“肝主疏泄”与肿瘤转移前微环境

免疫抑制是肿瘤转移前微环境得以形成的重要因素,在肿瘤转移中扮演重要角色。通过对“肝主疏泄”调畅气机以调控免疫功能,疏泄胆汁促脾运化以维持肝-肠免疫屏障正常,调畅情志改善压力应激增强免疫的论述,认为“肝主疏泄”为调控免疫功能的核心,基于此探析肝失疏泄、免疫抑制在肿瘤转移前微环境形成中的关联性,提出“肝失疏泄-免疫抑制-肿瘤转移前微环境”病机关联假说。并探讨风药畅达肝木、健脾扶土抑木、养肾滋水涵木、调肺佐金平木在恢复肝主疏泄上的运用,以期切断“肝失疏泄-免疫抑制-肿瘤转移前微环境”的病机关联,为中医药防治肿瘤转移提供新思路。

逍遥散通过调节肿瘤免疫微环境抑制肺转移前微环境形成

目的探讨逍遥散抗肿瘤转移作用的机制。方法建立小鼠结肠癌CT26.WT移植瘤及肺转移模型,通过活体成像、肺组织解剖以及HE染色评价不同剂量(200、400、800 mg)逍遥散干预下的肺转移情况。免疫荧光及Western blot检测肿瘤M2型巨噬细胞标志物CD206、ARG1、PDL2表达;酶联免疫吸附试验检测血清中转化生长因子(TGF)-β和肿瘤坏死因子(TNF)-α的水平;流式细胞术检测肺组织中血管内皮生长因子受体1阳性(VEGFR1+)髓系细胞的募集情况;Western blot检测原位肿瘤组织磷脂酰肌醇3激酶(STAT3)、血管内皮生长因子(VEGF)及肺组织中转移前微环境标志物基质金属蛋白酶(MMP)-9、S100A8及Fibronectin表达。结果逍遥散干预后,肺转移灶显著减少,小鼠肺组织中MMP-9、S100A8及Fibronectin的表达量显著降低,肿瘤相关巨噬细胞发生M1极化,血清中TGF-β的水平显著降低,TNF-α的水平显著升高,小鼠肺组织中VEGFR1+髓系细胞募集明显减少,肿瘤组织中STAT3磷酸化被抑制,VEGF表达量显著降低。结论逍遥散的抗肿瘤转移活性与其抑制转移前微环境的能力有关,并且这种抑制作用可能通过肿瘤相关巨噬细胞的表型转化以及抑制STAT3信号转导实现。

黄芪多糖对肺肿瘤转移前微环境中HIF-1和S100A8/A9蛋白表达及肺转移的影响

目的观察不同浓度黄芪多糖(Astragalus polysaccharides,APS)通过干预肺转移前微环境(Pre-metastatic niche,PMNs)对HIF-1和S100A8/A9蛋白的影响,初步阐明APS对肺PMNs中的作用靶点及对肿瘤肺转移影响的分子机制。方法SPF级C57BL/6J小鼠90只,除空白组外,其余75只用荧光素酶(LUC)标记的Lewis肺癌细胞1×10^(6)个通过小鼠尾静脉注射构建PMNs模型,并随机分成5组:模型组、低剂量组(灌服黄芪多糖50 mg/kg)、中剂量组(灌服黄芪多糖100 mg/kg)、高剂量组(灌服黄芪多糖200 mg/kg)、芬戈莫德(FTY720)组(腹腔注射FTY7201 mg/kg),每组15只。观察不同浓度黄芪多糖对PMNs中HIF-1和S100A8/A9蛋白的影响,同时用小动物活体成像及HE染色评估肺部转移情况。接种瘤细胞次日后低、中、高各剂量组按剂量灌胃给药,每天1次,共28 d。FTY720通过腹腔注射每2 d 1次间隔给药。在前14 d通过小动物活体成像动态观察肺肿瘤转移情况,并在第14天每组随机取出5只采用Western Blot及RT-qPCR技术检测多功能蛋白聚糖、纤维连接蛋白和赖氨酰氧化酶等在肿瘤转移前微环境中具有标志性的蛋白进一步验证模型成功。在第28天取肺组织采用苏木精-伊红(HE)染色观察小鼠肺组织病理学改变,并采用Western Blot及RT-qPCR技术检测28 d所取的肺组织中HIF-1和S100A8/A9蛋白和基因的表达,取材前12 h禁食不禁水。结果HE染色观察小鼠肺组织发现,与空白组相比模型组小鼠肺组织中出现大面积肺泡壁增厚和粒细胞浸润,并出现少量肿瘤转移灶;与模型组相比,高剂量组和FTY720组小鼠的肿瘤转移灶点明显减少,肺组织趋于正常。RT-qPCR、Western Blot检测结果显示:与空白组比较,模型组小鼠肺中HIF-1,S100A8,S100A9基因和蛋白表达显著升高(P<0.05);而与模型组相比,FTY720组和APS各组上述蛋白和基因表达均下降(P<0.05)。结论黄芪多糖可通过调控肺肿瘤转移前微环境中HIF-1、S100A8、S100A9的表达水平减少肿瘤细胞肺转移。

