自身免疫性梅尼埃病的体液与细胞转移免疫示踪研究

目的 :探究能否经体液和 (或 )细胞转移造成被动免疫性自身免疫性梅尼埃病(AIMD) ,并了解针对内耳组织的特异性抗体和淋巴细胞到达内耳的途径、部位及其对内耳组织和生理功能的影响。方法 :对AIMD模型动物的免疫球蛋白 (IgG)行荧光标记、脾细胞(主要为T淋巴细胞 )行同位素标记 ,继而进行被动免疫 (同时在内淋巴囊周围局部注射内耳抗原 ) ,观察内耳听觉和前庭功能变化、不同部位组织中荧光聚集反应和同位素含量改变。结果 :特异性抗体 (IgG)首先到达血管纹和内淋巴囊部位 ,特异性淋巴细胞则首先出现在内淋巴囊局部 ,内耳听觉和前庭功能障碍发生与内耳组织中抗体 (即荧光反应强度 )及淋巴细胞含量 (即CPM值 )呈明显相关性。结论 :体液和细胞转移免疫均可诱发出被动免疫性AIMD ;内耳组织抗原的特异性抗体和淋巴细胞可经过体循环到达内耳局部 ,抗体主要经血管纹和内淋巴囊部位造成内耳病变 (包括膜迷路积水 ) 。

自身免疫性白内障体液转移免疫研究

目的 探讨体液转移免疫是否能造成自身免疫性白内障(autoimmune cataract,AIC)。方法 分别采用α、β晶状体蛋白抗原所致的AIC模型动物的血清和空白对照动物血清进行转移免疫;对被动免疫动物行裂隙灯观察,晶状体调节力检查和病理切片观察。结果 针对α、β晶状体蛋白抗原的被动免疫组白内障样改变出现率分别为18.75％、31.25％,β晶状体蛋白抗原被动免疫组的晶状体调节力与免疫前比较有下降(P<0.05)。结论 依据Witskey法则,进一步证实了AIC是一种客观存在的自身免疫性疾病,体液免疫在AIC发病中可能起着重要作用,其中晶状体β蛋白抗原的致病作用可能更为重要,从而为进一步探索老年性白内障病因提供帮助。

特异性体液转移免疫致豚鼠先天性感音神经性聋实验研究

目的:探讨并证实孕豚鼠针对内耳组织抗原特异性抗体是否可以通过胎盘进而造成其子鼠自身免疫性先天性感音神经性聋。方法:采用同种粗制内耳抗原免疫豚鼠,造成自身免疫性感音神经性聋(ASNHL)动物模型[ELISA法测定示血清抗体水平升高和耳蜗电图(EcochG)示听神经复合动作电位和(或)耳蜗微音器电位阈值或伪阈升高],取其血清(含特异性抗内耳组织抗原的抗体)持续转移免疫妊娠豚鼠,采用EcochG测试被动免疫妊娠母鼠和子鼠的听觉功能,再采用颞骨火棉胶切片和HE染色,光镜观察内耳组织形态学改变。结果:各组出现听觉损伤的动物情况是:采用ASNHL模型动物血清被动免疫的8只妊娠母鼠中有5只(7耳)和其所产子鼠8只中有6只(10耳)、采用非ASNHL模型动物血清免疫的妊娠豚鼠所产子鼠5只中有1只(2耳)。出现听损的被动免疫母鼠和子鼠内耳病理形态学改变主要为螺旋神经节细胞变性和Rosenthal管中炎症细胞(以单个核细胞为主)浸润,部分动物出现膜迷路积水。结论:同种体液转移免疫可造成自身免疫性内耳病变;子鼠产生听觉功能障碍主要是由于母鼠所产生的特异性抗内耳组织抗原抗体经胎盘到达子鼠体内所致。

