铜诱导人体转铜伴侣蛋白Atox1构象变化的研究

目的 探讨铜对Atox1蛋白构象变化的影响。方法 用圆二色性光谱分析了Atox1的构象变化。结果 结合铜以后 ,Atox1无论是二级结构 ,还是三级结构都发生了变化 ,铜诱导的构象变化对于Atox1在体内发挥其作用时可能起关键作用。

转铜伴侣的功能与结构特性

铜是生物体不可缺少的一种元素,在细胞内把铜转运到含铜的蛋白质是细胞正常代谢的基本要求。转铜伴侣在体内执行重要的生理功能,它们不但保护细胞免受游离铜离子的有害作用,而且也确保铜被运输到其特异的靶蛋白。作者综述了转铜伴侣的功能、结构特性,以及可能的金属转移机制。

人体铜伴侣蛋白Atox1在大肠杆菌中的表达

利用PCR技术扩增出人体转铜伴侣蛋白Atox1的cDNA片段 ,直接克隆到PCRII载体上 ,经DNA序列测定后 ,再插入到谷胱甘肽巯基转移酶 (GST)融合表达载体PGEX 6p 2上 ,构成重组表达质粒PGEA ,将此质粒导入大肠杆菌 ,经IPTG诱导后获得PGEA融合蛋白的表达 表达的融合蛋白经亲和层析。