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多聚胺阳离子脂质体转染体系的构建 被引量:2
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作者 孙瑞琳 金发光 +4 位作者 吴道澄 吴红 南鹏娟 张颖 刘斌 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第18期2751-2754,共4页
目的制备多聚胺阳离子脂质体(PolyamineCationicliposome,PCL),转染哺乳动物细胞,评估其转染效率及细胞毒性,筛选高效低毒的阳离子脂质体转染体系。方法多聚胺阳离子脂质TC-Chol与中性磷脂DOPE以一定比例,制备PCL,通过转染以增强型绿色... 目的制备多聚胺阳离子脂质体(PolyamineCationicliposome,PCL),转染哺乳动物细胞,评估其转染效率及细胞毒性,筛选高效低毒的阳离子脂质体转染体系。方法多聚胺阳离子脂质TC-Chol与中性磷脂DOPE以一定比例,制备PCL,通过转染以增强型绿色荧光蛋白为报告基因的质粒PIRES2-EGFP入Hela细胞,倒置荧光显微镜下检测转染细胞的报告基因表达,通过MTT法,检测细胞毒性,筛选阳离子脂质体与DNA结合的最佳比例及最佳转染时间。结果多聚胺阳离子脂质体与DNA的质量比为3~4∶1时可达到高效低毒,转染后48h转染效率最高。结论由TC-Chol与DOPE制备的多聚胺阳离子脂质体可提高转染效率,在一定条件下可达到相对高效低毒,为基因转染和基因治疗提供可靠的实验室依据。 展开更多
关键词 脂质体制备 转染体系 基因表达
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丙肝病毒全基因组克隆转染细胞体系的初步研究
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作者 郭佳 姚相杰 +4 位作者 郑从义 方呈祥 屈三甫 李信墙 李卫云 《中国病毒学》 CSCD 2004年第4期320-324,共5页
采用一种含有HCV全基因组和噬菌体T7启动子和终止子序列的载体(pHCV)转染Vero-E6细胞,随后感染高效表达T7RNA聚合酶的重组痘病毒(vTF7-3),通过vTF7-3的辅助作用,使Vero-E6细胞高效增殖HCV病毒体,建立了一种新的HCV体外细胞培养体系。RT-... 采用一种含有HCV全基因组和噬菌体T7启动子和终止子序列的载体(pHCV)转染Vero-E6细胞,随后感染高效表达T7RNA聚合酶的重组痘病毒(vTF7-3),通过vTF7-3的辅助作用,使Vero-E6细胞高效增殖HCV病毒体,建立了一种新的HCV体外细胞培养体系。RT-PCR、荧光定量PCR检测转染细胞裂解液中HCV滴度的结果显示:pHCV转染细胞内HCV基因拷贝达107-108/mL,同时有HCV正链RNA合成;免疫印迹显示该培养体系中有HCV结构蛋白、非结构蛋白的表达;pHCV转染细胞经透射电镜观察,可见清晰的HCV病毒体,直径在40-50nm。这一新体系的初步建立,为研究HCV的复制机制、制备HCV疫苗和研发抗病毒药物奠定了基础。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 HCV 全基因组 克隆 细胞体系 重组痘病毒
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传染性喉气管炎重组病毒研究进展 被引量:2
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作者 智海东 王云峰 童光志 《畜禽业》 2002年第6期6-7,共2页
关键词 性喉气管炎 重组病毒 ILYV 转染体系 基因功能 外源基因 兽医内科学
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Metastasis-related genes in hepatocellular carcinoma cell-lines are clustered on chromosome territories predicted by transcriptome and proteome
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作者 Li Feng Hong Li +7 位作者 Yang Zhang Huali Shen Hongxiu Yu Fan Zhong Lunxiu Qin Fuchu He Pengyuan Yang Zhaoyou Tang 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS CSCD 2016年第3期380-382,共3页
Recently, we have analyzed expressional transcriptome and proteome for a number of cancer cell lines, including 8 hepatocellular carcinoma (HCC) ones [1,2]. These 8 HCC cell lines consist of 6 metastatic (all with ... Recently, we have analyzed expressional transcriptome and proteome for a number of cancer cell lines, including 8 hepatocellular carcinoma (HCC) ones [1,2]. These 8 HCC cell lines consist of 6 metastatic (all with mutant p53) and 2 non-metastatic (with a mutant and a lost p53) ones, being all HBV traceable for relatively close genetic-backgrounds. We have analyzed the related dataset and obtained transcrip- tome (16353 genes) and proteome (7861 proteins) of these 8 HCC cell lines, and explored a group of up-regulated and down-regulated genes [3]. 展开更多
关键词 Cell culture Chromosomes GENES PATHOLOGY
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