转录延伸样因子7对低分化人胃癌细胞株BGC823侵袭、迁移能力的影响及机制

目的探讨转录延伸样因子7（TCEAL7）对低分化人胃癌细胞株BGC823侵袭、迁移的影响及其机制。 方法应用实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）和Western blot法检测TCELA7 mRNA和蛋白在BGC823和正常胃黏膜细胞株GES-1中的表达；构建TCEAL7真核表达载体GFP-TCEAL7并转染BGC823细胞48 h，检测转染效果；噻唑蓝（MTT）法检测GFP-TCEAL7转染对BGC823细胞活性的影响；划痕实验、Transwell小室实验检测细胞侵袭、迁移；应用Real-time PCR和Western blot法检测转染GFP-TCEAL7转染对BGC823细胞侵袭、迁移基因表达水平的影响。 结果Real-time PCR和Western blot法显示，BGC823的TCEAL7表达（mRNA：0.280±0.048，蛋白：0.181±0.038）明显低于GES-1（mRNA：0.474±0.062，蛋白：0.346±0.057；t＝－6.061，P＝0.000；t＝－5.900，P＝0.000）。GFP-TCEAL7转染后胃癌BGC823细胞TCEAL7的mRNA及蛋白表达（1.886±0.326、1.007±0.262）比对照组（0.302±0.053、0.172±0.030）显著上调（t＝11.748，P＝0.000；t＝7.756，P＝0.000）。MTT结果显示，转染了GFP-TCEAL7的BGC823细胞活性（0.672±0.083）比对照组（1.242±0.215）显著减弱（t＝－6.058，P＝0.000）。划痕实验、Transwell小室实验显示转染了GFP-TCEAL7的BGC823细胞迁移能力[转染组（53.945±9.952）%，对照组（81.017±7.208）%]和侵袭能力（转染组76.333±12.420，对照组121.167±11.771）均明显降低（t＝－5.396，P＝0.000；t＝－6.418，P＝0.000）。Real-time PCR和Western blot法显示转染GFP-TCEAL7的BGC823细胞基质金属蛋白酶（MMP）-7、MMP-9的mRNA和蛋白表达水平下降，组织基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP1）和E-钙黏蛋白（E-cadherin）表达明显增高。 结论过表达TCEAL7可抑制BGC823细胞的侵袭、迁移。

TCEAL7通过负向调控ERK/c-FOS通路抑制卵巢癌细胞的增殖及迁移

目的探讨转录延伸因子A样蛋白7(TCEAL7)对卵巢癌细胞增殖及迁移的影响。方法利用GEPIA网站分析正常卵巢组织及卵巢癌组织中TCEAL7的表达差异。通过定量聚合酶链式反应(PCR)及免疫印迹(Western blot)实验检测人卵巢表层上皮细胞(HOSEpiC)及人卵巢癌细胞株CAOV-3、HO-8910、OVCAR-3及SKOV-3中TCEAL7的mRNA及蛋白表达。通过慢病毒转染过表达SKOV-3细胞中的TCEAL7,再利用噻唑蓝(MTT)实验检测在24、48、72及96 h SKOV-3细胞增殖的变化。利用划痕实验检测过表达TCEAL7后SKOV-3细胞迁移能力的变化。结果GEPIA网站分析结果显示,正常卵巢组织中TCEAL7的表达量显著高于卵巢癌组织。TCEAL7在4种卵巢癌细胞株中的mRNA及蛋白表达同样均显著低于HOSEpiC。本研究进一步发现过表达TCEAL7可显著抑制SKOV-3细胞的增殖及迁移,并可显著降低SKOV-3细胞中细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)及即刻早期基因(c-FOS)的磷酸化水平。结论本研究表明TCEAL7在卵巢癌中的表达下调,并可通过负向调控ERK/c-FOS通路抑制卵巢癌细胞的增殖及迁移,提示TCEAL7可能是卵巢癌的一个潜在治疗靶点。