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课堂教学中“转氨基作用实验”的改进 被引量:1
1
作者 李莲 杜林 +1 位作者 于冰筠 杨金娥 《实验室科学》 2015年第5期80-82,共3页
转氨基作用实验是高校生物学专业生化实验教学的重要内容,传统的转氨基实验常采用苯酚作为层析剂,由于苯酚的毒性和腐蚀性,限制了该实验在教学中的开展。笔者整合了近年来发表的有关转"氨基作用实验"的改进方法,总结出了安全... 转氨基作用实验是高校生物学专业生化实验教学的重要内容,传统的转氨基实验常采用苯酚作为层析剂,由于苯酚的毒性和腐蚀性,限制了该实验在教学中的开展。笔者整合了近年来发表的有关转"氨基作用实验"的改进方法,总结出了安全、实用的转氨基作用实验方法,包括对该实验材料、试剂和步骤的改进。改进后的实验方法中实验材料易于取材、并采用了对人体无毒性和腐蚀性的层析剂,层析与显色可同时进行,从而缩短了实验时间。改进后的实验方法已在课堂教学中加以实践运用,学生实验取得了良好的实验结果。 展开更多
关键词 转氨基作用 氨基 实验教学
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植物体内的转氨基作用实验方法的改进 被引量:2
2
作者 乔洁 褚卓栋 +2 位作者 侯志敏 钱洪波 谢田 《廊坊师范学院学报(自然科学版)》 2010年第4期60-61,共2页
植物体内的转氨基作用实验是生物化学课程中的一个重要的基础实验,实验方法应符合操作简单、耗时短、结果明显等特点。经试验发现,在提取酶液时可不经离心,研磨后直接取上清液备用即可;使用水饱和正丁醇与冰乙酸混合液作为展层剂的层析... 植物体内的转氨基作用实验是生物化学课程中的一个重要的基础实验,实验方法应符合操作简单、耗时短、结果明显等特点。经试验发现,在提取酶液时可不经离心,研磨后直接取上清液备用即可;使用水饱和正丁醇与冰乙酸混合液作为展层剂的层析时间虽然稍长,但丙氨酸和谷氨酸标准溶液点样点到层析中心的距离长,Rf值大,两种氨基酸分离效果显著;用乙醇作为溶剂溶解茚三酮配制的显色剂无毒、价格合理、显色效果明显,比丙酮和正丁醇作为溶剂更适合。 展开更多
关键词 植物 转氨基作用 氨酶 方法改进
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嗜冷弧菌2693菌株的天冬氨酸转氨基甲酰酶基因克隆及测序
3
作者 张远富 徐莹 +2 位作者 MVdeCasteele 梁子原 NGlansdorff 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1999年第5期585-590,共6页
对嗜冷弧菌(Psychrophicvibrto)2693菌株编码天冬氨酸氨甲酸基转移酶(Aspartate-transcarbamoylas──ATCase)的基因进行了克隆,并对其核着酸序列进行了分析。菌株2693的ATCase由pyrBI操纵子组成,pyrB编码催化链,pyrI编码调节... 对嗜冷弧菌(Psychrophicvibrto)2693菌株编码天冬氨酸氨甲酸基转移酶(Aspartate-transcarbamoylas──ATCase)的基因进行了克隆,并对其核着酸序列进行了分析。菌株2693的ATCase由pyrBI操纵子组成,pyrB编码催化链,pyrI编码调节链。催化及调节多肽链由一条单一的双顺反操纵子编码,在同一启动基因控制之下进行转录。pyrB的3’—端紧临pyrI的5’-端,两个编码区之间只有4个碱基间隔。 展开更多
关键词 嗜冷弧菌 天冬氨酸 转氨基甲酰酶 克隆 测序
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浅谈转氨基作用实验中异常黄斑的形成
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作者 康颖倩 《中华医学写作杂志》 2001年第18期2089-2091,共3页
