锌指转录因子Snail1在糖尿病大鼠肾组织中的表达

目的:观察锌指转录因子Snail1在糖尿病大鼠肾组织中的表达并探讨其与糖尿病肾病(DN)发生、发展的关系。方法:链脲佐菌素(STZ)诱发大鼠糖尿病(DM),分为2、4、8、12、16、20、24周以及16周A、20周A和24周A组,其中A组动物从第13周起用胰岛素控制血糖至正常水平,每个时点均设鼠龄匹配的正常对照组。测定各组血糖、24h尿蛋白、血肌酐(Scr)、肾脏指数。PAS染色光镜观察肾脏病理改变。免疫组化、RT-PCR方法检测肾皮质Snail1和纤连蛋白(FN)的蛋白及mRNA水平,Western blotting检测Snail1蛋白表达。结果:DM各组大鼠的血糖、24h尿蛋白、血肌酐、肾脏指数明显高于正常对照组(P<0.05,P<0.01),A组上述指标均明显低于DM组(P<0.05,P<0.01)。Snail1免疫组化阳性染色见于各组DM大鼠肾小管,正常对照组未见阳性表达,A组见弱阳性表达,并随治疗时间延长而减少。DM组肾皮质Snail1、FN蛋白和mRNA的表达水平高于正常对照组(P<0.01),而A组显著低于DM组(P<0.01)。Snail1与FN mRNA的表达水平呈显著正相关(P<0.01),Snail1蛋白表达水平与血糖、尿蛋白、血肌酐、肾脏指数亦呈正相关(P<0.01)。结论:Snail1基因和蛋白在DM大鼠肾组织过度表达,提示Snail1可能参与了DN的发生、发展机制。

锌指转录因子Snail及E-钙黏附素在食管鳞癌中的表达及意义

目的检测锌指转录因子Snail及E-钙黏附素(E-cadherin)蛋白在食管鳞癌中的表达,分析其与食管鳞癌侵袭、转移的关系。方法采用免疫组织化学方法检测Snail及E-cadherin在62例食管鳞癌组织、31例癌旁不典型增生组织及62例正常食管黏膜组织中的表达,并分析其与临床病理参数的关系。结果食管鳞癌组织中Snail及E-cadherin蛋白表达均与癌的组织学分级、浸润深度及淋巴结转移密切相关(P<0.05);在食管鳞癌癌变过程中Snail蛋白表达在癌组织、癌旁不典型增生组织及正常黏膜组织中的表达率依次降低,分别为79.0%(49/62)、48.4%(15/31)、17.7%(11/62),组间比较差异有统计学意义(χ2=50.129,P<0.01);而E-cadherin蛋白在癌组织、癌旁不典型增生组织及正常黏膜组织中的表达率依次升高,分别为40.3%(25/62)、71.0%(22/31)、95.2%(59/62),组间比较差异有统计学意义(χ2=48.426,P<0.01)。进一步相关性分析表明:Snail和E-cadherin蛋白在食管鳞癌组织中的表达呈负相关。结论 Snail及E-cadherin蛋白的异常表达可能与食管鳞癌的发生、发展密切相关,二者的联合检测有可能作为食管鳞癌侵袭、转移的重要生物学标志。

核转录因子Snail与骨肉瘤关系的研究进展

骨肉瘤是最常见的骨恶性肿瘤,但其发生机制目前尚未阐明。而核转录因子Snail不仅参与与骨肉瘤复发转移及预后有关的上皮细胞间质化过程,而且在肿瘤干细胞特性产生和维持、细胞生存和凋亡以及免疫调节中起着重要的作用,其有望成为骨肉瘤等恶性肿瘤治疗的一个新靶点。

