尼氏白血病毒插入位点1(B-lymphoma Moloney murine leukemia virus insertion regi... 目的:检测类转录激活因子效应物核酸酶(transcription activator-like effector nuclease,TALEN)介导的E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)、B细胞特异性莫洛尼氏白血病毒插入位点1(B-lymphoma Moloney murine leukemia virus insertion region-1,Bmi-1)基因联合干预对鼻咽癌细胞生物学行为的影响。方法:构建多位点基因打靶载体p UC-DS1-E-cad-2ANeo-DS2(以下简称E-cad打靶载体)和p UC-DS1-Bmi-1 sh RNA-Zeo-DS2(以下简称Bmi-1打靶载体),将E-cad打靶载体、Bmi-1打靶载体及佛山科学技术学院分子医学研究院前期构建的TALEN载体以不同组合转染鼻咽癌CNE-2细胞。采用PCR检测靶基因的整合,Western印迹检测靶基因蛋白表达水平变化,细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测细胞增殖能力变化,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡变化,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力变化。结果:靶基因E-cad和Bmi-1 sh RNA表达元件成功整合到鼻咽癌CNE-2细胞的基因组中;转染后鼻咽癌CNE-2细胞中E-cad的蛋白表达水平明显上升,Bmi-1的蛋白表达水平明显下降;干预E-cad及Bmi-1不影响细胞的增殖、周期和凋亡,但显著抑制细胞的迁移和侵袭能力,且E-cad和Bmi-1联合干预比单独干预更能显著抑制鼻咽癌CNE-2细胞体外迁移能力(均P<0.01)。结论:TALEN介导的E-cad和Bmi-1联合干预能有效抑制鼻咽癌CNE-2细胞的体外迁移和侵袭,可为人类癌症的基因治疗建立前期的实验基础。 展开更多
关键词 转录激活因子效应物核酸酶 E-钙黏蛋白 B细胞特异性莫洛尼氏白血病毒插入位点1 基因打靶 鼻咽癌
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植物B、C类热激转录因子研究进展 被引量:2
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作者 李红颖 王凤德 +4 位作者 邱念伟 张一卉 李化银 李景娟 高建伟 《山东农业科学》 2015年第1期144-148,共5页
热激转录因子(HSFs)在调控植物生长发育和胁迫响应中具有重要的作用。根据结构的不同,植物HSFs可分为A、B和C三类。由于B类和C类HSFs缺少AHA转录激活结构域,因此人们对HSFs的研究重点放在了A类。但近年来越来越多的证据表明B类和C类HSF... 热激转录因子(HSFs)在调控植物生长发育和胁迫响应中具有重要的作用。根据结构的不同,植物HSFs可分为A、B和C三类。由于B类和C类HSFs缺少AHA转录激活结构域,因此人们对HSFs的研究重点放在了A类。但近年来越来越多的证据表明B类和C类HSFs在调控植物生长发育和响应逆境胁迫的过程中也具有重要的作用,并日益得到人们的重视。本文综合了近几年的研究结果,对植物B类和C类HSFs的结构、组成以及生物学功能作了简要综述,以期为其研究和利用提供参考。 展开更多
关键词 植物B、C热激转录因子 结构 组成 生物学功能
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针刺对快速老化小鼠SAMP10转录调节因子NF-E2、YB-1、LRG47的影响 被引量:10
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作者 付于 于建春 +1 位作者 丁晓蓉 韩景献 《中国针灸》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期651-654,共4页
目的:探讨针刺延缓衰老的机制。方法:采用快速老化小鼠(SAMP10)、正常老化小鼠(SAMR1)为模型,运用地高辛标记的非放射性Northernblot技术,观察8月龄SAMR1对照组、SAMP10对照组、SAMP10针刺组及SAMP10非穴位刺激组全脑、皮层和海马NF-E2... 目的:探讨针刺延缓衰老的机制。方法:采用快速老化小鼠(SAMP10)、正常老化小鼠(SAMR1)为模型,运用地高辛标记的非放射性Northernblot技术,观察8月龄SAMR1对照组、SAMP10对照组、SAMP10针刺组及SAMP10非穴位刺激组全脑、皮层和海马NF-E2、YB-1、LRG47基因表达的变化。结果:SAMP10对照组小鼠NF-E2、YB-1、LRG47在全脑、皮层、海马中的表达下调,针刺后表达上调并趋向于正常组。结论:SAMP10小鼠脑衰老与NF-E2、YB-1、LRG47基因表达异常有关,针刺可以通过调节NF-E2、YB-1、LRG47基因表达增强红细胞系统功能和细胞增殖,提高细胞抗菌免疫,从而起到延缓衰老的作用。 展开更多
关键词 衰老/针灸效应 转录因子类 综合/针灸效应 基因 调节/针灸效应 印迹法 RNA 小鼠
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