目的:探讨转氨基作用实验中异常黄斑的形成机制及其克服。方法:采用增加碘乙酸用量的实验方法。结果:增加碘乙酸后异常黄斑消失,紫色色斑显色效果佳。结论:碘乙酸可抑制肝脏中催化谷氨酸生成脯氨酸过程中的一系列酶活性,如谷氨酸... 目的:探讨转氨基作用实验中异常黄斑的形成机制及其克服。方法:采用增加碘乙酸用量的实验方法。结果:增加碘乙酸后异常黄斑消失,紫色色斑显色效果佳。结论:碘乙酸可抑制肝脏中催化谷氨酸生成脯氨酸过程中的一系列酶活性,如谷氨酸激酶等。 展开更多
关键词 转氨基作用 黄斑 脯氨酸 碘乙酸
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纸层析法鉴定转氨酶的转氨基作用实验的新方法 被引量:2
5
作者 魏涛 《科技资讯》 2010年第8期145-146,共2页
通过对展开剂配方、层析温度、显色方法等研究,解决了原实验既污染环境、危害人体健康又浪费时间的问题,从而找到了纸层析法鉴定转氨酶的转氨基作用实验的新方法。结果表明,此方法简单易行,耗费低廉,基本上不污染环境,是一个值得在高校... 通过对展开剂配方、层析温度、显色方法等研究,解决了原实验既污染环境、危害人体健康又浪费时间的问题,从而找到了纸层析法鉴定转氨酶的转氨基作用实验的新方法。结果表明,此方法简单易行,耗费低廉,基本上不污染环境,是一个值得在高校生物化学实验室推广的新实验方法。 展开更多
关键词 展开剂 转氨基 新实验方法
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转氨基作用与氨基酸纸层析实验的改进 被引量:1
6
作者 游云悠 魏友煜 +3 位作者 左越 黎威巍 罗丽丹 金科华 《湖北科技学院学报(医学版)》 2020年第2期99-101,F0002,共4页
目的改进转氨基作用与氨基酸纸层析方式和方法,提高实验效率。方法在新的转氨基反应容器和点样方式下,比较缓冲液类型、转氨基时间、肝匀浆浓度及保存时间、磷酸吡哆醛用量对转氨基的影响。结果适当缩短反应时间、适当稀释和保存肝匀浆... 目的改进转氨基作用与氨基酸纸层析方式和方法,提高实验效率。方法在新的转氨基反应容器和点样方式下,比较缓冲液类型、转氨基时间、肝匀浆浓度及保存时间、磷酸吡哆醛用量对转氨基的影响。结果适当缩短反应时间、适当稀释和保存肝匀浆对转氨基影响较小;缓冲液类型和磷酸吡哆醛不影响转氨基。结论本研究改进了转氨基反应条件和点样方式,提高了实验效率,改善了实验结果。 展开更多
关键词 转氨基 氨基酸纸层析 肝匀浆
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影响转氨基作用实验结果的原因及对策 被引量:1
7
作者 苏明佐 罗艺萍 卫华 《中等医学教育》 2000年第9期44-44,共1页
做转氨基作用这一实验时,常出现肝浸液管与肌浸液管对比不明显或是肌浸液管比肝浸液管颜色深的现象,我们对可能产生此误差的原因进行了分析并采取了一些改进措施。
关键词 转氨基作用 实验结果 误差分析
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怎样理解蛋白质代谢中的脱氨基、转氨基作用? 被引量:1
8
作者 胡强 《生物学教学》 1985年第1期26-26,共1页
蛋白质在生物体内不断更新。一方面,组织中的蛋白质可以被分解成氨基酸,再进一步分解成氨、尿酸、尿素等终产物;另一方面,氨基酸又可不断缩合形成新的多肽链(蛋白质)。本文不谈蛋白质的全部代谢过程,仅就高中《生物》“蛋白质代谢”(P65... 蛋白质在生物体内不断更新。一方面,组织中的蛋白质可以被分解成氨基酸,再进一步分解成氨、尿酸、尿素等终产物;另一方面,氨基酸又可不断缩合形成新的多肽链(蛋白质)。本文不谈蛋白质的全部代谢过程,仅就高中《生物》“蛋白质代谢”(P65)中容易混淆的“脱氨基作用”、“氨基转换作用”(即转氨基作用)的生化机理作一浅述。 展开更多
关键词 转氨基作用 蛋白质代谢 氨基作用 终产物 多肽链 生化机理 酮酸 《生物》 糖代谢 酸类物质
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转氨基作用实验的改进
9
作者 唐英辉 黄敏 《卫生职业教育》 2002年第9期49-50,共2页
转氨基作用实验是中专卫校生物化学大纲要求的一个定性实验,其目的是证实氨基转移酶存在于正常成人各组织中,且肝组织ALT活性最高.
