叉头框转录因子M1和转移相关基因1蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其与临床特征和预后的相关性分析

目的探讨叉头框转录因子M1(crosshead box transcription factor M1,FOXM1)和转移相关基因1蛋白(transfer related gene 1 protein,MTA1)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及其与临床特征和预后的相关性。方法选取2012年6月—2014年2月收治的行手术治疗的86例NSCLC作为研究对象,记录患者的临床资料,检测FOXM1、MTA1表达情况,观察疾病转移、预后情况,分析FOXM1、MTA1表达与NSCLC患者临床特征的关系,采用多因素logistic回归分析观察影响NSCLC患者预后的危险因素。结果FOXM1阳性表达76例,阴性表达10例,阳性率为88.37%;MTA1高表达68例,低表达18例,高表达率为79.07%。34例生存,52例死亡,生存率39.53%。是否吸烟、肿瘤分化程度、是否发生远处转移的NSCLC患者FOXM1表达情况比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),是否吸烟、不同TNM分期、不同肿瘤直径、不同肿瘤分化程度、是否发生远处转移的NSCLC患者MTA1表达情况比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。单因素分析显示,年龄、是否吸烟、TNM分期、肿瘤直径、肿瘤分化程度、是否发生远处转移、FOXM1及MTA1表达情况是影响NSCLC患者预后的相关因素(P<0.05或P<0.01)。多因素logistic回归分析显示,年龄≤60岁、吸烟、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、肿瘤直径>3 cm、肿瘤分化程度低分化、发生远处转移、FOXM1表达阳性、MTA1高表达为影响NSCLC患者预后的独立危险因素(P<0.05或P<0.01)。结论FOXM1表达阳性、MTA1高表达为影响NSCLC患者预后的不良因素,临床应提高警惕。

骨转移性透明细胞性肾细胞癌33例临床病理分析

目的探讨骨转移性透明细胞性肾细胞癌(clear c ell renal cell carcinoma bone metastasis,CCRCC-BM)患者的临床病理学特征,提高对CCRCC-BM的认识。方法回顾性分析2011年1月—2023年7月福州市第二总医院病理科收集的33例CCRCC-BM患者的临床病理资料及随访结果,并复习相关文献。结果33例患者中,男性27例,女性6例,发病年龄42~94岁,中位年龄65岁。影像学均表现为膨胀性、溶骨性骨质破坏,骨转移病灶共43处,常见的骨转移部位为股骨(15处)及肱骨(12处);单发骨转移23例,伴一处或以上其他部位转移占10例。33例均因骨相关事件(skeletal related event,SREs)为首发症状就诊后经病理诊断为CCRCC-BM,18例出现肿瘤性坏死,3例伴有肉瘤样分化。Fuhrman细胞核分级:Ⅰ级16例、Ⅱ级14例,Ⅲ级1例,Ⅳ级2例。免疫表型:肿瘤细胞表达成对盒基因8(paired box protein 8,Pax-8)(32/33)、白细胞分化抗原10(cluster of differentiation 10,CD10)(33/33)、波形蛋白(vimentin)、碳酸酐酶Ⅸ(carbonic anhydraseⅨ,CAⅨ)(30/33)、上皮细胞膜抗原(epithelial membrane antigen,EMA)(32/33)、广谱细胞角蛋白(pan cytokeratin,CKpan)(31/33)。33例均经手术切除病灶,术后随访2~108个月,死亡21例,生存12例。结论CCRCC-BM好发于中老年男性患者,股骨、肱骨是最常见的转移部位,预后不佳。对于临床上不明原因出现的病理性骨折、脊髓压迫、骨痛等症状的患者,应考虑肾细胞癌骨转移的可能,结合既往史、病理形态学及免疫组织化学染色等有助于诊断及鉴别诊断。

