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题名弗氏柠檬酸菌1,3-丙二醇合成的代谢工程研究
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作者
于越
郭文逸
王居立
杨洪江
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机构
工业微生物教育部重点实验室天津市工业微生物重点实验室天津科技大学生物工程学院
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出处
《微生物学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第3期451-459,共9页
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基金
国家自然科学基金项目(No.31370205)
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文摘
【目的】研究弗氏柠檬酸菌(Citrobacter freundii)1,3-丙二醇合成的代谢过程。【方法】构建甘油脱氢酶基因GSR-lac Z、1,3-丙二醇氧化还原酶基因PDO-lac Z和甘油脱水酶基因GL-lac Z等报告基因。在此基础上,构建3个相应的转座子突变文库。【结果】筛选到6株突变子,其相应关键酶表达水平提高1-11倍,1,3-丙二醇产量提高幅度为3%-50%。对转座子插入位点分析显示,5株突变子插入位点均为β-内酰胺酶(CKO_02592)编码基因,1株突变子插入位点为二氢硫辛酰胺基转移酶(CKO_02433)编码基因。进一步分析发现,β-内酰胺酶基因突变显著提高甘油脱水酶和甘油脱氢酶的表达水平,而1,3-丙二醇氧化还原酶表达水平没有变化;二氢硫辛酰胺基转移酶基因突变显著提高1,3-丙二醇氧化还原酶表达水平,其他两种关键酶基因表达水平不变。【结论】β-内酰胺酶和二氢硫辛酰胺基转移酶基因能够分别影响1,3-丙二醇合成代谢途径关键酶的表达,为构建工程菌株打下基础。
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关键词
转录融合报告基因
转座子突变文库
弗氏柠檬酸菌
1
3-丙二醇
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Keywords
Transcriptional fusion reporter gene
Transposon mutant library
Citrobacter freundii
1
3-Propanediol
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分类号
Q93
[生物学—微生物学]
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