关键词 转氨基作用实验 氨基移酶 误差 改进
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N-乙酰氨基葡萄糖转移酶-V过表达对人肝癌细胞迁移及粘附分子表达的影响 被引量:3
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作者 王丽影 陈伉俪 +3 位作者 苏剑敏 靳嘉巍 陈惠黎 查锡良 《实验生物学报》 CSCD 北大核心 2001年第3期219-225,共7页
为了探讨转染N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅴ(GnT-V)正义cDNA后对7721细胞迁移影响及其机制,我们研究了GnT-V/7721和pcDNA3/7721(对照组)两株细胞的迁移力及其与侵袭转移能力密切相关的细胞表面重要粘附分子整合蛋白和E-钙粘蛋白的表达情况... 为了探讨转染N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅴ(GnT-V)正义cDNA后对7721细胞迁移影响及其机制,我们研究了GnT-V/7721和pcDNA3/7721(对照组)两株细胞的迁移力及其与侵袭转移能力密切相关的细胞表面重要粘附分子整合蛋白和E-钙粘蛋白的表达情况。通过琼脂滴法检测两株细胞的迁移力;间接免疫荧光法测定细胞表面整合蛋白α5和β1的含量及用RT-PCR方法检测细胞整合蛋白α5和β1的mRNA水平;免疫细胞化学ABC法检测了细胞E-钙粘蛋白表达水平;Western杂交方法检测β-连环蛋白含量。结果发现,7721细胞经转染GnT-V cDNA后,迁移力明显增高;整合蛋白α5亚基的含量比对照组增加2.9倍;β1亚基未见明显变化。α5亚基mRNA水平为对照细胞的2.1倍,β1亚基的mRNA含量无明显改变。GnT-V/7721细胞E-钙粘蛋白及β-连环蛋白表达也有不同程度的升高。本文结果提示与N-糖链加工有关的GnT-V过表达,可促进7721细胞表面整合蛋白的表达以及E-钙粘蛋白β-连环蛋白的表达,从而增加肿瘤细胞的迁移能力。 展开更多
关键词 肝癌细胞 染N-乙酰氨基葡萄糖移酶-V 粘附分子 迁移
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转氨酶正常或低于正常值2倍以下慢性乙型肝炎病毒感染者治疗问题 被引量:7
11
作者 聂青和 《实用肝脏病杂志》 CAS 2013年第4期293-295,共3页
转氨酶正常或低于正常值2倍以下HBV感染者治疗问题已成为临床关注的热点。既往和更新版的国际、国内乙型肝炎相关指南对ALT正常或低于正常值2倍以下的HBV感染者,包括免疫耐受期、非活动性HBV携带者、非活动性HBsAg携带者因抗病毒治疗效... 转氨酶正常或低于正常值2倍以下HBV感染者治疗问题已成为临床关注的热点。既往和更新版的国际、国内乙型肝炎相关指南对ALT正常或低于正常值2倍以下的HBV感染者,包括免疫耐受期、非活动性HBV携带者、非活动性HBsAg携带者因抗病毒治疗效果极差,故不予推荐抗病毒治疗。肝硬化患者,只要能检出HBVDNA,不论ALT或AST是否升高,应给予核苷(酸)类似物抗病毒治疗。笔者认为临床工作中对持续HBV DNA阳性,即使转氨酶正常或低于正常值2倍以下的HBV感染者,只要临床上有肝纤维化的证据,如影像学检查(B超、CT、MRI)提示脾脏肿大、血小板降低,其原因只能用HBV感染解释的,尤其对年龄在40岁以上或接近40岁年龄段的HBV感染者均应积极抗病毒治疗。慢性HBV携带者无需免疫治疗。本文还对慢性HBV携带者提出了若干建议,目的是普及乙型肝炎知识,提高认知程度,加强依从性教育。 展开更多
关键词 慢性乙型肝炎 慢性HBV携带者 非活动性HBSAG携带者 抗病毒治疗 免疫治疗 丙氨酸氨基 移酶 健康教育
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加强基本功训练提高授课能力
12
作者 毕红 《西北医学教育》 1996年第3期184-185,共2页
关键词 基本功训练 讲授内容 转氨基作用 组织教学内容 青年教师 授课能力 学生 氨酶 反应式 生理意义
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Transfer of Lysine-rich Protein Gene into Rice and Production of Fertile Transgenic Plants 被引量:54
13
作者 高越峰 荆玉祥 +3 位作者 沈世华 田世平 匡廷云 Samuel S.M.SUN 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2001年第5期506-511,共6页
Lysine-rich protein gene (lys) was cloned from Psophocarpus tetragonolobus (L.) DC. A plant expression plasmid was constructed and lys gene was under the control of maize ubiquitin promoter which is the highest effici... Lysine-rich protein gene (lys) was cloned from Psophocarpus tetragonolobus (L.) DC. A plant expression plasmid was constructed and lys gene was under the control of maize ubiquitin promoter which is the highest efficient monocotyledon promoter. The plasmid was introduced into rice embryogenic calli by microprojectile bombardment. The regenerated fertile plants were obtained by effective selection for hygromycin B resistance. Genomic PCR and Southern blotting analyses showed that the lys gene has been integrated into rice genome. Simultaneously, the results of GUS histochemical assay demonstrated that gus report gene is also expressed in leaves, stems and roots of the transgenic rice plants. Data analysis showed that lysine content in most of the 11 transgenic plants is differently improved, and in one of them increased by 16.04%. 展开更多
关键词 lysine-rich protein gene microprojectile bombardment transgenic rice lysine content