转录因子Snail对胃癌MKN-28细胞的增殖、凋亡及侵袭的影响

目的:探讨转录因子Snail对胃癌MKN-28细胞的影响。方法:取胃癌MNK-28细胞株的Snail基因进行沉默研究,以顺铂对MNK-28细胞进行处理,并选用CCK-8法不同刺激因素组细胞的增殖情况进行检测,同时选用透射电镜对各组细胞凋亡情况进行观察,而各组细胞侵袭能力则以Transwell小室进行观察。结果:(1)细胞增殖情况分析,顺铂处理及慢病毒沉默Snail基因均可见细胞增殖抑制现象,而shRNA+Snail+顺铂组细胞增殖抑制率显著高于其他组(p <0.05);(2)细胞凋亡情况,与单纯MKN-28细胞组比较,不同刺激因素组细胞凋亡程度均显著升高(p <0.05);(3)细胞侵袭实验分析,shRNA+Snail+顺铂组细胞迁出的细胞数较其他组明显降低(p <0.05)。结论:转录因子Snail可对胃癌MKN-28细胞的增殖情况产生影响,沉默Snail基因有利于加速细胞凋亡,提高化疗药敏感性,可在临床上推广。

钙结合蛋白S100A4和锌指转录因子Snail在骨肉瘤组织中的表达及意义

目的 探讨骨肉瘤组织中钙结合蛋白S100A4和锌指转录因子Snail的表达及意义.方法 应用免疫组织化学法检测70例骨肉瘤患者和20例骨软骨瘤患者手术切除组织中S100A4和Snail表达水平.结果 S100A4骨肉瘤组织的阳性表达率为71.43％（50/70）,明显高于骨软骨瘤组织阳性表达率[15.00％ （3/20）],两者差异有统计学意义（P＜0.01）,Snail骨肉瘤组织的阳性表达率[80.00％（56/70）],明显高于骨软骨瘤组织的阳性表达率[10.00％（2/20）],两者差异有统计学意义（P＜0.01）.S100A4和Snail表达水平均与骨肉瘤软组织浸润、临床分期、肺转移密切相关（P＜0.05）.结论 对骨肉瘤进行S100A4和Snail检测有助于判断肿瘤的侵袭和转移.

上皮性卵巢癌组织中WWOX蛋白、转录因子Elf5和Snail1、上皮间质转化标志分子的表达观察

目的观察上皮性卵巢癌组织中WWOX蛋白、转录因子Elf5和Snail1、上皮间质转化(EMT)标志分子的表达变化,并探讨其意义。方法收集300例上皮性卵巢癌患者的卵巢癌组织及其癌组织相对应的癌旁组织,免疫组化法分别检测上述组织中的WWOX蛋白、Elf5、Snail1及EMT标志分子E-cadherin、N-Cadherin、Vimentin。对卵巢癌组织及癌旁组织中上述指标的表达作比较,分析卵巢癌组织中上述指标的表达与卵巢癌FIGO分期、组织学类型、病理学分级和淋巴结转移等临床病理参数的关系,分析卵巢癌组织中上述各指标的表达关系,分析卵巢癌组织中WWOX蛋白、Elf5表达与卵巢癌患者预后的关系。结果 WWOX蛋白、Elf5和E-cadherin在卵巢癌组织中阳性表达率低、癌旁组织阳性表达率高,Snail1、N-cadherin、Vimentin在卵巢癌组织中阳性表达率高、癌旁组织中阳性表达率低;卵巢癌组织及癌旁组织中WWOX蛋白、Elf5、Snail1、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin的表达相比,P均<0.05。卵巢癌组织中上述指标的表达水平与上皮性卵巢癌病理分期、病理学分级及淋巴结转移有关(P均<0.05)。卵巢癌组织WWOX蛋白与Elf5的表达呈正相关(r=0.291,P<0.05),WWOX蛋白与Snail1、N-cadherin、Vimentin的表达呈负相关(r分别为-0.785、-0.482、-0.706,P均<0.05),WWOX蛋白与E-cadherin表达呈正相关(r=0.759,P<0.05),Elf5与Snail1、N-cadherin、Vimentin的表达呈负相关(r分别为-0.816、-0.465、-0.738,P均<0.05),Elf5与E-cadherin表达呈正相关(r=0.726,P<0.05)。卵巢癌组织中WWOX蛋白与Elf5阳性表达的患者生存率高于阴性者(P<0.05);卵巢癌组织中WWOX蛋白和Elf5的表达均为影响卵巢癌患者预后的独立因素(P均<0.05)。结论上皮性卵巢癌患者卵巢癌组织中WWOX蛋白、转录因子Elf5和Snail1、EMT标志分子的表达发生变化,而且其表达存在相关性,WWOX蛋白及Elf5的表达与上皮性卵巢癌患者的生存及预后相关。