长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1对巨噬细胞极化影响的研究

目的研究长链非编码RNA(lnc RNA)肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)对巨噬细胞极化的影响。方法采用佛波酯诱导人THP-1细胞分化为成熟的巨噬细胞,IFN-γ/LPS刺激诱导M1型极化,IL-4刺激诱导M2型极化,采用实时荧光定量PCR(RT-q PCR)检测各组细胞中MALAT1的表达。si RNA干扰巨噬细胞MALAT1表达,加入IL-4继续诱导M2型极化,RT-q PCR检测极化相关基因表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测TNF-α、IL-12、CCL22、IL-10的水平。si RNA干扰M2型巨噬细胞MALAT1表达,研究其对M2极化表型的影响。结果 MALAT1在M2型巨噬细胞中表达显著升高,M1向M2极化改变MALAT1表达升高,而M2向M1极化改变MALAT1表达降低。MALAT1干扰后,IL-4诱导的M2型巨噬细胞TNF-α、IL-12分泌升高,CCL22、IL-10分泌降低;CXCL10、CXCL11、HLA-DR表达升高,CCL17、CCL18、CD163表达降低。M2型巨噬细胞MALAT1干扰后,TNF-α、IL-12分泌升高,CCL22、IL-10分泌降低。结论 MALAT1参与调控巨噬细胞极化,干扰MALAT1表达有效抑制M2型巨噬细胞极化,促进M1型巨噬细胞极化。

外周血PD-1、PD-L1表达与肾细胞癌骨转移的相关性分析

目的分析外周血程序性死亡分子-1(PD-1)、程序性死亡分子-1配体(PD-L1)表达与肾细胞癌骨转移的相关性。方法选取2016年2月—2021年3月中国人民解放军空军军医大学第一附属医院泌尿外科收治肾细胞癌患者219例,其中发生骨转移66例(骨转移组),未发生骨转移153例(无骨转移组)。采用流式细胞术检测外周血CD4^(+)、CD8^(+)T细胞表面PD-1表达率及CD14^(+)单核细胞表面PD-L1表达率,多因素Logistic回归分析肾细胞癌骨转移的危险因素,受试者工作特征曲线(ROC)分析外周血CD4^(+)、CD8^(+)T细胞表面PD-1表达率及CD14^(+)单核细胞表面PD-L1表达率诊断肾细胞癌骨转移的价值。结果骨转移组年龄≥65岁、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、有肌肉或骨痛症状、碱性磷酸酶升高、高钙血症比例,外周血CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞表面PD-1表达率及CD14^(+)单核细胞表面PD-L1表达率显著高于无骨转移组[χ^(2)(t)/P=5.404/0.020、8.082/0.004、9.736/0.002、12.493/<0.001、5.746/0.017、15.766/<0.001、11.870/<0.001、10.614/<0.001]。多因素Logistic回归分析显示,TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、高钙血症、CD4^(+)T细胞表面PD-1表达率高、CD8^(+)T细胞表面PD-1表达率高、CD14^(+)单核细胞表面PD-L1表达率高是肾细胞癌发生骨转移的危险因素[OR(95%CI)=2.291(1.445~3.631)、2.980(1.440~6.143)、1.640(1.287~2.092)、1.881(1.383~2.559)、1.657(1.190~2.308)]。CD4^(+)T细胞表面PD-1表达、CD8^(+)T细胞表面PD-1表达、CD14^(+)单核细胞表面PD-L1表达及三者联合诊断肾细胞癌骨转移的曲线下面积分别为0.722、0.721、0.718、0.915,三项联合高于单独诊断肾细胞癌骨转移效能(Z=5.458、5.094、5.022,P均<0.001)。结论肾细胞癌骨转移患者外周血CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞表面PD-1表达率及CD14^(+)单核细胞表面PD-L1表达率均增高,且与肾细胞癌骨转移发生有关。

