孕前超重/肥胖孕妇胎盘中长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1对母婴代谢的影响研究

背景孕前肥胖会给母体及胎儿带来一系列影响,其机制可能与母胎代谢异常有关,因此,探讨其机制对于改善胎儿预后至关重要。目的探讨孕前不同BMI孕妇胎盘中与肥胖及血糖代谢相关因子的改变。方法选取2019年在首都医科大学附属北京世纪坛医院分娩的单胎孕妇100例为研究对象,通过电子病历系统收集研究对象的临床资料,将孕妇按体质量分为孕前低体质量/正常体质量组(57例)和孕前超重/肥胖组(43例)。采用反转录-聚合酶链反应检测孕妇胎盘组织长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1(LncRNA MALAT1)、血液淀粉样抗原3(SAA3)、白介素6(IL-6)mRNA表达。结果研究对象年龄22~43岁,平均年龄(32.7±4.2)岁;其中初产妇61例,妊娠期糖尿病(GDM)患者21例,低体质量14例,正常体质量43例,超重26例,肥胖17例。孕前超重/肥胖组GDM比例、新生儿体质量高于孕前低体质量/正常体质量组,妊娠期增重低于孕前低体质量/正常体质量组(P<0.05)。孕前超重/肥胖组孕妇胎盘组织LncRNA MALAT1 mRNA表达量高于孕前低体质量/正常体质量组(P<0.05)。孕前肥胖孕妇胎盘组织中LncRNA MALAT1、SAA3、IL-6的mRNA表达量高于孕前正常体质量孕妇(P<0.05)。结论孕前过高的BMI对妊娠期母婴的影响更大,掩盖了妊娠期控制体质量增加的效果。在肥胖孕妇中,LncRNA MALAT1可能通过SAA3、IL-6调节葡萄糖和脂肪稳态,涉及炎症变化和氧化应激,从而影响胎儿代谢,值得进行更深入的探索。

肺癌骨转移患者血清lncRNA MALAT1和lncRNA A2M-AS1表达水平及临床价值

目的探究肺癌骨转移患者血清非编码RNA转移相关肺腺癌转录本1(lncRNA MALAT1)和非编码RNAα-2-巨球蛋白反义RNA 1(lncRNA A2M-AS1)表达水平及临床价值。方法选取2021年9月至2022年9月在哈励逊国际和平医院经过病理学检查确诊为肺癌的164例患者为肺癌组,其中经骨骼ECT检查发现84例者骨转移为骨转移组,80例无骨转移者为无骨转移组。同期选取80例肺部良性疾病患者为对照组。采用qRT-PCR法检测血清lncRNA MALAT1和lncRNA A2M-AS1表达水平;Pearson法分析lncRNA MALAT1和lncRNA A2M-AS1表达的相关性;ROC曲线分析lncRNA MALAT1和lncRNA A2M-AS1对肺癌骨转移的诊断价值。结果与对照组相比,肺癌组血清中lncRNA MALAT1表达水平显著升高(P<0.001),lncRNA A2M-AS1表达水平显著降低(P<0.001)。与无骨转移组相比,骨转移组血清中lncRNA MALAT1表达水平显著升高(P<0.001),lncRNA A2M-AS1表达水平显著降低(P<0.001)。相关性分析显示,肺癌骨转移患者血清中lncRNA MALAT1和lncRNA A2M-AS1表达水平呈负相关(r=-0.369,P<0.001)。lncRNA MALAT1和lncRNA A2M-AS1联合诊断肺癌骨转移的AUC高于两者单独诊断(P<0.05)。结论肺癌骨转移患者血清中lncRNA MALAT1表达水平显著升高,lncRNA A2M-AS1表达水平显著降低,两者联合对肺癌骨转移具有一定的诊断价值。

LncRNA MALAT1通过靶向miR-146a调节PI3K/Akt信号通路影响胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭

目的 探究长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)肺腺癌转移相关转录子1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1,MALAT1)通过调节miR-146a对胃癌(gastric cancer, GC)细胞的增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法 收集GC组织和配对正常胃上皮组织,将GC细胞MNK-45分为空白对照(blank control, BC)组(未转染)、MALAT1 siRNA-NC组(转染MALAT1 siRNA-NC)、MALAT1 siRNA组(转染MALAT1 siRNA)、miR-146a mimics-NC组(转染miR-146a mimics-NC)、miR-146a mimics组(转染miR-146a mimics)、MALAT1 siRNA+miR-146a inhibitor-NC组(共转染MALAT1 siRNA+miR-146a inhibitor-NC)、MALAT1 siRNA+miR-146a inhibitor组(共转染MALAT1 siRNA+miR-146a inhibitor)。定量荧光PCR(qRT-PCR)检测胃组织或细胞中MALAT1、miR-146a表达量;CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖能力;Transwell法检测细胞侵袭和迁移能力;RNA pull down实验、双荧光素酶报告实验分析MALAT1和miR-146a的结合情况;Western blot检测磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase, PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)通路蛋白及c-Myc、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)蛋白表达量。结果 转染MALAT1 siRNA可明显降低MNK-45细胞的MALAT1表达量,敲低MALAT1或过表达miR-146a可降低细胞活力、克隆能力、迁移和侵袭,增加miR-146a表达,降低PI3Kp85α、PI3Kp85β、c-Myc、MMP9蛋白表达量及p-Akt/Akt水平;MALAT1可结合并靶向下调miR-146a表达;低表达miR-146a可逆转敲低MALAT1对MNK-45细胞增殖、迁移和侵袭的抑制效应。结论 MALAT1可能作为ceRNA吸附并降解miR-146a,敲低MALAT1可上调miR-146a表达,并通过PI3K/Akt通路抑制GC细胞增殖、迁移和侵袭。

