转录因子MoOaf22对稻瘟病菌营养生长、细胞壁完整性和胁迫应答的调控

为了研究油酸激活型转录因子MoOaf22编码基因MoOAF22(MGG_03413)在稻瘟病菌生长发育及致病过程中的功能,利用基因敲除方法将其进行了缺失突变并对突变体进行了一系列的生物学表型分析。结果表明该基因缺失突变体在完全培养基(CM)上营养生长加快,但在基本培养基(MM)上生长变慢,同时该突变体原生质体释放速度变慢,对荧光增白剂(CFW)和刚果红(Congo Red)耐受性增强,对十二烷基磺酸钠(SDS)、氯化钠(Na Cl)和山梨醇(Sorbitol)敏感,但该突变体在产孢量、附着胞形成及致病性等方面较野生型没有明显变化。说明MoOaf22在稻瘟病菌的营养生长、细胞壁完整性和对外界的胁迫应答过程中具有重要的调控作用。

Th22、Treg细胞转录因子及细胞因子在子痫前期孕妇胎盘组织中的表达及意义

目的通过检测子痫前期孕妇胎盘组织中Th22、CD4+CD25+CD127low Treg细胞转录因子AHR、Foxp3及细胞因子IL-22、IL-10的表达,探讨其在子痫前期中的作用。方法选取35例明确诊断的子痫前期孕妇为研究组,同时选取正常妊娠孕妇35例为对照组,采用实时荧光定量PCR检测两组孕妇胎盘组织中Th22、CD4+CD25+CD127low Treg细胞转录因子AHR mRNA、Foxp3 mRNA的表达情况;采用免疫组化检测细胞因子IL-22、IL-10的表达。结果AHR mRNA在研究组和对照组的表达量分别为(1.85±0.47)和(0.89±0.26),Foxp3 mRNA在两组的表达量分别为(0.76±0.23)和(1.31±0.42),差异均具有统计学意义;IL-22在研究组和对照组的阳性表达率分别为68.57%和40.00%,IL-10在两组的表达率为34.29%和60.00%,差异也具有统计学意义。结论Th22、Treg细胞转录因子及细胞因子的异常表达,可能参与了子痫前期的发生。

CC类趋化因子22和叉头状翅膀样转录因子3在胆管癌组织中的表达及意义

目的探讨CC类趋化因22(C-C class chemokines 22,CCL22)和叉头状翅膀样转录因子3(forkhead/winged helix transcription factor 3,FOXP3)在胆管癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测70例胆管癌组织和15例非肿瘤胆道上皮组织中CCL22、FOXP3的表达情况,分析其与胆管癌临床和预后的关系。结果 70例胆管癌、15例非肿瘤胆道上皮组织中CCL22和FOXP3阳性表达率分别为62.4%(44/70)、20.0%(3/15)及71.4%(50/70)、13.3%(2/15)。CCL22和FOXP3蛋白在胆管癌组织中的表达水平均明显高于非肿瘤胆道上皮组织(P<0.01)。有淋巴结转移者和TNM分期Ⅲ+Ⅳ期者较无淋巴结转移者和TNM分期Ⅰ+Ⅱ期者CCL22和FOXP3的表达阳性率高,差异有统计学意义(P<0.05)。CCL22与FOXP3蛋白表达呈明显正相关(P<0.01)。CCL22和FOXP3蛋白阴性表达者生存时间明显长于阳性表达者(P<0.01)。结论 CCL22和FOXP3可能对胆管癌发展及预后产生重要影响。