POK红系髓性致癌因子和锌指转录因子Snail在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的探讨POK红系髓性致癌因子（Pokemon）和锌指转录因子Snail在乳腺癌组织中的表达及其与临床病理因素的关系。方法采用免疫组织化学法检测70例乳腺癌患者手术切除的癌组织和相应癌旁组织中Pokemon和Snail的表达水平。结果Pokemon在乳腺癌组织中表达率为72．86％，在癌旁组织中表达率为37．14％，两者差异有统计学意义（P〈0．01），Pokemon表达水平与乳腺癌淋巴结转移明显相关（P〈0．05）；Snail在乳腺癌组织中表达率为81．43％，在癌旁组织中表达率为27．14％，两者差异有统计学意义（P〈0．01），Snail表达水平与乳腺癌组织学分级、TNM分期、淋巴结转移有关（P〈0．05）。结论检测Pokemon及Snail的表达与乳腺癌患者的临床病理特征及预后有关。

锌指结构转录抑制因子Snail及NF-κB在卵巢上皮癌中的表达及临床意义

目的通过对卵巢上皮癌组织中Snail、NF-κB的检测,探讨其在卵巢上皮癌中的表达及临床意义。方法卵巢恶性肿瘤59例,良性上皮性肿瘤18例,应用免疫组化方法检测其在良恶性卵巢肿瘤的表达情况。结果 Snail及NF-κB在卵巢上皮癌的表达明显高于良性上皮,两者呈正相关。结论 Snail,NF-κB在卵巢上皮癌中高表达,卵巢癌期别越高,表达越强,NF-κB与Snail在卵巢癌的发展过程中可能起协同作用。

SOX9通过转化生长因子β信号通路调节角膜内皮损伤后内皮-间质转化过程

目的探究性别决定区Y框蛋白9(sex-determining region Y-box protein 9,SOX9)是否会调控角膜内皮细胞损伤后的角膜上皮-间质转化(endothelial-to-mesenchymal transition,EndMT)过程及具体机制。方法转染小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)敲低人角膜内皮细胞B4G12中SOX9的表达,使用甲萘醌构建体外B4G12细胞损伤模型,设4个分组:si-NC组(转染siRNA-阴性对照)、si-SOX9组(转染siRNA-SOX9)、si-NC+甲萘醌组(转染siRNA-阴性对照后添加外源性甲萘醌做损伤处理)、si-SOX9+甲萘醌组(转染siRNA-SOX9后添加外源性甲萘醌做损伤处理)。通过实时荧光逆转录聚合酶链反应(real-time reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)和Western blot检测各组细胞中EndMT关键因子Snail家族转录抑制因子2(snail family transcriptional repressor 2,SNAIL2)及相关信号通路关键因子表达变化,阐明SOX9调控EndMT过程的功能和机制。结果转染siRNA-SOX9敲低细胞SOX9表达后,给予甲萘醌细胞损伤处理,观察到细胞中SNAIL2的表达会随SOX9的敲低而降低,同时观察到转化生长因子β(transforming growth factor beta,TGF-β)信号通路中SNAIL2的上游关键因子Smad2/Smad3的表达也随着SOX9的敲低而降低。结论SOX9通过TGF-β信号通路调控角膜内皮损伤后EndMT过程。