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Selenium-catalyzed oxidative carbonylation of 2-aminobenzyl alcohol to give 1,4-dihydro-2H-3,1-benzoxazin-2-one 被引量:1
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作者 张晓鹏 王平 +3 位作者 牛雪利 李政伟 范学森 张贵生 《Chinese Journal of Catalysis》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2016年第11期2034-2038,共5页
An efficient,economical,and phosgene-free approach was developed for the preparation of l,4-dihydro-2H-3,l-benzoxazin-2-one from 2-aminobenzyl alcohol.In terms of its key features,this reaction uses the cheap and recy... An efficient,economical,and phosgene-free approach was developed for the preparation of l,4-dihydro-2H-3,l-benzoxazin-2-one from 2-aminobenzyl alcohol.In terms of its key features,this reaction uses the cheap and recyclable non-metal selenium as a catalyst instead of the noble metal palladium;carbon monoxide as a carbonylation agent instead of virulent phosgene or one of its derivatives;and oxygen as an oxidant.The selenium-catalyzed oxidative carbonylation reaction of2-aminobenzyl alcohol proceeded efficiently in a single pot in the presence of triethylamine to afford l,4-dihydro-2H-3,l-benzoxazin-2-one in 87%yield.Furthermore,the selenium catalyst was readily recovered and recycled,affording a product yield of 80%after five cycles. 展开更多
关键词 SELENIUM Oxidative carbonylation 1 4-Dihydro-2H-3 1-benzoxazin-2-one 2-Aminobenzyl alcohol Phase-transfer catalysis
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Cloning of Glutamate Dehydrogenase cDNA from Chlorella sorokiniana and Analysis of Transgenic Tobacco Plants 被引量:1
15
作者 黄国存 孟颂东 +2 位作者 王荣 杨怀义 田波 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2002年第3期318-324,共7页
A full_length cDNA has been cloned encoding nicotinamide adenine dinucleotide phosphate_specific glutamate dehydrogenase (NADP_GDH) from Chlorella sorokiniana with the RT_PCR method. The complete nucleotide sequence o... A full_length cDNA has been cloned encoding nicotinamide adenine dinucleotide phosphate_specific glutamate dehydrogenase (NADP_GDH) from Chlorella sorokiniana with the RT_PCR method. The complete nucleotide sequence of NADP_GDH gene had 94% homology to the previously reported one . The NADP_GDH gene was constructed into a vector highly expressed in plants. The specific activity of NADP_GDH in transformants was detected, but not in the control plants. All transformed shoots on MS medium containing lower concentration of nitrogen and the transformed seedlings grown in lower concentration of nitrogen vermiculite had higher growth rate and more leaves than the control plants. Transformed leaf discs cultured on MS medium containing different nitrogen concentrations had more chlorophyll contents compared to the controls. These results suggested that exogenous NADP_GDH may enhance the absorption and utilization to ammonium in plants. The increased weight of transformed leaf discs cultured on medium supplemented with different concentrations of phosphinothricin (PPT) was more than that of control discs. 0.5 μg/mL PPT could be used as a selecting drug instead of kanamycin to develop the transformants. These results suggested that the NADP_GDH gene might be used as a new selecting gene in the future research of plant gene engineering. 展开更多