白细胞介素22经信号转导和转录激活因子3通路对人脐静脉内皮细胞苏氨酸495磷酸化及小鼠内皮功能和血压的影响

目的探讨白细胞介素22(IL-22)经信号转导和转录激活因子3(Stat3)通路对人脐静脉内皮细胞苏氨酸495(thr495)磷酸化及小鼠内皮功能和血压的影响,为治疗高血压提供新的思路。方法随机将人脐静脉内皮细胞(HUVECs)分成6组,分别为二甲基亚砜溶剂处理组(对照组),重组人IL-22组,S31-201组,S31-201+IL-22组,Go6976组,Go6976+IL-22组,各组经相应处理后检测Stat3通路活化状态和一氧化氮合酶(e NOS)抑制性位点thr495磷酸化的表达。32只C57BL/6小鼠随机分成4组,均经腹腔注射给药,第一组给予磷酸盐缓冲液(PBS)(对照组),第二组给予15μg/kg IL-22(模型组),第三组给予15μg/kg IL-22+二甲基亚砜溶剂(S31-201对照组),第四组给予15μg/kg IL-22+5 mg/kg S31-201(S31-201模型组)。处理14 d后测量尾动脉收缩压、主动脉NO表达、Stat3通路活化状态和thr495磷酸化的表达。结果 HUVECs经过重组人IL-22处理后可以引起Stat3通路活化及e NOS thr495磷酸化增多,这种作用可以被Stat3通路阻断剂S31-201阻断(P<0.05),但蛋白激酶C(PKC)阻断剂Go6976对其没有影响(P>0.05)。IL-22组小鼠较对照组收缩压显著升高,主动脉Stat3通路活化及e NOS thr495磷酸化增多,NO的表达下降,这些作用均可被S31-201阻断(均P<0.05)。结论 IL-22可以通过激活Stat3通路引起内皮功能障碍和高血压。抑制IL-22的生成或Stat3通路的激活是一个预防或治疗高血压的方法。

PTPN22和转录因子FOXP3基因多态性与系统性红斑狼疮遗传易感性的关联性分析

目的探讨蛋白酪氨酸磷酸22(PTPN22)和转录因子FOXP3基因多态性与系统性红斑狼疮(SLE)遗传易感性的关联性。方法选取2013年1~6月我院收治的系统性红斑狼疮患者80例为研究组,选取同期健康体检人员80例为对照组,对比两组研究对象的PTPN22和转录因子R3XP3基因多态性。结果 FOXP3位点基因频率在两组研究对象当中的分布存在明显区别(P<0.05);FOXP3基因-23S3C/T同-3281C/A存在连锁不平衡,-2383T/-3281A的单倍型携带者明显加大SLE发病的风险(P<0.05);PTPN2.2基因-112.3G/C位点的等位基因以及基因型分布在两组研究对象之间无明显差异(P>0.05)。结论 FOXP3基因-2383C/T的多态性同SLE发生发展之间存在显著的关联性,并且-23S3T基因可能是该病重要的遗传易感基因,同时PTPN22基因位点1S58C/1858T以及-1123G/C同SLE发病无明显关联性。

DNA损伤诱导转录因子4过表达可能通过Wnt/β-catenin信号通路抑制HT-22细胞增殖并促进其凋亡

神经管畸形(neural tube defects,NTDs)是一种由细胞增殖凋亡紊乱引起的先天缺陷性疾病。本室前期利用RNA-Seq技术,发现小鼠神经管畸形胚胎脑组织中DNA损伤诱导转录因子-4(DNA damage-inducible transcript 4,Ddit4)表达水平增加,但其在神经管畸形中的作用尚不清楚。本文拟探索Ddit4过表达对海马神经元HT-22细胞增殖和凋亡的影响及相关机制,从而为后续研究Ddit4在小鼠神经管畸形中的作用奠定基础。本研究首先根据小鼠Ddit4序列构建真核表达载体pEX-3-Ddit4,限制性酶切分析和测序结果表明pEX-3-Ddit4构建成功。qRT-PCR和Western印迹检测显示转染pEX-3-Ddit4后,HT-22细胞中DDIT4的表达水平明显增加(P<0.01)。CCK-8和Western印迹结果显示,Ddit4过表达导致HT-22细胞增殖下降(P<0.01)。流式细胞仪结果显示,转染pEX-3-Ddit4后,G0/G1期细胞比例增加、S期比例下降(P<0.01),细胞凋亡率增加(P<0.05)。Western印迹检测发现,转染pEX-3-Ddit4能够显著上调切割胱天蛋白酶3(cleaved caspase3)水平(P<0.05),表明Ddit4过表达促进HT-22细胞凋亡。细胞免疫荧光及Western印迹结果显示,过表达Ddit4显著降低细胞β-联蛋白(β-catenin)、T细胞因子4、细胞周期蛋白D1和C-myc的表达水平(P<0.05),核内β-联蛋白减少,提示Ddit4过表达抑制了Wnt/β-catenin信号通路。过表达Ddit4的同时加入Wnt/β-catenin信号通路激动剂LiCl处理细胞可逆转上述现象,表明Ddit4过表达可能通过Wnt/β-catenin信号通路对HT-22细胞发挥抗增殖和促凋亡作用。

