胃癌组织中再生基因、转录辅助因子退变样蛋白表达与淋巴结转移的相关性

目的探讨胃癌组织中再生基因(REG1α)、转录辅助因子退变样蛋白(VGLL4)表达与淋巴结转移之间的相关性。方法回顾性选取2019年10月至2020年10月上饶市人民医院收治的82例胃癌患者作为研究对象,根据患者是否合并淋巴结转移分为转移组(55例)与未转移组(27例)。比较两组REG1α、VGLL4阳性表达率,并分析上述蛋白表达与淋巴结转移的相关性。结果转移组REG1α阳性表达率高于未转移组,VGLL4阳性表达率低于未转移组,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,REG1α表达与胃癌淋巴结转移呈正相关,VGLL4表达与胃癌淋巴结转移呈负相关(P<0.05)。结论REG1α、VGLL4可作为评估胃癌患者是否发生淋巴结转移的有效指标,且其表达情况与胃癌淋巴结转移存在一定相关性。

胃癌间充质干细胞培养上清液上调退变样蛋白4(VGLL4)表达促进胃癌细胞PD-L1表达及肿瘤生长

目的探讨胃癌间充质干细胞(GCMSC)上清液(GCMSC-CM)是否通过调节退变样蛋白4(VGLL4)上调胃癌细胞程序性死亡蛋白1配体1(PD-L1)表达并促进胃癌进展。方法首先采用Western blot法检测SGC-7901、HGC-27和MGC-803胃癌细胞VGLL4表达;使用VGLL4特异小干涉RNA(siRNA)抑制HGC-27和SGC-7901细胞VGLL4的表达,转染质粒过表达SGC-7901胃癌细胞VGLL4,将胃癌细胞分为对照组、GCMSC上清处理组、VGLL4干扰或过表达组以及VGLL4干扰联合GCMSC上清处理组。实时定量PCR和Western blot法分别检测SGC-7901胃癌细胞PD-L1的mRNA和蛋白表达,平板克隆实验检测细胞的增殖能力,Transwell^(TM)迁移实验检测细胞迁移能力。构建人外周血单个核细胞过继的NCG免疫缺陷小鼠(PBMC-NCG)皮下瘤模型观察小鼠肿瘤生长情况,将小鼠分为对照组、GCMSC上清处理组、VGLL4敲低组、VGLL4敲低后联合GCMSC上清处理组。实时定量PCR检测肿瘤组织VGLL4和PD-L1的mRNA水平,免疫组织化学染色检测VGLL4、PD-L1、KI-67抗原(ki67)、CD8和颗粒酶B(GZMB)的表达。结果VGLL4在SGC-7901、HGC-27和MGC-803细胞均有表达。干扰SGC-7901和HGC-27细胞VGLL4后PD-L1 mRNA和蛋白表达明显下降。过表达SGC-7901细胞VGLL4后PD-L1 mRNA和蛋白表达上调。GCMSC上清处理HGC-27和MGC-803细胞后VGLL4表达升高,干扰HGC-27细胞VGLL4表达能够逆转上清对PD-L1的上调。干扰SGC-7901细胞VGLL4表达使GCMSC上清促细胞增殖和迁移的能力减弱。敲低VGLL4抑制了GCMSC上清促小鼠肿瘤生长作用并增强PBMC-NCG小鼠抗肿瘤免疫作用。结论GCMSC上清液通过上调胃癌细胞VGLL4表达促进PD-L1表达及肿瘤生长。

胃癌组织中YAP、VGLL4蛋白表达与临床病理特征的相关性分析

目的:分析胃癌组织中转录共激活因子相关蛋白(YAP)、转录辅助因子退变样蛋白4(VGLL4)表达水平与临床病理特征的相关性。方法:回顾性分析医院2018年3月至2021年12月收治的胃癌患者103例的临床资料,采用免疫组织化学(SP)法检测患者胃癌组织及癌旁组织中YAP、VGLL4蛋白表达水平,采用Spearman相关性分析胃癌患者YAP与VGLL4蛋白表达的相关性,分析胃癌组织中YAP、VGLL4蛋白表达水平与临床病理特征的相关性。结果:癌组织中YAP蛋白阳性表达率高于癌旁组织,VGLL4蛋白阳性表达率低于癌旁组织(P<0.05);不同性别、年龄、肿瘤大小胃癌患者YAP、VGLL4蛋白表达水平相比,无显著性差异(P>0.05);不同组织学分级、TNM分期及淋巴结转移胃癌患者YAP、VGLL4蛋白表达水平相比,差异有统计学意义(P<0.05);经Spearman直线相关性检验,胃癌组织中YAP、VGLL4蛋白表达呈负相关性(r<0,P<0.05)。结论:胃癌组织中YAP、VGLL4蛋白表达与临床病理特征存在一定相关性,其中YAP蛋白表达与肿瘤的发展及恶性程度呈正相关,而VGLL4蛋白表达与肿瘤的恶性程度呈负相关。

