转录因子T-bet/GATA-3比率评价哮喘患者Th1/Th2失衡及CpG ODN干预机制的研究

目的:探讨哮喘患者PBMCs中转录因子T-bet/GATA-3比率与Th1/Th2细胞失衡的关系及体外CpG干预后T-bet/GATA3比率的变化及其对Th1/Th2细胞平衡的调节作用。方法:用RT-PCR法测定30例发作期哮喘患者(哮喘组)及20例慢性阻塞性肺病患者(COPD组)及20例正常人(对照组)PBMCs中T-bet mRNA、GATA-3 mRNA及TLR9 mRNA的表达强度,用ELISA法测定血浆IL-4、IL-5、IL-13和IFNγ的表达水平,以观察哮喘患者PBMCs中转录因子T-bet/GATA-3比率与Th1/Th2细胞失衡的关系。将20例发作期哮喘患者的PBMCs分为2部分,一份加入CpG ODN和PHA(CpG组),一份仅加入PHA(对照组),培养48h后分别收集培养液和细胞,采用RT-PCR法测定细胞中T-bet mRNA、GATA-3 mRNA及TLR9 mRNA的表达强度,ELISA法测定培养液中IL-4、IL-5、IL-13和IFN-γ的表达水平。结果:哮喘患者PBMCs中T-bet/GATA-3的比率显著低于COPD患者和正常人,IL-4、IL-5、IL-13的水平显著高于COPD患者和正常人,与T-bet/GATA-3的比率呈负相关,而IFN-γ的水平显著降低,与T-bet/GATA-3的比率呈正相关。哮喘组TLR9的表达强度显著弱于COPD患者和正常人。CpG干预组细胞培养液中IL-4、IL-5和IL-13的水平分别显著低于对照组,IFN-γ的水平显著高于对照组。CpG干预组细胞中T-bet mRNA和TLR9 mRNA的表达强度显著强于对照组,GATA-3 mRNA的表达强度显著低于对照组;T-bet/GATA-3的比率显著高于对照组。结论:哮喘患者T-bet/GATA-3的比率降低,可以作为评价Th1/Th2细胞失衡的精确指标。CpG ODN可以上调T-bet的表达,下调GATA-3的表达,从而上调T-bet/GATA-3的比率,逆转Th1/Th2细胞失衡,是一种很有前景的哮喘治疗手段。

芪黄益气摄血方对ITP模型小鼠Th1/Th2细胞因子及转录因子T-bet/GATA3表达的影响

目的研究芪黄益气摄血方对免疫性血小板减少症(ITP)模型小鼠Th1/Th2细胞因子及转录因子T-bet/GATA3表达的影响。方法50只BALB/C小鼠随机分为5组,分别为正常组、模型组、芪黄益气摄血方高、低剂量组和强的松组,每组10只。采用豚鼠抗小鼠血小板血清(APS)腹腔注射方法,建立ITP小鼠模型;注射APS后的第5天,各组分别灌胃给药,连续灌胃14 d。观察各组小鼠一般情况;检测外周血血小板计数(PLT)和血红蛋白(Hb)浓度变化;Elisa法检测血清IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ水平;分离脾脏、胸腺组织,称重,计算脏器指数;qRT-PCR法检测脾脏T-bet、GATA-3 mRNA表达水平;Western Blot法检测脾脏T-bet、GATA-3蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组小鼠外周血PLT、Hb和血清IL-4、IL-10水平均显著降低(P<0.05或P<0.01),脾脏和胸腺指数、血清IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ、以及脾脏T-bet、GATA-3 mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.01);与模型组比较,芪黄益气摄血方高、低剂量和强的松组PLT、Hb、IL-4、IL-10水平均显著升高(P<0.05或P<0.01),脾脏和胸腺指数、IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ、以及T-bet、GATA-3 mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01);与低剂量组比较,高剂量组和强的松组PLT、IL-4、IL-10水平显著升高(P<0.05或P<0.01),而IL-6、TNF-α、IFN-γ水平显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论芪黄益气摄血方可通过下调T-bet/GATA-3转录因子的表达,纠正Th1/Th2细胞因子失衡,从而发挥治疗ITP的作用,且高、低剂量之间存在一定的剂量依赖关系。