Th22细胞及其特征性细胞因子IL-22在神经系统疾病中的研究

辅助性T细胞(T helper cell,Th)22是在基因表达及功能方面都有别于Th17细胞的新型T细胞亚群[1]。Th22细胞的表面特征性识别因子为CC趋化因子受体(CC chemokinereceptor,CCR)6、CCR10和CCR4,关键转录因子为多环芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor,AHR)。Th22细胞亚群产生特征性细胞因子IL-22,其功能取决于信号转导和转录激活因子3(signal transduction and activators of transcription,STAT3)的活化[2]。IL-22属于IL-10细胞因子家族,通过细胞因子受体发挥生物学效应。细胞表面IL-22受体复合体是由IL-22R1和IL-10R2构成的异二聚体受体链[3],后者也是IL-10、IL-26和IL-28/IL-29受体的辅助受体链[4]。

溃疡性结肠炎活动期患者血清TRIM22和KLF2水平与病情及临床结局的关系

目的探讨溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)活动期患者血清三结构域家族蛋白22(tripartite motif protein 22,TRIM22)、Kruppel样转录因子2(Kruppel-like factor 2,KLF2)水平与病情及临床结局的关系。方法选取上海健康医学院附属崇明医院2020年1月~2023年1月收治的97例溃疡性结肠炎活动期患者为活动期组、56例缓解期患者(缓解期组)和80例健康体检者(对照组)为对照。活动期患者根据病情分为轻度组(n=46)、中度组(n=31)和重度组(n=20),根据治疗后临床结局分为好转组(n=68)和未好转组(n=29)。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清TRIM22和KLF2水平,Pearson积矩相关分析其与改良Mayo评分相关性,多因素Logistic回归分析溃疡性结肠炎活动期患者未好转的影响因素,绘制ROC曲线评估两指标对未好转的预测价值。结果对照组、缓解期组和活动期组血清TRIM22(37.16±9.22 pg/ml,51.05±10.83 pg/ml,64.29±13.51 pg/ml)依次升高,血清KLF2(45.27±7.98 pg/ml,36.91±7.34 pg/ml,27.03±6.25 pg/ml)依次降低,差异具有统计学意义(F=121.076,143.946,均P<0.05)。轻度组、中度组和重度组血清TRIM22(56.07±11.18 pg/ml,67.29±13.04 pg/ml,78.56±13.69 pg/ml)依次升高,血清KLF2(32.07±4.95 pg/ml,25.86±4.32 pg/ml,17.25±4.09 pg/ml)依次降低,差异具有统计学意义(F=24.541,74.141,均P<0.05)。溃疡性结肠炎活动期患者血清TRIM22与改良Mayo评分呈正相关性(r=0.692,P<0.05),血清KLF2与改良Mayo评分呈负相关性(r=-0.716,P<0.05),血清TRIM22与KLF2呈负相关性(r=-0.659,P<0.05)。与轻度患者比较,中度和重度患者未好转风险增加(OR=1.232,2.298,均P<0.05),血清TRIM22水平升高是未好转的危险因素(OR=1.835,P<0.05),血清KLF2水平升高是保护因素(OR=0.731,P<0.05)。血清TRIM22,KLF2和联合检测对未好转有预测价值,AUC分别为0.806,0.803和0.907,指标联合检测预测价值大于单独指标检测(Z=2.049,2.053,均P<0.05)。结论溃疡性结肠炎活动期患者血清TRIM22水平升高,KLF2水平下降,并与病情严重程度及临床结局有关,指标联合检测可作为临床早期预测未好转的生化标志物。