茶黄素调节Snail/Slug信号通路对口腔鳞癌细胞生物学行为的影响

目的研究茶黄素调节Snail/Slug信号通路对口腔鳞癌(OSCC)细胞增殖、凋亡和上皮间质转化的影响。方法采用MTT法检测25、50、100、150、175 mg/L茶黄素处理的人OSCC细胞SCC-25存活率,筛选出茶黄素的合适作用浓度。体外培养SCC-25细胞并构建OSCC移植瘤模型,分为对照组、茶黄素低剂量组、茶黄素高剂量组、茶黄素高剂量+空载组、茶黄素高剂量+Snail过表达组。采用实时荧光定量PCR与免疫印迹检测各组细胞Snail、Slug表达;采用MTT法与流式细胞术分别检测各组细胞增殖、凋亡;采用细胞划痕与Transwell侵袭实验分别检测各组SCC-25细胞迁移、侵袭;采用免疫印迹检测各组SCC-25细胞凋亡及上皮间质转化相关蛋白表达;检测各组裸鼠肿瘤体积、肿瘤质量。结果与对照组相比,茶黄素低剂量组、茶黄素高剂量组细胞存活率、迁移率、侵袭数、Snail mRNA及蛋白表达、Slug m RNA及蛋白表达、Bcl-2、N-cadherin蛋白表达、裸鼠肿瘤质量及体积均降低(P<0.05),细胞凋亡率、Bax、ZO-1及E-cadherin蛋白表达均升高(P<0.05),高剂量茶黄素作用更强。与茶黄素高剂量组相比,茶黄素高剂量+空载组各指标差异无统计学意义(P>0.05);过表达Snail可逆转茶黄素对细胞及裸鼠各指标的影响。结论茶黄素可下调Snail/Slug通路蛋白表达,从而抑制OSCC细胞的上皮间质转化、增殖、迁移及侵袭,促使其凋亡,并可延缓裸鼠移植瘤的生长。

过表达Snail增强肺癌细胞A549的体外侵袭能力

用锌指转录因子Snail诱导肺癌细胞A549发生上皮细胞-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT),检测肺癌发生EMT后细胞侵袭能力的变化,为临床筛选分子靶向药物提供依据.构建pcDNA3.1-snail载体,用pcDNA3.1-snail及空pcDNA3.1载体转染肺癌A549细胞后,进行G418筛选;光镜观察培养后细胞形态学的改变、免疫细胞化学与免疫荧光检测细胞表达E-钙黏着蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)的改变,Western印迹检测细胞中E-钙黏着蛋白和波形蛋白的改变,Transwell侵袭小室法进行细胞体外侵袭能力检测.采用pcDNA3.1-snail转染细胞后,A549细胞变得细长,细胞融合度降低.免疫细胞化学、免疫荧光、Western印迹结果显示,E-钙黏着蛋白表达降低,波形蛋白表达升高;transwell侵袭小室法结果显示,过表达Snail的A549细胞穿透matrigel胶的细胞数明显增多.结果提示,Snail能有效诱导肺癌发生EMT,并且能增强肺癌的体外侵袭能力.

转化生长因子-β通路对胃癌细胞增殖、侵袭及slug蛋白、上皮钙黏素表达的影响

目的 研究转化生长因子-β(TGF-β)通路的激活与阻断对人胃癌HGC-27细胞增殖、侵袭及slug蛋白和上皮钙黏素(E-cadherin,E-cad)表达的影响。方法 于2021年1月至2022年1月使用外源性通路激活剂TGF-β1和阻断剂SB431542培养胃癌细胞,后根据对细胞给药不同分为五组。空白对照组:仅使用等量常规培养基;激动剂组:TGF-β1(25μg/L);阻断剂组:SB431542(2 mg/L);激动剂+低浓度阻断剂组:TGF-β1(25μg/L)+SB431542(2 mg/L);激动剂+高浓度阻断剂组:TGF-β1(25μg/L)+SB431542(4 mg/L)。并使用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测各组胃癌细胞增殖活性,使用Transwell侵袭实验检测各组胃癌细胞侵袭能力,使用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测胃癌细胞中slug与E-cad两种蛋白的表达情况。结果 五组胃癌细胞增殖活性、侵袭能力及slug蛋白、E-cad蛋白表达水平比较均差异有统计学意义(P<0.05)。激动剂组胃癌细胞增殖活性(24 h:0.70±0.13)和侵袭能力[细胞穿过小室膜的细胞数量(227.45±5.46)个]、slug蛋白表达水平[(149.45±24.46)ng/L]高于空白对照组[24 h:0.52±0.10、(117.81±3.11)个、(101.25±20.11)ng/L](P<0.05),而E-cad蛋白表达水平(23.54±9.42)ng/L相较空白对照组(41.56±25.26)ng/L显著降低(P<0.05)。结论 TGF-β通路可通过增强slug蛋白表达并抑制E-cad表达,激活上皮-间充质转化(EMT),提高胃癌细胞的体内外增殖和侵袭能力,从而影响胃癌的进展。