酶联免疫电转移印迹技术(EITB)检测抗EB病毒特异性DNA酶抗体

本研究用酶联免疫电转移印迹技术,检测血清中抗 EB 病毒特异性 DNA 酶抗体,试图建立一种可常规应用于临床的检测方法。结果表明:50例鼻咽癌患者血清中,26例在52～59KD 范围内出现由4条阳性显带融合而成的阳性反应区;健康成人和其他头颈部肿瘤患者血清无一例在此区域内出现阳性显带,表明其特异性甚高。

含抗内耳抗原特异性抗体的体液转移免疫致豚鼠先天性感音神经性聋的实验研究

目的:证实针对内耳组织抗原特异性抗体通过胎盘可造成子鼠先天性自身免疫性感音神经性聋。方法:同种粗制内耳抗原(CIEAgs)免疫豚鼠,造成自身免疫性感音神经性聋(ASNHL)动物模型。ELISA法测定示其血清抗体水平升高,耳蜗电图(ECochG)示其听神经复合动作电位和(或)耳蜗微音器电位阈值或伪阈升高。取其血清(含特异性抗内耳组织抗原抗体)持续转移免疫妊娠豚鼠,采用ECochG测试被动免疫妊娠母鼠和子鼠的听觉功能,再采用颞骨火棉胶切片和苏木精-伊红染色,光镜观察内耳组织形态学改变。结果:各组出现听觉损伤的动物是:采用ASNHL模型动物血清被动免疫的8只妊娠母鼠中有5只(7耳)和其所产子鼠8只中有6只(10耳),采用非ASNHL模型动物血清免疫的妊娠豚鼠所产子鼠5只中有1只(2耳)。出现听力损失的被动免疫母鼠和子鼠内耳病理形态学改变主要为螺旋神经节细胞变性和Rosenthal管中炎性细胞(以单个核细胞为主)浸润,部分动物出现膜迷路积水。结论:同种体液转移免疫可造成自身免疫性内耳病变,子鼠产生听觉功能障碍主要是由于母鼠所产生的特异性抗内耳组织抗原抗体经胎盘到达子鼠体内所致。

Biotin-Avidin免疫转移技术

Biotin-Avidin-Immunoblot是将生物素和亲和素引入酶标免疫检测中,用于经电泳分离并转移到硝酸纤维素膜上的蛋白质的分析。该方法特异性好,具有很好的重复性,检测敏感度可达1.5×10^(-11)mg,与放射免疫检测方法相似。