人源性RUNX相关转录因子1在肾癌中的表达及生物学功能

目的人源性RUNX相关转录因子1(RUNX 1)在肾癌中的作用报道较少。文中旨在研究RUNX1基因在肾癌中的表达及生物学功能。方法从GEO数据库下载GSE66272肾癌芯片原始CEL文件,包括肾癌及癌旁组织样本,利用R软件对组织样本基因进行差异表达分析。选取2015年1月至2019年6月南通大学附属医院泌尿外科20份肾癌组织标本,另取对应癌旁组织标本。基因芯片分析RUNX 1在肾癌组织中的表达。小干扰RNA转染786-O细胞株,敲低RUNX1基因,将细胞分为:siRNA1组(转染si-RUNX1的siRNA1序列)、siRNA2组(转染si-RUNX1的siRNA2序列)、siRNA3组(转染si-RUNX1的siRNA3序列)、对照组(对照序列空载体siRNA转染)。实时定量PCR测定RUNX 1含量;细胞克隆形成实验统计细胞克隆形成数量;MTT法检测786-O细胞增殖活性;Transwell肿瘤细胞侵袭实验分析细胞迁移数量;Western blot检测蛋白水平变化。结果RUNX 1在肾癌组织中的表达水平(1.95±0.09)显著高于癌旁组织(0.62±0.05),差异有统计学意义(P<0.01)。siRNA1组、siRNA2组、siRNA3组的siRNA敲减效率显著低于对照组(P<0.01)。MTT检测结果显示,siRNA1组较对照组显著抑制786-O肾癌细胞的增殖(P<0.01)。克隆形成结果显示,siRNA1组786-O肾癌细胞的集落形成效率较对照组显着降低(P<0.003)。siRNA1组的细胞过膜数量[(98.67±3.53)个/视野]明显低于对照组[(143.3±8.74)个/视野],差异有统计学意义(P<0.01)。Western blot结果显示,siRNA1组RUNX1、N-cadherin、MMP9、p-AKT及p-GSK3β较对照组明显下降,E-cadherin明显增加。结论RUNX1在肾癌组织的高表达可促进肾癌细胞的增殖和迁移,故RUNX 1可作为肾癌的潜在临床诊治靶点及预后标志物。

肺腺癌转移相关转录因子1在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义

目的 分析口腔鳞状细胞癌组织中长链非编码RNA(lncRNA)肺腺癌转移相关转录因子1(MALAT1)的表达及其临床意义。方法收集口腔鳞癌组织标本81例和正常口腔黏膜组织20例,分别设为口腔鳞癌组和健康对照组。采用RT-PCR方法检测2组组织中lncRNA MALAT1表达情况,统计分析lncRNA MALAT1表达与病理资料特征的关系,Kaplan-Meier分析lncRNA MALAT1表达和生存预后间的关系。结果与健康对照组相比,lncRNA MALAT1在口腔鳞癌组中表达明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);口腔癌组织中lncRNA MALAT1的相对表达量在不同肿瘤分期、肿瘤分化程度和有无颈部淋巴结转移间比较,差异均有统计学意义(P<0.05);而在不同年龄、性别、肿瘤大小及肿瘤类型间比较,差异均无统计学意义(P>0.05);lncRNA MALAT1高表达组和低表达组患者的3年总体生存率(OS)分别为45.9%(17/37)、65.9%(29/44),Kaplan-Meier生存分析(log-rank检验)表明MALAT1高表达组患者3年OS显著低于MALAT1低表达组患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论口腔鳞癌组织中lncRNA MALAT1表达增高,其表达水平与口腔鳞癌患者的不良预后有关,在口腔鳞癌组织中检测其表达可能有助于肿瘤的诊断及作为药物治疗的靶点。