先天性心脏病室间隔缺损合并肺动脉高压患儿外周血单核细胞中转录因子T-bet的表达及临床意义

目的探讨先天性心脏病室间隔缺损合并肺动脉高压患儿外周血单核细胞中转录因子T-bet的表达及临床意义。方法选取自2014年12月至2016年12月收治的60例接受手术治疗的先天性心脏病室间隔缺损合并肺动脉高压患儿,按照肺动脉高压范围分为轻度组、中度组及重度组,每组各20例,另选择未合并肺动脉高压的先天性心脏病室间隔缺损20例作为对照组。采用实时荧光RT-PCR技术检测各组患儿围术期外周血中转录因子T-bet mRNA的表达水平,并做出对比。结果中度组与重度组外周血中转录因子T-bet mRNA的表达水平均明显低于对照组,中度组与重度组外周血中转录因子T-bet mRNA的表达水平均明显低于轻度组,差异具有统计学意义(P<0.05)。先天性心脏病室间隔缺损合并肺动脉高压患儿术后3 d、术后7 d分别与术前相比,外周血中转录因子T-bet mRNA的表达水平较高,差异具有统计学意义(P<0.05)。患儿术后3 d、术后7 d分别与术后1 d相比,外周血中转录因子T-bet mRNA的表达水平较高,差异具有统计学意义(P<0.05)。患儿术后3 d与术后7 d相比外周血中转录因子T-bet mRNA的表达水平无显著差异(P>0.05)。结论先天性心脏病室间隔缺损合并肺动脉高压患儿中度组、重度组与轻度组相比外周血中转录因子T-bet mRNA的表达水平较低,可能与此类患儿Th1细胞数量减少的可能性较大相关。另外,在手术治疗后,患儿的免疫功能可能出现了一定的影响,但随后可恢复正常,应引起临床工作者的足够重视。

转录因子T-bet与支气管哮喘

转录因子T bet可以调节T辅助细胞 1(TH1 )和T辅助细胞 2(TH2 )的平衡。TH1 /TH2水平降低,是哮喘发病的重要机制之一。本文就T bet调节TH1 /TH2平衡,以及调节TH1细胞释放的相关细胞因子,从而调节哮喘的炎症反应作一综述。

转录因子T-bet表达与外周T细胞淋巴瘤的预后关系

目的:分析转录因子T-bet表达与外周T细胞淋巴瘤(PTCL)的预后关系。方法:选取笔者所在医院收治的初次治疗PTCL患者101例,均进行石蜡包埋病理标本检查,对其临床资料进行回顾性分析,分析转录因子T-bet表达与PTCL预后的关系。结果:本组101例PTCL患者,T-bet阳性患者5年生存率高于T-bet阴性患者,差异有统计学意义(P<0.05)。本组56例外周T细胞淋巴瘤非特指型患者,T-bet阳性患者5年生存率高于T-bet阴性患者,差异有统计学意义(P<0.05)。本组17例NK-T细胞淋巴瘤患者,T-bet阳性患者1年生存率高于T-bet阴性患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:转录因子T-bet与PTCL患者预后存在一定的相关性,其属于PTCL-NOS患者以及NKT患者预后的保护因素。

