电针对原位肝癌小鼠转轮活动节律及视交叉上核Per基因表达的影响

目的:观察电针对原位肝癌移植模型小鼠转轮活动节律的调节作用及其对视交叉上核(SCN)中核心钟基因Period(Per)1、Per 2表达的影响,探讨电针对原发性肝癌患者昼夜节律调整的作用机制。方法:雄性C 57BL/6J小鼠按6个授时因子时间(ZT)随机分为ZT 0组、ZT 4组、ZT 8组、ZT 12组、ZT 16组和ZT 20组,每组各设空白组、模型组和电针组3个亚组,每个亚组6只。肝脏局部注射H 22癌细胞株建立原位肝癌移植模型。电针组在各时间点给予电针小鼠双侧"肝俞"和"至阳",每次15min,每日1次,治疗10d。全程采用ClockLab(ACT-500)软件记录小鼠活动节律,采用MATLAB(R 2007b)导出小鼠转轮活动节律图谱,分析小鼠活动起始时间、振幅、峰相位、周期。HE染色观察肝癌组织癌变情况。实时荧光定量PCR法检测SCN内钟基因Per 1mRNA、Per 2mRNA的相对表达量。结果:肝癌小鼠活动振幅较空白组下降(P<0.05),不同时间点电针均能影响肝癌小鼠转轮活动的振幅及峰相位,尤以ZT 8电针能显著升高肝癌小鼠降低的振幅,前移滞后的峰相位(P<0.05);不同时间点电针能够不同程度下调肝癌小鼠SCN内Per 1mRNA、Per 2mRNA的相对表达量,尤以ZT 8最为显著(P<0.05)。结论:电针能够对肝癌小鼠转轮活动节律产生良性调节,且以ZT 8最佳。这一作用可能是通过下调SCN内Per 1mRNA、Per 2mRNA的相对表达量实现。

择时电针对肝癌小鼠生物节律及其视交叉上核表观遗传学修饰的影响

目的:以原位肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)小鼠为模型,观察电针对肝癌小鼠转轮活动节律的调节作用及其对视交叉上核(suprachiasmatic nucleus,SCN)内表观遗传学相关基因表达的影响,探讨电针调整肝癌患者昼夜节律的表观遗传学机制。方法:将筛选合格的108只雄性C57BL/6J小鼠按6个授时因子时间(zeitbeger time,ZT)即ZT0(7:00)、ZT4(11:00)、ZT8(15:00)、ZT12(19:00)、ZT16(23:00)和ZT20(3:00)实施干预,每个时间点设空白组、模型组和电针组,每组6只。肝脏注射H22癌细胞悬液制备肝癌小鼠模型。造模后第11天开始干预,电针组在各相应时间点给予电针小鼠"肝俞"和"至阳"穴(电针参数:2 Hz/15 Hz,0.2 m A),每天1次,每次15 min,连续电针10 d。空白组和模型组在同时间、同等条件下捆绑固定。全程采用Clock Lab(ACT-500)软件不间断记录小鼠活动节律,干预10 d后采用MATLAB(R2007b)导出小鼠转轮活动节律图谱,分析小鼠活动振幅与峰相位。选择最佳时间点干预组,采用高通量表观遗传学PCRarray阵列检测小鼠SCN部表观遗传学相关基因表达。结果:(1)造模后,与对应时间点空白组比较,模型组和电针组小鼠活动振幅下降、峰相位滞后(均P<0.05),模型组与电针组节律参数比较差异无统计学意义(均P>0.05);(2)干预后,与ZT8模型组比较,ZT8电针组小鼠活动振幅升高、峰相位前移(均P<0.05),ZT0、ZT4、ZT12、ZT16、ZT20电针组与相应时间点模型组比较活动振幅、峰相位差异无统计学意义(均P>0.05);ZT8电针组与ZT0、ZT4、ZT12、ZT16、ZT20电针组比较,活动振幅升高、峰相位前移(均P<0.05);(3)表观遗传PCRarray阵列(Epigenetic PCRarray)结果示:最佳时间点ZT8干预结束后,与空白组比较,肝癌小鼠SCN内48个表观遗传学相关基因表达上调;与模型组比较,电针下调SCN内49个表观遗传学相关基因相对表达量;3组小鼠SCN内表观遗传学相关差异表达基因有23个。结论:电针能够对肝癌小鼠转轮活动节律产生良性调节,且以15:00最佳;该时间点电针能下调肝癌小鼠SCN内异常高表达的表观遗传学相关基因。