MCPIP1和TRAF6水平与肾细胞癌患者远端转移风险及预后的关系

目的探讨单核细胞趋化蛋白-1诱导蛋白-1(MCPIP1)和肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)水平与肾细胞癌(RCC)患者远端转移风险及预后的关系。方法选取2017年3月至2020年4月河北省秦皇岛市第二医院收治的223例RCC患者作为研究对象,根据是否发生远端转移将患者分为远端转移组(69例)和无远端转移组(154例)。比较远端转移组和无远端转移组临床资料。以RCC患者血清MCPIP1和TRAF6平均值为临界值,将患者分为MCPIP1高表达组、MCPIP1低表达组和TRAF6高表达组、TRAF6低表达组。采用Pearson相关分析RCC患者血清MCPIP1、TRAF6水平之间及二者与碱性磷酸酶水平的相关性。采用多因素Logistic回归分析RCC患者发生远端转移的危险因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清MCPIP1、TRAF6对RCC患者发生远端转移的诊断价值。采用Kaplan-Meier分析血清MCPIP1和TRAF6水平与RCC患者预后的关系。结果远端转移组血清MCPIP1水平低于无远端转移组,TRAF6水平高于无远端转移组,差异均有统计学意义(P<0.05)。远端转移组和无远端转移组TNM分期、碱性磷酸酶水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,MCPIP1水平降低、TRAF6水平升高、TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期、碱性磷酸酶水平升高为RCC患者发生远端转移的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,2项指标联合诊断RCC患者发生远端转移的曲线下面积(AUC)为0.940,显著高于单项检测的AUC(Z_(MCPIP1-联合)=2.217,P=0.027;Z_(TRAF6-联合)=5.481,P<0.001)。Pearson相关分析结果显示,RCC患者血清MCPIP1水平和TRAF6水平呈显著负相关(r=-0.459,P<0.001),血清MCPIP1水平与碱性磷酸酶水平呈负相关(r=-0.443,P<0.001),TRAF6水平与碱性磷酸酶水平呈正相关(r=0.471,P<0.05)。Kaplan-Meier曲线分析结果表明,MCPIP1高表达组3年累积生存率显著高于MCPIP1低表达组(χ^(2)=12.625,P<0.001),TRAF6高表达组3年累积生存率显著低于TRAF6低表达组(χ^(2)=10.128,P=0.001)。结论RCC转移患者血清MCPIP1水平降低,TRAF6水平升高,与发生RCC转移和预后不良有关。

长链非编码RNA转移相关肺腺癌转录本1及微小RNA-874对气道平滑肌细胞功能改善的调控

目的探讨长链非编码RNA转移相关肺腺癌转录本1(lncRNA MALAT1)与微小RNA-874(miR-874)在血小板衍生因子(PDGF)-BB处理的气道平滑肌细胞(ASMCs)中的表达与功能。方法采用PDGF-BB处理ASMCs建立哮喘细胞模型。将ASMCs分为正常培养的对照组(Control组)、PDGF-BB处理的PDGF-BB组[再根据处理时间分为PDGF-BB(6 h)组、PDGF-BB(12 h)组、PDGF-BB(28 h)组、PDGF-BB(24 h)组)]、PDGF-BB处理的转染sh-MALAT组(PDGF-BB+sh-MALAT组)、PDGF-BB处理的转染sh-NC组(PDGF-BB+sh-NC组)、PDGF-BB处理的转染miR-874 mimics组(PDGF-BB+miR-874 mimics组)、PDGF-BB处理的转染miR-NC组(PDGF-BB+miR-NC组)、PDGF-BB处理的共转染sh-NC与miR-NC组(PDGF-BB+sh-NC+miR-NC组)、PDGF-BB处理的共转染sh-MALAT1与miR-NC组(PDGF-BB+sh-MALAT1+miR-NC组)、PDGF-BB处理的共转染sh-MALAT1与miR-874 inhibitor组(PDGF-BB+sh-MALAT1+miR-874 inhibitor组)。将MALAT-WT或MALAT-MUT序列和miR-874 mimics或miR-NC共同转染入psi-CHECK2荧光素酶报告载体中,并将共转染的细胞分为miR-874 mimics+MALAT-WT组、miR-NC+MALAT-WT组、miR-874 mimics+MALAT-MUT组和miR-NC+MALAT-MUT组。采用RT-PCR检测MALAT1、miR-874表达水平,采用CCK-8法检测吸光度值代表细胞增殖能力,采用Transwell实验计算迁移细胞数代表细胞迁移能力,采用ELISA试验检测IL-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平。使用在线数据库starbase预测MALAT和miR-874之间的潜在结合位点,采用双荧光素酶报告系统检测各组ASMCs中荧光素酶活性。结果Control组、PDGF-BB(6 h)组、PDGF-BB(12 h)组、PDGF-BB(18 h)组及PDGF-BB(24 h)组细胞MALAT1相对水平依次升高,miR-874相对水平依次降低(P<0.05)。与Control组比较,PDGF-BB组、PDGF-BB+sh-NC组及PDGF-BB+sh-MALAT1组、PDGF-BB+miR-NC组及PDGF-BB+miR-874 mimics组细胞增殖能力、迁移能力及细胞上清液中IL-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平均明显增强;与PDGF-BB组比较,PDGF-BB+sh-MALAT1组及PDGF-BB+miR-874 mimics组细胞上述能力与指标水平均明显降低(P<0.05)。与miR-NC+MALAT1-WT组细胞比较,miR-874 mimics+MALAT1-WT组细胞荧光素酶活性显著降低;与Control组比较,转染sh-MALAT1后细胞miR-874表达水平明显升高(P<0.05)。与sh-NC+miR-NC组比较,PDGF-BB+sh-NC+miR-NC组、PDGF-BB+sh-MALAT1+miR-NC组和PDGF-BB+sh-MALAT1+miR-874 inhibitor组细胞增殖能力与迁移能力均明显升高;与PDGF-BB+sh-NC+miR-NC组比较,PDGF-BB+sh-MALAT1+miR-874 inhibitor组细胞上述能力均明显降低(P<0.05)。结论通过降低细胞增殖、迁移和炎症因子分泌可抑制MALAT1/miR-874轴表达,在PDGF-BB诱导的ASMCs中发挥保护作用。

