干旱对转Bt+CPTi基因棉花SGK36生理性状的影响

干旱对转Bt+CPTi基因棉花SGK36生理性状的影响研究表明:SGK36的叶绿素a和叶绿素b含量比新研9648偏高,在干旱初期,叶绿素a含量均快速下降,随着持续的干旱,2个品种的叶绿素a含量都有所恢复;另外,SGK36和新研9648的脯氨酸含量随着干旱时间的延长而逐渐上升,说明棉花新研9648转入Bt+CPTi基因后的抗旱性没有明显的变化。

土壤酶活性对大田单季种植转Bt基因及转双价棉花的响应

利用田间试验,以转Bt基因棉花Z30、转双价(Bt+CpTI)棉花SGK321及其相应的等价基因Z16、SY321作为供试对象,研究棉花种植后对土壤水解/氧化还原酶类活性的影响。结果表明,转Bt棉花及转双价棉花的种植对各种土壤酶活性的影响不一致,转Bt棉花及转双价棉花种植显著降低了土壤蛋白酶和脱氢酶活性(P<0.05)。转Bt棉花还显著降低了土壤脲酶活性(P<0.05);转双价棉花种植同时显著降低土壤磷酸二酯酶、β-葡萄糖苷酶、过氧化氢酶和硝酸还原酶活性(P<0.05)。棉花品种及转基因行为(转入基因类型)均未给土壤酸性磷酸单酯酶和FDA活性带来影响;土壤芳基硫酸酯酶所受的影响主要来自于棉花品种自身。

利用PLFA方法研究转Bt基因棉花对土壤微生物群落结构变化的影响

在大田条件下,用3个转Bt基因棉花品种和一个常规品种,利用磷脂脂肪酸(PLFA)方法研究转Bt基因棉花对土壤微生物群落结构变化的影响。试验结果表明,转基因棉花增加了土壤微生物PLFA的含量。转基因棉花降低了棉田土壤格兰氏阳性细菌的比例,提高棉田土壤的真核生物、真菌和放线菌的比例;转基因棉花在蕾期提高了土壤原生动物比例,在吐絮期比例反而降低;转基因棉花在蕾期提高了棉田土壤格兰氏阴性细菌的比例,吐絮期则降低了格兰氏阴性细菌的比例。主成分分析和聚类分析表明,转Bt基因棉花对土壤微生物群落结构变化有明显影响。PLFA方法可作为转基因生态安全评价的一种方法。

转Bt基因棉花对土壤微生物的影响

在大田和盆栽条件下,以转Bt基因抗虫棉晋棉26号和其具有相似遗传背景的普通棉花品种晋棉7号为材料,研究棉花不同生育期的土壤细菌、真菌、放线菌及其生理菌种的变化。结果表明,转Bt基因棉晋棉对土壤微生物种类和数量有一定的影响,在某些生育期显著高于或低于普通非转基因棉花,或者差异不显著。因此,转基因安全评价需要对土壤微生物进行评价。

转Bt基因棉花国抗62对棉铃虫生长发育的影响及田间抗虫效果

为了明确新疆第一个自主转Bt基因棉花品种国抗62对棉铃虫Helicoverpa armigera生长发育影响及田间抗虫效果,2005年进行了室内生物测定和田间小区试验。在室内以国抗62（转Cry1Ac基因棉花）和中棉35（对照常规棉花）的叶片饲喂棉铃虫幼虫,从幼虫发育历期、体重、存活率、化蛹等方面,分析了棉铃虫生长发育动态。结果表明,国抗62对棉铃虫生长发育的抑制作用非常显著。与对照相比,取食国抗62的棉铃虫幼虫1~6龄龄期分别延长了1.0,7.8,8.2,17.8,20.3和〉21.3天;幼虫发育到6龄时存活率仅为2.6%,最终无一化蛹,而对照幼虫发育到6龄时存活率为91.8%,最终化蛹率为89.8%。田间小区调查结果显示国抗62对第2代棉铃虫有非常好的抗虫效果：两个品种棉田棉铃虫落卵量无显著差异,但国抗62棉田比对照棉田虫口数量降低85.7%,顶尖被害率降低94.4%,蕾铃被害率降低95.1%,差异达到显著和极显著水平。但国抗62对第3代棉铃虫的田间抗虫效果欠佳。棉铃虫在新疆棉田以第2代为害为主,因此,国抗62能够起到有效的控制作用。

