miz1基因siRNA表达载体的构建及影响HeLa细胞对阿霉素的敏感性

目的:构建针对转录因子miz1基因的siRNA表达载体,观察其影响HeLa细胞对阿霉素的敏感性.方法:设计并合成针对miz1基因的siRNA寡核苷酸,克隆入siRNA表达载体,脂质体瞬时转染入HeLa细胞中,用RT-PCR检测miz1基因的mRNA表达水平,用Western Blot检测Miz1蛋白表达水平,用MTT法检测HeLa细胞活力.结果:DNA测序和酶切鉴定证明针对miz1基因的siRNA表达载体构建成功,RT-PCR和Western Blot表明其能降低miz1基因的mRNA表达和蛋白表达.与对照组相比,转染上述干扰载体后的HeLa细胞,在加入阿霉素12h后,细胞活力明显降低(P<0.05),并且干扰质粒与阿霉素存在交互作用(P<0.05),以加入阿霉素12h和24h后最明显.结论:针对miz1基因的siRNA能够抑制人宫颈癌细胞系HeLa中miz1基因的表达并能增强HeLa细胞对阿霉素的敏感性.