甲状腺转录因子1细胞角蛋白7细胞角蛋白20联合检测在原发性肺腺癌和转移性肺腺癌中的诊断价值

肺,因血供丰富,常常是其它脏器恶性肿瘤转移最常见的部位之一,其中腺癌可能来自胃肠道、乳腺等,未知原发部位的转移性肺腺癌占所有肺癌的3%~5%[1]。一些腺癌转移至肺脏时仍然表达“原发组织器官特征”的标志物,借助有效的抗体组合可以进行鉴别诊断。最近的研究显示免疫组化标志物甲状腺转录因子1(TTF-1)、细胞角蛋白(CK)7、CK20在鉴别诊断中有价值。

外周血中肺腺癌转移相关转录本1对口腔鳞状细胞癌的临床诊断价值

目的:探讨外周血中肺腺癌转移相关转录本1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1,MALAT1)对口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)的临床诊断价值。方法:采用荧光定量RT-qPCR方法检测OSCC患者术前外周血样本及配对术后癌组织中MALAT1的表达。结果:MALAT1在OSCC患者外周血中的平均表达水平明显高于健康志愿者(1.845±0.142 vs. 0.642±0.090,P<0.001);MALAT1在外周血中的表达水平与配对癌组织成正相关,相关系数为0.783(P<0.001);MALAT1在外周血中的表达水平与肿瘤TNM分期(P=0.001)及细胞分化程度相关(P=0.010);MALAT1对OSCC诊断的ROC曲线下面积为0.892,当截断值为0.788时,其诊断灵敏度为85%,特异度为81%。结论:MALAT1对OSCC具有较好的临床诊断价值,有望成为OSCC疾病诊断、预后判断的血清分子标志物。

肺腺癌转移相关转录子-1和核因子-κB在食管鳞癌组织中的表达及其相关性

目的:研究肺腺癌转移相关转录子-1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1,MALAT-1)和核因子-κB(NF-κB)在食管鳞状细胞癌(鳞癌)组织中的表达及其相关性。方法:采用qRT-PCR技术检测60例食管鳞癌组织和癌旁组织中MALAT-1和NF-κB的mRNA水平的表达,免疫组化SP方法检测NF-κB的蛋白表达水平。统计分析MALAT-1及NF-κB与患者临床病理特征之间的关系以及两者的相关性。结果:MALAT-1和NF-κB mRNA在60例食管鳞癌组织中的表达均高于癌旁组织(Z=-3.600,P<0.001;Z=-2.856,P<0.05),且NF-κB蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达率显著高于癌旁组织(χ2=36.39,P<0.001)。MALAT-1、NF-κB的表达均与食管鳞癌的分化程度、淋巴结转移以及TNM分期密切相关(P<0.05)。MALAT-1与NF-κB之间存在正相关(r=0.795,P<0.001)。结论:长链非编码RNA MALAT-1可能在食管鳞癌的发生发展中发挥重要作用。