江苏沿海地区转Bt基因棉花的抗虫性及生长发育研究

１９９７～１９９８年以本地常规种植的非抗虫棉品种“苏棉９号”为对照，对国内４个转Ｂｔ基因棉花品种的抗虫性及生长发育进行了研究，结果表明，在棉铃虫中等发生年份，Ｂｔ棉上二、三代棉铃虫可以免治，四代可在幼虫期按防治指标防治１～２次；取食Ｂｔ棉营养器官的棉铃虫幼虫基本不能化蛹完成生活史；Ｂｔ棉对鳞翅目幼虫具有兼抗作用，对刺吸口器类昆虫则无抗虫作用；在不治虫条件下，Ｂｔ棉可比常规棉增产１１．３１％～１３．３７％，虫卵量减少５１．０２％～６３．２７％；两类棉田捕食性天敌种群动态无差异；所有品种治虫处理的产量均显著高于不治虫处理；Ｂｔ棉的生长发育状况优于常规棉。

转Bt基因棉花杀虫蛋白表达规律及对棉铃虫控制作用研究

为了探明不同棉花品种对棉铃虫发生的影响,采用酶联免疫法(ELISA)检测在安徽省普遍种植的12个转Bt基因棉花品种不同生育期叶片,以及不同组织器官的Bt蛋白含量,并结合室内生物测定方法探讨不同棉花品种对棉铃虫幼虫的毒杀效果。结果表明,不同棉花品种Bt蛋白含量差异显著,首先,Bt蛋白在中棉所71、中棉所65、爱棉1号和岱杂2号的各生育期,以及不同组织器官中均能相对稳定地高表达;其次,铜杂411、荃银棉4号和皖棉17在部分生育期及组织器官中Bt蛋白含量较高;与上述品种相比,创072、湘杂棉7号、稼元216、农丰棉1号和鄂杂棉26在不同生育期以及不同组织器官中的Bt蛋白含量普遍较低。同时,转Bt基因棉花Bt蛋白的含量随着棉花逐渐生长逐步下降,然而其下降趋势并非呈现出平滑和逐渐递减的状态,12个棉花品种三叶期叶片中Bt蛋白的含量普遍较低,随着棉花生长,在七叶期叶片至蕾期叶片的生长过程中出现一个Bt蛋白的表达高峰。室内生物测定表明,其对棉铃虫幼虫的致死率与其杀虫蛋白表达量基本一致。

