尾型同源盒转录因子2在十二指肠癌中的表达及其与预后的关系

目的 探讨尾型同源盒转录因子2(CDX2)在十二指肠癌中的表达及其与预后的关系。方法 收集2011年11月至2022年12月经病理组织学或细胞学检查确诊的61例十二指肠癌患者的临床资料和病理切片。免疫组织化学法检测CDX2的表达。生存分析采用Kaplan-Meier法并行Log-rank检验,多因素分析采用Cox比例风险回归模型。结果 十二指肠癌组织内CDX2的阳性表达率为78.7%(48/61)。Ⅰ~Ⅱ期患者CDX2的阳性表达率为89.7%,高于Ⅲ~Ⅳ期患者的68.8%(P<0.05),而CDX2的表达与性别、年龄、分化程度、CEA及是否贫血均无关(P>0.05)。单因素分析显示,CDX2的表达、分化程度、TNM分期及CEA与预后相关。CDX2阴性者和阳性者的中位OS分别为21.6个月和49.8个月(P=0.015);低分化者和中、高分化者的中位OS分别为13.0个月和82.5个月(P<0.001);Ⅰ~Ⅱ期患者和Ⅲ~Ⅳ期患者的中位OS分别为72.3个月和13.0个月(P<0.001);CEA<5μg/L者和CEA≥5μg/L者的中位OS分别为49.8个月和9.4个月(P=0.002)。年龄、性别及是否贫血与预后无关(P>0.05)。Cox多因素分析显示,CDX2的表达是影响十二指肠癌的独立预后因素(RR=2.697,95%CI:1.191~6.106,P=0.017)。结论 CDX2是影响十二指肠癌患者的独立预后因素,CDX2阳性表达患者的预后明显优于CDX2阴性者。

R2R3型MYB转录因子调控植物胁迫应答的研究进展

MYB转录因子(TF)是植物中最大的转录家族之一,广泛参与植物生命过程. R2R3-MYB转录因子作为MYB TF家族最大的亚家族,在植物响应生物和非生物胁迫过程中发挥着重要作用.本文简要综述了MYB转录因子的分类,并具体论述了R2R3型MYB转录因子在调控植物应答病害、虫害等生物胁迫和干旱、低温、盐等非生物胁迫中的作用机制.

胆汁酸、幽门螺旋杆菌等因素诱导尾型同源盒转录因子2表达致胃黏膜肠上皮化生研究进展

胃黏膜肠上皮化生(GIM)是一种癌前病变,增加了后续胃癌(GC)发展的风险。因此,GIM一直是基础和临床研究的重点。尾型同源盒转录因子2(CDX2)是调节肠上皮细胞表型的肠特异性转录因子,主要存在于小肠和结肠,在正常胃黏膜中很少表达。幽门螺杆菌感染已被公认为GIM的主要致病因素,其通过核因子-kappaB信号通路及其下游的促炎因子、转化生长因子-β信号通路以及Sonic Hedgehog基因(Shh)来增加CDX2的表达,从而引起GIM。然而,越来越多的研究表明,胆汁反流引起的胃黏膜慢性炎症同样也是GIM的关键致病因素。胆汁反流通过其微小RNA、外泌体、表观遗传学及胆汁酸受体激活GIM生物标志物的表达导致GIM的发生和发展。目前,两大因素之外诱导CDX2的相关研究仍然很少。现对目前该领域的相关进展进行综述,为进一步研究提供参考。

Cys_(2)His_(2)型转录因子GL26016对灵芝菌丝生长和灵芝酸合成的影响

克隆灵芝(Ganoderma lingzhi)基因gl26016,全长为1 169 bp,开放阅读框为1 107 bp,序列分析表明该基因编码Cys_(2)His_(2)(C_(2)H_(2))型转录因子。采用CRISPR/Cas9方法缺失该基因483 bp序列,通过PCR扩增及测序表明成功获得突变菌株△GL26016。对△GL26016与野生型菌株(WT)的菌丝生长和灵芝酸含量进行检测,结果表明:两者相比,菌丝形态和菌丝体干重差异不显著,△GL26016中灵芝酸含量较高。△GL26016中灵芝酸GA-Mk、GA-S、GA-Me在第6天的含量分别为(5.09±0.36)、(5.36±0.11)、(3.45±0.26)μg·mg^(-1),分别是WT菌株积累量的1.51、1.47、1.93倍。研究结果表明GL26016参与灵芝酸生物合成调控。