肺腺癌转移相关转录本-1沉默对喉癌细胞增殖、凋亡及丝氨酸苏氨酸蛋白激酶通路的影响

目的 探讨RNA干扰技术(RNAi)沉默肺腺癌转移相关转录本-1(MALAT-1)基因对喉癌细胞增殖、凋亡及丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号通路影响。方法体外培养人喉癌细胞Hep-2、正常永生化表皮细胞Hacat,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中MALAT-1mRNA表达水平。采用RNAi技术将MALAT-1阴性对照质粒、si-MALAT1分别转染至Hep-2细胞,命名为si-NC组、si-MALAT1组,未处理组作为空白对照组,分别检测三组Hep-2细胞中MALAT-1及B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bax、caspase-3mRNA表达水平、Bcl-2、Bax、caspase-3、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)及其磷酸化蛋白(p-PI3K)、Akt及其磷酸化蛋白(p-Akt)蛋白表达情况以及细胞增殖及凋亡情况。结果 与正常细胞相比,喉癌Hep-2细胞中MALAT-1mRNA表达水平(3.24±1.02)升高(P<0.05);与空白对照组、si-NC组相比,si-MALAT-1组Hep-2细胞中MALAT-1mRNA表达水平(0.47±0.08)及Bcl-2mRNA(0.56±0.09)及蛋白(0.31±0.05)表达降低,细胞增殖抑制率及凋亡率[(20.48±3.41)%]均升高,Bax、caspase-3mRNA(3.02±0.50、2.58±0.43)及蛋白表达(0.86±0.14、0.94±0.16)均升高,p-PI3K、p-Akt蛋白表达(0.57±0.10、0.51±0.08)均降低(P均<0.05)。结论 MALAT-1沉默可抑制人喉癌细胞系Hep-2细胞增殖并提高其凋亡率,推测可能通过影响Akt信号通路诱导癌细胞凋亡。

血浆长链非编码RNA转移相关肺腺癌转录因子1对肺癌临床诊断价值

目的探讨血浆中长链非编码RNA转移相关肺腺癌转录因子1(MALAT1)对肺癌临床诊断意义。方法分别检测84例肺癌患者(34例腺癌、26例鳞癌、24例小细胞性肺癌)和60例体检健康者血浆中MALAT1、癌胚抗原(CEA)、CK19片段(CYFRA21-1)、鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达水平,通过logistic回归分析和受试者工作曲线(ROC曲线)分析其灵敏度、特异度等指标。结果MALAT-1在肺癌患者血浆中比健康对照组的表达水平高(P<0.01);当临界点(cutoff值)为0.03时,MALAT-1在腺癌中阳性率为70.59%,其诊断肺癌时AUC、灵敏度和特异度分别为0.70、58.33%、81.67%。MALAT-1、NSE和CYFRA21-1三者联合检测肺癌及小细胞性肺癌的AUC分别为0.91、0.98,灵敏度分别为82.14%、95.83%,特异度分别为85.00%、93.33%。MALAT-1在腺癌中AUC、灵敏度和特异度分别为0.81、76.47%、83.33%。结论 MALAT-1可作为肺癌,特别是肺腺癌血清学诊断独立标志物,MALAT-1、NSE和CYFRA21-1三指标联合可显著提高肺癌及不同肺癌病理类型的诊断效能。

KLF6通过调控E2F1转录抑制肾透明细胞癌细胞转移

肾癌是泌尿系统常见的恶性肿瘤，发病率较高，约占全身恶性肿瘤的4．2％。50％以上的肾癌患者早期并无特异性症状，发现时多已进入中晚期，而且约1／3的患者已有转移。转移后肾癌患者预后尤其不佳，5年生存率仅有10％。为了明确肾癌侵袭转移的相关分子机制，我们对转移性。肾透明细胞癌（clear cell renal caicinoma, ccRCC）患者样本进行了基因芯片筛选，发现一种在人类很多肿瘤的发生和转移过程中都发挥着重要作用的肿瘤抑制因子——KLF6，其在原发性转移性CCRCC中表达下调。