夏季补饲蛋氨酸铬对干奶牛热应激状态、抗氧化能力和被动免疫转移能力的影响

本试验旨在研究蛋氨酸铬对热应激状态下干奶牛直肠温度、抗氧化能力和被动免疫转移能力的影响,为蛋氨酸铬在干奶牛上的合理应用提供理论依据。试验选取72头胎次、预产期和体重相近的健康经产荷斯坦干奶牛,采用单因素完全随机试验设计,随机分为4组(C组、L组、M组、H组),每组18个重复,每个重复1头牛。对照组(C组)饲喂牧场基础饲粮,L组、M组、H组在基础饲粮中分别添加有效铬含量为3、6、9 mg/(头·d)的蛋氨酸铬。试验期从产前第60天至产犊当天。试验期间每10 d测定1次直肠温度。在干奶牛产前第60、28、10天和产犊当天尾静脉采血,测定血清生化、抗氧化及免疫指标等。奶牛产犊后立即采集初乳样品,犊牛出生2 h内灌服初乳,24 h后颈静脉采血,测定血清免疫指标。结果显示:1)饲粮添加蛋氨酸铬对各时期干奶牛15:00的直肠温度无显著影响(P>0.05);干奶牛产前第30天09:00的直肠温度随蛋氨酸铬添加量的增加而线性降低(P=0.02);产前第10天09:00,L组和H组干奶牛的直肠温度显著低于对照组(P<0.05);从全期来看,M组和H组干奶牛09:00的直肠温度显著低于对照组(P<0.05)。2)产前第45天,各补饲蛋氨酸铬组干奶牛的干物质采食量(DMI)显著高于对照组(P<0.05)。3)从全期来看,M组干奶牛血清总抗氧化能力(T-AOC)显著高于对照组(P<0.05),L组和M组血清超氧化物歧化酶(SOD)活性显著高于对照组(P<0.05);分娩当天,干奶牛血清丙二醛(MDA)含量随蛋氨酸铬添加量的增加呈三次降低(P=0.04)。4)产前第10天,M组干奶牛血清甘油三酯(TG)含量显著低于其他各组(P<0.05);产前第28天,M组干奶牛血清非酯化脂肪酸(NEFA)含量显著低于对照组(P<0.05);产前第10天,L组和M组干奶牛血清NEFA含量显著低于对照组(P<0.05),且血清β-羟基丁酸(BHBA)含量随蛋氨酸铬添加量的增加呈二次降低趋势(P=0.08)。5)M组初乳中免疫球蛋白G(IgG)含量显著高于对照组(P<0.05);初乳中免疫球蛋白A(IgA)含量随蛋氨酸铬添加量的增加有线性升高趋势(P=0.08);M组初乳中免疫球蛋白M(IgM)含量显著高于对照组和H组(P<0.05)。产前第28天,干奶牛血清IgA含量随蛋氨酸铬添加量的增加二次升高(P=0.04);L组、M组和H组干奶牛血清IgM含量显著高于对照组(P<0.05)。产前第10天,干奶牛血清IgM含量随蛋氨酸铬添加量的增加呈二次升高趋势(P=0.09);分娩当天,干奶牛血清IgG含量随蛋氨酸铬添加量的增加呈线性升高趋势(P=0.07),且IgM含量也呈二次升高趋势(P=0.09)。M组犊牛血清IgG含量显著高于对照组和H组(P<0.05)。综上可知,干奶牛饲粮中添加蛋氨酸铬可以有效缓解热应激,提高抗氧化能力和被动免疫转移能力,其中添加有效铬含量为6 mg/(头·d)的蛋氨酸铬效果最优。

促进转移的肿瘤相关免疫细胞与靶向治疗策略

肿瘤转移受肿瘤细胞自身改变的累积和肿瘤微环境所共同驱动。肿瘤微环境中的免疫相关细胞,尤其是肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)、骨髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)、调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)等在免疫抑制和促肿瘤转移中举足轻重。肿瘤转移经历免疫逃逸、预转移"壁龛"形成、突破血管内皮至血循环,最终转移至靶器官形成转移灶,每一个步骤都离不开肿瘤细胞与多种免疫细胞相互作用。本文就免疫相关细胞促进肿瘤转移的分子机制作一综述,并探讨靶向肿瘤转移相关免疫细胞的研究策略。