黄芪多糖对变应性鼻炎小鼠转录因子T-bet/GATA-3的表达影响

目的观察黄芪多糖对变应性鼻炎小鼠转录因子T-bet/GATA-3表达的影响,探讨黄芪多糖对其调节作用。方法30只Balb/c小鼠随机分成正常对照组、变应性鼻炎组和黄芪多糖组,通过OVA致敏建立变应性鼻炎动物模型,造模成功后,黄芪多糖组在第15 d给以黄芪多糖组200mg/kg灌胃,共2周。观测各组小鼠症状表现,HE染色检测鼻腔黏膜中嗜酸性粒细胞总数;ELISA检测小鼠血清中s Ig E、IL-4、IL-5、IFN-γ含量;Western blot法检测鼻黏膜组织中T-bet、GATA-3蛋白的表达。结果小鼠经黄芪多糖干预后,变应性鼻炎症状缓解,黄芪多糖可以降低鼻黏膜嗜酸性粒细胞数量,血清中s Ig E、IL-4、IL-5水平下降(P<0.01),IFN-γ水平上升(P<0.05)。与对照组、黄芪多糖组比较,AR组中T-bet蛋白含量明显减低,而GATA-3明显升高(P<0.01)。结论转录因子T-bet/GATA-3在变应性鼻炎中表达失衡,黄芪多糖可以抑制变应性鼻炎的鼻腔黏膜嗜酸性粒细胞炎症,纠正T-bet/GATA-3平衡,从而起治疗作用。

甲炎康泰对自身免疫性甲状腺炎大鼠T-bet/GATA3的影响

目的观察甲炎康泰(JYKT)复方颗粒对自身免疫性甲状腺炎(autoimmune thyroiditis,AIT)大鼠Th1/Th2细胞转录因子T-bet/GATA3的影响。方法50只Lewis大鼠,雌性,每组10只随机分为正常对照组、模型组、JYKT低、中、高剂量组。模型组与给药组大鼠皮下多点注射猪甲状腺球蛋白和弗化剂的方法建立自身免疫性甲状腺炎大鼠(AIT大鼠),大鼠造模6周后,正常、模型组大鼠每日予以0.9 mL/100 g双蒸水,中药组大鼠予以同体积药物混悬液连续8周。给药结束后RT-PCR检测各组大鼠脾脏中T-bet、GATA3mRNA的表达情况;Western Blot检测各组大鼠脾脏中T-bet、GATA3的蛋白表达情况;免疫组化法测定大鼠甲状腺组织T-bet、GATA3蛋白的表达情况。结果与正常组比较,模型组T-bet、GATA3 mRNA及蛋白表达均显著上升(P<0.01);与模型组比较,甲炎康泰低、中、高剂量组T-bet、GATA3 mRNA及蛋白均下降(P<0.05,P<0.01)。结论T-bet/GATA3是影响Th1/Th2平衡的关键转录因子,甲炎康泰可调控T-bet/GATA3表达,从而影响了自身免疫性甲状腺炎的发生与发展。

加减固本防哮饮对支气管哮喘患者缓解期外周血T-bet/GATA-3比值及Th1/Th2平衡的影响

目的:观察加减固本防哮饮对支气管哮喘患者缓解期外周血T-bet/GATA-3比值及Th1/Th2平衡的影响。方法选取2016年12月~2018年11月间在本院接受治疗的支气管哮喘缓解期患者65例,随机数字表法分成2组,对照组(32例)采用沙美特罗替卡松粉吸入剂,观察组(33例)在对照组基础上加服加减固本防哮饮。观察患者临床疗效、治疗前后肺功能、中医证候评分、血清白细胞介素-4(IL-4)、γ-干扰素(IFN-γ)含量及结合蛋白-3(GATA-3)及转移因子T-bet mRNA表达。结果观察组患者总的有效率为93.94%,高于对照组的81.25%(P<0.05);治疗后观察组患者PEF、FEV1较治疗前、对照组升高(P<0.05);治疗后观察组患者ACT评分较治疗前、对照组升高,中医证候积分较治疗前、对照组降低(P<0.05);治疗后观察组患者血清IL-4含量较治疗前、对照组降低,IFN-γ含量、IFN-γ/IL-4比值较治疗前、对照组升高(P<0.05);治疗后观察组患者GATA-3mRNA表达较治疗前、对照组降低,T-bet mRNA表达、T-bet/GATA-3比值较治疗前、对照组升高(P<0.05)。结论加减固本防哮饮可改善支气管哮喘患者缓解期患者肺功能,提升疗效,其作用机制可能和调控外周血T-bet/GATA-3及Th1/Th2平衡有关。