盐碱土壤转Bt基因棉花外源蛋白表达量时空变化及对抗虫性的影响

盐碱地是潜在的可利用耕地资源,但土壤盐碱化严重制约了农业生产的可持续发展。基于棉花机械化程度低、劳动力成本和生产资料投入剧增、比较效益下降和实施粮食生产安全战略等因素影响,我国长江流域和黄河流域棉花面积锐减,种植区域向内陆盐碱旱地或滨海盐碱地转移,但目前针对盐碱地转Bt基因棉种植可能带来的生态安全性问题研究甚少,正成为国内外研究的焦点和热点。伴随着棉花向盐碱地大面积转移种植趋势,检测盐胁迫是否影响转基因抗虫棉抗虫性,明确其影响程度,直接关系到转基因抗虫棉种植的安全性,也是目前抗虫棉扩大生产中迫切需要解决的问题。以非转基因棉花为对照,分别在低盐、中盐和高盐土壤种植的棉花的苗期、蕾期和花铃期采样,室内测定了转Bt基因棉花叶片对棉铃虫幼虫校正死亡率和外源蛋白表达量。研究结果发现盐分胁迫下转Bt基因棉花苗期叶片对棉铃虫幼虫校正死亡率下降了9.22%—47.46%,蕾期下降了31.61%—45.42%,花铃期下降了3.59%—18.52%;土壤盐分显著降低了转Bt基因棉花叶片中外源蛋白的表达量,苗期功能叶外源蛋白表达量下降了7.66%—29.86%;蕾期下降了3.77%—36.85%;花铃期下降了18.13%—41.02%;相关性分析表明,盐分胁迫条件下转Bt基因棉花叶片中外源蛋白表达量与其对棉铃虫抗性程度存在正相关关系。结果表明,盐碱土壤显著降低了转Bt基因棉花叶片外源杀虫蛋白表达量,从而导致转Bt基因棉花叶片对棉铃虫的抗虫性下降。研究土壤盐分对转Bt基因棉花对棉铃虫的影响及其作用机制,可为建立盐碱地转Bt基因棉花田害虫综合防控技术体系、转Bt基因棉花环境安全评价及转Bt基因棉安全管理提供依据。

转Bt基因棉花性状表现·存在问题及对策

综述了转Ｂｔ基因棉花转化系，经遗传改良含Ｂｔ基因棉花品系以及含Ｂｔ基因棉花杂种一代的抗虫性、产量、品质性状表现。指出含Ｂｔ基因抗虫棉当前应用存在的几个问题，阐述了提高Ｂｔ抗虫棉生产应用效果的一些对策。

化学调节剂诱导转Bt基因棉花杀虫蛋白和主要抗虫次生物的变化

初步探讨了水杨酸和缩节胺处理转 Bt基因棉花后顶端嫩叶中 Bt杀虫蛋白和主要抗虫次生物发生的变化。结果发现 ,水杨酸和缩节胺处理不能明显影响转 Bt基因棉花顶端嫩叶中 Bt杀虫蛋白的表达量 ;适宜浓度的水杨酸和缩节胺处理能够明显提高转 Bt基因棉花顶端嫩叶中缩合单宁和芸香苷的含量 ;适宜浓度的水杨酸处理还能够明显提高转 Bt基因棉花顶端嫩叶中总抗虫萜烯类物质的含量 ;而缩节胺处理对转 Bt基因棉花顶端嫩叶中总抗虫萜烯类物质的含量影响不大。

转Bt基因棉花各组织器官对棉铃虫抗性的研究

为了控制棉铃虫的危害，人类一直在做不同的尝试。每年因棉铃虫的危害使一些地方棉花产量大幅度减产。依靠大量喷洒农药来防治害虫，不但费用较高，也给生态环境造成污染。近十年来，国内外均成功的把Ｂｔ抗虫基因转入棉花体内，达到有效的表达，具有一定的杀虫效果，在生...

转Bt基因棉花抗虫萜烯类化合物时空动态的HPLC分析

利用高效液相色谱 (HPLC)技术对转Bt基因棉花抗虫萜烯类化合物种类、含量以及时空动态进行了初步研究 .结果表明 ,被研究的抗虫棉品种抗虫萜烯类化合物在不同品种、不同组织器官间含量差异较大 .叶片中杀实夜蛾素(包括H1、H2 、H3、H4 )含量较高 ,花及蕾中棉酚含量的比例明显高于叶片 .总抗虫萜烯类 (包括棉酚、半棉酚酮、杀实夜蛾素H1、H2 、H3、H4 以及甲氧基半棉酚酮等 )均以铃、顶叶含量最高 ,蕾、花柱等器官次之 .说明在棉花不同品种、同一品种不同器官中是不同的萜烯类化合物在起到抗虫作用 .图 3参

