基于水协同转运蛋白KCC1、KCC3、KCC4、NKCC1含量及Na^+ -K^+ -ATP酶活性变化研究湿阻中焦证的水液代谢机制

目的：以前期研究的水通道蛋白为平台,通过观察并分析水协同转运蛋白KCC1、KCC3、KCC4、NKCC1含量及Na~＋-K~＋-ATP酶活性变化,揭示湿阻中焦致水液代谢紊乱及平胃散对其修复作用机制的科学内涵,为中医临床治疗本证型疾病提供实验参考;同时搭建中药复方水通道调节剂的研究平台。方法：模拟＂外湿过盛,困阻脾胃、饮食不节,湿从内生、情志不遂,气机受阻、水湿不运三大致湿病因,建立湿阻中焦证模型。用蛋白定量法测定Na~＋-K~＋-ATP酶活性,用酶联免疫法（ELISA）测定肾脏组织KCC1,KCC3,KCC4,NKCC1的含量。结果：与空白组比较,模型组肾脏KCC1、KCC4含量升高,KCC3、NKCC1、Na~＋-K~＋-ATP酶活力降低,与模型组比较,自然恢复组肾脏KCC1、KCC3、NKCC1含量降低,Na~＋-K~＋-ATP酶活力明显升高（P〈0.01）,KCC4含量有上升趋势,经药物干预后,各给药组KCC1含量均明显降低（P〈0.01）,平胃散中剂量组KCC3、KCC4含量明显升高（P〈0.01）,平胃散低剂量组NKCC1含量明显降低（P〈0.01）;平胃散低剂量组肾脏Na~＋-K~＋-ATP酶活力明显升高（P〈0.01）;呋塞米组和平胃散加泽泻组KCC1、KCC3、KCC4、NKCC1含量及Na~＋-K~＋-ATP酶活性均明显降低,差异有统计学意义（P〈0.01）;与自然恢复组比较,平胃散中剂量组肾脏KCC1、KCC3、KCC4含量及Na~＋-K~＋-ATP酶活力有上升趋势,平胃散低剂量组NKCC1含量下降明显（P〈0.01）,呋塞米组和平胃散加泽泻组KCC1、KCC3、KCC4、NKCC1含量及Na~＋-K~＋-ATP酶活性均明显降低,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：（1）湿阻中焦证模型不仅能够影响体内能量代谢,还能够影响KCC1、KCC3、KCC4、NKCC1含量表达,这可能是湿阻中焦导致水代谢输布障碍的机制之一;（2）平胃散能够调整Na~＋-K~＋-ATP酶活性和KCC1、KCC3、KCC4、NKCC1含量分布参与能量代谢和水液代谢调控,这可能是平胃散燥湿运脾、行气导滞、散中焦之湿阻治疗湿阻中焦证的分子机理之一;（3）水协同转运蛋白之间可能存在互补代偿机制。

脑内水转运的研究进展

脑内水的转运与许多脑功能密不可分,维持脑细胞水转运平衡是保证脑正常生理功能的基础,而各种脑损伤后脑水肿对机体可能存在致命性的影响。多种离子通道和共同转运体参与了脑内水的转运,探究与细胞水转运相关的离子通道和共同转运体可能是理解脑水肿形成机制的基础,这也是目前研究的热点。该文就脑内水跨细胞转运主要的离子通道和共同转运体的分布、功能、调控等最新研究进展进行综述。

炎调方维持肺泡上皮细胞水液代谢平衡减轻肺损伤的机制研究

目的观察炎调方调节肺泡上皮细胞钠水转运系统,维持肺泡内外液体平衡的作用和机制。方法体内实验:雄性成年SD大鼠分为模型组、炎调方组、正常对照组和假手术组,盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症模型。分别于CLP后2、8、12、24、48 h麻醉腹主动脉采血处死并留取标本进行血气分析、血清SP-D水平、肺湿重/干重(W/D)、钠水通道相关蛋白检测等。体外实验:检测炎调方药物血清对大鼠肺泡Ⅱ型细胞存活率、上清液SP-D水平、钠水通道相关蛋白表达等的影响。结果炎调方中、高剂量组均降低了脓毒症大鼠肺湿重/干重(P<0.05)。炎调方中、高剂量组均升高了脓毒症大鼠PO2(P<0.05)。炎调方低、中、高剂量组均能显著抑制模型组诱导的SP-D水平(P<0.05)。炎调方低、中、高剂量组增加钠水转运系统蛋白表达。炎调方中剂量和高剂量处理细胞12 h均显著降低了LPS诱导的SP-D水平(P<0.05)。炎调方处理细胞2 h和12 h,中、高剂量均能增加钠水转运系统蛋白表达。结论炎调方能通过调节大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞调控钠水转运系统,缓解脓毒症大鼠肺水肿。

乳果糖对便秘小鼠结肠水通道蛋白4表达的影响

便秘是消化道常见的慢性病症,随着饮食结构变化及精神、心理因素的影响,其发病呈上升趋势,严重影响着人类的身心健康,水代谢紊乱为其主要的发病环节。水通道蛋白（aquaporins,AQP）是特异性转运水的蛋白家族,参与机体水的分泌、吸收及细胞内外水平衡的调节,已有研究发现水通道蛋白3、4、8等存在于结肠,与结肠水吸收密切相关[1-3]。渗透性泻药,通过提高肠腔内渗透压,使粪便含水量增加.