人类免疫缺陷病毒整合酶链转移抑制新药——卡波拉韦及其复方长效注射液

人类免疫缺陷病毒(HIV)是侵袭人体免疫系统的病原体,严重危害人类健康和生命安全。HIV感染引起获得性免疫缺陷综合征(AIDS),简称艾滋病,仍然是全球主要的公共卫生问题。据世界卫生组织(WHO)在2020年世界艾滋病日前夕发布的公告指出:自1981年确认艾滋病的病原体HIV,迄今,已经夺走了近3300万人的生命。国际社会为应对艾滋病作出了协调一致的努力,服务范围不断扩大。全世界医药工作者经过几十年的努力,潜心研究,已获得6大类抗HIV新药,近50多种有效的治疗感染HIV新药的单方或复方制剂,有利于开展鸡尾酒疗法,即“高效抗逆转录病毒治疗”。随着获得有效的预防、诊断、治疗和护理HIV感染及其伴随的机会感染的措施越来越多,艾滋病毒感染已从一种致死性疾病转变为可控、可治的慢性传染性疾病,使HIV携带者能够过上长寿健康的生活。据WHO报告,截至2019年底,估计全球还有3800万人感染HIV。在2014年,联合国艾滋病联合规划署(UNAIDS)提出“2030年终结艾滋病”的愿景。该领域仍存在着巨大的未获满足的医疗需求,包括降低服药负担、提高治疗依从性、减少耐药突变等。目前,离实现全球终结HIV感染的愿景尚有一段较长的距离,顺应UNAIDS的号召,仍需要全世界各国领导者、医药科技工作者和各行各业的有识之士为实现此项远大的愿景,各尽所能地付出应有的贡献,特别是从事疫苗研发的医药研究学者,虽然历经过多方面的努力,进行了大量的试验研究工作,但至今仍未能取得突破性的进展。从事新药研发的学者在既往取得成绩的基础上,继续深入研究,在已开发高效低毒的新类型抗逆转录病毒(ARV)药物中,应着眼于长效、低耐药性和价廉的抗HIV新品种,使广大患者减少用药量,减轻经济负担。在已开发的6大类新药中,HIV整合酶链转移抑制药是最有潜力的品种之一,人体细胞中无相应的整合酶,其抑制药在HIV复制过程中,能阻断催化病毒DNA与宿主染色体DNA的整合,减轻新药研发的干扰,成为抑制HIV的新靶点。截至2020年底已批准上市4个品种,单药使用疗效不佳,易产生耐药性,若与核苷或非核苷类逆转酶抑制药及蛋白酶抑制药组成多种复方制剂,可发挥强有力抗HIV活性新药。由英国葛兰素史克公司控股,美国辉瑞大药厂和日本盐野义制药公司持股的ViiV医疗保健公司是一家专门从事抗HIV/AIDS新药研发的公司,近期推出HIV整合酶抑制药卡波拉韦(cabotegravir,CAV)及其与美国强生制药公司的非核苷类逆转录酶抑制药利匹韦林(rilpivirine,RPV)组合成为长效复方制剂。每月或隔月肌内注射一次CAV与RPV混悬缓释注射液,能达到长效抑制HIV复制的疗效。2019年7月3日和2019年7月30日ViiV医疗保健公司分别向美国食品药品监督管理局(FDA)和欧洲药品管理局(EMA)提出每月注射一次的复方新药上市申请(NDA)。2020年1月10日该公司收到FDA长效复方制剂的完整回复函,2020年11月18日ViiV公司获得FDA突破性治疗的指定,给以优先评审的待遇。2020年10月21日欧洲、中东、非洲三地区(EMEA)的人用药品委员会(CHMP)对于复方长效制剂给予积极评价,建议批准上市。2021年1月13日和2021年1月21日,首个长效注射治疗HIV新药分别被美国和欧盟批准上市。商品名均为Vocabria。该复方新制剂预防HIV感染的活性比恩曲他滨(FTC)与替诺福韦二吡呋酯(TDF)的复方抑制剂(商品名Truvada)的有效性高89%,95%CI(68,96)%。此前,加拿大卫生厅于2020年9月9日首先批准长效复方注射液上市。2021年2月24日,ViiV医疗保健公司向美国FDA提交补充新药申请(sNDA),要求扩大卡波拉韦长效复方制剂的使用范围,允许隔月一次,肌内注射CAB复方制剂,以稳定的方案治疗成年人HIV感染。何时批准上市尚待定。该文对人类免疫缺陷病毒I型(HIV-1)整合酶链转移新抑制药——卡波拉韦(cabotegravir)及其长效复方缓释肌内注射液的非临床和临床药理毒理学、临床研究、不良反应、适应证、剂量与用法、用药注意事项及知识产权状态和国内外研究进展等进行介绍。

