EGFR突变NSCLC组织LncRNA TCF7L2表达及临床病理特征和预后分析

目的 探究长链非编码RNA(LncRNA)转录因子7类似物2(TCF7L2)在表皮生长因子受体基因(EGFR)突变的非小细胞肺癌(NSCLC)组织表达及其与病人临床病理特征和预后相关性。方法 选取2019年3月—2021年6月河北北方学院附属第一医院治疗的EGFR突变NSCLC病人104例为研究对象,分别取其癌组织和癌旁组织应用逆转录PCR(RT-PCR)检测LncRNA TCF7L2的表达,比较不同组织TCF7L2表达及其与临床病理特征和预后的相关性。结果 RT-PCR检测结果显示,癌组织中LncRNA TCF7L2表达量显著高于癌旁组织(t=12.410,P<0.05)。与LncRNA TCF7L2低表达病人比较,高表达者发生淋巴结转移更多、肿瘤体积更大(χ^(2)=4.579、7.762,P<0.05);LncRNA TCF7L2高表达病人6、9和12个月的生存率较低,但差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 LncRNA TCF7L2在EGFR突变NSCLC病人癌组织表达高于癌旁组织,且TCF7L2高表达病人的淋巴结转移风险较高、肿瘤体积较大,其生存率可能较低。

沉默TCF7L2对胰岛素抵抗HepG2细胞胰岛素降解酶表达的调控作用观察

目的探讨沉默转录因子7类似物2(TCF7L2)对胰岛素抵抗(IR)Hep G2细胞胰岛素降解酶(IDE)表达的调控作用及可能机制。方法将Hep G2细胞分为空白组、TCF7L2干扰组、空载体组、IR组、IR+TCF7L2干扰组、IR+空载体组。采用高浓度胰岛素(5×10-6mol/L)持续作用24h诱导IR模型(IR-Hep G2细胞)生成。以人TCF7L2 m RNA编码序列为干扰靶点构建TCF7L2特异性小干扰RNA慢病毒载体(LV-TCF7L2-si RNA)转染空白组及IR组细胞,空载体病毒转染空载体组及IR+空载体组细胞。q RT-PCR法检测各组细胞TCF7L2及IDE m RNA的表达,Western blotting检测各组细胞TCF7L2、IDE、胰岛素刺激后蛋白激酶B(AKT)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白表达的变化,流式细胞术检测各组2-脱氧-D-葡萄糖(2-NBDG)荧光葡萄糖摄取率。结果与空白组比较,IR组细胞葡萄糖消耗量及2-NBDG摄取率均明显降低(P<0.01),证明IR细胞模型建立成功。q RT-PCR及Western blotting结果显示,IR组TCF7L2及IDE m RNA种蛋白表达水平均明显低于空白组(P<0.05),TCF7L2干扰组TCF7L2、IDE m RNA和蛋白表达水平较空白组、空载体组明显下降,IR+TCF7L2干扰组TCF7L2、IDE m RNA和蛋白表达水平较IR组、IR+空载体组均明显下降(P<0.05)。生理剂量胰岛素刺激后,IR组、IR+TCF7L2干扰组p-AKT蛋白水平较空白组明显下降(P<0.01),各组总AKT水平差异无统计学意义。TCF7L2干扰组2-NBDG荧光葡萄糖摄取率较空白组和空载体组明显下降,IR+TCF7L2干扰组2-NBDG荧光葡萄糖摄取率较IR组、IR+空载体组明显下降(P<0.01)。结论 TCF7L2联合IDE致肝细胞IR,其机制可能与减少胰岛素信号通路关键酶p-AKT蛋白的表达有关。