抑制长链非编码RNA MALAT1对糖脂毒性诱导的内皮细胞功能障碍的影响及可能机制

目的:探讨糖脂毒性环境中抑制长链非编码RNA(lnc RNA)人类肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)的表达水平对人脐静脉内皮细胞功能影响的分子机制。方法:用葡萄糖和棕榈酸处理人脐静脉内皮细胞,建立体外糖脂毒性内皮细胞模型,并分为对照组、高糖高脂组、高糖高脂对照组以及小干扰RNA(si-RNA)干预的高糖高脂+si-MALAT1组、高糖高脂+si-丝裂原活化蛋白激酶1(si-MAPK1)组。应用实时荧光定量PCR检测MALAT1、MAPK1的mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法检测自噬、线粒体融合分裂、凋亡、通路相关蛋白的表达水平;免疫荧光共聚焦定位检测自噬及溶酶体相关蛋白的荧光共定位情况;透射电镜观察内皮细胞中自噬溶酶体的数目;线粒体探针染色检测线粒体形态;免疫荧光检测细胞内活性氧(ROS)的产生;流式细胞仪检测各组细胞的凋亡;细胞增殖及划痕实验检测不同时间点各组细胞的增殖及迁移能力;血管形成试验检测各组细胞中新生血管数量。结果:与对照组相比,高糖高脂组、高糖高脂对照组的MALAT1 mRNA、磷酸化的丝裂原活化蛋白激酶1(p-MAPK1)的表达水平增加,磷酸化的哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)的表达水平下降,P均<0.05。与高糖高脂对照组相比,高糖高脂+si-MALAT1组微管相关蛋白1A/1B-轻链3(LC3)、螯合体1(p62)、ROS、剪切后活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved caspase-3)、BCL-2相关X蛋白(BAX)、p-MAPK1的表达水平均下降,线粒体融合蛋白视神经萎缩蛋白1(OPA1)、BCL-2、p-mTOR的表达水平均增加,P均<0.05;LC3和溶酶体相关膜蛋白2(LAMP2)蛋白的荧光共定位阳性颗粒增加(P均<0.01),溶酶体数目减少;细胞增殖、迁移、成管能力均增加(P均<0.01)。与高糖高脂对照组相比,高糖高脂+si-MAPK1组内皮细胞中p-MAPK1的表达下降,p-mTOR的表达上升(P均<0.01)。结论:抑制MALAT1表达,可降低糖脂毒性环境中线粒体的自噬水平,减少内皮细胞的凋亡及改善内皮细胞的功能,可能与调节MAPK1/mTOR信号通路有关。

血清CTSB、lncRNA MALAT1水平与脓毒症相关急性肾损伤严重程度的关系及预后预测价值

目的探讨脓毒症相关急性肾损伤(SA-AKI)患者血清组织蛋白酶B(CTSB)、长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1(lncRNA MALAT1)水平与病情严重程度的关系及其对预后的预测价值。方法选取2021年1月至2023年1月德阳市人民医院收治的80例SA-AKI患者为SA-AKI组,另选取同期80例单纯脓毒症患者为单纯脓毒症组,根据病情严重程度将SA-AKI患者分为1期(22例)、2期(27例)、3期(31例),并根据28 d临床结局分为死亡组(35例)和存活组(45例)。采用酶联免疫吸附试验和实时荧光定量PCR检测血清CTSB与lncRNA MALAT1水平,多因素Logistic回归分析SA-AKI患者预后不良的影响因素,受试者工作特征曲线分析血清CTSB、lncRNA MALAT1水平对SA-AKI患者死亡的预测价值。结果与单纯脓毒症组比较,SA-AKI组血清CTSB、lncRNA MALAT1水平升高(P<0.05)。1期、2期、3期SA-AKI患者血清CTSB、lncRNA MALAT1水平依次升高(P<0.05)。80例SA-AKI患者28 d病死率为43.75%。AKI分期3期、急性生理学和慢性健康状况评价Ⅱ评分、序贯器官衰竭评估评分、血乳酸、CTSB、lncRNA MALAT1升高为SA-AKI患者死亡的独立危险因素(P<0.05)。血清CTSB联合lncRNA MALAT1水平预测SA-AKI患者死亡的曲线下面积为0.894,大于血清CTSB、lncRNA MALAT1水平单独预测的0.797、0.793(P<0.05)。结论SA-AKI患者血清CTSB、lncRNA MALAT1水平升高与病情加重和预后不良密切相关,血清CTSB联合lncRNA MALAT1水平对SA-AKI患者预后的预测价值较高。