肝母细胞瘤组织RECK及膜型基质金属蛋白酶-1与肿瘤转移抑制关系的探讨

目的 探讨RECK蛋白、膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)在肝母细胞瘤组织中的表达及其在肿瘤转移抑制中的作用.方法 采用第二代通用型二步法监测系统(PV-6000)免疫组织化学方法检测35例肝母细胞瘤组织和15例正常肝脏组织及10例肝脏良性肿瘤组织中RECK、MT1-MMP的表达情况.结果 肝母细胞瘤组织RECK的表达水平明显降低(28.6%),与肿瘤的浸润转移密切相关(P【0.05);MT1-MMP肝母细胞瘤组织中高表达(54.3%),并随着肿瘤浸润深度的加深、远处转移的发生而增高(P【0.05);二者表达呈负相关(P【0.05).结论 RECK和MT1-MMP在肝母细胞瘤组织中的表达呈负相关;RECK和MT1-MMP在肝母细胞瘤的进展中起重要作用.

基于生物免疫学的入侵检测系统研究

分析了入侵检测系统的生物免疫模型,研究了免疫系统的原理与致病机制以及其中的隐喻机理.针对当前入侵攻击的新特点,就如何避免免疫病理转移造成的各种安全隐患,构建安全、高效、低耗的入侵检测系统提出了解决方案.

基于遗传算法的免疫入侵检测分析引擎

分析了生物免疫病理转移造成的免疫入侵检测系统(IDS)的安全漏洞,将遗传算法应用于入侵检测分析引擎的研究与开发,结合生物免疫优良的隐喻机理设计了一类测度参数优化算法,提出一类混合入侵检测分析引擎。该方案发挥了遗传算法并行操作、全局寻优、自适应优化等特征,避免了免疫病理机制转移进入IDS造成的安全隐患以及现有入侵检测引擎虚警与误警率高的缺陷,增强了免疫IDS的实时性、健壮性、高效性、并行性和可适应性。

肺癌患者血清CA125水平与肺癌转移的关系分析

目的探讨血清CA125对预测肺癌转移的临床应用价值。方法应用化学发光免疫分析技术检测2197例肺癌患者血清肿瘤标志物CA125水平。结果2197例肺癌患者中，未发生转移的患者为1105人，CA125的中位数为55.23U／ml；发生转移的患者为1092人，CA125的中位数值为908.56U／ml。发生转移的患者血清CA125中位数显著高于未发生转移的肺癌患者（P〈0．01）。结论血清CA125水平对肺癌的转移有重要的提示意义。

基质金属蛋白酶含量及表达与膀胱癌侵袭转移的关系

目的 :探讨基质金属蛋白酶 2 (MMP- 2 )、基质金属蛋白酶 9(MMP- 9)的血清含量及组织表达与膀胱移行细胞癌侵袭转移的关系。方法 :用 EL ISA法检测 6 8例膀胱移行细胞癌患者及 2 0例正常对照组血清中MMP- 2和 MMP- 9的含量 ;应用免疫组织化学 SP法 ,检测 6 8例膀胱移行细胞癌、 10例正常膀胱黏膜组织中MMP- 2和 MMP- 9的表达及分布情况。结果 :膀胱癌患者血清中 MMP- 2和 MMP- 9含量明显高于正常对照组(P<0 .0 1) ,淋巴结转移组患者血清 MMP- 2及 MMP- 9含量高于无淋巴结转移组 ;膀胱癌组织中 MMP- 2及MMP- 9表达显著高于癌旁组织及正常黏膜 ,随着肿瘤分级的增高 MMP- 2和 MMP- 9表达显著增强 (P<0 .0 5 )。结论 :MMP- 2和 MMP- 9血清含量及组织表达与膀胱癌侵袭转移有密切关联 ,可以作为判断膀胱移行细胞癌预后的客观指标。