麻风树JcERF22基因的克隆与功能分析

AP2/ERF转录因子在植物生长发育和响应非生物胁迫过程中起重要的调控作用,克隆麻风树AP2/ERF基因JcERF22,分析其对非生物胁迫的响应,鉴定其在调控拟南芥抗逆胁迫中的作用,为麻风树耐逆品种的培育提供依据。以麻风树为材料,利用逆转录PCR(RT-PCR)技术克隆麻风树JcERF22基因,利用生物信息学方法分析JcERF22基因序列,使用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术分析非生物胁迫下JcERF22基因的表达模式,利用花粉浸染法构建JcERF22转基因拟南芥植株,并分析转基因植株在正常生长、缺磷和盐胁迫下的表型。结果显示,克隆的JcERF22基因编码区(CDS)长度为1 074 bp,编码357个氨基酸。亚细胞定位结果显示,JcERF22蛋白定位于细胞核。在缺磷和盐胁迫条件下,麻风树叶片中JcERF22基因的表达量均显著降低。正常条件下,过表达JcERF22基因不影响拟南芥地上部分的生长发育,但增加了拟南芥的根毛长度和根毛数量;缺磷胁迫下,JcERF22过表达拟南芥叶片中的花青素含量显著低于野生型,花青素合成相关基因(CHS、DFR、F3H、LDOX、FLS1、UF3GT)的表达量也均显著低于野生型;盐胁迫下,JcERF22过表达拟南芥的叶片白化严重,鲜重显著低于野生型,非生物胁迫相关基因(AtHKT1;1、AtP5CS1)的表达量显著低于野生型。综上,JcERF22基因在麻风树响应缺磷和盐胁迫中发挥重要作用。

白介素-22在胃癌恶性转化中的作用

目的:观察处于胃癌恶性转化不同阶段的患者组织中白介素-22(interleukin-22,IL-22)、IL-22受体1(interleukin-22receptor1,IL-22R1)和信号转导与转录激活因子3(signaling and transcriptional activation factor 3,STAT3)的表达,探讨IL-22在胃癌恶性转化过程中的作用。方法:收集慢性胃炎组织、癌前病变胃组织及胃癌组织各15例,用免疫组化和实时定量PCR(realtime PCR)的方法,测定3组中IL-22、IL-22R1及p-STAT3(S727)的分布及表达。结果:①IL-22主要分布在异形腺体上皮细胞和腺体间浸润的散在的淋巴细胞胞浆中,IL-22R1主要分布在异形腺体上皮细胞的胞浆中,p-STAT3则主要定位于异形腺体上皮细胞的胞核中;②胃癌前病变组及胃癌组中的IL-22、IL-22R1及p-STAT3蛋白的表达量都明显高于慢性胃炎对照组;同时,胃癌组中IL-22、IL22-R1及p-STAT3蛋白的表达量明显高于胃癌前病变组,差异均具有统计学意义(P<0.001);③胃癌前病变组及胃癌组中的IL-22和IL22-R1的mRNA表达量都明显高于慢性胃炎对照组;胃癌组中IL-22和IL22-R1的mRNA表达量明显高于胃癌前病变组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:胃癌前病变及胃癌组织中,IL-22不仅可由浸润的免疫细胞分泌,还可由异形腺体上皮细胞自分泌产生。胃癌的恶性转化过程中,IL-22可能起着促进作用,且其促进作用可能通过IL-22-IL-22R1-STAT3通路完成。