ATF4靶向AKT1对膝关节软骨细胞凋亡及软骨退变的影响

目的探讨活化转录因子4(ATF4)靶向蛋白激酶B(AKT1)对膝关节软骨细胞凋亡及软骨退变的影响。方法体外实验:①体外培养正常软骨细胞与骨关节炎(OA)软骨细胞,实时荧光定量PCR检测两组细胞内ATF4、AKT1的mRNA表达水平;②通过细胞转染法构建下调ATF4的OA软骨细胞;③MTT法及Annexin V/PI流式细胞术检测OA软骨细胞增殖及凋亡情况;④生物信息学预测ATF4靶向基因结合位点,双荧光素酶报告基因实验验证ATF4与AKT1的靶向关系;⑤共同转染构建ATF4下调及AKT1上调的OA软骨细胞,同样的方法检测其细胞增殖及凋亡情况。动物实验:取6个月月龄雄性Duncan豚鼠30只,随机均分为3组,A、B两组皮下均植入Alzet微量泵,ATF4组每天泵注含PBS稀释过的ATF4,PBS组泵注单纯PBS液,取豚鼠膝关节软骨,评估3组Mankin组织评分及膝关节软骨组织内IL⁃1及TNF⁃α水平。结果与正常软骨细胞相比,OA软骨细胞ATF4 mRNA表达量均显著上升(P<0.05),AKT1mRNA表达量均显著下降(P<0.05)。ATF4⁃mimics转染物可上调细胞ATF4的表达,且细胞增殖能力下降,凋亡能力上升,ATF⁃inhibitor能下调细胞ATF4表达,细胞则表现出相反的增殖及凋亡特点。靶基因预测ATF4与AKT13’UTR存在靶向结合位点,双荧光素酶报告基因验证了AKT1是ATF4的靶向基因。动物实验表明,ATF4组豚鼠膝关节软骨组织Mankin组织评分显著高于PBS组及空白组(P<0.05),膝关节软骨内IL⁃1及TNF⁃α表达水平明显高于阴性对照组及正常对照组(P<0.05)。结论ATF4在促进OA软骨细胞凋亡中发挥积极作用,其作用机制可能与靶向调控AKT1相关。

miR-211,LARP1,VGLL4在胃癌组织中的表达及意义

目的:分析微小核糖核酸-211(micro ribonucleic acid-211,miR-211)、La相关蛋白1(La-associated protein 1,LARP1)、转录辅助因子退变样蛋白4(transcription-assisted factor deformable protein 4,VGLL4)在胃癌组织中的表达及意义。方法:收集98例胃癌患者,并取胃癌组织距离肿瘤边缘5 cm的癌旁组织43例。比较胃癌组织和癌旁组织miR-211,LARP1,VGLL4表达情况和以上指标与胃癌患者临床病理特征及生存情况的关系。结果:胃癌患者miR-211及LARP1高表达率高于癌旁组织,VGLL4高表达率低于癌旁组织(均P<0.05)。MiR-211,LARP1,VGLL4表达在TNM分期、淋巴结转移、浸润深度中差异有统计学意义(P<0.05)。MiR-211及LARP1高表达者3年生存率分别低于miR-211及LARP1低表达者,VGLL4高表达者3年生存率高于低表达者(P<0.05)。Cox比例风险模型分析显示TNM分期、淋巴结转移、浸润深度、miR-211、LARP1为胃癌预后的危险因素,VGLL4为保护因素。miR-211与LARP1呈正相关,miR-211与VGLL4,LARP1与VEGLL4呈负相关。结论:MiR-211及LARP1在胃癌组织中呈高表达,VGLL4呈低表达,和胃癌生物学行为相关,可能成为胃癌诊治的潜在生物学指标。