TCF7L2基因多态性与妊娠期糖尿病遗传易感性的相关性

目的 探讨转录因子7类似物2（TCF7L2）基因rs7903146、rs290487、rs11196205、rs12255372位点单核苷酸多态性（SNP）与妊娠期糖尿病（GDM）孕妇遗传易感性的相关性.方法 选取2010年1月-2013年7月在江西省妇幼保健院就诊的GDM孕妇100例为GDM组,选取同期入院的健康孕妇100例为对照组.孕妇入院后当日计算体质指数（BMI）,检测空腹胰岛素（FINS）及空腹血糖（FPG）水平,并计算稳态模型胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）;采用等位基因特异PCR（AS-PCR）技术分析TCF7L2基因rs7903146、rs290487、rs11196205、rs12255372位点的基因型,并进行相关性分析.结果 （1） GDM组孕妇BMI（27.4± 3.0） kg/m2、FPG（5.6±1.0） mmol/L、FINS（6.2±3.4）mU/L、HOMA-IR1.8±1.0;对照组孕妇BMI为（24.2±2.9） kg/m2、FPG（5.3 ±0.8） mmol/L、FINS（4.5±2.8） mU/L、HOMA-IR1.2±0.8;两组分别比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）.（2）rs7903146位点的SNP分型为CC、CT和TT共3种基因型;rs290487位点的SNP分型为CC、CT和TT共3种基因型;rs11196205位点的SNP分型为GG、CC共两种基因型;rs12255372位点的SNP分型仅为GG基因型.（3）rs7903146位点在GDM组及对照组中均以CC基因型为主,GDM组CC型频率为40％（40/100）,CT型频率为36％（36/100）,TT型频率为24％（24/100）;C等位基因频率为58％ （116/200）,T等位基因频率为42％（84/200）.对照组CC型频率为55％（55/100）,CT型频率为38％（38/100）,TT型频率为7％ （7/100）;C等位基因频率为74％（148/200）,T位基因频率为26％ （52/200）.两组分布比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）.（4）rs290487位点在GDM组及对照组中均以TT基因型为主,GDM组CC型频率为12％（12/100）,CT型频率为36％ （36/100）,TT型频率为52％ （52/100）;C等位基因频率为30％ （60/200）,T等位基因频率为70％ （140/200）.对照组CC型频率为16％（16/100）,CT型频率为34％（34/100）,TT型频率为50％（50/100）;C等位基因频率为33％ （66/200）,T等位基因频率为67％（134/200）.两组分布比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）.（5）rs11196205位点在GDM组及对照组中均以GG基因型为主,GDM组GG型频率为99％ （99/100）,CC型频率为1％ （1/100）;G等位基因频率为99％ （198/200）,C等位基因频率为1％ （2/200）.对照组GG型频率为100％ （100/100）,CC型频率为0;G等位基因频率为100％ （200/200）,C等位基因频率为0.两组频率分布比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）.（6）rs12255372位点在GDM组及对照组中均为GG基因型,GDM组GG型频率为100％ （100/100）,G等位基因频率为100％ （200/200）;对照组GG型频率为100％ （100/100）,G等位基因频率为100％ （200/200）;两组分别比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）.（7）对孕妇的年龄、孕周、分娩时BMI、FPG、FINS及TCF7L2基因型进行logistic回归分析,结果发现,TCF7L2基因rs7903146的TT基因型相对于CC±CT基因型的OR值为2.77（95％ CI为1.03～7.57,P＜0.05）,是C等位基因携带者的2.45倍,TT基因型是发生GDM的危险因素.结论 TCF7L2基因rs7903146位点的多态性与GDM孕妇遗传易感性相关,TT基因型可能是GDM发生的危险因素.

TMEM9B-AS1对食管癌细胞增殖和侵袭影响及机制

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)TMEM9B-AS1介导TCF7L2-SATB1途径调控食管癌细胞环氧化酶-2(COX-2)和β连环蛋白1(CTNNB1)表达以及对细胞增殖和侵袭的影响。方法将人食管癌细胞KYSE510分为对照组、TMEM9B-AS1组和siTMEM9B-AS1组,分别转染阴性对照(NC)质粒、TMEM9B-AS1质粒和siTMEM9B-AS1质粒。通过细胞计数(CCK-8)法和转移小室(Transwell)检测细胞增殖活力和侵袭能力。通过定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹(Westernblot)检测转录因子7样蛋白2(TCF7L2)、特殊富含AT的序列结合蛋白1(SATB1)、COX-2、CTNNB1的mRNA和蛋白表达水平。结果与对照组相比较,TMEM9B-AS1组细胞的TMEM9B-AS1水平、侵袭能力以及TCF7L2、SATB1、COX-2、CTNNB1的mRNA和蛋白水平显著升高(F=30.268~56.084,P<0.05),siTMEM9B-AS1组细胞则显著降低(P<0.05)。各组细胞中增殖活力对比,差异具有统计学意义(F_(组别)=18.681,P<0.001);随着培养时间的延长,各组细胞的增殖活力显著上调(F_(时间)=4.347,P<0.001)。结论过表达TMEM9B-AS1可促进TCF7L2-SATB1途径,提高COX-2和CTNNB1的表达,并促进食管癌细胞的增殖和侵袭的能力。