肠型胃腺癌组织CDX2表达与临床表现和病理特征的关系

目的分析肠型胃腺癌患者胃癌组织中尾侧型同源转录因子2(CDX2)免疫组织化学情况与临床表现和病理特征的关系。方法回顾性收集2022年1-12月联勤保障部队第909医院手术切除的肠型胃腺癌90例患者临床资料。根据CDX2免疫组织化学染色情况将所有患者分为CDX2阳性组和CDX2阴性组。比较两组患者间的临床表现和病理学资料特点、免疫和靶向治疗分子特征,分析CDX2表达与患者二代基因测序结果关系。结果根据胃癌组织中CDX2和细胞角蛋白7(CK7)免疫组化染色结果划分,CDX2阳性/CK7阳性共38例(42.22%),是最常见表达模式,其次为CDX2阴性/CK7阳性共30例(33.33%),CDX2阳性/CK7阴性16例(17.78%),CDX2阴性/CK7阴性6例(6.67%)。CDX2阳性组患者的肿瘤最大直径[(2.56±0.85)cm]小于CDX2阴性组[(3.41±0.93)cm],差异有统计学意义(P<0.001)。与CDX2阴性组相比,CDX2阳性者的组织学分级G2~G4患者比例(66.67%vs.88.89%)低,肿瘤分期T3~T4比例(25.93%vs.66.67%)低,淋巴管血管侵犯(18.52%vs.55.56%)、神经周围侵犯(14.81%vs.50.00%)及淋巴结转移比例(14.81%vs.61.11%)均低(P<0.05)。CDX2阴性患者的HER-2表达阳性比例(6.67%vs.50.00%)更低(P<0.05)。CDX2阳性患者基因改变多与受体酪氨酸激酶(TRK)基因相关,包括EGFR、ERBB2、ERBB3、DDR2和MET,而CDX2阴性患者似乎与肿瘤抑制基因的改变更密切相关,包括BRCA2、PETN、RB1、SMARCA4、TSC1和ATRX。结论肠型胃腺癌具有一定异质性,可根据CDX2的表达情况分为两种亚型。CDX2阳性和CDX2阴性患者间具有不同的病理和分子特征,并可能具有不同的预后,值得进一步研究。

Musashi-1和尾侧型同源转录因子2在肠上皮化生及胃癌组织中的表达及意义

目的探讨Musashi-1(Msi-1)和尾侧型同源转录因子2(CDX2)在损伤胃黏膜组织中表达的相互关系及意义。方法采用免疫组织化学En Vision二步法和免疫荧光双标法检测Msi-1和CDX2蛋白在慢性浅表胃炎(CSG),Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型肠上皮化生(IM),低级别上皮内瘤变(LIN)及早期胃癌(EGC)组织中的表达情况。结果免疫组化显示:CSG,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型IM,LIN,EGC中Msi-1的阳性表达率分别为22.2%、42.4%、60.6%、77.3%、87.9%、92.4%,CDX2的表达阳性率分别为13.9%、84.8%、83.3%、63.6%、50.0%、31.8%,CSG与各组织比较差异均有统计学意义(P<0.05),在IM组织中Msi-1和CDX2表达之间呈弱相关性(χ2=4.383,C=0.147,P<0.05)。免疫荧光双标显示:CSG中并未见到Msi-1、CDX2共表达,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型IM,LIN及EGC组织中Msi-1、CDX2共表达率分别为(32.64±9.01)%、(43.82±10.09)%、(52.27±9.00)%、(57.19±12.64)%、(28.71±7.52)%,其中Ⅰ型IM与EGC、Ⅲ型IM与LIN比较差异无统计学意义(P>0.05),其余两两比较差异均有统计学意义(F=16.194,P=0.000)。结论 Msi-1、CDX2表达及Msi-1、CDX2共表达与IM存在相关性,Msi-1、CDX2共同表达可能是促使IM组织向胃黏膜瘤变进展的相关因素。

胃癌组织β-连环蛋白与尾侧型同源转录因子-2表达的临床意义

目的:探讨胃癌β-连环蛋白(β-catenin)与尾侧型同源转录因子-2(CDX-2)的表达与浸润、转移及预后的关系.方法:胃癌患者80例,以正常胃黏膜12例作为对照,应用SP免疫组化方法检测β-catenin和CDX2的表达.结果:正常胃黏膜上皮中β-catenin全部正常表达,而在胃癌组织中表达减弱、缺失或分布异常.CDX2则在正常胃黏膜上皮中不表达.β-catenin和CDX2的表达与胃癌组织的分化程度、肿瘤生长方式、癌细胞浸润深度及淋巴结转移有关(P<0.01).当患者β-catenin阳性表达/CDX2阳性表达时,术后5 a生存率最高(P<0.05).结论:β-catenin,CDX2与胃癌的发生、浸润、转移有关.