关键词 nicotinamide adenine dinucleotide phosphate_specific glutamate dehydrogenase (NADP_GDH) transgenic tobacco ammonium absorption phosphinothricin resistance
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Effects of Transgenic DREB Soybean Dongnong 50 on the Diversity of Soil Ammonia-oxidizing Bacteria
16
作者 金羽 曲娟娟 +1 位作者 任广明 董蕾 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2013年第7期988-992,997,共6页
ObjectiveThe aim was to understand the effects of transgenic DREB soybean on the ammonia-oxidizing bacteria. MethodThe diversity of the cto gene in pot-planted transgenic soybean and near-isogenic non-transgenic soybe... ObjectiveThe aim was to understand the effects of transgenic DREB soybean on the ammonia-oxidizing bacteria. MethodThe diversity of the cto gene in pot-planted transgenic soybean and near-isogenic non-transgenic soybean under normal water condition and drought stress was analyzed by PCR-DGGE and sequence analysis. ResultRhizosphere community diversity of ammonia-oxidizing bacteria showed no difference between the treatments of transgenic soybean and its non-transgenic isolines, moreover transgenic soybean under normal water condition and drought stress improved the diversity of the ammonia-oxidizing bacteria in the harvest time. The phylogenetic analysis revealed that all the sequences of excised DGGE bands were closely related to members of the genus Nitrosovibrio and Nitrosospira of the β-subclass Proteobacteria. ConclusionTransgenic DREB soybean has no adverse impact on soil ammonia-oxidizing bacteria. 展开更多
关键词 Transgenic soybean DREB Ammonia-oxidizing bacteria DIVERSITY
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临床问答
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作者 杨露绮 《传染病网络动态》 2001年第11期22-24,共3页
关键词 药物性肝中毒 艾滋病 抗逆录病毒治疗 转氨基 肝功能障碍
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紫色色杆菌转氨酶基因表达载体的构建及其原核表达
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作者 陈存 刘韩 +2 位作者 翁静凤 杨运航 任迎虹 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2024年第9期1070-1074,共5页
目的利用紫色色杆菌(Chromobacterium violaceum)的转氨酶(CV2025)基因序列构建重组质粒pET-28aCV2025,并在大肠埃希菌(Escherichia coli,E.coli)中进行原核表达。方法将CV2025基因序列与pET-28a(+)载体连接,构建重组质粒pET-28a-CV2025... 目的利用紫色色杆菌(Chromobacterium violaceum)的转氨酶(CV2025)基因序列构建重组质粒pET-28aCV2025,并在大肠埃希菌(Escherichia coli,E.coli)中进行原核表达。方法将CV2025基因序列与pET-28a(+)载体连接,构建重组质粒pET-28a-CV2025,转化E.coli TOP10中进行阳性克隆子筛选,经双酶切及测序验证后,转化E.coli BL21(DE3)和Rosetta,诱导表达目的蛋白;将重组菌28a-CV2025-BL21活化后接种2TY液体培养基,IPTG诱导表达制备粗酶液后,以异丙胺为氨基供体,1-(4-甲氧苯基)乙酮、邻氟苯乙酮、苯乙酮为氨基受体,采用薄层色谱法监测反应,初步检验转氨酶活性,高效液相色谱法进行进一步分析。结果重组质粒pET-28a-CV2025经双酶切及测序鉴定证明构建正确;重组菌28a-CV2025-BL21、28a-CV2025-Rosetta的表达产物均可见相对分子质量约51000的目的蛋白条带,且28a-CV2025-BL21表达的蛋白大部分以可溶性形式存在;酶液催化后,1-(4-甲氧苯基)乙酮与异丙胺发生转氨基化反应,生成对应的手性胺1-(4-甲氧苯基)乙胺,具有一定的催化活性。结论在E.coli中成功表达了CV2025,初步检验上清中可溶性蛋白具有酶活性,为后期转氨酶的分离、纯化以及增强产物转化率奠定了基础。 展开更多
关键词 紫色色杆菌 氨酶 大肠埃希菌 基因克隆 表达 转氨基化反应
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Noninvasive assessment of liver fibrosis with combined serum aminotransferase/platelet ratio index and hyaluronic acid in patients with chronic hepatitis B 被引量:14