人乳腺癌MCF-7细胞中TRIM22下调NF-κB的表达

目的研究人乳腺癌细胞中TRIM22对NF-κB表达的影响。方法通过RT-PCR和Western blot方法检测人乳腺癌细胞系MCF-7和人正常乳腺细胞系MCF-10A中TRIM22和NF-κB在mRNA和蛋白水平的表达差异;构建TRIM22表达质粒,并通过瞬时转染TRIM22表达质粒,使MCF-7高表达TRIM22,再检测NF-κB在mRNA及蛋白水平的变化。结果TRIM22在人正常乳腺细胞MCF-10A中的表达水平高于乳腺癌细胞系MCF-7,在MCF-7中转染TRIM22表达质粒后,NF-κB的表达量随之降低。结论在MCF-7细胞中TRIM22可负调控NF-κB的表达。

清肠化瘀方对溃疡性结肠炎患者CDX2 mRNA、miR-22及Th17细胞的影响

目的探讨中药清肠化瘀方对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)患者尾型同源盒转录因子2(caudal type homeobox transcription factor2,CDX2)、miR-22及辅助性T细胞17(the helper 17 cells,Th17)的影响。方法选择大肠湿热型UC患者96例,按照随机数字表法分为研究组(48例)和对照组(48例),研究组口服美沙拉嗪片和中药清肠化瘀方,对照组口服美沙拉嗪片和中药清肠化瘀方低剂量配方颗粒,疗程均为12周。比较两组治疗前后中医证候评分、Sutherland疾病活动指数(disease activity index,DAI)评分、Geboe指数评分;并包括两组血清CDX2 mRNA、miR-22、IL-17、IL-21水平和外周血Th17含量,比较炎症性肠病生活质量问卷(inflammatory bowel disease quality of life questionnaire,IBDQ)评分。结果治疗后研究组中医证候评分、DAI评分、Geboe指数评分均低于对照组(P<0.01);血清CDX2 mRNA水平高于对照组(P<0.01),miR-22水平低于对照组(P<0.01),外周血Th17细胞含量及血清IL-17、IL-21水平低于对照组(P<0.01);IBDQ各维度(肠道症状、全身症状、情感能力、社会能力)评分均高于对照组(P<0.01)。结论清肠化瘀方可有效改善中医证候,促进肠黏膜的修复和愈合,改善患者生活质量,治疗大肠湿热型UC效果显著,其机制可能与调控CDX2 mRNA、miR-22表达,抑制Th17细胞分化,减少IL-17、IL-21等Th17细胞相关因子合成有关。

IL-22对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞的作用

目的:探究白细胞介素(IL)-22对类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLSs)功能的影响及机制。方法:组织块法培养RA-FLSs。将不同浓度(0、1、10、100μg/L)的重组人源性IL-22(rhIL-22)与RA-FLSs共培养24 h、48 h、72 h,CCK-8法检测细胞活力的改变;利用10μg/L的rhIL-22作用于RA-FLSs 24 h,流式细胞术检测细胞周期改变。rhIL-22和/或信号转导和转录因子3(STAT3)特异性抑制剂STA-21以不同浓度作用RA-FLSs 24h,Western blot法检测Bcl-2和p-STAT3蛋白水平的变化。结果:不同浓度的rhIL-22作用于RA-FLSs 24 h、48 h、72h后,RA-FLSs细胞活力明显增高,均显著高于对照组(P<0.05)。rhIL-22刺激RA-FLSs后,S期和G_2/M期细胞明显增多,G_0/G_1期细胞减少。Western blot法检测结果提示rhIL-22可上调RA-FLSs中Bcl-2、p-STAT3的蛋白水平,而STA-21单用或联用rhIL-22均可抑制RA-FLSs中Bcl-2及p-STAT3的表达(P<0.05)。结论:IL-22在RA-FLSs细胞活力和周期调节中起重要作用,且STAT3在IL-22促RA-FLSs细胞Bcl-2表达的过程中起关键作用,提示IL-22可能对RA-FLSs凋亡有一定的影响。