新疆南部棉区转Bt基因棉花Bt杀虫蛋白表达规律研究

为研究新疆南部植棉区转Bt基因棉花Bt杀虫蛋白时空表达规律,本文利用ELISA技术于2009年和2010年对南疆种植的转Bt基因棉花‘中棉所41’、‘中棉所43’、‘236’、‘K9030’、‘T3’、‘中棉所44’、‘中棉所45’、‘K7’和‘SGK321’各生育期中不同器官中的Bt杀虫蛋白含量进行测定。结果发现:在时间表达上,大多数转Bt基因棉花叶片的Bt杀虫蛋白含量随着棉花发育进程而逐渐下降,在子叶期含量最高,至蕾期或吐絮期达到最低点。并且不同品种间Bt杀虫蛋白含量差异显著。在空间表达上,在花铃期,棉铃和花苞叶的Bt杀虫蛋白含量最低,大多数品种表现为叶片>棉蕾>花瓣(花柱)>棉铃和花苞叶。

转Bt基因棉花主要抗虫黄酮类化合物时空动态的HPLC分析

棉花植株中的黄酮类化合物是重要的抗病虫害物质 .运用高效液相色谱技术 ,对转Bt基因棉花主要抗虫黄酮类化合物的种类、含量和时空动态进行了初步探讨 .结果表明 ,棉花组织中主要抗虫黄酮类化合物 (包括异槲皮苷、芸香苷和槲皮素等 )能够用HPLC方法检测并进行定量 ;异槲皮苷、芸香苷和槲皮素的含量均以花瓣中最高 ,花萼、苞叶和棉铃中较少 ;棉花生长中后期顶端嫩叶中抗虫黄酮类化合物的含量明显高于苗期 .不同组织不同生长期的主要抗虫黄酮类化合物含量有一定的差异 ,所起的抗虫作用也有所不同 .

转Bt+CpTI双价基因抗虫棉棉铃虫抗性的遗传分析

研究了转 Bt+ Cp TI双价基因抗虫棉 (简称双 - 1 )对棉铃虫的抗性及双价基因的遗传规律。结果表明 :双 - 1与非抗虫棉的正、反交 F1都表现高抗棉铃虫 ;F2 和 BC1群体的抗、感植株分离比分别符合 3∶ 1和 1∶ 1 ,说明双 - 1的棉铃虫抗性符合孟德尔一对显性基因的遗传方式。连锁测验表明双价基因独立于陆地棉多标记基因系 T5 86和T5 82的 1 1个形态标记基因。等位性测验证明双 -1与山西 Bt和 R1 9的整合位点不同 ,而可能与中心

转Bt基因棉花对棉铃虫不同龄期幼虫的杀虫活性和抑制生长作用

以我国培育的转Bt基因棉花（简称Bt棉）为材料，系统测定了Bt棉叶片对棉铃虫Helicoverpaarmigera（Hubner）不同龄期幼虫的杀虫活性和抑制生长的作用。结果表明，Bt棉的杀虫活性随着龄期的增大而趋于降低，其中处理3d只对1龄幼虫有较高效果；从1～4龄开始连续取食Bt棉后均不能化蛹，5龄幼虫则能正常化蛹。3龄幼虫取食Bt棉叶3d后的体重与初始体重之比为0．94，而取食常规棉叶的相应比值为5．48，对幼虫生长的抑制作用明显。在28℃条件下用Bt棉饲养棉铃虫1～3龄幼虫3d，对幼虫的致死率显著高于25℃处理，对3龄幼虫抑制生长的作用也显著提高。研究结果可为确定棉铃虫对Bt棉的抗性监测与治理技术以及Bt棉的田间应用技术提供依据。

转Bt基因棉花及其受体品种主要挥发性物质的测定

应用顶空进样气质联机系统 ( Headspace-GC-MS)测定了转 Bt基因棉花及其对照亲本主要挥发性物质。结果表明棉花营养器官和繁殖器官的主要挥发性物质有差异 ,棉花植株现蕾期前 ,叶片中挥发性物质以 α-蒎烯为主 ,而现蕾后 ,蕾、花和铃中主要以β-月桂烯为主。研究初步发现 ,外源