假型逆转录病毒载体高效介导兔平滑肌细胞基因转染

目的构建假型逆转录病毒载体MuLV／VSV-G，并用于转染兔平滑肌细胞，为兔平滑肌细胞基因转染寻找一种高效的载体。方法构建含有报道基因lacZ的假型逆转录病毒载体MuLV／VSV—G，测定滴度，并转染兔平滑肌细胞，观察其转导效率。并与MuLV的转导效率进行比较。结果构建的MuLV／VSV-G载体，病毒滴度为6～7．8×10^6CFU，转染兔平滑肌细胞的效率是（92±12）％。而MuLV的转导效率为（24土5）％。结论成功构建了假型逆转录病毒载体MuLV／VSV-G载体，该载体作为一种高效的载体可用于兔平滑肌细胞基因转染。

尾侧型同源转录因子-2在结直肠癌肝脏转移灶和原发性肝癌中的表达及意义

目的评价尾侧型同源转录因子2(CDX2)在原发性肝癌和结直肠癌肝脏转移的鉴别诊断中的应用价值。方法收集手术切除的原发性肝癌20例和结直肠肝转移癌15例的病理标本进行免疫组织CDX2检测,标本为甲醛固定、石蜡包埋切片。同时检测患者血清AFP,CEA水平。结果CDX2在正常肝脏组织和原发性肝癌组织中无表达,但在所有的转移性结直肠肿瘤中(15/15)有表达,在肝脏转移灶中表达阳性率高于CEA及AFP,且有统计学意义。结论CDX2易在常规病理标本中检测,在原发性肝癌和结肠癌肝脏转移的鉴别诊断中是一个特异性、敏感性较高的免疫组化标志物,临床上有良好的应用前景。

杀香鱼假单胞菌Ⅲ型分泌系统转录调控蛋白ExsA突变株的构建及其对大黄鱼的毒力特征分析

杀香鱼假单胞菌是大黄鱼内脏白点病的致病菌,感染该菌常会导致养殖大黄鱼很高的死亡率和严重的经济损失。病原株NB2011编码典型的Ⅲ型分泌系统,可能是该菌重要的毒力因子,ExsA是控制此分泌系统表达的重要调控蛋白。为确认ExsA在NB2011致病过程中的作用,开发有效疫苗,实验采用双交换同源重组法构建了ExsA内部序列被卡那霉素基因替换的突变株,检测突变株与野生株对鼠巨噬细胞J774的黏附、内化和胞内增殖特性,并比较对大黄鱼的毒力变化,同时,通过透射电子显微镜观察人工感染后大黄鱼内脏组织的病理变化。研究表明,巨噬细胞对突变株的内化率降低,内化的细菌在12 h内被清除,野生株在内化后虽然一段时间内数量稍有下降,12~24 h期间数量急剧上升;突变株对大黄鱼的96 h LD_(50)为2.59×10~7/mL,比野生株高数百倍;电镜切片中未观察到组织内有菌体的存在,表明突变株的毒力明显减弱,可以作为弱毒疫苗的开发对象。

艾滋病毒1型逆转录酶抑制剂的小鼠血清活性动态研究

目的:观察艾滋病毒1型逆转录酶(HIV-1RT)抑制剂在小鼠血清中的活性动态,探讨其在药效评价中的可应用性。方法:不同途径给予小鼠已知和未知HIV-1RT抑制剂后,在不同时间取血分离血清,体外测定血清抑制 HIV-1RT的活性。结果:正常小鼠血清有非特异性抑制HIV-1RT的活性,经稀释后可排除;非核苷类RT抑制剂可在体外直接测定小鼠体内用药后的血清抑制HIV-1RT活性和动态,核苷类RT抑制剂的血清抗HIV-1RT的活性可测出,但血清活性不如非核苷类药物为高,主要因核苷类药物的活性物质是其三磷酸盐,在细胞内转化后形成。此种体外测定小鼠用药后血清活性的体内体外结合的实验方法,简便快速,可初步分析药物与血清蛋白的结合率以及估算其生物利用度和清除率。结论:体内与体外相结合的逆转录酶抑制剂的小鼠血清活性的测定方法,可应用于非核苷类HIV-1RT抑制剂的药效评价,对于核苷类HIV-1RT抑制剂,取血时间要长,并同时测定血清在细胞内的活性,以便综合分析。

