参术胶囊治疗脾虚胃癌转移鼠模型的基因表达谱研究

目的:研究脾虚胃癌转移鼠模型的分子生物学特征;参术胶囊治疗脾虚胃癌转移鼠模型的基因表达谱变化,分析其治疗脾虚胃癌的分子机理。方法:在将BALB/c-nu/nu小鼠采用食醋法建立脾气虚证动物模型的基础上用外科原位移植方法,建立脾虚胃癌转移鼠病证结合动物模型;用基因芯片分别检测脾虚胃癌转移鼠模型组和胃癌细胞株,脾虚胃癌转移鼠模型组和空白对照组,参术胶囊治疗组和模型组,阳性药物的基因差异表达。结果:脾虚胃癌转移鼠模型中95条基因差异表达与代谢、免疫、离子通道和运输蛋白等有关;参术胶囊能逆向调节因脾虚胃癌引起的9条基因(代谢相关基因、离子通道和运输蛋白)的差异表达。结论:脾虚因素加重了脾虚胃癌的病情;参术胶囊是从多靶点出发来治疗脾虚胃癌和改善症状的。

参术胶囊对脾虚胃癌转移鼠胃癌细胞形态影响的研究

目的研究参术胶囊对脾虚胃癌转移鼠动物模型胃癌细胞形态的影响,探讨参术胶囊抗脾虚胃癌转移的作用机理。方法在建立裸鼠脾虚胃癌转移病证结合动物模型基础上,采用HE染色方法研究参术胶囊对脾虚胃癌转移鼠动物模型癌细胞分化的影响。结果参术胶囊对胃癌组织细胞分化有明显调控作用。结论参术胶囊具有改善瘤细胞的异型性,诱导胃癌组织细胞重新分化的作用,这可能是参术胶囊抗脾虚胃癌转移的作用机制之一。

肿瘤模型的最新进展——“转移鼠”模型

理想的肿瘤模型应该能够移植大多数人类肿瘤,并且移植瘤在宿主体内以类似于病人的方式展示其恶性行为。只有这样的模型才适用于患者的治疗设计和对新的抗瘤因子评估。面对这一要求,最新发展的“转移鼠”肿瘤模型,它能容许人类肿瘤完整地表达其转移潜能,是近年该领域最引人注目的进展。

茶多酚联合5-aza-CdR对高转移性肝癌小鼠的影响

目的探讨联合应用TP与5-aza-CdR对高转移性肝癌小鼠肿瘤细胞生物学特性及小鼠生存率的影响。方法将移植成功肿瘤的小鼠根据用药方法不同随机分成4组,即A、B、C、D组。每组12只,同时选择阴性对照小鼠12只,实验后取肿瘤细胞体外进行黏附、侵袭和迁移率及检测CDH1蛋白表达实验,体内实验则取肺、淋巴结检查远处转移情况;取肝组织检查局部侵袭情况,并测量肿瘤体积大小。结果E-cad蛋白表达下降是与CDH1启动子区存在甲基化状态有密切关系,体外研究发现B组与C组在黏附、侵袭、迁移率、死亡、肿瘤体积等各项指标均无统计学差异(P>0.05),与B组比较,D组细胞体外黏附、侵袭、迁移率未见差异,但肿瘤体积却明显下降。体内实验发现B、C两组发生死亡、局部侵袭和肺、淋巴结转移上差异无显著性(P>0.05);与B组比较,D组死亡发生率明显下降,但局部侵袭和肺、淋巴结转移率上差异无显著性(P>0.05)。与对照组比较,A、B、C、D组在死亡、局部侵袭和肺、淋巴结转移发生率均有统计学差异(P<0.05)。结论高转移性肝癌小鼠CDH1启动子区甲基化直接导致E-cad蛋白表达下降,从而导致侵袭性、转移性、死亡率的提高,应用5-aza-CdR可以逆转这种状态,联合应用TP可以降低5-aza-CdR用量却不改变治疗效果,TP没有降低肿瘤细胞侵袭、转移的功能。