栀子醇提物下调lncRNA MALAT1影响帕金森病模型细胞增殖和凋亡

目的 探讨栀子醇提物对帕金森病进展的影响,并探讨其机制是否与调控长链非编码RNA(lncRNA)肺癌转移相关转录本(MALAT)1表达有关。方法 1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP~+)处理SK-N-SH构建模型帕金森病细胞模型。将SK-N-SH细胞分为对照组、模型组、实验1组(25μg/ml栀子醇提物)、实验2组(50μg/ml栀子醇提物)、实验3组(100μg/ml栀子醇提物)、si-NC组(转染si-NC)、si-MALAT1组(转染si-MALAT1)、实验3+pcDNA组(转染pcDNA联合100μg/ml栀子醇提物)、实验3+pcDNA-MALAT1组(转染pcDNA-MALAT1联合100μg/ml栀子醇提物)。细胞计数试剂盒(CCK-8)、流式细胞术和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)用于检测细胞活力、凋亡及lncRNA MALAT1表达。结果 与对照组比较,模型组细胞活力显著降低,lncRNA MALAT1表达、凋亡率显著升高(P<0.05)。与模型组比较,实验2组、实验3组细胞活力显著升高,lncRNA MALAT1表达、凋亡率显著降低(P<0.05)。与si-NC组比较,si-MALAT1组细胞活力显著升高,凋亡率显著降低(P<0.05)。与实验3+pcDNA组比较,实验3+pcDNA-MALAT1组细胞活力显著降低,凋亡率显著升高(P<0.05)。结论 栀子醇提物可促进帕金森病模型细胞增殖,抑制细胞凋亡,其机制与下调lncRNA MALAT1表达有关。

血清内脂素、LncRNA MALAT1、HbA1c水平与妊娠期糖尿病患者不良妊娠结局的相关性

目的:分析血清内脂素、长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1(LncRNA MALAT1)、糖化血红蛋白(HbA1c)水平与妊娠期糖尿病(GDM)患者不良妊娠结局的相关性。方法:选取2021年4月至2023年4月该院收治的103例GDM患者为研究对象,纳入观察组,另选取同期于本院进行产检的103名健康孕妇为对照组,检测两组血清内脂素、LncRNA MALAT1、HbA1c水平,并随访至GDM患者分娩。比较两组、不同妊娠结局GDM患者血清内脂素、LncRNA MALAT1、HbA1c水平,并采用Pearson相关性分析血清内脂素、LncRNA MALAT1、HbA1c水平与GDM患者不良妊娠结局的相关性。结果:观察组血清内脂素、LncRNA MALAT1、HbA1c水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);不良妊娠结局GDM患者血清内脂素、LncRNA MALAT1、HbA1c水平均高于正常妊娠结局GDM患者,差异有统计学意义(P<0.05);Pearson相关性分析结果显示,血清内脂素、LncRNA MALAT1、HbA1c水平与GDM患者不良妊娠结局均呈正相关(r>0,P<0.05)。结论:血清内脂素、LncRNA MALAT1、HbA1c水平与GDM患者不良妊娠结局均呈正相关。

LncRNA MALAT-1靶向microRNA-370-3p调节Akt通路对肺癌细胞生物学行为影响的机制研究

目的 探讨长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录因子-1(LncRNA MALAT-1)是否能靶向调节microRNA-370-3p(miR-370-3p)的表达,以及对Akt通路和肺癌细胞生物学行为的影响。方法 选用非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞体外培养,分别抑制LncRNA MALAT-1(转染si-MALAT-1)或过表达miR-370-3p(转染miR-370-3p mimic),抑制LncRNA MALAT-1和干扰miR-370-3p(同时转染si-MALAT-1和antimiR-370-3p),观察A549细胞的生物学行为和Akt通路蛋白的表达。qRT-PCR检测LncRNA MALAT-1、miR-370-3p mRNA的表达;MMT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;Transwell实验检测细胞迁移与侵袭;Western blotting检测Akt、p-Akt、PI3K、p-PI3K蛋白相对表达量。构建MALAT-1野生型(MALAT-1WT_1uc)与突变型(MALAT-1MUT_1uc)荧光素酶报告基因质粒并分别与miR-370-3p、miR-NC转染至A549细胞,观察荧光结合强度并检测miR-370-3p的表达。结果 抑制LncRNA MALAT-1或过表达miR-370-3p能抑制A549细胞迁移、侵袭,促进细胞凋亡,减少A549细胞活性(P <0.05),并下调p-Akt和p-PI3K蛋白的表达(P <0.05)。与单纯抑制LncRNA MALAT-1比较,抑制LncRNA MALAT-1并干扰miR-370-3p能促进A549细胞迁移、侵袭,抑制细胞凋亡,增加A549细胞活性(P <0.05),并上调p-Akt和p-PI3K蛋白的表达(P <0.05)。TargetScan靶基因预测发现LncRNA MALAT-1与miR-370-3p存在结合位点,荧光素酶报告基因实验验证发现,与MALAT-1WT_1uc+Control组和MALAT-1WT_1uc+miR NC组比较,MALAT-1WT_1uc+miR-370-3p组相对荧光强度下降(P <0.05),MALAT-1MUT_1uc+miR-370-3p荧光强度无变化(P>0.05),进一步qRT-PCR结果发现,与Control组比较,si-MALAT-1组的miR-370-3p mRNA相对表达量升高(P <0.05),与si-MALAT-1组比较,si-MALAT-1+anti-miR-370-3p组的miR-370-3pmRNA相对表达量降低(P <0.05)。结论LncRNA MALAT-1可以靶向负调控miR-370-3p。抑制LncRNA MALAT-1可以上调miR-370-3p的表达,抑制A549细胞的增殖、迁移及侵袭,促进A549细胞的凋亡,并下调Akt通路蛋白的磷酸化。