卵巢癌转移前微环境免疫抑制的形成及其机制

腹膜广泛转移是导致卵巢癌患者手术难以切净、反复复发以及生存预后差的主要原因之一。研究发现,卵巢癌转移前通过肿瘤细胞、免疫抑制细胞和间质细胞的相互作用在腹膜特定部位形成免疫抑制的转移前微环境,包括肿瘤细胞自身特性改变、免疫细胞募集及功能异常、间质细胞分布及调控能力异常等。本文就卵巢癌转移前微环境免疫抑制的形成及其机制进行综述,以期探寻卵巢癌转移中关键分子,明确免疫逃逸关键机制,为临床卵巢癌的治疗提供新的思路。

肿瘤来源外泌体介导MDSC促进转移前微环境形成的研究进展

肿瘤转移是导致实体瘤患者死亡的主要原因。髓源性抑制细胞(MDSC)可介导转移靶器官免疫抑制,诱导转移前微环境形成,促进肿瘤细胞休眠重激活并增殖,最终形成影像学可检测的转移灶。肿瘤来源外泌体能够通过细胞间通信,诱导骨髓细胞分化为MDSC,促进靶器官对MDSC的募集,介导MDSC的免疫抑制功能,为肿瘤细胞生存营造局部免疫抑制微环境(局部正虚),进而促进癌症转移或发生。本文聚焦肿瘤来源外泌体介导MDSC促进靶器官免疫抑制的作用及机制进行综述,以期从干预转移前微环境形成的角度,为防治恶性肿瘤转移提供参考。

荧光素酶标记的Lewis肺癌细胞转移前微环境小鼠模型建立与评价

目的 通过选择荧光素酶标记的Lewis(Luc-Lewis)肺癌细胞建立肺转移前微环境小鼠模型,采用定性、定量的方法评价该模型是否成功。方法 C57BL/6小鼠分为正常对照组和模型组,每组15只,模型组小鼠通过尾静脉注射Luc-Lewis肺癌细胞建立转移前微环境模型。每日记录各组小鼠体质量,运用高通量酶标仪检测小鼠体内肿瘤荧光信号。取小鼠肺组织观察转移情况,HE染色观察肺组织病变情况,实时定量PCR和Western blot法分别检测转移前肺组织微环境形成的特异性标志物赖氨酰氧化酶(LOX)、基质金属蛋白酶9(MMP9)、多功能蛋白聚糖(VCAN)、纤连蛋白(FN)的mRNA和蛋白表达。结果 与正常组相比,模型组小鼠体质量显著下降,精神萎靡。模型组小鼠肺脏可检测到明确的荧光信号,且信号强度与造模天数呈正相关;14 d时模型组小鼠LOX、 MMP9、 VCAN、 FN的mRNA和蛋白表达水平显著升高;14 d时模型组小鼠肺组织肺间隙增厚,肺泡萎缩,大量炎性细胞浸润,第21天时可观察到模型组小鼠肺组织已形成转移病灶。通过以上实验结果提示转移前微环境成熟时间约为14 d。结论 成功建立了Lewis肺癌肿瘤转移前微环境小鼠模型。