Snail、E-cadherin和MMP-2在Ⅰ型子宫内膜癌中的表达及临床意义

目的探讨子宫内膜样腺癌组织中转录因子Snail、上皮钙黏附素(E-cadherin)和基质金属蛋白酶2(MMP-2)的表达关系,研究Snail促进子宫内膜癌侵袭转移的机制及临床意义。方法采用免疫组化方法,结合组织芯片技术,检测58例Ⅰ型子宫内膜癌、17例内膜不典型增生、21例正常内膜组织中Snail、E-cadherin和MMP-2的表达水平,分析3种蛋白表达之间的相关性及与临床病理因素的关系。结果Ⅰ型子宫内膜癌组织中存在Snail和MMP-2蛋白的过度表达以及E-cadherin蛋白的低度表达(P<0.01)。Snail蛋白表达与FIGO分期、淋巴结转移相关(P<0.05),E-cadherin表达的降低与肿瘤肌层浸润和淋巴结转移相关(P<0.05),MMP-2蛋白表达与肿瘤淋巴结转移显著相关(P<0.01)。子宫内膜样腺癌组织中Snail和E-cadherin的表达存在负相关关系(r=-0.259,P<0.05),而Snail蛋白与MMP-2的表达呈显著正相关(r=0.447,P<0.01)。结论 Snail可能通过调节E-cadherin和MMP-2蛋白的异常表达促进子宫内膜样腺癌的侵袭转移,联合检测Snail、E-cadherin和MMP-2对于判断子宫内膜样腺癌的恶性潜能和生物学行为具有重要意义。

基于TLR4/NF-κB/Snail1信号通路的槲皮素对糖尿病大鼠肾脏疾病的实验

本文基于TLR4/NF-κB/Snail1信号通路,通过采用一次性腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,随机分为正常对照组、糖尿病模型组、阳性对照组和槲皮素组并进行对比分析。实验结果表明:槲皮素对糖尿病大鼠的肾脏保护作用可通过调控肾脏TLR4/NF-κB/Snail1信号通路,减轻炎症反应抑制肾脏纤维化。

Snail高表达对子痫前期大鼠胎盘滋养细胞侵袭能力的影响及其机制

目的:研究锌指转录因子Snail高表达对子痫前期(PE)大鼠胎盘滋养细胞侵袭能力的影响,并探讨其相关机制。方法:建立大鼠PE模型,作为模型组,取健康大鼠作为对照组。从PE大鼠绒毛膜滋养层组织分离和培养原代滋养细胞。取对数生长期滋养细胞,分为Neo组(转染Snail阴性对照质粒pL-tdTomato-Neo)和mSnail组(转染Snail过表达质粒pL-tdTomato-mSnail),以不作处理的细胞为空白对照组。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blotting法检测对照组和模型组大鼠胎盘绒毛膜滋养层组织及空白对照组、Neo组和mSnail组细胞中Snail mRNA和蛋白表达水平,Transwell小室实验检测各组细胞侵袭能力,Western blotting法检测各组细胞中上皮性钙黏蛋白(E-cadherin)、神经性钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)蛋白表达水平。结果:与对照组比较,模型组大鼠胎盘绒毛膜滋养层组织中Snail mRNA和蛋白表达均明显降低(P<0.05);荧光显微镜下观察,Neo组和Snail组细胞转染效率均>80%。与空白对照组和Neo组比较,mSnail组细胞中Snail mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05),每个视野平均穿过微孔的细胞数明显增加(P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平明显降低(P<0.05),N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论:Snail高表达可增强PE大鼠胎盘滋养细胞的侵袭能力,其机制可能与Snail促进胎盘滋养细胞上皮-间质转化过程有关。