姜黄素对IL-22诱导的角质形成细胞STAT3磷酸化的影响

目的探讨姜黄素对IL-22诱导的角质形成细胞STAT3磷酸化影响。方法体外培养HaCaT细胞,首先在不同时间点(0,5,15,30,60 min)加入IL-22(20 ng/ml),检测STAT3磷酸化蛋白(phospho-STAT3,p-STAT3)的表达情况。此外,将细胞分为5组,除了正常对照组外,其余4组在加入IL-22刺激细胞前1 h加入不同浓度的姜黄素(0,2.5,5,10μmol/L)干预,Western blot法检测磷酸化STAT3(p-STAT3)和总STAT3的蛋白表达情况。结果用IL-22(20 ng/ml)刺激HaCaT细胞,p-STAT3表达升高,并在30 min达到最高峰(P<0.05);与对照组比较,姜黄素干预组经IL-22诱导的HaCaT细胞中p-STAT3表达有所降低(P<0.01),而总STAT3的表达则无明显变化;随着姜黄素浓度增加,p-STAT3/STAT3的比值逐渐降低。结论姜黄素能够下调IL-22诱导的STAT3磷酸化蛋白的表达,而且此作用有一定的剂量依赖性。

拟南芥R2R3-MYB家族第22亚族的结构与功能

拟南芥R2R3-MYB转录因子在拟南芥生长发育、代谢及响应生物和非生物胁迫的调控网络中具有重要作用。根据保守的氨基酸序列,R2R3-MYB转录因子被分为25个亚族,其中第22亚族包含AtMYB44、AtMYB77、AtMYB73和AtMYB70 4个基因,主要响应生物和非生物胁迫。文章从基因功能的相似性、基因表达的一致性和基因结构的保守性3方面综述了第22亚族的4个基因,并综合讨论了其在结构与功能上的冗余性和多样性。

CCL22、IL-10和FOXP3在B细胞非霍奇金淋巴瘤组织中的表达及意义

目的探讨CC趋化因子22(CCL22)、IL-10和转录因子FOXP3在B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)发生、发展中的作用及意义。方法应用免疫组化染色法检测100例B-NHL瘤组织(B-NHL组)及30例反应性增生淋巴组织(增生组)中CCL22、IL-10和FOXP3的表达情况,分析其与B-NHL临床病理特征及三者表达的关系。结果B-NHL组CCL22、IL-10和FOXP3的阳性表达率分别为57.0%、61.0%、58.0%,增生组的阳性表达率分别为26.6%、33.3%和36.7%,B-NHL组CCL22、IL-10和FOXP3的阳性表达率明显高于增生组(P均<0.01);各指标阳性表达率与肿瘤直径有关,FOXP3的阳性表达率与B-NHL分型中弥漫大B亚型有关(P均<0.05);CCL22与FOXP3的表达呈正相关(r=0.309,P<0.05)。结论 CCL22、IL-10、FOXP3可促进B-NHL的发生、发展,对疾病预后具有指导意义。