携带T-bet基因的重组腺病毒载体的构建

目的包装携带人T细胞转录因子T-bet基因的重组腺病毒,为研究T-bet在人鼻黏膜中作用的分子机制奠定基础。方法采用RT-PCR方法从健康人PBMC中扩增出转录因子T-bet的cDNA序列,构建重组穿梭载体pDC316-T-bet;采用阳离子脂质体介导将重组穿梭载体pDC316 T-bet与pBHGloxΔE1,3C re质粒共转染293细胞,包装出携带T-bet基因的重组腺病毒rAdT-bet,空斑纯化,PCR鉴定阳性rAdT-bet。结果以空斑纯化后的rAdT-bet为模板,作PCR均扩增出含1633 bp的片断,阳性率达100%,证实T-bet稳定整合于重组腺病毒。结论利用AdMaxTM腺病毒包装系统成功包装了rAdT-bet,为进一步研究T-bet基因在鼻黏膜中作用的分子机制和探讨变应性鼻炎治疗新手段均具有重要意义。

T-bet/GATA3与哮喘的相关性及川芎嗪治疗哮喘的研究进展

目的了解Th1/Th2中特异性转录因子T-bet/GATA3与哮喘的相关性及川芎嗪治疗哮喘的研究现状。方法应用现代信息技术,通过互联网等查阅近年来国内外相关资料并进行分析、整理、总结,对Th1/Th2中特异性转录因子T-bet/GATA3的生物学特征、转录因子T-bet/GATA3与哮喘发病机制的相关性、川芎嗪对哮喘的治疗及其与转录因子T-bet/GATA3关系进行综述。结果转录因子T-bet/GATA3在哮喘发病中起到复杂的生物调节作用,动物实验显示,川芎嗪治疗哮喘有效,川芎嗪能促进转录因子T-bet水平的表达,降低转录因子GATA3水平的表达。结论深入研究转录因子T-bet/GATA3、哮喘及川芎嗪之间的相关性,为哮喘的临床分级和治疗提供新的思路。

STAT1和T-bet基因敲除在咪喹莫特诱导的小鼠银屑病模型中的不同作用

目的观察STAT1信号分子和T-bet转录因子在咪喹莫特诱导的银屑病疾病模型中的不同作用。方法将雄性8周龄129和C57BL/6小鼠分别随机分为正常对照组、野生型咪喹莫特诱导组,将雄性8周龄STAT1-/-小鼠和T-bet-/-小鼠分为STAT1-/-咪喹莫特诱导组、T-bet-/-咪喹莫特诱导组,依据PASI评分标准记录评价小鼠银屑病疾病模型的严重程度,HE染色观察疾病模型中皮损组织的形态和炎性细胞浸润情况来评价其病理学改变,实时荧光定量PCR检测疾病模型的皮损组织中相关细胞因子基因表达水平的改变。结果局部给予咪喹莫特诱导后4种小鼠(129、C57BL/6、STAT1-/-、T-bet-/-)背部皮肤均出现不同程度红斑、鳞屑、炎症细胞浸润。与T-bet-/-对比,STAT1-/-给药组皮炎反应更严重。与野生型给药组相比,STAT1-/-给药组分泌的IL-22水平明显升高而IL-17升高不明显。结论 STAT1信号分子可能通过除Th17细胞分泌外的其他途径调控IL-22表达水平,从而影响银屑病严重程度。