VEGF启动子介导鼠α1,3半乳糖基转移酶表达及其对缺氧的人肝癌细胞HepG2的靶向杀伤效应

目的:利用血管内皮生长因子(VEGF)基因启动子介导鼠α1,3半乳糖基转移酶(α1,3GT)在缺氧肝癌细胞HepG2中靶向表达并检测其诱导的人血清天然抗体对肝癌细胞的杀伤效应,为肝癌的靶向基因治疗方法提供新的思路。方法:利用PCR从Balb/c小鼠肝组织中扩增出小鼠VEGF基因启动子片段并插入到荧光素酶报告载体中;用所构建的荧光素酶报告载体瞬时转染HepG2细胞;经缺氧诱导后检测转染细胞中荧光素酶活性;进一步通过基因重组构建受VEGF基因启动子调控的鼠α1,3GT重组逆转录病毒载体并稳定转染HepG2细胞;转染细胞在缺氧条件下培养后,通过CDCC试验检测人血清对转染细胞的杀伤效应。结果:在转染重组有VEGF基因启动子的荧光素酶报告载体的HepG2中,荧光素酶的活性是对照组的2-3倍;通过CDCC实验发现转染有鼠α1,3GT重组逆转录病毒载体的HepG2细胞经缺氧培养后对人血清的杀伤效应更加敏感。结论:利用VEGF基因启动子介导鼠α1,3GT在缺氧肿瘤细胞中靶向表达并诱导人血清天然抗体对肿瘤细胞产生杀伤效应在肿瘤的靶向基因治疗中具有潜在的临床应用价值。

针药合用刺激嗅觉系统对血管性痴呆大鼠学习记忆功能及海马ChAT、AchE活性的影响

目的:探讨针药合用刺激嗅觉系统对血管性痴呆大鼠学习记忆功能及海马ChAT、AchE活性的影响作用。方法:成年SD雄性大鼠48只。随机分为正常对照组、VD模型组、VD嗅球损毁模型组、嗅三针组、丁香酚刺激组和针药合用组,每组8只。结果:定位航行试验显示,平均逃避潜伏期和平均游泳路程比较,正常对照组明显短于VD模型组(P<0.01);嗅三针组、丁香酚刺激组和针药合用组均明显短于VD模型组(P<0.01);针药合用组短于嗅三针组、丁香酚刺激组(P<0.05);嗅三针组与丁香酚刺激组相比较,其差异无显著性意义(P>0.05);VD模型组与VD嗅球损毁模型组相比较,其差异无显著性意义(P>0.05)。海马ChAT、AchE活性比较,VD模型组明显低于正常对照组(P<0.01);嗅三针组、丁香酚刺激组和针药合用组明显高于VD模型组(P<0.01);针药合用组高于嗅三针组和丁香酚刺激组(P<0.05);嗅三针组与丁香酚刺激组之差异无显著性意义(P>0.05)。VD模型组与VD嗅球损毁模型组之差异无显著性意义(P>0.05)。结论:嗅三针和丁香酚均能够显著增强VD大鼠学习记忆功能、提高海马ChAT和AchE活性、针药合用效果更佳,其治疗效应的发挥依赖于嗅觉传导通路的完整性。

高同型半胱氨酸和高胆固醇血症联合作用对大鼠基因组DNA总甲基化状态的影响

目的:探讨高同型半胱氨酸血症(HHCY)和高胆固醇血症(HTC)联合作用对大鼠主动脉基因组DNA总甲基转移酶活力(DNMT)及总甲基化水平的影响。方法:44只健康清洁级成年Wistar雄性大鼠按2×2析因设计随机分为阴性对照组、高同型半胱氨酸(HCY)组、高总胆固醇(TC)组、高HCY+高TC组,每组11只。对照组给予普通大鼠饲料,其余各组给予相应的配方饲料。喂养3个月后心脏取血检测血清中HCY、TC等相关指标。提取主动脉基因组DNA检测基因组DNA总甲基化水平;提取主动脉核蛋白检测基因组DNA总甲基转移酶活力。结果:HHCY和HTC联合作用大鼠血清HCY较高,产生相互作用(P<0.01),表现为协同作用,而对大鼠血清TC、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)无交互作用。HHCY和HTC联合作用主动脉基因组DNA总甲基转移酶活力较高,产生相互作用(P<0.01),表现为协同作用,总基因组DNA甲基化水平降低,即去甲基化程度的增加,产生相互作用(P<0.01),表现为协同作用。结论:HHCY和HTC联合作用使得大鼠主动脉基因组DNA总DNMT活力增高,基因组DNA总甲基化水平降低,可能是AS发生发展的重要机制之一。