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作者 You-Xiang Zhang Wen-Juan Wu +3 位作者 Yun-Zhi Zhang Yan-Ling Feng Xin-Xi Zhou Qi Pan 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2008年第46期7117-7121,共5页
AIM: To construct a noninvasive assessment model consisting of routine laboratory data to predict significant fibrosis and cirrhosis in patients with chronic hepatitis B (CHB). METHODS: A total of 137 consecutive ... AIM: To construct a noninvasive assessment model consisting of routine laboratory data to predict significant fibrosis and cirrhosis in patients with chronic hepatitis B (CHB). METHODS: A total of 137 consecutive patients with CriB who underwent percutaneous liver biopsy were retrospectively analyzed. These patients were divided into two groups according to their aminotransferase (ALT) level. The sensitivity, specificity, positive predictive value (PPV), negative predictive value (NPV), the likelihood ratio (LR) of aminotransferase/platelet ratio index (APRI) ≥ 1.5 or 〈 1.5 in combination with different hyaluronic acid (HA) cut-off points were calculated for the presence of moderate to severe fibrosis/cirrhosis (fibrosis stages 2 and 4) and no to mild fibrosis/cirrhosis (fibrosis stages 0 and 1). RESULTS: The APRI correlated with fibrosis stage in CriB patients. The APRI ≥1.5 in combination with a cut-off HA cut-off point 〉 300 ng/mL could detect moderate to severe fibrosis (stages 2-4) in Crib patients. The PPV was 93.7%, the specificity was 98.9%. The APRI 〈 1.5 in combination with different HA cut-off points could not detect no to mild fibrosis in CHB patients. CONCLUSION: The APRI ≥ 1.5 in combination with a HA cut-off point 〉 300 ng/mL can detect moderate to severe fibrosis (stages 2-4) in Crib patients. 展开更多
关键词 Noninvasive assessment Liver fibrosis Chronic hepatitis B Aminotransferase/platelet ratio index Hyaluronic acid
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A convenient synthesis of 1-alkyl-5-amino-6-phenylethyluracils as potential non-nucleoside HIV-1RT inhibitors
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作者 马小艳 程志坚 +4 位作者 陈艳丽 李阿敏 张志丽 王孝伟 刘俊义 《Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences》 CAS 2008年第4期281-284,共4页
1-Alkyl-5-amino-6-phenylethyluracils (1a, 1b) were synthesized as potential non-nucleoside HIV-1RT inhibitors. A convenient synthetic procedure was developed for the preparation of 1-alkyl-5-amino or 5-aminosubstitu... 1-Alkyl-5-amino-6-phenylethyluracils (1a, 1b) were synthesized as potential non-nucleoside HIV-1RT inhibitors. A convenient synthetic procedure was developed for the preparation of 1-alkyl-5-amino or 5-aminosubstituted-6-phenylethyluracils, which were synthesized in three or four steps from 6-methyluracil in good yield. The development of a one-pot reaction that simultaneously removed the benzyl protection group and reduced the nitro group greatly improved the yield of the synthesis. Compounds 1a and 1b are analogs of MKC-442, which is an efficient inhibitor of HIV-1 reverse transcriptase, 1a and 1b were tested for their inhibition of HIV-1RT, and moderate activity was found for 1a. 展开更多
关键词 HIV-1 reverse transcriptase 1-Alkyl-5-amino-6-phenylethyluracils Uracil derivatives
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