Snail基因修饰对骨髓基质干细胞骨架结构稳定作用及促迁移和对无血清培养诱导细胞凋亡的保护作用研究

转录因子Snail是调控肿瘤细胞迁徙转移的重要调控分子,基于干细胞与肿瘤细胞分子机制的重叠性,提出通过借鉴肿瘤细胞迁移的相关机制以用于提高骨髓基质干细胞向缺氧受损组织迁移能力的假设和研究思路,探讨Snail基因在人骨髓基质干细胞(MSCs)中的转染和表达情况,及转染后对基质干细胞促迁移作用、骨架结构的稳定作用及对无血清培养诱导细胞凋亡的保护作用。密度梯度离心法及细胞体外培养分离纯化人骨髓MSCs,脂质体法将重组表达载体pCAGGSneo-Snail-HA转染MSCs,G418筛选稳定表达,流式细胞仪检测MSCs表面抗原,采用免疫荧光染色技术检测转染后MSCs报告基因HA及目的基因Snail表达,Transwell细胞迁移实验和Western-blot评估细胞迁移能力和检测有关细胞信号转导通路分子水平变化,荧光染色分析细胞骨架,Sub-G1凋亡峰流式细胞仪检测细胞凋亡率并评估细胞抗凋亡能力。经流式细胞仪选择检测分离纯化扩增MSCs表面分子特点为CD34(-)/CD29(+),Snail及报告基因在转染后MSCs呈阳性表达,Snail质粒转染MSCs(MSCs-Sna)较对照空质粒转染MSCs(MSCs-neo)细胞迁移率增加(P<0.05),PI-3K信号通路特异性抑制剂Wortmannin能显著抑制此迁移率的增加,无血清培养72h后,MSCs-Sna凋亡率较MSCs-neo低(P<0.05)。经Snail基因转染,MSCs迁移能力、骨架结构的稳定性及在无血清培养环境中抗凋亡能力增加。

E-cadherin和Snail在前列腺癌组织中的表达及其与根治术后生化复发的相关性分析

目的:分析在前列腺癌组织中上皮钙黏素(E-cadherin)和转录因子Snail的表达以及与根治术后生化复发的关系。方法:将2018年5月至2019年7月在上海市浦东新区人民医院接受治疗的98例前列腺疾病患者纳入研究,其中52例前列腺癌患者作为肿瘤组,同时将同期确诊为良性前列腺增生的46例患者作为对照组,分析两组患者的临床资料,通过免疫组化测定前列腺癌组织中的E-cadherin和Snail,观察其表达情况;并调查E-cadherin和Snail表达情况与前列腺癌患者根治术后生化复发时间的相关性。结果:肿瘤组E-cadherin阳性表达率明显低于对照组,Snail阳性表达率明显高于对照组(P<0.05);前列腺癌患者在分化程度、淋巴结转移、TNM分期以及远处转移的E-cadherin和Snail阳性表达情况上差异具有统计学意义(P<0.05),同时前列腺癌患者中E-cadherin和Snail表达呈负相关;对比前列腺癌患者根治术后无生化复发率,E-cadherin阳性表达者明显高于E-cadherin阴性表达者,Snail阴性表达者明显高于Snail阳性表达者(P<0.05)。随着E-cadherin的阳性降低和Snail的阳性升高,Snail蛋白和E-cadherin蛋白表达为负向相关关系(r=-0.69,P<0.05)。结论:在前列腺癌组织中E-cadherin呈高表达,Snail呈低表达,并且两者的表达情况与根治术后生化复发存在密切联系。

实时定量PCR方法检测宫颈癌组织中SNAIL mRNA的表达

目的研究锌指转录抑制因子SNAIL mRNA在宫颈癌组织和宫颈癌细胞系中的表达情况并探讨其意义。方法采用实时定量PCR方法检测5例宫颈原位癌、55例宫颈浸润癌、14例癌旁组织和3种宫颈癌细胞系HeLa、SiHa、C33A中SNAIL mRNA的表达,并分析其与宫颈浸润癌各临床病理指标的相关性。结果正常宫颈组织、宫颈原位癌和宫颈浸润癌SNAIL mRNA的相对表达水平分别为0.01±0.01、0.08±0.05、0.09±0.07;宫颈原位癌和浸润癌均高于正常宫颈组织(P<0.05)。但在不同FIGO分期、病理分级、浸润深度及淋巴结转移情况之间SNAIL mRNA水平无明显变化。3种宫颈癌细胞系中均有SNAIL mRNA的表达,分别为0.06±0.06、0.18±0.05、0.09±0.08,以SiHa细胞系最高(P<0.05)。结论SNAIL基因在宫颈原位癌和浸润癌中高表达,提示SNAIL可能与宫颈癌的发生和发展有关。