CXCR4在“人源性”乳腺癌骨转移小鼠模型中的表达及其意义

目的探讨趋化因子受体CXCR4在"人源性"乳腺癌骨转移小鼠模型转移骨中的表达对判断乳腺癌预后的价值。方法建立"人源性"乳腺癌骨转移小鼠模型,SCID雌性小鼠50只随机分为实验组(n=30)与对照组(n=20)。实验组小鼠背部皮下植入人骨,4周后将移植骨成活鼠随机均分A,B,C亚组,分别注射MD-MBA-231干细胞亚群1×105个/只,1×106个/只及MD-MBA-231人乳腺癌亲代细胞1×106个/只。D组鼠(阳性对照组,未植入人骨)注射MD-MBA-231人乳腺癌亲代细胞1×106个/只;E组鼠(阴性对照组,植入人骨)注射生理盐水。第8周处死所有小鼠,取人骨、鼠骨组织。用免疫组化及实时定量PCR法检测其中CXCR4的表达,并进行定量和相关性分析。结果在小鼠模型中B组骨转移率最高(77.8%,P<0.05)。B组中人骨转移灶CXCR4抗原表达高于C、D组骨中的表达(P<0.05);B组CXCR4mRNA表达水平是C组8.4倍、D组28.4倍。结论CXCR4的表达与乳腺癌发生、转移密切相关;推测其可作为判断乳腺癌患者一个有价值的预后指标。

致敏上皮内淋巴细胞过继免疫抗弓形虫感染的作用

目的：探讨致敏上皮内淋巴细胞（IEL）过继免疫抗弓形虫感染的作用。方法：将72只BALB／c小鼠随机分为供体和受体鼠各36只。将36只供体鼠再分为6组，每组6只。第1～5组的小鼠均灌服5×10^4个弓形虫速殖子，于感染后第7、9、11、13、15天，分离致敏的小肠IEL；第6组小鼠，不进行任何处理（为对照组，直接分离肠IEL）。36只受体小鼠也分为6组，1～5组经尾静脉分别注入灌服弓形虫速殖子，感染后第7、9、11、13、15天分离致敏IEL；第6组经尾静脉注入未感染的供体小鼠的IEL。各组小鼠过继转移IEL后第4天，均用5×10^4个弓形虫速殖子灌胃攻击，于攻击后第13天，分离纯化脑、肺、脾组织中的弓形虫速殖子并计数。结果：与第6组相比较，1～5组受体小鼠的脑、肺、脾组织内，弓形虫速殖子数均减少，其中第4组（接受感染第13天分离的致敏IEL）的小鼠组织内。速殖子数减少最为显著（P〈0．01），其脑、肺和脾组织内弓形虫速殖子的数比对照组分别减少81．13％、58．43％和70．97％。结论：弓形虫速殖子致敏的IEL具有明确的抗感梨作用，但IEL抗弓形虫感染的作用与分离致敏IEL的时间有关，感染后第13天分离的致敏IEL，对抗弓形虫感染的作用最强。

LTB4和BLT1在类风湿关节炎中的作用

类风湿关节炎是一种慢性的、系统性的、以关节滑膜炎为主要特征的自身免疫疾病,发病机制尚未完全明确,是临床难以治愈的疾病之一。白三烯B4(LTB4)是一种炎症脂质介体,其受体有两类分别为BLT1和BLT2。LTB4与BLT1亲和力较高,研究表明LTB4和BLT1在小鼠类风湿关节炎发病机制中具有非常关键的作用,因此探索LTB4-BLT1途径在关节炎发病中的作用及机制,可为关节炎的临床治疗提供新的方向,本文对LTB4和BLT1在类风湿关节炎的作用进行综述。