假型逆转录病毒载体介导的tPA转染对平滑肌细胞增殖的影响

目的:探讨假型逆转录病毒载体VSV-G/MuLV介导组织纤溶酶原激活物(tPA),lacZ基因转染兔平滑肌细胞(SMCs)后基因的表达和对SMCs增殖的效应.方法:利用携带tPA,lacZ基因的假型逆转录病毒载体VSV-G/MuLV分别转染兔SMCs(SMCs/tPA,SMCs/lacZ).通过检测tPA抗原和测定tPA的活性观察tPA基因的表达.通过x-gal染色检测β-gal的活性测定lacZ基因的表达.用放射性标记的脱氧胸腺嘧啶苷(3H-TdR)掺入法和细胞计数法测定SMCs的增殖.结果:在没有纤溶酶原时,SMCs/tPA与SMCs在增殖上无显著差异.在有纤溶酶原时,SMCs/tPA条件培养基诱导了SMCs增殖.结论:VSV-G/MuLV介导tPA,lacZ转染到SMCs并成功表达.tPA基因转染在纤溶酶原存在的条件下促进了SMCs的增殖.

尾型同源转录因子-2和糖链抗原242蛋白在老年结直肠癌中的表达及其与临床病理特征的关系

目的探讨尾型同源转录因子-2(CDX2)和糖链抗原242(CA242)蛋白表达与老年结直肠癌临床病理特征的关系。方法应用免疫组化技术检测90例老年结直肠癌组织和30例正常结直肠黏膜组织中CDX2和CA242蛋白的表达情况。结果老年结直肠癌组织中CDX2阳性表达率(65.6%)显著低于正常结直肠黏膜组织(93.3%,P<0.05),而CA242蛋白阳性表达率(75.6%)显著高于正常结直肠黏膜组织(10.0%,P<0.05)。CDX2和CA242蛋白的表达与老年结直肠癌的分化程度、Duke's分期、浆膜浸润和淋巴结转移相关(P<0.05)。CDX2与CA242蛋白的表达呈显著负相关(r=-0.30,P<0.05)。结论 CDX2和CA242蛋白表达与老年结直肠癌浸润转移密切相关,联合检测其蛋白表达可作为判断老年结直肠癌预后的客观参考指标。

携TGFβ1正、反义基因的复制缺陷型逆转录病毒载体的构建与鉴定

目的 :构建携TGFβ1正、反义基因的复制缺陷型逆转录病毒载体。方法 :以逆转录病毒 pRevTRE为载体 ,采用平末端连接法获得含人TGFβ1cDNA3’ -端活性肽编码基因正、反向插入的重组病毒质粒 ,脂质体介导转染包装细胞PA317,获得含TGFβ1正、反义RNA的复制缺陷型逆转录病毒载体 pRevTβ和 pRevTβ-AS ,感染NIH3T3细胞 ,测定病毒滴度。分别转染膀胱癌EJ细胞 ,通过Southern -blot和半定量RT -PCR方法评价载体整合及表达效率。结果 :pRevTβ、pRevTβ-AS载体病毒滴度分别为0.84、0.88×105CFU/ml,EJ细胞外源基因的整合率为100 %,正、反义基因转染细胞内TGFβ1mRNA的相对转录水平为1.89和0.35。结论 :构建的携TGFβ1正、反义基因的复制缺陷型逆转录病毒载体符合细胞体外转染要求 ,能与肿瘤细胞高效整合 ,有效表达。

结肠癌组织中尾型同源盒转录因子2与环氧合酶-2、血管内皮生长因子的表达

目的探讨尾型同源盒转录因子2(CDX2)与环氧合酶-2(COX-2)、VEGF在结肠癌组织的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测CDX2与COX-2、VEGF在62例结肠癌组织、20例正常结肠组织中的表达情况,探讨CDX2、COX-2、VEGF与结肠癌临床病理特征的关系。结果 CDX2在结肠癌、正常结肠组织中阳性表达率分别为54.8%、95.0%,COX-2在结肠癌、正常结肠组织中阳性表达率分别为75.8%、20.0%,VEGF在结肠癌、正常结肠组织中阳性表达率分别为80.6%、25.0%。CDX2在结肠癌组织中表达阳性率显著低于正常结肠组织(P<0.05),COX-2、VEGF在结肠癌组织中表达阳性率显著高于正常结肠组织(P<0.05)。CDX2、COX-2、VEGF在结肠癌阳性表达与患者肿瘤浸润深度、有无淋巴结转移相关。Spearman相关分析显示,CDX2与COX-2、VEGF在结肠癌组织中表达均呈负相关(P<0.05),COX-2和VEGF在结肠癌组织中表达呈显著正相关(P<0.05)。结论 CDX2、COX-2、VEGF的表达与结肠癌的发生、发展及预后关系密切。