川芎平喘合剂对哮喘患者血清Th1/Th2及相关转录调节因子T-bet/GATA-3平衡的影响

目的:探讨川芎平喘合剂治疗哮喘的临床疗效及对患者血清Th1/Th2及相关转录调节因子T-bet/GATA-3平衡的影响。方法:选取中医辨证为风哮夹瘀型且符合慢性持续期支气管哮喘诊断的患者,随机分为对照组和治疗组。对照组采用西医常规治疗(吸入沙美特罗/氟替卡松吸入剂),治疗组在对照组基础上加服川芎平喘合剂,疗程均为1个月。监测治疗前后两组中医证候积分、哮喘控制测试(ACT)评分、肺功能,检测外周血γ-干扰素(IFN-γ)、白介素-4(IL-4)水平及转录因子T-bet、结合蛋白-3(GATA-3)的mRNA表达变化,评价临床疗效。结果:两组中医证候积分均较治疗前显著下降(P<0.01),ACT评分、肺功能指标[1秒用力呼气容积占预计值%(FEV1%)、最大呼气峰流量占预计值%(PEF%)]均较治疗前明显升高(P<0.01),且治疗组的改善作用均优于对照组(P<0.01或P<0.05);两组血清IFN-γ、T-bet mRNA均明显升高(P<0.01),血清IL-4、GATA-3 mRNA均明显降低(P<0.01),且治疗组对IFN-γ/IL-4及T-bet/GATA-3的调节作用均显著优于对照组(P<0.05)。治疗组总有效率为96.7%,对照组为80.0%,两组总体疗效差异有统计学意义(P<0.05)。结论:川芎平喘合剂对哮喘的疗效确切,且可能与调节患者Th1/Th2及相关转录调节因子T-bet/GATA-3的平衡有关。

针刺对慢性疲劳综合征大鼠血浆T细胞转录因子/GATA结合蛋白3表达的影响

目的:观察针刺对慢性疲劳综合征(CFS)大鼠血浆T细胞转录因子(T-bet)/GATA结合蛋白3(GATA-3)表达的影响,探索针刺治疗CFS的作用机制。方法:SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、针刺组、人参皂甙组,每组12只。采用束缚+冷水游泳的复合应激法制备CFS大鼠模型。针刺组针刺"百会""关元""足三里",人参皂甙组予人参皂甙水溶液灌胃,均1次/d,14d后,观察各组行为学变化,采用RTPCR法检测血浆T-bet/GATA-3基因的表达水平。结果:模型组大鼠悬挂不动时间长于空白对照组(P<0.05),力竭游泳时间短于空白对照组(P<0.05);与模型组比较,人参皂甙灌胃及针刺治疗后大鼠悬挂不动时间均缩短(P<0.05),力竭游泳时间均延长(P<0.05);且针刺组较人参皂甙组悬挂不动时间更短,力竭游泳时间更长(均P<0.05)。模型组大鼠血浆T-bet基因的表达水平高于空白对照组(P<0.05),GATA-3基因表达水平低于空白对照组(P<0.05);人参皂甙灌胃及针刺治疗均能降低T-bet基因的表达水平(P<0.05),升高GATA-3基因的表达水平(P<0.05);针刺组较人参皂甙组T-bet表达水平降低更显著(P<0.05)。模型组T-bet/GATA-3比值高于空白对照组(P<0.05);人参皂甙灌胃及针刺治疗后T-bet/GATA-3比值较模型组均下降(P<0.05)。结论:针刺能降低血浆T-bet表达水平,升高GATA-3表达水平,调节升高的T-bet/GATA-3比值,可能是其治疗CFS的机制之一。