白癜风患者血清LncRNA MALAT1及miR-211-5p表达水平与临床特征的相关性分析

目的探讨长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录因子1(long non-coding RNA metastasis associated transcription factor 1 in lung adenocarcinoma,Lnc RNA MALAT1),微小核糖核酸(micro RNA,miR)-211-5p表达水平变化与临床特征的相关性。方法选取2022年1~6月河北省沧州中西医结合医院皮肤科收治的白癜风患者80例为研究对象(白癜风组),同期于该院进行体检的健康者80例为对照组。采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,q RT-PCR)法检测受试者血清中Lnc RNA MALAT1,mi R-211-5p表达水平;两组间比较采用独立样本t检验;多组间(不同临床分期、临床分型、皮损面积及病程)比较进行单因素方差分析,组间多重比较采用SNK-q检验;白癜风患者皮损面积及病程与血清中Lnc RNA MALAT1和mi R-211-5p表达水平的相关性采用Pearson法分析。结果白癜风组患者血清Lnc RNA MALAT1(1.90±0.25)表达水平高于对照组(1.02±0.13),血清mi R-211-5p(0.53±0.07)表达水平低于对照组(1.05±0.10),差异均有统计学意义(t=27.933,38.103,均P=0.000)。进展期及快速进展期血清Lnc RNA MALAT1水平均高于稳定期(2.29±0.42,2.47±0.31 vs 1.54±0.12),差异有统计学意义(t=15.000,16.766,均P<0.001)。血清mi R-211-5p水平均低于稳定期(0.28±0.09,0.22±0.06 vs 0.74±0.11),差异有统计学意义(t=24.748,25.217,均P<0.001)。寻常型血清Lnc RNA MALAT1(2.06±0.26)表达水平高于节段型(1.50±0.16),寻常型血清mi R-211-5p(0.39±0.11)表达水平低于节段型(0.86±0.21),差异有统计学意义(t=9.768,13.127,均P<0.001)。泛发型血清Lnc RNA MALAT1相对表达水平高于肢端型、局限型及散发型(2.59±0.38 vs 2.02±0.19,1.98±0.44,1.89±0.30),差异有统计学意义(t=5.559,6.038,7.375,均P<0.001)。血清mi R-211-5p水平低于肢端型、局限型及散发型(0.17±0.04 vs 0.39±0.09,0.43±0.11,0.45±0.10),差异有统计学意义(t=7.651,9.177,10.520,均P<0.001)。皮损面积<1%,1%~50%和>50%的白癜风患者血清Lnc RNA MALAT1表达水平依次升高(1.69±0.19,1.92±0.21,2.56±0.26),差异有统计学意义(t=6.424,17.408,12.312,均P<0.001);皮损面积<1%,1%~50%和>50%的白癜风患者血清mi R-211-5p表达水平依次升高(0.70±0.09,0.41±0.10,0.21±0.03),差异有统计学意义(t=18.972,22.964,9.012,均P<0.001)。Pearson相关性分析显示,白癜风患者血清Lnc RNA MALAT1与皮损面积呈正相关(r=0.576,P<0.001),血清mi R-211-5p与皮损面积呈负相关(r=-0.475,P<0.001)。病程<1年、1~3年和>3年的白癜风患者血清Lnc RNA MALAT1表达水平依次降低(1.65±0.18,1.88±0.22,2.48±0.23),差异有统计学意义(t=5.984,20.581,13.291,均P<0.001);病程<1年、1~3年、>3年的白癜风患者血清mi R-211-5p表达水平依次降低(0.68±0.11,0.53±0.10,0.21±0.04),差异有统计学意义(t=8.352,24.942,15.170,均P<0.001)。Pearson相关性分析表明,血清Lnc RNA MALAT1与病程呈正相关(r=0.344,P<0.001),血清mi R-211-5p与病程呈负相关(r=-0.433,P<0.001)。结论白癜风患者血清中Lnc RNA MALAT1表达上调,mi R-211-5p表达下调,且与皮损面积及病程等临床特征显著相关。

