转录因子Oct-4和端粒酶在人胚胎生殖细胞的表达

目的体外培养人胚胎生殖细胞（EGC），通过检测培养的细胞中转录因子Oct-4、端粒酶的表达，鉴定EGC。方法取5～10周人胚胎的生殖腺嵴和肠背系膜，进行组织块体外培养，采用免疫细胞化学检测Oct-4、端粒酶表达。结果组织块体外培养得到的细胞，经免疫细胞化学法显示的单个细胞或细胞集落，均阳性表达转录因子Oct-4、端粒酶。结论组织块体外培养所获得细胞来源于原始生殖细胞（PGCs），为未分化的EGC。

肝胆肿瘤细胞转录因子Oct-4的表达对Survivin抗凋亡作用的调控

对临床原发性肝癌、胆囊癌、胆管癌标本Oct-4和Survivin的表达进行了免疫组化鉴定;进一步建立肝癌、胆囊癌、胆管癌细胞系EHBH-H1、EH-GB1和EH-CA1,利用腺病毒携带Survivin-shRNA或Oct-4基因感染癌细胞系,并利用流式细胞术观察细胞周期和细胞凋亡的变化,探讨转录因子Oct-4与Survivin之间的相互调控及对癌细胞遗传特性的影响。结果表明,临床原发性肝癌、胆囊癌、胆管癌标本Oct-4阳性率达60.7%,Survivin阳性率达75.0%,且两者之间存在明显的正相关关系;特异性shRNA沉默EH-CA1癌细胞Survivin的表达后,其Oct-4表达没有变化,但诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡;EH-GB1癌细胞获得Oct-4表达后,Survivin表达增强,促进细胞周期运行并下调细胞凋亡。实验证实Oct-4可以增强癌细胞Survivin的表达,从而发挥促进细胞周期运行、抑制细胞凋亡的作用,此研究为建立并优化肿瘤基因治疗的策略提供了新的靶点。

隐睾症与生殖细胞肿瘤关联性的病理研究

目的:通过对隐睾患者检测神经细胞粘附分子(NCAM)及转录因子Oct-4蛋白,探讨隐睾症与生殖细胞肿瘤的关联性。方法:搜集入住我院的隐睾症的患者,采集隐睾睾丸标本,并进行睾丸活检,检测NCAM、Oct-4的表达;并分析两个指标的表达与隐睾位置和年龄的相关性。结果:NCAM在人隐睾中的表达与年龄组、睾丸位置无相关性(P>0.05)。但是大于5岁后隐睾内生精小管NCAM阳性表达有增高趋势。不同年龄组NCAM表达存在显著差异性(P<0.05),小于1.6岁年龄组与大于5岁年龄组间存在显著差异性(P<0.017),余年龄组间无显著差异性。NCAM在间质内阴性表达与睾丸位置分布无相关性(P>0.05)。Oct-4与NCAM生精小管内同时阳性表达有4例,其年龄及睾丸位置分布无规律。结论:NCAM、Oct-4在人隐睾中存在病理性表达,NCAM和Oct-4可作为临床预测隐睾患儿生殖潜能和睾丸癌变的筛查指标。

胚胎干细胞基因Oct-4在神经母细胞瘤组织中的表达及意义

目的 探讨神经母细胞瘤组织中胚胎干细胞基网Oct-4的表达情况及其意义。方法收集39例神经母细胞瘤和相应癌旁组织，应用实时定量PCR和Western印迹法检测Oct-4的表达，并分析其表达与临床病理参数的相关性。结果术前未化疗的神经母细胞瘤Oct-4的mRNA相对表达量为6．53±1．74，明显强于瘤旁组织1．04±0．65，两组间差异有统计学意义（P〈0．05）；其中Ⅲ～Ⅳ期肿瘤Oct-4mRNA相对表达量8．81±0．67较Ⅰ～Ⅱ期肿瘤4．26±0．54高，差异有统计学意义（P〈0．05）。Ⅲ～Ⅳ期肿瘤中术前未化疗的Oct4mRNA相对表达量8．81±0．67明显高于术前化疗的肿瘤3．15±0．42（P＜0．05）。神经母细胞瘤Oct-4表达与患儿性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤部位、病理分型等参数无相关性。结论Oct-4可能与神经母细胞瘤的发生、发展相关，化疗药物的使用对其表达有抑制作用。