安格斯母牛初乳产量与质量测定及其新生犊牛被动免疫效果评价

【目的】新生犊牛被动免疫转移失败(failure of passive transfer, FPT)会导致犊牛发病率和死亡率显著增高,影响后期生长发育。本试验针对国外引进的安格斯母牛初乳产量和质量进行测定,并对其新生犊牛被动免疫效果进行评估,以期为新生犊牛初乳管理措施制定提供科学依据。【方法】随机选择健康安格斯初产母牛(24月龄)和经产母牛(36~48月龄)各15头,待母牛产犊后立即进行人工挤奶测定初乳产量、营养成分及免疫球蛋白浓度。选取初产和经产新生犊牛各15头,测定其初生重,分别采集犊牛出生后未食初乳(0 h)和食初乳后(24~36 h)血样,测定其血清总蛋白含量及各生理生化指标。【结果】初产母牛平均初乳产量极显著低于经产母牛,但其初乳中乳蛋白、非脂乳固体、乳糖、灰分含量,以及密度和电导率均极显著高于经产母牛(P<0.01)。初产母牛和经产母牛初乳中免疫球蛋白浓度分别为28.72%和26.24%,合格率分别为93.33%和91.67%,差异均不显著(P>0.05);初产和经产新生犊牛被动免疫失败率分别为33.3%和25.0%;初产新生犊牛平均初生重极显著低于经产新生犊牛(P<0.01);被动免疫成功犊牛平均初生重和球蛋白含量均极显著高于被动免疫失败犊牛(P<0.01)。【结论】新疆安格斯犊牛FPT的主要原因可能是母牛初乳产量低导致新生犊牛初乳摄入不足,初生重较低的犊牛FPT的风险性较高。本研究为制定切实可行的新生安格斯犊牛初乳补饲计划提供了科学基础。

非小细胞肺癌中p97蛋白的表达及其临床意义

目的 研究腺苷三磷酸酶（p97）在非小细胞肺癌（non-small cell lung carcinoma，NSCLC）组织中的表达及与侵袭、转移的关系。方法 采用免疫组织化学和Western-Blot方法对60例NSCLC、癌旁组织以及10例正常肺组织进行D97蛋白定位表达及表达水平研究。结果 在免疫组化试验中，p97在NSCLC组织中的阳性表达率为65．0％（39/60），瘤旁组织为28．3％（17/60），两者比较差异有统计学意义，X^2=6．1，P=0．047；在Western印迹实验中，p97在NSCLC组织中的阳性表达率为81．7％（49/60），瘤旁组织为35．0％（21/60）。非肿瘤肺组织为10％（1/10），差异有统计学意义。X^2=7．5，P=0．023。Western印迹与免疫组化检查结果明显正相关性。r=0．293。P〈0．05。在NSCLC组织中，p97蛋白阳性表达率与肿瘤转移（P=0．0020）和肿瘤分期（P=0．0150）之间的差异有统计学意义；而与瘤体大小、病理分级、组织类型的差异无统计学意义。结论 NSCLC在蛋白水平上表达p97增加，与肺癌侵袭和转移有关。

注射HBsAg免疫转移因子后对特异性细胞免疫影响

为研究HBsAg免疫转移因子（HBV-TF）对人体细胞免疫应答的改善,对14位健康志愿者每日肌注HBV-TF2mg,计14d;18例慢乙肝病人随机分成3组,每组分别以0.5mg、1mg和2mg肌注了3个月。两组均于注射前后分别进行HBsAg刺激的淋巴细胞增殖试验和巨噬细胞移动抑制试验。结果显示:健康组,HBsAg的淋巴细胞增殖,刺激指数（SI）,注射前为0.77±0.21,注射后增至1.57±0.79（P<0.01）,其中10例明显增高。HBsAg刺激的巨噬细胞,移动抑制指数（MI）,注射前为0.926±0.06,注射后下降至0.784±0.089（P<0.01）,其中7例明显降低。慢性乙肝病人组,注射前后SI分别为 1.048±0.398和 1.352±0. 383（P<0. 05）,其中4例明显增高,4例中有3例HBeAg阴转伴抗-HBe阳转。MI治疗前后分别为1.061±0.109和0 955±1.171,有3例明显降低,3例中有2例HBeAg阳转伴抗-HBe阳转。