JAG1影响单核-巨噬细胞重塑三阴性乳腺癌转移前微环境:基于外泌体中的LncRNA MALAT1

目的探讨JAG1对单核-巨噬细胞在三阴性乳腺癌(TNBC)中肿瘤转移前微环境(PMN)中作用的影响及其可能的调控机制,以期为TNBC诊疗提供新的思路和靶点。方法人TNBC细胞MDA-MB-231,MDA-MB-231B体外培养,qRT-PCR检测JAG1的表达。动物实验将雌性裸鼠分为MDA-MB-231组和MDA-MB-231B组,5只/组,分别往乳腺脂肪垫注射细胞5×10^(6),6周取肿瘤组织进行免疫组化分析。人源单核细胞THP-1为研究对象,分别经人源JAG1重组蛋白(rhJAG1)直接处理或经TNBC条件培养基(CM)处理,通过单核-内皮粘附、Transwell、qRT-PCR和Western blot实验检测JAG1对单核细胞的直接作用和在PMN中的影响。实验分为5组:Control组:THP-1正常培养;231-CM组:THP-1+231-CM;231-JAG1-CM组:THP-1+rhJAG1处理后231-CM;231B-CM组:THP-1+231B-CM;231-DAPT-CM组:THP-1+DAPT处理后231-CM。透射电镜(TEM)、纳米颗粒跟踪分析(NTA)检测JAG1对TNBC外泌体分泌影响。生物信息学筛选与LncRNA MALAT1相互作用的miRNA并行qRT-PCR验证。结果与MDA-MB-231相比,侵袭株MDA-MB-231B的JAG1表达更高(P<0.01),肝转移面积更大;rhJAG1直接处理和TNBC条件培养基处理均能促进单核细胞的黏附、迁移,并影响其分化(均P<0.05);透射电镜和NTA检测显示JAG1能促进MDA-MB-231外泌体分泌数量增多(P<0.01),外泌体中LncRNAMALAT1含量升高(P<0.0001)。生物信息学分析得到与LncRNA MALAT1和JAG1相关的5个候选miRNA,实验证实miR-26a-5p在TMN中的单核-巨噬细胞中受到MALAT1的靶向调控(P<0.0001)。结论JAG1能促进TNBC的外泌体分泌并影响其中Lnc MALAT1的表达,从而靶向PMN中单核-巨噬细胞miR-26a-5p的表达,从而使单核-巨噬细胞中JAG1表达升高,进而影响单核-巨噬细胞在PMN中的黏附、迁移和破骨分化作用。

中医药调控肿瘤转移前微环境相关靶点的研究进展

肿瘤转移是癌症临床治疗失败的主要原因,也是患者死亡的常见原因。肿瘤源性分泌因子或骨髓衍生细胞可在播散肿瘤细胞定植之前到达靶器官,提示靶器官转移前微环境(pre-metastatic niche,PMN)是导致肿瘤转移的关键因素。中药及其组分通过降低免疫抑制细胞的数量和功能、抑制肿瘤相关分泌因子的表达,阻断PMN的形成。本文综述中药对肿瘤PMN相关靶点的调控机制,为肿瘤转移的临床治疗提供理论依据。

从转移前微环境探讨原发性肝癌术后复发转移中“癌毒盛衰”病机的科学内涵

全国名中医凌昌全教授提出“癌毒盛衰”是恶性肿瘤发生发展的特异病机。转移前微环境(premetastatic niche,PMN)指在肿瘤转移的超早期,在潜在转移靶器官中形成的有利于肿瘤细胞定植的微环境。在原发性肝癌术后复发转移发生过程中,PMN形成和“癌毒盛衰”病机理论具有密切联系。因此,本文试图从PMN形成的三大要素——“细胞外基质重塑微环境”“免疫抑制微环境”“微血管重塑微环境”的角度,探讨在肝癌术后复发转移中“癌毒盛衰”病机的现代科学内涵。

肿瘤转移前微环境动物模型的构建与评价方法研究进展

肿瘤转移是一个庞杂的过程,转移前微环境(PMN)概念的提出,揭示了肿瘤转移的关键因素。实验动物模型在模拟人类的疾病进程、开发新型药物及疗法和临床试验等方面有着巨大的贡献,现已被广泛用于研究肿瘤行为学相关研究,其中肿瘤的肺转移微环境模型具有操作性强、成功率高、实验效果良好等优点。基于肿瘤转移前微环境这一概念,本文围绕肿瘤的肺转移前微环境实验动物模型的构建方法及评价指标展开综述。