转Bt基因棉花对土壤酶活性的影响

为评价转基因棉花对土壤生态安全风险,采用3个转Bt基因品种(‘晋棉26’、‘晋棉44’和‘中棉所41’)及其相应的近等位基因非转基因品种(‘晋棉7’、‘冀合492’和‘中棉所23’)和1个常规品种(‘运资919’)在大田研究了转基因棉花种植对土壤过氧化氢酶、脲酶和转化酶活性的影响。结果表明,转基因棉花种植对土壤酶活性的影响依棉花品种、生育期、土壤酶种类不同而有不同。与非转基因棉花品种的亲本相比,‘晋棉44’和‘中棉所41’过氧化氢酶活性在蕾期显著提高11.27%和13.98%;开花期‘晋棉26’的活性提高3.39%,而‘中棉所41’降低7.75%。‘晋棉44’在苗期和开花期显著降低土壤脲酶活性69.2%和17.74%、吐絮期却提高163%,‘晋棉26’在蕾期显著降低土壤脲酶活性27.9%,而在开花期和吐絮期脲酶活性提高264%和38.1%;‘中棉所41’蕾期显著降低土壤脲酶活性31.6%。‘晋棉44’在苗期和蕾期分别降低了土壤转化酶活性26.9%和14.7%,而在花期和吐絮期显著提高转化酶活性10.6%和15.9%;‘晋棉26’在开花期与吐絮期、‘中棉所41’在吐絮期分别降低了转化酶活性27.9%、22.9%和20.6%,其他生育期不显著。

转CpTI基因对棉花根际土壤中微生物的影响

2006-2007年,采用4个转CpTI基因棉花材料及其受体,于棉花不同生育期取根际土壤,研究了转CpTI基因对棉花根际细菌、放线菌及真菌数量的影响。结果表明:转CpTI基因及其受体材料根际土壤中细菌、放线菌和真菌的数量均随着棉花的生长发育变化,细菌在棉花的花铃期达到高峰,放线菌和真菌在蕾期至花铃期达到高峰,之后随着棉花的衰老均减少。转CpTI基因对棉花根际土壤中细菌、放线菌和真菌的数量有显著影响,细菌和放线菌的数量均比对应受体材料显著增加,而真菌的数量显著减少;从棉花的不同生育时期看,细菌的数量在苗期和花铃期显著高于受体材料,放线菌在不同时期均显著高于受体材料,尤以苗期和花铃期更明显,而真菌的数量在吐絮期显著低于受体材料。

转Bt+CpTI基因棉对烟粉虱种群动态影响及其几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶活性变化

本研究调查了转Bt+CpTI基因棉SGK321棉田、其亲本常规棉SY321棉田以及间作棉田烟粉虱成虫种群的数量,测定了不同时期SGK321棉与SY321棉叶片中几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶的活性及蛋白质的含量。结果表明:在整个生长期间,SGK321棉田烟粉虱的种群数量一直高于SY321棉田和间作棉田。烟粉虱取食的SGK321植株叶片几丁质酶活性呈下降-上升-下降-上升的趋势;SY321上部叶片中呈下降-上升-下降-上升的趋势,其下部叶片为先下降后上升趋势;SGK321叶片中β-1,3-葡聚糖酶活性变化呈下降-上升-下降-上升趋势,而SY321叶片基本上均呈先下降后上升趋势;SY321与SGK321上部叶片中蛋白质相对含量均呈先上升后逐渐下降趋势,下部叶片与上部叶片相似但略有不同。SGK321与SY321处理植株叶片几丁质酶活性之间没有明显差异;SGK321处理植株叶片β-1,3-葡聚糖酶的活性多数时期高于SY321。探讨了棉花防御反应与棉田烟粉虱种群数量差异的相关性,以利于揭示双价抗虫棉对烟粉虱的影响及其生理防御机制,为烟粉虱的综合治理以及棉花育种等提供理论依据。