长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1表达影响裸鼠骨肉瘤增殖的病理改变

目的探讨长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1(MALAT-1)表达对裸鼠皮下植入的骨肉瘤增殖和病理学形态的影响。方法使用慢病毒感染构建MALAT-1稳定低表达的骨肉瘤U2OS细胞系,qPCR法验证MALAT-1表达的改变。将12只4~6周龄的雄性裸鼠随机平均分为实验组和对照组,实验组皮下植入MALAT-1稳定低表达的骨肉瘤U2OS细胞,对照组皮下植入空载慢病毒处理的骨肉瘤U2OS细胞。分别在植入后第3、6、9、12、15、18、21天测定并记录两组裸鼠皮下骨肉瘤的体积。植瘤后第21天处死裸鼠,完整取出骨肉瘤称重,通过H-E染色观察骨肉瘤病理学形态,免疫组织化学染色观察增殖细胞核抗原(PCNA)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果与对照组相比,实验组的肿瘤生长更慢,植瘤21 d后的体积、质量均小于对照组(P均<0.01)。H-E染色结果显示,实验组肿瘤基质成分增多,肿瘤细胞密集程度降低。免疫组织化学染色结果显示,实验组PCNA阳性染色积分光密度(IOD)中位数为8531.03、阳性细胞占比为29.3%(1758/6000),对照组IOD中位数为27548.23、阳性细胞占比为56.5%(3392/6000),实验组PCNA表达程度较对照组下降,差异均有统计学意义(P均<0.05);实验组VEGF阳性染色IOD为18179.490±18299.433、阳性细胞占比为51.0%(3063/6000),对照组IOD为15850.632±9341.063、阳性细胞占比为50.0%(3001/6000),两组VEGF表达程度差异无统计学意义(P均>0.05)。结论抑制骨肉瘤中长链非编码RNA MALAT-1的表达可以延缓肿瘤的生长,降低肿瘤的侵袭性,促进实体瘤中肿瘤细胞的坏死。

前列腺癌“劫持”肿瘤相关成纤维细胞通过外泌体MALAT1调控糖代谢重编程的机制研究

目的:阐明外泌体转移性肺腺癌相关转录因子1(MALAT1)介导的前列腺癌(PCa)细胞与癌相关成纤维细胞(CAFs)间相互作用,探究CAFs来源的外泌体MALAT1在PCa糖代谢重编程中的作用及其机制。方法:分析肿瘤基因组图谱(TCGA)资料,探讨MALAT1在多种肿瘤中的表达模式,尤其是其与PCa的临床关联性。运用单细胞RNA测序(scRNA-seq)及相关技术,研究MALAT1在介导PCa细胞与CAFs之间相互作用的机制。过表达CAFs细胞中的MALAT1,提取上清外泌体,并与PCa细胞共培养,通过RNA纯化的染色质分离—质谱(ChIRP-MS)等方法,研究外泌体MALAT1在PCa进展中的功能及作用机制。结果:利用TCGA数据集进行分析,观察到MALAT1与前列腺腺癌、乳腺浸润癌、胆管癌等多种肿瘤恶性程度相关,且与PCa不良预后相关。scRNA-seq分析显示,PCa肿瘤微环境细胞中的CAFs不仅存在PCa分子标记物KLK3,而且MALAT1在CAFs中的表达显著高于PCa细胞,提示PCa细胞能够“驯化”CAFs,并通过CAFs中MALAT1促进PCa进展。进一步地,共培养和ChIRP-MS实验发现外泌体MALAT1通过与PCa糖代谢关键酶的直接结合调控PCa的能量代谢。ChIRP-MS和RNAseq联合分析发现外泌体MALAT1能够与4个糖酵解关键基因(GPI、ALDOC、PGK1、ALDOA)直接结合,从而调控PCa细胞的糖代谢重编程。结论:PCa细胞能够“驯化”CAFs,并通过CAFs释放外泌体MALAT1直接作用于PCa糖酵解关键分子,从而调控糖代谢重编程加速PCa发展。