核转运蛋白α2(KPNA2)通过激活Snail 1信号通路促进胃癌细胞增殖和侵袭及迁移

目的研究核转运蛋白α2(KPNA2)在胃癌细胞中的表达、生物学作用及机制。方法采用基因表达谱相互作用分析(GEPIA)数据库分析胃癌患者肿瘤组织中KPNA2蛋白相对表达量。将KPNA2短发夹RNA转入至高表达KPNA2的MKN45胃癌细胞,将KPNA2质粒转入至MKN45胃癌细胞,在敲低和过表达KPNA2细胞中,采用CCK-8法检测细胞增殖,TranswellTM小室实验、创伤愈合实验检测细胞侵袭和迁移;实时定量PCR检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、增殖细胞核抗原(PCNA)、CD133、CD44、性别决定区Y框蛋白2(SOX2)、上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、神经钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP9的mRNA水平,Western blot法检测KPNA2、cyclinD1、PCNA、CD133、CD44、SOX2及Snail 1蛋白水平。结果KPNA2在胃癌组织高表达,过表达KPNA2能够促进MKN45胃癌细胞增殖、侵袭和迁移。同时促进胃癌细胞的cyclin D1、PCNA、CD133、CD44、SOX2、E-cadherin、N-cadherin、vimentin、MMP2、MMP9以及Snail 1的表达。结论KPNA2通过刺激上皮间质转化促进胃癌细胞的侵袭和迁移。

Snail家族转录因子-2的表达与脑胶质瘤细胞替莫唑胺抵抗的相关性

目的研究Snail家族转录因子-2(Snail2)的表达对人脑胶质瘤细胞U87替莫唑胺(TMZ)抵抗的影响。方法体外分步诱导建立抵抗替莫唑胺细胞系(U87-TR),并通过噻唑蓝比色法(MTT)实验进行验证,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)及免疫印迹(Western blot)法检测U87-TR与亲本细胞Snail2表达的变化。慢病毒转染干扰质粒降低U87-TR细胞系Snail2的表达,得到U87-TR-sh Snail2细胞系,并通过RT-PCR及Western blot进行验证,MTT法检测U87-TR-sh Snail2耐药能力的变化。结果成功构建U87-TR细胞系,MTT结果显示U87-TR及U87细胞替莫唑胺IC50值分别为(19.73±1.34),(3.06±0.28)μg·m L^(-1),差异有统计学意义(P<0.05),U87-TR细胞耐药指数为6.45。Western blot结果显示,U87-TR及U87细胞Snail2蛋白相对表达水平分别为0.70±0.09及0.26±0.03,RT-PCR结果显示,U87-TR及U87细胞Snail2 mRNA相对表达水平分别为1.77±0.16及0.58±0.06,差异有统计学意义(P<0.05)。U87-TR-sh Snail2、U87及U87-TR细胞替莫唑胺IC50值分别为(8.61±0.74),(2.98±0.33),(17.20±1.09)μg·m L^(-1),U87-TR细胞显著高于U87-TR-sh Snail2及U87细胞,且U87-TR-sh Snail2细胞显著高于U87细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。U87-TR-sh Snail2细胞及U87-TR细胞Snail2蛋白相对表达水平分别为0.15±0.02及0.53±0.06,U87-TR-sh Snail2细胞显著低于U87-TR细胞,U87-TR-sh Snail2细胞及U87-TR细胞Snail2mRNA相对表达水平分别为0.42±0.06及1.71±0.15,U87-TR-sh Snail2细胞显著低于U87-TR细胞,差异有统计学意义(P<0.05),U87-TR-sh Snail2耐药指数降低至2.90。结论 Snail2在抗替莫唑胺细胞系中高表达,且降低Snail2的表达能提高胶质瘤细胞对替莫唑胺的敏感性,提示Snail2可能在胶质瘤细胞抗替莫唑胺发生的过程中发挥着重要作用。