髓源性抑制细胞与肺癌转移前微环境的形成

转移是恶性肿瘤导致死亡的主要原因,目前尚无针对转移的药物。转移前微环境是肿瘤发生转移前在远端器官形成的适宜"土壤",有益于循环肿瘤细胞的定植。而转移前微环境的主要特征是免疫抑制,髓源性抑制细胞是近年来发现的具有抑制特异性和非特异性免疫的重要负性调控细胞。本综述对髓源性抑制细胞在转移前微环境的作用机制及潜在的干预靶点进行总结,以期揭示髓源性抑制细胞对转移前微环境的影响,进而为干预恶性肿瘤的转移提供有效的思路。

重楼皂苷Ⅶ下调S100A8抑制肺癌转移前微环境形成

目的:评估重楼皂苷Ⅶ干预MDSCs介导转移前微环境形成的作用,揭示"正虚伏毒"转移核心病机的生物学基础。方法:在C57BL/6小鼠上建立皮下移植瘤模型,随机分为4组,分别为生理盐水对照组(NS)、重楼皂苷Ⅶ组(PP7)、紫杉醇组(PTX)、重楼皂苷Ⅶ联合紫杉醇组(PP7+PTX),每组8只,每周给药3次,共用药两周。活体成像检测小鼠成瘤情况,流式细胞术检测外周血MDSCs表达,免疫组化检测MDSCs分泌的相关细胞因子和转移前微环境形成情况。结果:与对照组相比,PP7+PTX组与PP7组均可以控制瘤重(P<0.05),且PP7+PTX组在控制瘤体积方面具有显著性差异(P<0.001);小鼠体重方面无显著性差异;外周血中MDSCs的比例无显著性差异;免疫组化显示,与对照组相比,PP7、PTX、PP7+PTX组均可以下调IDO表达(P<0.01),而PP7+PTX组可下调Arg-1的表达(P<0.05);在转移前微环境方面,免疫组化检测显示,与对照组相比,PP7、PTX、PP7+PTX组均可以下调转移前微环境形成指标S100A8(P<0.05),但对S100A9无显著性差异。结论:重楼皂苷Ⅶ可抑制小鼠皮下瘤生长,并下调S100A8抑制转移前微环境形成,揭示重楼皂苷Ⅶ可能具有扶正的作用,但是否通过调控MDSCs发挥作用尚待进一步探索。

中医治疗肿瘤转移新模式——转移前微环境干预

防治肿瘤转移是目前肿瘤领域研究的热点,其中改善转移前"土壤"倍受关注。转移前微环境的中医理论及治疗策略仍不完善,结合现代医学研究成果及医疗实践,深入研究转移前环境形成病机及中医治则对防治肿瘤转移有重大意义。本文以气机升降理论为指导,结合花宝金教授治瘤经验及转移前环境相关分子机制,对转移前微环境的中医认识及干预策略进行再探讨,以期创新肿瘤治疗模式,为肿瘤转移的中医治疗提供参考。

肺转移前微环境体外模型的建立与双参颗粒干预机制

目的:构建肺转移前微环境体外模型,观察S1pr1-stat3信号通路在模型成熟过程中的作用,同时验证双参颗粒对该模型的干预作用,探讨其可能的机制。方法:体外构建小鼠Lewis肺癌细胞和原代骨髓细胞共培养模型,并用S1pr1激活剂SEW2871干预髓系细胞分化的过程,观察相关蛋白MMP9、Lox、Version及Fibronectin的表达情况,并检测模型中骨髓来源的抑制性细胞(MDSCs)细胞的分化情况及双参颗粒对模型的干预效果。结果:S1pr1可以明显促进肺转移前微环境体外模型的成熟构建,S1pr1-stat3是该模型成熟的关键信号通路,双参颗粒不仅显著降低模型中该信号通路相关蛋白的表达,同时对微环境成熟的关键蛋白的表达也具有抑制作用,还可显著降低该信号通路相关的骨髓细胞向MDSCs细胞的分化(P<0.05),同时对转移前微环境中部分肿瘤源性细胞因子如粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)及转化生长因子(TGF-β)有显著抑制作用(P<0.05)。结论:双参颗粒通过抑制S1pr1-stat3信号通路及部分肿瘤源性细胞因子的表达,抑制肺转移前微环境模型的成熟。