幽门螺杆菌感染者外周血CD4^+ T细胞中Notch1 mRNA的表达及其意义

目的研究幽门螺杆菌(H.pylori)感染者外周血CD4+T细胞中Notch1的mRNA表达水平及其与转录因子T-bet和细胞因子IFN-γ的相关性。方法选取37例H.pylori感染者及35例健康成人设为病例组(H.pylori感染组)和对照组(Control组),采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测CD4+T细胞中Notch1、T-bet的mRNA表达水平,酶联免疫吸附测定法(ELISA)定量检测血浆中IFN-γ因子的含量,分析2组的各项指标的表达差异及它们的相关性。结果与正常人相比,H.pylori感染组中Notch1、T-bet的mRNA表达水平均较对照组升高(均P <0.05),T-bet的升高与Notch1呈正相关(r=0.558 6,P <0.000 1);IFN-γ因子的含量较对照组升高(P <0.05),但是与Notch1的升高无相关性。结论 Notch1和T-bet在H.pylori感染者中同步升高,且呈正相关,提示着Notch1参与了CD4+T细胞向Th1细胞的分化。

间充质干细胞治疗提升免疫性血小板减少症小鼠的血小板数并影响其外周血单核细胞中 T-bet 和 GATA-3基因表达

目的：探讨间充质干细胞（ MSC）对原发免疫性血小板减少症（ ITP）小鼠血小板数目的影响及其机制。方法采用腹腔注射大鼠抗小鼠CD41抗体（ MWReg30单抗）的方法诱导BALB/c小鼠产生ITP后，取20只作为实验组，20只作为对照组。之后通过鼠尾静脉给实验组小鼠注射MSC 2×107个/只。注射后5 d、7 d、14 d，测定实验组与对照组小鼠外周血血小板数；14 d时应用逆转录聚合酶链反应（ RT-PCR）检测小鼠外周血单个核细胞（ PBMC）中转录因子T-bet和GATA-3 mRNA的表达；应用酶联免疫法测定Th1类细胞因子IFN-γ、IL-2及Th2类细胞因子IL-4、IL-10的水平。结果7 d、14 d后，注射MSC实验组小鼠血小板值[（588．0±81．6）×109/L、（623．0±78．9）×109/L]明显高于未注射MSC对照组[（317．0±90．1）×109/L、（288．0±87．8）×109/L]（P＜0．05）；14 d时，实验组PBMC中T-bet mRNA表达水平低于对照组[（0．04±0．03） vs （0．27±0．05）]（P＜0．05）；GATA-3 mRNA的表达水平高于对照组[（0．14±0．04） vs （0．07±0．05）]（P＜0．05）；实验组Th1类细胞因子IFN-γ、IL-2水平[（3．1±1．7） pg/ml、（3．2±2．1） pg/ml]明显低于对照组[（10．3±4．8） pg/ml、（16．3±5．7） pg/ml]（P＜0．05）；实验组外周血 Th2类细胞因子 IL-4、IL-10水平[（88．6±15．2） pg/ml、（38．3±11．8） pg/ml]明显高于对照组[（32．7±5．7） pg/ml、（22．1±3．4） pg/ml]（P＜0．05）。结论 MSC可以有效提升ITP小鼠的血小板数，机制可能与抑制了T-bet和GATA-3的表达失常导致的Th1细胞极化有关。

慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉筛窦黏膜组织中T-bet和GATA-3的表达

目的:研究Th1特异性转录因子T-bet及Th2特异性转录因子GATA-3在慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉(CRSwNP)筛窦黏膜组织中的表达。方法:选取48例CRSwNP患者,根据是否伴变应性鼻炎(AR)分成CRSwNP伴AR组(AR组,25例)和CRSwNP不伴AR组(NAR组,23例);对照组为16例无CRS及AR的上颌窦囊肿或蝶窦囊肿患者。手术中均取前组筛窦黏膜。采用Real-time PCR和免疫组织化学检测黏膜组织中转录因子T-bet与GATA-3的表达;用ABC-ELISA检测黏膜组织中细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-5的含量。结果:与对照组比较,AR组转录因子GATA-3 mRNA表达水平明显升高,GATA-3表达的阳性细胞数增多,IL-4和IL-5的含量显著增加(P<0.05);NAR组T-bet与GATA-3mRNA表达水平及T-bet与GATA-3表达的阳性细胞数差异均有统计学意义,IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-5的含量均明显升高(P<0.05)。NAR组与AR组比较,Tbet mRNA表达水平升高以及T-bet表达的阳性细胞数增多,差异均有统计学意义,且IFN-γ和IL-2的含量也显著升高(P<0.05);而GATA-3的表达水平以及IL-4和IL-5的含量差异无统计学意义(P>0.05)。结论:GATA-3在CRSwNP伴AR患者的筛窦黏膜中高表达,提示Th2型免疫反应可能占主导;在CRSwNP不伴AR患者中T-bet和GATA-3表达水平均升高,提示Th1与Th2型免疫反应均可能存在。