胃癌组织中IL-22BP、IL-22、STAT3的表达变化及意义

目的观察白细胞介素22结合蛋白(IL-22BP)、IL-22、信号传导和转录激活因子3(STAT3)在胃癌组织中的表达变化,并探讨其意义。方法采用免疫组化SP法对经手术后的37例份胃癌组织及其配对的距癌旁5 cm外的正常胃组织标本37例份进行染色,检测IL-22BP、IL-22、STAT3表达,并分析三者与胃癌患者临床病理特征的关系。结果在胃癌组织、正常胃组织中IL-22BP阳性表达率分别为67.6%(25/37)、18.9%(7/37),IL-22阳性表达率分别为73.0%(27/37)、18.9%(7/37),STAT3阳性表达率分别为75.8%(28/37)、24.3%(9/37),胃癌组织、正常胃组织中IL-22BP、IL-22、STAT3表达差异均有统计学意义(P均<0.01)。IL-22BP、IL-22、STAT3在胃癌组织中的阳性表达与患者临床分期、浸润深度、淋巴结转移均有关(P均<0.05),与患者的性别和年龄无关(P均>0.05);胃癌组织中IL-22BP表达与IL-22、STAT3表达呈正相关(r分别为0.526、0.383,P均<0.05);IL-22表达与STAT3表达呈正相关(r=0.342,P<0.05)。结论胃癌组织中IL-22BP、IL-22、STAT3呈高表达,且三者表达与胃癌的侵袭和转移有关,三者可能协同促进胃癌的发生发展。

小黑杨PsnHB22基因在烟草中的遗传转化研究

HD-Zip转录因子在光信号转导、非生物胁迫、叶片发育等方面发挥重要的作用,HB22转录因子是HD-ZipⅠ亚家族的成员之一。为研究PsnHB22基因的功能,从小黑杨(Populus simonii×P.nigra)cDNA中克隆PsnHB22基因并构建植物表达载体进行烟草(Nicotiana tabacum)的遗传转化,以获得该基因过量表达的转基因株系。对转基因株系进行PCR、qRT-PCR分子检测后观察表型,结果显示在营养生长时期,转基因烟草叶片窄小并且株高显著低于野生型对照。测定转基因烟草及野生型叶片的叶绿素含量,发现转基因烟草叶绿素含量显著高于野生型。由此推测PsnHB22基因在植株高生长、光合作用及叶片的形态建成等过程中起着重要的作用。

TSC-22基因的研究进展

转化生长因子β诱导基因22(transforming growth factor β-inducible gene 22,TSC-22)是一个候选的负性生长调控和肿瘤抑制基因。能与其他转录因子相结合,参与细胞生长、凋亡等重要生命活动调控,在多种肿瘤中低表达,可能与多种肿瘤的发生、发展有关。

塞来昔布联合卡培他滨对H_(22)肝癌移植瘤小鼠的抑制作用及机制

目的探讨塞来昔布联合卡培他滨对H22肝癌移植瘤小鼠的抑瘤作用及作用机制。方法 BALB/c裸鼠皮下接种H22肝癌细胞,建立移植瘤模型。40只模型小鼠随机分为对照组、塞来昔布组(100mg/kg)、卡培他滨组(755mg/kg)和联合干预组(100mg/kg塞来昔布+755mg/kg卡培他滨)4组,每组10只。接种后第3天起,每天灌胃给药1次,对照组给予等量生理盐水,连续15d。处死动物,剥离完整瘤组织,称重并计算抑瘤率。采用荧光定量PCR和Western blotting检测瘤组织中核转录因子kappaB(NF-κB)p65和环氧合酶(COX)-2的mRNA及蛋白表达。结果塞来昔布和卡培他滨组抑瘤率分别为30.2%和49.9%,而联合干预组抑瘤率为75.4%,显著高于单药组(P<0.01,P<0.05)。荧光定量PCR结果显示,塞来昔布和联合干预组COX-2的mRNA表达显著低于对照组(P<0.001),但对NF-κBp65的mRNA表达无明显影响。卡培他滨对NF-κBp65和COX-2的mRNA均无明显影响。Western boltting结果显示,塞来昔布和联合干预组小鼠瘤组织中NF-κBp65和COX-2的蛋白表达水平均显著低于对照组(P<0.05),卡培他滨组与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论塞来昔布可通过抑制H22肝癌移植瘤小鼠瘤组织中NF-κBp65和COX-2的表达发挥抗肿瘤作用,且与卡培他滨联合应用具有协同增效作用。