lncRNA MALAT1对肝星状细胞活化的调节作用及其机制

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)在肝纤维化进展过程中对肝星状细胞(HSC)活化的调节作用,并阐明其作用机制。方法:收集25例健康志愿者(健康组,n=25)和25例肝纤维化患者[轻度肝纤维化组(n=12)和重度肝纤维化组(n=13)]血清样本。小鼠HSC分为对照组、转化生长因子β1(TGF-β1)组、TGF-β1+si-NC组、TGF-β1+si-MALAT1组、TGF-β1+si-MALAT1+anti-miR-150-5p组和TGF-β1+si-MALAT1+CXCL14组。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组研究对象血清和各组HSC中MALAT1 mRNA、miR-150-5p和CXC趋化因子配体14(CXCL14)mRNA表达水平,Western blotting法检测各组研究对象血清中CXCL14蛋白表达水平和各组HSC中CXCL14、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原蛋白α1(COL1A1)蛋白表达水平,CCK-8法检测各组HSC增殖活性,免疫荧光法检测各组HSC中α-SMA和COL1A1蛋白表达量,双荧光素酶报告系统检测miR-150-5p与MALAT1和CXCL143’-UTR基因的靶向关系。结果:RT-qPCR法检测,与健康组比较,轻度和重度肝纤维化组患者血清中MALAT1 mRNA和CXCL14 mRNA表达水平升高(P<0.05),miR-150-5p表达水平降低(P<0.05);与轻度肝纤维化组比较,重度肝纤维化组患者血清中MALAT1 mRNA和CXCL14 mRNA表达水平升高(P<0.05),miR-150-5p表达水平降低(P<0.05);与对照组比较,TGF-β1组HSC中MALAT1 mRNA和CXCL14 mRNA表达水平均升高(P<0.05),miR-150-5p表达水平降低(P<0.05);与TGF-β1+si-NC组比较,TGF-β1+si-MALAT1组HSC中MALAT1mRNA和CXCL14 mRNA表达水平均降低(P<0.05),miR-150-5p表达水平升高(P<0.05);与TGF-β1+si-MALAT1组比较,TGF-β1+si-MALAT1+anti-miR-150-5p组HSC中miR-150-5p表达水平降低(P<0.05),CXCL14 mRNA表达水平升高(P<0.05);与TGF-β1+si-MALAT1组比较,TGF-β1+si-MALAT1+CXCL14组HSC中CXCL14 mRNA表达水平升高(P<0.05)。Western blotting法检测,与健康组比较,轻度和重度肝纤维化组患者血清中CXCL14蛋白表达水平升高(P<0.05);与轻度肝纤维化组比较,重度肝纤维化组患者血清中CXCL14蛋白表达水平升高(P<0.05);与对照组比较,TGF-β1组HSC中CXCL14、α-SMA和COL1A1蛋白表达水平升高(P<0.05);与TGF-β1+si-NC组比较,TGF-β1+si-MALAT1组HSC中CXCL14、α-SMA和COL1A1蛋白表达水平降低(P<0.05);与TGF-β1+si-MALAT1组比较,TGF-β1+si-MALAT1+anti-miR-150-5p组和TGF-β1+si-MALAT1+CXCL14组HSC中CXCL14、α-SMA和COL1A1蛋白表达水平升高(P<0.05)。CCK-8法检测,与对照组比较,TGF-β1组HSC增殖活性升高(P<0.05);与TGF-β1+si-NC组比较,TGF-β1+si-MALAT1组HSC增殖活性降低(P<0.05);与TGF-β1+siMALAT1组比较,TGF-β1+si-MALAT1+anti-miR-150-5p组和TGF-β1+si-MALAT1+CXCL14组HSC增殖活性升高(P<0.05)。免疫荧光检测,各组HSC中α-SMA和COL1A1蛋白表达与Western blotting法检测结果一致。MALAT1和CXCL143’-UTR与miR-150-5p存在靶向关系。双荧光素酶报告基因测定,与miR-NC组比较,与MALAT1 WT或CXCL14 WT共转染的miR-150-5p组HSC中荧光素酶活性降低(P<0.05)。结论:敲低MALAT1可抑制TGF-β1诱导HSC活化,其机制可能与miR-150-5p/CXCL14信号通路有关。

妊娠高血压疾病患者血清miR-155-5p、LncRNA MALAT1表达及与糖脂代谢关系

目的:探讨微小RNA-155-5p(miR-155-5p)、长链非编码RNA肺癌转移相关转录本1(LncRNA MALAT1)在妊娠期高血压疾病患者血清中的表达及与糖脂代谢关系。方法:选择2019年8月-2021年12月本院收治的103例妊娠期高血压疾病患者为病例组,其中妊娠期高血压患者41例、轻度子痫前期患者35例、重度子痫前期患者27例,选择同期产前检查正常孕妇40例为对照组,qRT-PCR检测血清miR-155-5p、LncRNA MALAT1表达,检测血清糖脂代谢指标水平,Pearson法分析血清miR-155-5p与LncRNA MALAT1表达相关性,及与血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)水平的相关性。结果:与对照组比较,妊娠期高血压组、轻度子痫前期组、重度子痫前期组患者血清miR-155-5p、FBG、HbA1c、TG、TC、LDL-C水平升高,且随疾病程度增加而升高,LncRNA MALAT1、HDL-C水平降低,且随疾病程度增加而降低(均P<0.05);相关性分析显示,血清miR-155-5p与LncRNA MALAT1表达呈负相关性,miR-155-5p与FBG、HbA1c、TG、TC、LDL-C呈正相关,与HDL-C呈负相关;LncRNA MALAT1与FBG、HbA1c、TG、TC、LDL-C呈负相关,与HDL-C呈正相关(均P<0.01)。结论:妊娠期高血压疾病患者血清miR-155-5p高表达、LncRNA MALAT1低表达,二者具有相关性且与糖脂代谢水平和病情严重程度相关,可能作为评估患者糖脂代谢及病情变化的标志物。

