转FAS基因治疗膀胱癌的实验研究

目的探讨Fas基因转染对膀胱癌细胞的作用。方法应用脂质体介导的方法,将人Fas cDNA导入膀胱癌细胞EJ中,并利用Northem bolt、原位杂交、流式细胞术检测细胞的Fas mRNA和分子表达。以顺铂作用转染前后的EJ细胞,用流式细胞仪、DNA梯形带和NTT法分析顺铂对转染前后的EJ细胞抑制增殖和诱导凋亡的能力。结果脂质体介导的Fas基因转染可明显增强膀胱癌细胞EJ的Fas表达,顺铂对转染后的EJ细胞抑制细胞增殖和诱导凋亡的能力明显增强。结论 Fas系统参与泌尿生殖系肿瘤的发生发展过程,Fas基因转染可显著上调膀胱癌细胞EJ的Fas表达。联合应用Fas基因转染和顺铂可获得协同的细胞毒作用,为进一步将Fas基因用于临床治疗膀胱癌提供了理论与实验基础。

Fas基因转染对直肠癌细胞生物学行为影响的研究

目的 探讨Fas基因转染对直肠癌细胞生物学行为的影响。方法 以正常人外周血单个核细胞 (PBMC)为模板 ,通过RT -PCR方法扩增出Fas全长cDNA ,转染人直肠癌细胞HR - 8348,检测Fas基因表达 ,观察细胞生长状态。采用MTT法观察癌细胞对化疗药物反应及细胞存活率。采用H33342释放法检测PBMC对癌细胞的杀伤活性。结果 未转染的HR - 8348细胞Fas基因表达为阴性 ,转染Fas后HR - 8348细胞Fas表达阳性。两组细胞形态和生长状态无显著性差异。分别加入化疗药物 5 -Fu、卡铂 ,检测细胞存活率。在相同药物浓度下 ,两组细胞存活率有显著性差异 (t =4 .73,3.84 ,P <0 .0 1)。Fas转染组癌细胞存活率低于未转染组 ,Fas表达阳性癌细胞对 5 -Fu、卡铂的敏感性增强。PBMC对Fas转染组HR - 8348细胞的杀伤活性为 5 6 % ,对未转染组的杀伤活性为 2 1% ,两组有显著性差异 (χ2 =2 0 .73,P <0 .0 1) ,PBMC对Fas阳性癌细胞杀伤活性明显高于对照组癌细胞。结论 转染Fas可提高癌细胞对化疗药物的敏感性 ,增强药物对癌细胞的杀伤作用。

转Fas基因对膀胱癌细胞的作用

目的 探讨Fas基因转染对膀胱癌细胞的作用。 方法 将人FascDNA通过脂质体导入膀胱癌细胞EJ中 ,并利用Northernblot、原位杂交、流式细胞术检测细胞的FasmRNA和分子表达。用流式细胞仪、DNA梯形带和MTT法分析顺铂对转染前后的EJ细胞抑制增殖和诱导凋亡的能力。 结果 Fas基因转染可明显增强膀胱癌细胞EJ的Fas表达 ,顺铂对转染后的EJ细胞抑制细胞增殖和诱导凋亡的能力明显增强。 结论 转染的Fas基因可显著上调膀胱癌细胞EJ的Fas表达 ,促进细胞凋亡 。