急、慢性乙型肝炎患者外周血中PD-1、T-bet及IFN-γ的水平变化及其意义

目的探讨急性乙型肝炎患者与慢性乙型肝炎患者外周血中程序性死亡分子-1(PD-1)、转录因子T-bet、干扰素-γ(IFN-γ)的表达水平差异及其临床意义。方法选取2015年8月至2017年8月在本院确诊的乙型肝炎患者158例进行研究,其中70例为急性乙型肝炎患者(急性组)、88例为慢性乙型肝炎患者(慢性组)。另选同期健康体检对象80例作为对照组;采用流式细胞仪检测三组外周血CD8+T细胞PD-1、T-bet、IFN-γ的表达水平。结果急性组患者的ALT、AST水平均明显高于慢性组和对照组(P<0.05);慢性组患者的ALT、AST水平均明显高于对照组(P<0.05);急性组患者的HBsAg、HBeAg、HBV-DNA均明显低于慢性组(P<0.05);急性组患者CD8+T细胞PD-1、T-bet、IFN-γ的表达水平均明显高于慢性组、对照组(P<0.05);慢性组患者CD8+T细胞PD-1、T-bet、IFN-γ的表达水平均明显高于对照组(P<0.05);急性组患者的CD8+T细胞PD-1、T-bet的表达水平与患者血清ALT、AST水平均呈正相关(P<0.05),CD8+T细胞T-bet的表达水平还与患者血清HBeAg呈正相关(P<0.05);慢性组患者CD8+T细胞PD-1、T-bet、IFN-γ表达水平均与患者血清HBsAg、HBV-DNA水平呈正相关(P<0.05)。结论急性乙型肝炎患者的外周血CD8+T细胞PD-1、T-bet、IFN-γ的表达水平高于慢性乙型肝炎患者,并且与患者急性肝损伤程度有关;慢性乙型肝炎患者外周血CD8+T细胞PD-1、T-bet、IFN-γ的表达水平主要与患者病毒载量、复制情况相关。

二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织GATA3,T-bet mRNA表达的影响

目的:观察二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织锌指蛋白3(GATA3),T盒转录因子(T-bet)的影响。方法:将70只SD大鼠随机分为7组,每组10只,分别为正常组,模型组,二陈汤加味低、中、高剂量组(5,10,20 g·kg-1),消咳喘组(5 g·kg-1),二陈汤组。以烟熏合并脂多糖(LPS)气管滴注的方法制备COPD大鼠模型。成功造模后,治疗组灌胃给药,正常组及模型组灌胃等体积生理盐水。酶联免疫吸附测定(ELISA)测定大鼠血清中白细胞介素-10(IL-10),白细胞介素-12(IL-12)的含量。实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测GATA3,T-bet mRNA表达,免疫组化(IHC)检测其肺组织GATA3,T-bet的蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清中IL-10水平显著降低,IL-12显著升高(P <0. 01);肺组织GATA3的蛋白和mRNA表达显著降低,T-bet的表达显著升高(P <0. 01)。与模型组比较,各治疗组血清中IL-10水平均有不同程度的升高,IL-12则不同程度的降低(P <0. 05)。各治疗组大鼠肺组织GATA3 mRNA和蛋白表达均明显增多,T-bet则受到了抑制(P <0. 05)。结论:二陈汤加味可能是通过降低IL-12,增加IL-10的含量,并抑制T-bet,兴奋GATA3的蛋白和mRNA表达,来减轻COPD大鼠肺组织炎症,改善肺功能的,并阻止COPD的免疫紊乱。