血管活性肠肽对HT-29细胞水通道蛋白8表达的影响

结肠的主要功能是吸收食物残渣中的水分和盐类,使粪便成形,结肠内水分的吸收属于被动转运,但近年研究发现消化道水通道蛋白（aquaporins,AQPs）大量表达,提示经细胞途径的水分吸收机制除了简单扩散外还存在特殊跨膜转运蛋白的快速水转运机制。研究认为AQPs在肠道的异常表达导致结肠对水分的吸收和分泌紊乱,参与了腹泻和便秘的发生。

XJ-6-A抑制肿瘤生长转移作用与水孔蛋白1的关系

研究目的XJ-6-A是我室与北京大学化学院合作，根据水通道蛋白1（Aquaporin1，AQP1）的空间结构和碳酸酐酶抑制剂（Carbonic Anhydrase Inhibitor，CAI）的化学结构，借助于计算机辅助药物设计合成的具有抑制肿瘤转移潜在活性的AQP1抑制剂。XJ-6-A在20mg／kg时具有明显的抑制肿瘤生长及转移作用。XJ-6-A在剂量为0．1μM和1μM时，能明显抑制细胞水转运功能。本研究旨在进一步证实XJ-6-A抑制肿瘤生长转移作用，探讨其可能的作用机制，以期发现具有抑制肿瘤生长转移作用的AQP1抑制剂。

AQP9在组织中的分布和功能

AQP9是一种选择性水通透膜转运蛋白 ,属于主体内在蛋白家族的成员之一。AQP9不但对水具有通透性 ,而且对其它一些中性溶质也具有通透性。现已发现 ,AQP9分布在多种器官组织中。在脑组织 ,AQP9主要分布在星形胶质细胞 ,参与水的代谢和渗透压调节 ,还可能与脑的某些水代谢疾病有关。在肝脏 ,AQP9的分布有明显的性别差异 ,其功能可能与尿素清除有关。在睾丸 ,分布在生精小管和Leyding细胞 ,与液体的重吸收及雄性激素产生功能有关。研究AQP9的分子结构 ,生化特性 。

I型上皮细胞在ALI与ARDS形成与修复中的作用

在ALI与ARDS的研究过程中 ,II型肺泡上皮细胞一直受到更多的关注 ,近年来I型肺泡上皮细胞的功能与作用逐渐被重视。I型肺泡上皮细胞的功能状况影响ALI与ARDS的转归与愈后。I型肺泡上皮细胞的水转运功能受损程度决定肺水肿的肺水肿形成与转归 ,I型肺泡上皮细胞的蛋白转运功能 ,影响肺泡局部的炎症反应与组织的修复。人I型肺泡上皮细胞的特异性标志物HTI5 6的定量检测 。

花鲈aqp3a基因的克隆、表达分析及渗透调节功能研究

水通道蛋白3(AQP3)是水通道蛋白家族成员之一,在鱼类的渗透调节过程中发挥着重要作用。本研究从花鲈(Lateolabrax maculatus)中克隆出aqp3a基因,其mRNA序列长度为2058 bp,编码302个氨基酸,含有6个α跨膜螺旋和2个水通道蛋白家族的特征性天冬酰胺-脯氨酸-丙氨酸(NPA)序列。多重序列比对分析表明aqp3a基因具有高度保守性。采用枝位点模型对aqp3进行选择压力分析,结果显示aqp3在进化过程中存在4个显著的正选择位点。qRT-PCR检测结果表明,花鲈aqp3a基因在其各组织中广泛表达,且在鳃中表达显著高于其它组织。此外,还检测分析了花鲈aqp3a基因在淡水和海水驯化过程中于各时间点(0 h、12 h、1 d、3 d、7 d)在鳃组织中的表达情况。结果显示:在淡水适应过程中,花鲈aqp3a基因的表达量呈先升后降趋势,1 d时表达量显著上调并达到最大值,7 d时的表达量降低至与淡水转化前无显著差异的水平。在海水适应过程中,aqp3a基因在鳃中的表达量逐渐下降然后维持稳定。将花鲈aqp3a基因的cRNA显微注射进非洲爪蟾(Xenopus laevis)的卵母细胞中进行异源表达,卵母细胞在5 min内膨胀至初始体积的1.3~1.4倍,透水系数(Pf)约为注射蒸馏水对照组的5倍,表明花鲈aqp3a基因在水的转运和细胞体积调节中发挥着重要作用。本研究为深入了解花鲈aqp3a基因的渗透调节功能提供了理论基础,同时为其它鱼类渗透调节相关功能基因的研究提供参考。

水通道的分子生物学研究进展

生理学家很久以前就认识到,水通过细胞膜脂质双分子层的速度比水的单纯扩散方式要快,因此预见,膜上有特异转运水的孔道。到1992年,Agre及其同事终于先后完成了对AQP-CHIP水通道蛋白的分子和功能鉴定,从而使水跨细胞膜转运的生物学研究跃入一个新阶段。 迄今为止,从哺乳动物的组织中鉴定出至少6种水通道蛋白,统称aquaporins(AQPs)。AQPs存在于许多组织细胞的质膜中,功能上属于选择性水孔道的主体内在膜蛋白家族。

肺泡内水肿液清除及其干预机制的研究进展

肺泡上皮细胞的钠水转运系统由钠通道、Na^+-K^+-ATP酶和水通道等组成。肺泡内水肿液主要由钠水转运系统主动转运而重吸收。静水压性肺水肿和通透性肺水肿都可能存在肺泡内钠水重吸收障碍。对肺泡内液体重吸收的干预措施存在儿茶酚胺依赖和非儿茶酚胺依赖两类机制。儿茶酚胺依赖的β_2-受体激动剂和非儿茶酚胺依赖的糖皮质激素、甲状腺素、胰岛素、醛固酮、雌激素及生长因子等均可增加肺泡内钠水清除。