复制缺陷型人泡沫逆转录病毒载体构建和外源基因表达

在人泡沫逆转录病毒 (humanfoamyvirus ,HFV)原病毒全长克隆pHRSV13的基础上 ,缺失病毒基因组的env基因和bel基因 ,构建了一个表达标记基因neo和报道基因 gfp的重组人泡沫病毒载体质粒pGPSNI GFP。在与辅助质粒 p△GP共转染情况下 ,得到复制缺陷型的重组病毒颗粒GPSNI GFP。该病毒颗粒可以感染多种宿主细胞 。

尾型同源盒转录因子2作为大肠癌潜在生物标志物的价值研究

目的探讨尾型同源盒转录因子2(CDX2)作为大肠癌(CRC)潜在生物标志物的价值。方法选择2017年7月~2019年3月在我院就诊的96例CRC患者临床资料和组织样本,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测CRC患者癌组织与正常癌旁组织中CDX2的表达水平;通过受试者工作特征曲线(Receiver operating characteristic curve,ROC曲线)评估CDX2对CRC的诊断价值;对患者进行随访并统计CDX2低表达和高表达CRC患者的生存情况。结果CRC组织和正常癌旁组织中CDX2表达水平分别为0.360±0.108、0.744±0.144,两者比较差异有统计学意义(P<0.0001);ROC曲线结果显示AUC=0.969,敏感度为95.00%,特异度为92.00%;在总生存期(OS)和无进展生存期(PFS)分析中,不同CDX2表达水平的CRC患者生存曲线均存在统计学差异(P=0.043、0.027)。结论CDX2在CRC组织中表达水平明显下降,对CRC具有较高的诊断价值,不同CDX2表达水平的CRC患者生存差异显著,CDX2可能成为CRC预后评估的潜在生物标志物。

假型逆转录病毒高效介导人乳腺癌细胞基因转移

目的 :探索假型逆转录病毒MuLV/VSV G在乳腺癌细胞基因转导的效率 ,为乳腺癌细胞基因转导找寻一种高效的载体。方法 :将含报道基因的假型逆转录病毒MuLV/VSV G转导入人乳腺癌MDA MB 435细胞 ,观察其转导效率 ,并与MuLV的转导效率进行比较。结果 :MuLV/VSV G的转导效率达 (92± 12 ) % ,MuLV的转导效率为 (2 4±5 ) % ,前者较MuLV转导效率提高 3.8倍。结论 :假型逆转录病毒MuLV/VSV G可作为一种高效的载体广泛应用于乳腺癌的基因治疗研究。

小麦bHLH型转录因子TaHLH1的分子特征和表达特性研究

利用cDNA-AFLP技术,鉴定了1个对低磷胁迫逆境产生明显应答的小麦bHLH型转录因子转录本片段(TDF)。比对分析表明,该TDF(TaHLH1 EST)与前人在水稻中鉴定的对低磷产生明显应答的bHLH型转录因子基因OsPTF1高度同源。利用生物信息学技术,获得了TaHLH1 EST对应的cDNA序列。TaHLH1的cDNA全长为2 209bp,含有1个编码480个氨基酸残基的开放阅读框。TaHLH1含有bHLH型转录因子具有的Basic-Helix-Loop-Helix保守基序,分别由13,15,6和22个氨基酸残基组成。比对分析表明,TaHLH1与源于水稻、大麦和玉米的同源基因编码蛋白在保守基序的氨基酸组成上高度同源。TaHLH1对低磷、低氮、干旱和高盐等逆境明显应答,但对低钾、低钙、脱落酸(ABA)和低温不产生应答。研究表明,TaHLH1是小麦bHLH型转录因子家族的重要成员,在介导低磷等非生物逆境的信号转导中可能发挥着重要作用。

尾型同源盒转录因子2和NF-κB P65蛋白在胃印戒细胞癌组织中的表达及意义

目的观察尾型同源盒转录因子2(CDX2)和核转录因子(NF)-κBP65蛋白在胃印戒细胞癌组织中的表达。方法以癌旁正常胃黏膜和胃黏膜肠上皮化生作为对照,用免疫组织化学SABC法检测CDX2和NF-κBP65蛋白在胃印戒细胞癌组织中的表达情况。结果CDX2在正常胃黏膜中无表达,在肠上皮化生中表达明显增高,在胃印戒细胞癌组织中有CDX2的表达但水平低于肠上皮化生;胃印戒细胞癌组织中NF-κBP65则明显高于癌旁正常胃黏膜;胃印戒细胞癌中CDX2和NF-κBP65表达与肿瘤浸润深度有相关性。结论CDX2与NF-κBP65是胃印戒细胞癌重要的分子标志物。