遗传信息的转录和翻译机制是怎样发现的

文章具体地介绍了遗传信息表达机制的发现过程:克里克关于序列假设、中心法则、模板RNA和连接物RNA的提出及其实验背景;信使RNA概念的形成及其转录机制的发现;转移RNA的功能及其结构的发现;在核糖体上蛋白质合成机制的确立。

长链非编码RNA转移相关肺腺癌转录本1及微小RNA-874对气道平滑肌细胞功能改善的调控

目的探讨长链非编码RNA转移相关肺腺癌转录本1(lncRNA MALAT1)与微小RNA-874(miR-874)在血小板衍生因子(PDGF)-BB处理的气道平滑肌细胞(ASMCs)中的表达与功能。方法采用PDGF-BB处理ASMCs建立哮喘细胞模型。将ASMCs分为正常培养的对照组(Control组)、PDGF-BB处理的PDGF-BB组[再根据处理时间分为PDGF-BB(6 h)组、PDGF-BB(12 h)组、PDGF-BB(28 h)组、PDGF-BB(24 h)组)]、PDGF-BB处理的转染sh-MALAT组(PDGF-BB+sh-MALAT组)、PDGF-BB处理的转染sh-NC组(PDGF-BB+sh-NC组)、PDGF-BB处理的转染miR-874 mimics组(PDGF-BB+miR-874 mimics组)、PDGF-BB处理的转染miR-NC组(PDGF-BB+miR-NC组)、PDGF-BB处理的共转染sh-NC与miR-NC组(PDGF-BB+sh-NC+miR-NC组)、PDGF-BB处理的共转染sh-MALAT1与miR-NC组(PDGF-BB+sh-MALAT1+miR-NC组)、PDGF-BB处理的共转染sh-MALAT1与miR-874 inhibitor组(PDGF-BB+sh-MALAT1+miR-874 inhibitor组)。将MALAT-WT或MALAT-MUT序列和miR-874 mimics或miR-NC共同转染入psi-CHECK2荧光素酶报告载体中,并将共转染的细胞分为miR-874 mimics+MALAT-WT组、miR-NC+MALAT-WT组、miR-874 mimics+MALAT-MUT组和miR-NC+MALAT-MUT组。采用RT-PCR检测MALAT1、miR-874表达水平,采用CCK-8法检测吸光度值代表细胞增殖能力,采用Transwell实验计算迁移细胞数代表细胞迁移能力,采用ELISA试验检测IL-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平。使用在线数据库starbase预测MALAT和miR-874之间的潜在结合位点,采用双荧光素酶报告系统检测各组ASMCs中荧光素酶活性。结果Control组、PDGF-BB(6 h)组、PDGF-BB(12 h)组、PDGF-BB(18 h)组及PDGF-BB(24 h)组细胞MALAT1相对水平依次升高,miR-874相对水平依次降低(P<0.05)。与Control组比较,PDGF-BB组、PDGF-BB+sh-NC组及PDGF-BB+sh-MALAT1组、PDGF-BB+miR-NC组及PDGF-BB+miR-874 mimics组细胞增殖能力、迁移能力及细胞上清液中IL-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平均明显增强;与PDGF-BB组比较,PDGF-BB+sh-MALAT1组及PDGF-BB+miR-874 mimics组细胞上述能力与指标水平均明显降低(P<0.05)。与miR-NC+MALAT1-WT组细胞比较,miR-874 mimics+MALAT1-WT组细胞荧光素酶活性显著降低;与Control组比较,转染sh-MALAT1后细胞miR-874表达水平明显升高(P<0.05)。与sh-NC+miR-NC组比较,PDGF-BB+sh-NC+miR-NC组、PDGF-BB+sh-MALAT1+miR-NC组和PDGF-BB+sh-MALAT1+miR-874 inhibitor组细胞增殖能力与迁移能力均明显升高;与PDGF-BB+sh-NC+miR-NC组比较,PDGF-BB+sh-MALAT1+miR-874 inhibitor组细胞上述能力均明显降低(P<0.05)。结论通过降低细胞增殖、迁移和炎症因子分泌可抑制MALAT1/miR-874轴表达,在PDGF-BB诱导的ASMCs中发挥保护作用。

子痫前期孕妇血浆外泌体中LncRNA MALAT1和miR-206的表达水平及临床意义

目的探究长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1(LncRNA MALAT1)、微小RNA-206(miR-206)在子痫前期(PE)孕妇血浆外泌体中的表达水平及临床意义。方法选取2017年1月至2019年12月在郑州市妇幼保健院住院分娩的PE孕妇42例为PE组,另选取同期在本院分娩的健康孕妇42例为对照组。根据入组PE患者病情严重程度分为轻度组22例,重度组20例。检测所有研究对象血浆外泌体LncRNA MALAT1、miR-206、血管内皮生长因子(VEGF)表达水平并进行组间比较。采用Pearson法分析PE孕妇血浆外泌体中LncRNA MALAT1、miR-206和VEGF的相关性,logistic回归模型分析PE发生的影响因素,采用受试者工作特征曲线(ROC)分析血浆外泌体LncRNA MALAT1、miR-206表达水平对PE发生的预测价值。结果与对照组比较,PE组患者血浆外泌体miR-206水平明显升高,LncRNA MALAT、VEGF水平明显降低(P<0.05)。LncRNA MALAT1、VEGF水平随PE患者病情加重有降低趋势,miR-206水平有升高趋势(P<0.05)。高miR-206水平、低LncRNA MALAT1水平是PE发生的独立危险因素(P<0.05)。LncRNA MALAT1、miR-206联合检测预测PE发生的曲线下面积为0.872,敏感度为92.86%。结论 PE患者血浆外泌体中LncRNA MALAT1呈低表达、miR-206呈高表达,两者均是PE发生的危险因素,二者联合检测对PE的诊断价值较高。

