LncRNA-ANCR在人脑胶质瘤组织及细胞中的表达及其与细胞恶性增殖的关系

目的探究LncRNA ANCR在人脑胶质瘤组织中的表达及其与细胞恶性增殖间的关系。方法收集2017年1月5日至2018年9月30日临沂市中心医院神经外科45例高级别脑胶质瘤组织作为高级别组、13例低级别脑胶质瘤组织作为低级别组、10例正常脑外伤组织作为正常组,荧光定量PCR技术(qPCR)检测组织中ANCR及潜在的eIF4B的表达。体外采用慢病毒转染shRNA表达载体,在人高级别脑胶质瘤U251细胞中构建对照细胞及ANCR干扰细胞株,作为本研究的对照组、实验1组及实验2组细胞,qPCR检测细胞中ANCR、eIF4B及下游分子c-Myc mRNA的表达水平,蛋白印迹实验(Western blot)检测eIF4B及c-Myc蛋白表达水平,CCK-8实验检测细胞相对增殖能力变化,平板集落形成实验检测细胞克隆形成能力变化。使用SPSS 21.0进行统计分析,组间比较采用方差分析,组内比较使用SNK-q两两比较法。结果高级别脑胶质瘤、低级别脑胶质瘤及正常脑外伤组织中ANCR mRNA的表达水平分别为0.710±0.125、2.033±0.312及3.408±0.296,而eIF4B mRNA的表达水平为0.176±0.019、0.268±0.022及0.426±0.028,ANCR及eIF4B在高级别脑胶质瘤组织中表达高于低级别脑胶质瘤及正常脑组织(P<0.001),ANCR在低级别脑胶质瘤组织中表达高于正常脑组织(P=0.013)。ANCR与eIF4B mRNA两者差异具有统计学意义(P<0.001)。对照组、实验1组及实验2组ANCR mRNA的表达分别为1.000±0.021、0.202±0.057及0.300±0.016;对照组、实验1组及实验2组eIF4B mRNA的表达分别为1.000±0.078、0.452±0.012及0.526±0.037;对照组、实验1组及实验2组c-Myc mRNA的表达分别为1.000±0.053、0.688±0.067及0.564±0.089,实验1组及实验2组细胞中ANCR、eIF4B及c-Myc mRNA及蛋白分子表达显著低于对照组细胞(P<0.001);实验1组及实验2组细胞在72 h及96 h增殖能力显著降低,克隆形成能力显著减弱(P<0.001)。结论ANCR在高级别脑胶质瘤组织中表达显著上调,且与eIF4B表达正相关,体外干扰ANCR可介导eIF4B及c-Myc mRNA及蛋白分子的表达下降,进而抑制脑胶质瘤细胞的增殖能力。