补肾生血方治疗慢性再生障碍性贫血的临床疗效及对T细胞亚群、T-bet与GATA3表达的影响

目的:探讨补肾生血方与益气养血方治疗慢性再生障碍性贫血疗效及T细胞亚群与T-box家族的新型转录因子(T-bet)、Gata转录因子家族的转录因子3(GATA3)表达的影响。方法:收集2018年5月至2021年6月,在全国19家医院就诊的慢性再生障碍性贫血患者共585例,利用前瞻性、双盲、随机对照方法,采用分层区组随机法将患者分为3组,肾虚组、气血两虚组、对照组,中药治疗分别予补肾生血方颗粒、益气养血方颗粒、安慰剂(半量补肾生血方颗粒),均联合口服西药环孢素及雄激素。每组治疗以3个月为一疗程,连续观察2个疗程,分析治疗前后检测患者血常规,T细胞亚群及融合基因T-bet、GATA3,并监测安全性指标。结果:观察期间共脱落75例,剔除18例,最终肾虚组161例,气血两虚组164例,对照组167例,共492例完成治疗。治疗6个月后,肾虚组的总有效率98.8%(159/161)高于气血两虚组的79.9%(131/164)(χ^(2)=30.135,P<0.01);肾虚组明显高于对照组的总有效率61.7%(103/167)(χ^(2)=70.126,P<0.01);气血两虚组总有效率高于对照组(χ^(2)=13.232,P<0.01)。与本组治疗前比较,治疗后3组患者的血红蛋白(HGB)明显提升(P<0.05,P<0.01),且肾虚组HGB含量提高更为显著(P<0.01);治疗后与气血两虚组比较,肾虚组与对照组的白细胞(WBC)及血小板(PLT)均显著升高(P<0.01);3组患者治疗后的中性粒细胞(ANC)差异无统计学意义。3组患者在相同时间点进行比较,肾虚组T辅助细胞1(Th1)、Th1/Th2水平均明显降低(P<0.05),且肾虚组CD4^(+)水平明显下降,CD4^(+)/CD8^(+)明显降低(P<0.05)。肾虚组与其余两组CD19^_(-)、HLA/DR^(+)、CD25^(+)比较差异无统计学意义,肾虚组与对照组T-bet均低于气血两虚组(P<0.05)。结论:补肾生血方治疗再生障碍性贫血可能通过改善免疫调节机制,抑制免疫系统活性,调节T细胞亚群,抑制Th1及CD4^(+)水平,促进骨髓造血,且安全、不良反应小,方案值得进一步推广。

β-arrestin2对急性支气管哮喘小鼠模型脾CD4＋T细胞T-bet表达的影响

目的探讨G-arrestin 2在急性支气管哮喘（简称哮喘）小鼠模型脾CD4^＋T细胞中的表达及对Tbet表达的影响。方法建立急性哮喘小鼠模型，免疫磁珠分离小鼠脾源性CD4^＋T细胞，RNA干扰β-arrestin 2的表达后，检测CD4^＋T细胞β-arrestin 2、T-bet mRNA和蛋白的表达。结果siRNA-β-arrestin 2-1123沉默效果最佳，相对于未转染siRNA的哮喘组及其他siRNA-β-arrestin2转染组，β-arrestin 2 mRNA明显降低（P〈O．01）；哮喘小鼠模型脾CD4^＋T细胞β-arrestin 2蛋白的表达明显高于正常组（P〈O．01）；β-arrestin 2沉默后，哮喘小鼠脾CD4’T细胞T-bet mRNA和蛋白的表达明显升高（P〈O．05）。结论β-arrestin2可能通过抑制小鼠CD4^＋T细胞T-bet的表达参与哮喘的发病。