转Bar基因稻谷对小鼠(Mus musculus)肠道菌群的作用研究

选取6周龄、雌雄各半、体重18～22 g的SPF级昆明小鼠（Mus musculus）100只袁随机分成5组袁每组4个重复袁每个重复5只小鼠。分别用含量为40%和60%的转Bar基因稻谷Bar68-1和非转基因稻谷D68日粮喂养小鼠袁亲代小鼠饲养180 d后开始繁殖子一代（F1）袁每代小鼠饲养180 d。在180 d后分别从亲代和子一代每组随机抽取5只小鼠袁提取肠道内容物基因组DNA袁利用细菌通用引物对细菌16S r DNA的V3区序列进行PCR扩增袁并将扩增产物用变性梯度凝胶电泳（denaturing gradient gel electrophoresis DGGE）。研究显示袁各组小鼠肠道菌群相似性系数无显著差异（P〉0.05）曰肠道主要优势菌群相同。结果表明袁转Bar基因稻谷对小鼠肠道菌群的作用不明显。

转Bar基因稻谷对小鼠肝功能若干参数的影响

通过对SPF级昆明小鼠喂食含量分别为20%、40%、60%转抗除草剂(Bar)基因稻谷,繁殖F1、F2代,并持续观察F1、F2代小鼠的日常行为、肝脏器官指数及血液生化指标,研究了转抗除草剂Bar基因稻谷对小鼠肝功能若干参数的影响。结果表明:用转Bar基因稻谷喂养并未对小鼠日常行为产生明显影响。F1、F2代供试小鼠各剂量的转基因组与常规对照组小鼠肝脏器官指数无明显差异(P>0.05)。F1代小鼠中A组和C组的白/球比、谷草转氨酶、谷丙转氨酶、碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶等指标无显著性差异(P>0.05),B组的白/球比、谷草转氨酶、谷丙转氨酶、乳酸脱氢酶等指标无显著性差异(P>0.05),但碱性磷酸酶指标出现显著性差异(P<0.05);F2代小鼠中A、B、C组白/球比、谷草转氨酶、谷丙转氨酶、碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶5项指标均无显著性差异(P>0.05)。F1、F2代A、B、C组的葡萄糖、甘油三酯和总胆固醇3项指标均无显著性差异(P>0.05)。在试验处理及时间内,与对照常规稻谷相比,用转基因稻谷喂养小鼠对其肝脏功能基本无影响。

转Bar基因稻谷全蛋白对体外培养小鼠淋巴细胞的毒性

为了评价转基因大米Bar68-1全蛋白的急性细胞毒性,分别以25、50、100和200μg·mL-1转基因大米Bar68-1全蛋白孵育昆明小鼠淋巴细胞,并各孵育2 h、6 h、24 h,然后通过体外试验用CCK-8及中性红摄取试验检测细胞毒性大小。在经过不同的孵育时间段后,阳性对照组淋巴细胞的细胞存活率与空白对照组相比,存在显著差异(p<0.05)。其中,CCK-8试验、中性红试验测得细胞存活率存在着明显的损伤作用-时间效应关系。转基因大米Bar68-1全蛋白组孵育的淋巴细胞存活率与非转基因大米D68全蛋白组孵育的淋巴细胞相比无明显差异(p>0.05),且与空白对照组细胞存活率差异不显著(p>0.05)。结果显示,转基因大米Bar68-1全蛋白与非转基因大米D68全蛋白急性细胞毒性效应相似,对小鼠淋巴细胞无明显急性毒性。

转Bar基因抗除草剂稻谷对妊娠小鼠亚慢性毒性的响应

[目的]研究转Bar基因水稻对妊娠期小鼠是否有亚慢性毒性损害及多代毒性累积。[方法]以60只18～24 g区间的SPF级昆明小鼠为试验对象,分别喂食含量为20%、40%、60%转Bar基因稻谷,并以常规D68水稻为对照,饲养90 d后合笼,自由取食、饮水并受孕繁殖F1代。在小鼠妊娠14～15 d解剖,测定孕鼠的血液生化、脏器重量及其病理学指标。[结果]转Bar基因抗除草剂稻谷对亲代孕鼠血液生化指标均无显著的影响;除喂食转基因稻谷含量为20%和40%的F1代孕鼠分别在甘油三酯和总胆固醇含量上显著高于对照组外,转Bar基因抗除草剂稻谷对F1代孕鼠血液生化的其他指标均无显著影响。转Bar基因抗除草剂稻谷对亲代、F1代孕鼠的脏器重量及其病理学指标均无显著影响。[结论]该研究表明转Bar基因水稻对亲代、F1代妊娠小鼠没有亚慢性毒性损害及多代毒性累积的影响。

PAT酶长期胁迫下小鼠遗传多态性的变化

为探测PAT酶长期胁迫下小鼠遗传多态性的变化，应用AFLP技术对饲喂转Bar基因抗除草剂稻谷子二代（ F2）小鼠遗传多态性进行了研究．36只体重18～22 g的F2代小鼠分为实验组（ Z2）和对照组（ C2），分别饲喂转Bar基因稻谷Bar68-1和非转基因稻谷D68．每组3个重复，每个重复6只小鼠，雌雄各半．6对引物组合扩增出108个AFLP条带，其中多态性条带占25．9％．在聚类图上Z2组肝脏和小肠样品与C2组肝脏和小肠样品有微小差异，但差异不明显．结果表明，PAT对小鼠肝脏和小肠的DNA多态性没有明显影响．