血清CTSB、lncRNA MALAT1水平与脓毒症相关急性肾损伤严重程度的关系及预后预测价值

目的探讨脓毒症相关急性肾损伤(SA-AKI)患者血清组织蛋白酶B(CTSB)、长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1(lncRNA MALAT1)水平与病情严重程度的关系及其对预后的预测价值。方法选取2021年1月至2023年1月德阳市人民医院收治的80例SA-AKI患者为SA-AKI组,另选取同期80例单纯脓毒症患者为单纯脓毒症组,根据病情严重程度将SA-AKI患者分为1期(22例)、2期(27例)、3期(31例),并根据28 d临床结局分为死亡组(35例)和存活组(45例)。采用酶联免疫吸附试验和实时荧光定量PCR检测血清CTSB与lncRNA MALAT1水平,多因素Logistic回归分析SA-AKI患者预后不良的影响因素,受试者工作特征曲线分析血清CTSB、lncRNA MALAT1水平对SA-AKI患者死亡的预测价值。结果与单纯脓毒症组比较,SA-AKI组血清CTSB、lncRNA MALAT1水平升高(P<0.05)。1期、2期、3期SA-AKI患者血清CTSB、lncRNA MALAT1水平依次升高(P<0.05)。80例SA-AKI患者28 d病死率为43.75%。AKI分期3期、急性生理学和慢性健康状况评价Ⅱ评分、序贯器官衰竭评估评分、血乳酸、CTSB、lncRNA MALAT1升高为SA-AKI患者死亡的独立危险因素(P<0.05)。血清CTSB联合lncRNA MALAT1水平预测SA-AKI患者死亡的曲线下面积为0.894,大于血清CTSB、lncRNA MALAT1水平单独预测的0.797、0.793(P<0.05)。结论SA-AKI患者血清CTSB、lncRNA MALAT1水平升高与病情加重和预后不良密切相关,血清CTSB联合lncRNA MALAT1水平对SA-AKI患者预后的预测价值较高。

长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1及其在肿瘤转移中的作用

肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)是一种长度约8 000 nt的长链非编码RNA(lncRNA),其在3'端构成"三螺旋"结构,保护自身免遭降解,在功能上一定程度取代了多聚腺苷酸[poly(A)]。MALAT1的表达受到TAR DNA结合蛋白43(TDP-43)、DiGeorge综合征危象区基因8蛋白(DGCR8)及后垂体激素等多个不同层面的调控。MALAT1介导包括丝氨酸/精氨酸(SR)蛋白向具有转录活性的基因位点聚集,从而控制选择性剪切;也可导致生长基因改变核内位置,有效激活转录单元。此外,癌细胞中MALAT1呈高水平表达,并与Wnt/β-连环蛋白信号通路、Bcl-2家族等密切关联,是癌细胞侵袭和转移的重要因素。同时,MALAT1通过MYB相关蛋白B(B-MYB)和异质核糖核蛋白C(hnRNP C)影响细胞周期和有丝分裂,造成癌细胞增殖。lncRNA无论作为癌症诊断和预后标志物,还是新型治疗靶点,都将为癌症的诊断和治疗带来新的突破口。

MARCCT-1调控HIF-2α促进肾细胞癌增殖及转移的机制研究

目的探究人肾癌转移相关转录本(metastasis associated renal cell carcinoma transcription-1,MARCCT-1)对肾细胞癌细胞缺氧诱导因子-2α(hypoxia inducible factor-2α,HIF-2α)表达水平、肾细胞癌增殖及转移能力的影响。方法体外采用慢病毒转染技术干扰MARCCT-1的人肾癌细胞系A498,荧光定量聚合酶链反应检测干扰水平,细胞计数试剂-8(CCK-8)试剂盒及克隆形成实验检测干扰细胞系增殖能力变化,Transwell侵袭实验检测干扰细胞系侵袭能力变化,划痕修复实验检测干扰细胞系迁移能力变化,蛋白质印迹法检测HIF-2α表达水平。结果 MARCCT-1干扰细胞表达水平显著低于对照细胞(P<0.05),相对增殖能力在48、72、96小时均显著低于对照细胞(P<0.05),克隆形成面积和修复面积均显著小于对照细胞(P<0.05),穿透基底膜的细胞数量显著少于对照细胞(P<0.05)。MARCCT-1干扰细胞HIF-2α表达明显低于对照细胞(P<0.05)。结论 MARCCT-1可通过促进人肾癌细胞HIF-2α的表达,增强其增殖转移能力,是肾细胞癌重要的促癌因子。