lncRNA MALAT1靶向调控miR-214在睾丸缺血再灌注损伤中的作用及其机制

目的:观察长链非编码RNA肺癌转移相关转录本1(IncRNA MALAT1)在睾丸缺血再灌注损伤(IRI)中对GC-1细胞增殖和凋亡的作用及其机制。方法:建立睾丸GC-1细胞缺氧复氧模型,qRT-PCR法检测不同复氧损伤时间点IncRNA MALAT1和微小RNA-214(miR-214)的表达变化;分别采用MTT实验、流式细胞术测定转染IncRNA MALAT1对GC-1细胞增殖和凋亡的影响;采用Western blot实验检测凋亡相关蛋白caspase-3和cytc蛋白表达;荧光素酶实验验证IncRNA MALAT1和miR-214的靶向关系,并采用qRT-PCR法检测转染IncRNA MALAT1后细胞中miR-214的表达变化。结果:IncRNA MALAT1随着复氧损伤时间的增加,其表达增高,在缺氧3 h/复氧24 h细胞上调最为明显,而miR-214的表达降低;过表达IncRNA MALAT1能显著抑制GC-1细胞增殖能力,促进细胞凋亡。沉默IncRNA MALAT1可使GC-1细胞的增殖能力增强,凋亡水平减弱;荧光素酶报告实验表明IncRNA MALAT1序列上有miR-214的结合位点。过表达IncRNA MALAT1抑制GC-1细胞miR-214表达,而沉默IncRNA MALAT1能促进miR-214表达。结论:IncRNA MALAT1可以通过靶向miR-214改变GC-1细胞的增殖和凋亡能力,从而影响睾丸IRI的发生发展。

芍药苷上调lncRNA MALAT1抑制Wnt1/β-catenin通路促进人类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞凋亡

目的探讨芍药苷(PAE)对体外培养类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞(RA-FLS)凋亡的影响及其作用机制。方法体外培养RA-FLS,噻唑蓝(MTT)法检测(20、40、80)μmol/L PAE培养24、48、72 h的细胞生存率,流式细胞术检测细胞凋亡率;合成3条长链非编码RNA转移相关肺腺癌转录本1的小干扰RNA(si-MALAT1)片段,脂质体转染48 h后,实时定量PCR检测筛选出敲除效果最佳si-MALAT1。将细胞分对照组、PAE组、si-NC组、si-MALAT1组、PAE联合si-MALAT1组。敲低MALAT1表达后,流式细胞术检测细胞凋亡率,实时定量PCR检测各组Wnt1、β联蛋白(β-catenin)、胱天蛋白酶3(caspase-3)、caspase-9、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)、Bcl2相关X蛋白(BAX)的mRNA表达;Western blot法检测各组Wnt1、β-catenin、caspase-3、caspase-9、Bcl2、BAX的蛋白表达。结果不同浓度PAE对RA-FLS均有抑制作用,相同浓度RA-FLS活力呈时间依赖性下降;与FLS对照组相比,RA-FLS组MALAT1表达下调,经PAE处理后细胞凋亡率增加;RA-FLS中si-MALAT1组细胞凋亡率最低,而PAE联合si-MALAT1组显著增高;PAE组较对照组Bcl2、Wnt1、β-catenin的mRNA表达降低,caspase-3、caspase-9、BAX的mRNA表达则升高;si-MALAT1组的Bcl2表达显著增高,PAE联合si-MALAT1组的Bcl2表达则显著下调,BAX、caspase-3、caspase-9表达显著升高。结论PAE通过上调MALAT1抑制Wnt1/β-catenin通路促进RA-FLS凋亡。

急性心肌梗死患者血清lncRNA MALAT1表达与心肌损伤、凝血功能的相关性研究

目的 探究急性心肌梗死(AMI)患者血清长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1(lncRNA MALAT1)表达与心肌损伤、凝血功能的相关性。方法 将2020年1月—2021年1月广元市中心医院确诊的313例冠心病患者分为冠心病组(n=163)和AMI组(n=150)。收集患者一般资料;采用实时荧光定量PCR法测定血清lncRNA MALAT1水平;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清心肌损伤指标肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)水平;采用全自动血凝仪检测凝血功能指标活化部分凝血酶时间(APTT)、血浆凝血酶原时间(PT)、血浆凝血酶时间(TT)水平;采用Pearson法分析血清lncRNA MALAT1水平与心肌损伤、凝血功能指标相关性;采用多因素Logistic回归分析影响冠心病患者发生AMI的影响因素。结果 与冠心病组患者比较,AMI组患者实验室指标Hs-CRP、高密度脂蛋白及血清lncRNA MALAT1水平均升高(P<0.05),其余资料比较差异无统计学意义(P>0.05);血清lncRNA MALAT1水平高表达是冠心病患者发生AMI的独立危险因素(P<0.05);与冠心病组比较,AMI组心肌损伤指标CK-MB、H-FABP水平及凝血功能指标APTT、PT、TT水平均降低(P<0.05);患者血清lncRNA MALAT1水平与心肌损伤指标CK-MB、H-FABP水平及凝血功能指标APTT、PT、TT水平均呈负相关(P<0.05)。结论 lncRNA MALAT1在急性心肌梗死患者血清中异常高表达,可能与患者心肌损伤及凝血功能异常有关。