髓源性抑制细胞在构筑转移前微环境促肿瘤转移中的作用

肿瘤细胞持续存活是肿瘤转移过程中的主要限速环节。与肿瘤微环境类似,转移前器官的局部微环境(转移前微环境)为肿瘤细胞的存活提供了适宜的环境,是肿瘤细胞在远端器官持续存活、增殖的重要条件。髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)是这一环境中的关键成分,其构筑的促增殖、炎症、免疫抑制及血管重塑的转移前微环境在肿瘤细胞的种殖、转移灶的形成过程中具有重要作用,是抗肿瘤转移治疗的潜在靶点。该研究主要介绍MDSCs构筑转移前微环境的机制及相关信号通路,为干预转移前微环境的抗肿瘤转移研究提供参考。

肿瘤转移前微环境形成机制的研究进展

肿瘤原发灶诱导待转移器官营造一个适宜转移的微环境,即转移前微环境。转移前微环境的形成是一个由多种细胞和细胞因子参与的复杂过程,其中肿瘤衍生因子、肿瘤外泌体以及骨髓源性细胞在转移前微环境形成中至关重要。该文概述了转移前微环境的重要组成因素和主要形成过程的新机制,并探讨可能的临床意义,以期通过阻断转移前微环境的形成,为治疗肿瘤转移提供新思路。

HPV感染对宫颈癌转移前微环境的影响

转移性宫颈癌的诊治一直是临床的难点,肿瘤转移前微环境的形成促进了宫颈癌转移。高危型HPV感染可导致宫颈癌的发生;而HPV持续感染能否促进宫颈癌转移前微环境形成尚无定论,文章就HPV感染与转移性宫颈癌、HPV持续感染促进宫颈癌PMN的形成等方面的研究进展进行综述。

乳腺癌肺转移前微环境形成机制及中医药干预研究进展

乳腺癌是目前发病率最高的癌症之一,临床上大部分乳腺癌患者往往因发生远端转移而死亡。在转移这一复杂的级联反应过程中,转移前微环境(PMN)的形成近年来被认为在肿瘤发生远端转移过程中至关重要。原发部位的肿瘤通过分泌肿瘤来源的分泌因子(TDSF)、细胞外囊泡(EV)等至转移靶器官,从而改变靶器官的微环境以适应之后的肿瘤远端转移。乳腺癌是一种具有多器官转移倾向性的癌症,近年来,大量研究揭示了乳腺癌PMN形成机制,并表明抑制乳腺癌PMN的形成过程能够减少乳腺癌转移。中医药多靶点,多成分的作用特点目前已被报道可以有效干预PMN形成。该文综述了乳腺癌肺PMN形成的机制以及中医药干预的相关研究进展。

外泌体在肿瘤转移前微环境形成中的作用

肿瘤的转移前微环境(pre-metastatic niche,PMN)特指原发肿瘤灶为肿瘤细胞远处播散和定植准备的微环境,此微环境的六个特征包括炎症、免疫抑制、血管生成/血管通透性、亲器官性、重编程和淋巴管生成。PMN形成的关键成分包括肿瘤源性分泌因子、细胞外囊泡(含外泌体)、骨髓源性细胞、免疫抑制细胞和宿主基质细胞等,其中,外泌体作为细胞间重要的信使,在肿瘤PMN的形成中具有重要作用。本综述就外泌体在肿瘤PMN形成中的作用进行探讨。

结肠癌肝脏转移前微环境形成机制及作用的研究进展

结肠癌肝转移是临床治疗难题,研究发现,肿瘤细胞转移至肝脏前,通过释放相关细胞因子在肝脏内部形成转移前微环境,从而利于循环肿瘤细胞在肝脏定植。转移前微环境的形成主要与结肠原发癌、肝脏局部微环境以及机体免疫状况相关,其中涉及多种机制,包括肿瘤分泌外泌体、细胞因子、肿瘤上皮间质转化、肝脏细胞外基质重塑等。研究结肠癌肝转移前微环境形成机制,将有助于结肠癌肝转移的早诊早治以及降低肝转移发生、改善患者预后。本文就结肠癌肝转移前微环境的形成及相关机制进行综述。