LncRNA MALAT1在下咽鳞状细胞癌中表达及临床意义

目的:探讨血浆长链非编码RNA肺癌转移相关转录本1(LncRNA MALAT1)在下咽鳞状细胞癌中的表达水平,分析其与临床预后的关系和可能的作用机制。方法:选取手术切除的下咽癌患者35例癌组织为观察组,同时选取同一患者的癌旁组织作为对照组。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测下咽鳞状细胞癌(HSCC)组织和癌旁组织中LncRNA MALAT1的表达差异;采用免疫组化检测HSCC组织及癌旁组织中细胞外信号调节激酶(ERK)蛋白的表达水平,分析两者与临床病理特征之间的关系,结合临床随访资料,采用KaplanMeier法绘制生存曲线。结果:与对照组比较,观察组LncRNA MALAT1的表达量明显升高(P<0.05);免疫组化结果显示,观察组中ERK的表达明显高于对照组(P<0.05);LncRNA MALAT1的表达与患者TNM分期及淋巴结转移有关(P<0.05);LncRNA MALAT1高表达及低表达的5年总生存率分别为22.9%和75.00%,ERK阳性和阴性患者的5年总生存率分别为38.71%和75.00%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:LncRNA MALAT1在HSCC中高表达,可能是通过激活ERK/MAPK信号转导通路影响下咽癌的发生发展,可为HSCC的临床预后评估提供参考。

lncRNA MALAT1在糖脂代谢相关疾病中的研究进展

随着社会经济的发展以及人类物质生活条件的改善,肥胖症、2型糖尿病、血脂代谢异常以及非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)在全世界广泛流行,不仅发病率高,且呈低龄化及逐年上升趋势。长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1(lncRNA MALAT1)是一种重要的调控基因,在糖脂代谢相关疾病的进展中发挥重要作用。对lncRNA MALAT1与糖脂代谢异常相关疾病的关联性及相关发病机制的探讨分析显示lncRNA MALAT1有可能成为糖脂代谢相关疾病诊断的新靶点,为糖脂代谢相关疾病的治疗及预防提供新思路及指导。

LncRNA MALAT1、miR-155在心力衰竭患者血清中的表达及与心功能的相关性

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)、微小RNA-155(miR-155)在慢性心力衰竭(CHF)患者血清中的表达水平及其与心功能及预后的相关性。方法选取2018年9月至2019年10月诊治的103例CHF患者为CHF组,并纳入同期40例体检健康者为健康组。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定血清LncRNA MALAT1、miR-155表达水平;比较两组心功能指标左心室射血分数(LVEF)、左心室舒张末期内径(LVEDD)水平;依据美国纽约心脏病学会(NYHA)分级将CHF患者分为Ⅱ级组(44例)、Ⅲ级组(32例)、Ⅳ级组(27例),比较不同NYHA分级CHF患者血清LncRNA MALAT1、miR-155表达水平及心功能指标;Pearson法分析CHF患者血清LncRNA MALAT1、miR-155表达水平与心功能指标的相关性,及血清LncRNA MALAT1表达水平与miR-155的相关性;对CHF患者随访1年,比较不同预后CHF患者血清LncRNA MALAT1、miR-155水平;应用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清LncRNA MALAT1、miR-155水平对CHF患者预后的评估价值。结果CHF组患者血清LncRNA MALAT1表达水平、LVEDD水平均明显高于健康组(P<0.05),血清miR-155表达水平及LVEF水平明显低于健康组(P<0.05);随NYHA分级增高,CHF患者血清LncRNA MALAT1表达水平、LVEDD水平呈升高趋势(P<0.05),血清miR-155表达水平及LVEF水平呈降低趋势(P<0.05);CHF患者血清LncRNA MALAT1表达水平与LVEF、miR-155呈负相关(P<0.05),与LVEDD呈正相关(P<0.05),而血清miR-155表达水平与LVEF呈正相关(P<0.05),与LVEDD呈负相关(P<0.05);预后不良亚组CHF患者血清LncRNA MALAT1表达水平明显高于预后良好亚组(P<0.05),miR-155表达水平明显低于预后良好亚组(P<0.05);血清LncRNA MALAT1、miR-155表达水平预测CHF患者不良预后的曲线下面积(AUC)分别为0.895、0.854,截断值分别为2.09、0.43,敏感度均为89.7%,特异度分别为79.7%、81.1%;两者联合预测CHF患者不良预后的AUC为0.937,其敏感度、特异度分别为86.2%、91.9%。结论CHF患者血清LncRNA MALAT1呈高表达,miR-155呈低表达,两者均与心功能及预后显著相关,两者联合可提高对CHF患者预后的预测价值,更好的判定CHF患者预后情况。