轮枝拟青霉中虫草素的微波提取工艺优化

采用微波提取轮枝拟青霉发酵菌丝体中的虫草菌素,HPLC法测定提取液中的虫草素含量,在单因素试验的基础上,用正交试验进行工艺参数的优化。优选出的最佳提取工艺为蒸馏水40mL,固液比1∶200,中火(P50)处理3min。在此最佳条件下,轮枝拟青霉中虫草素含量为3.247mg/g,工艺简便可行。

两相法提高轮枝拟青霉中虫草菌素含量的研究

以轮枝拟青霉(Paecilomyces verticillatus GZ)为材料,分别考察油酸和邻苯二甲酸二丁酯添加量以及添加时间对轮枝拟青霉产虫草菌素的影响。结果表明,接种GZ的同时添加6%(V/V)油酸,虫草菌素产量达到71.33(±2.61)mg/L,比对照组提高44%;接种GZ的同时添加6%(V/V)邻苯二甲酸二丁酯,虫草菌素产量达到59.21(±2.50)mg/L,比对照组提高20%。此法为简化虫草菌素的下游提取工艺提供了依据。

发酵成分对轮枝拟青霉中虫草菌素含量的影响

以轮枝拟青霉(Paecilomyces verticillatus GZ)为材料,通过单因素、正交实验考察不同的发酵成分对提高GZ高产虫草菌素的条件,通过发酵动力学考察GZ菌株的收菌时间。结果表明:以白砂糖2%、麦芽糖1%、牛肉膏3%、酵母膏2%为发酵培养基,140r/min,26℃,摇瓶培养7d,虫草菌素产量为(69.1±0.921)mg/L。

几种有机溶剂对轮枝拟青霉产虫草菌素的影响

以轮枝拟青霉(Paecilomyces verticillatus)GZ为材料,通过对两相培养体系中有机相的考察,找到能够较大幅度提高虫草菌素产量的有机相。结果显示:从6种有机溶剂中筛选出十六烷,将十六烷以8%(v/v)的浓度添加到培养基中,接种GZ,26℃下140r/min摇瓶培养7d,虫草菌素产量达到(116.78±7.81)mg/L,比未添加有机相的对照组提高224%。

不同种类有机相对轮枝拟青霉产虫草菌素的影响

实验以轮枝拟青霉(Paecilomyces verticillatus)GZ为材料,以GZ发酵产虫草菌素(cordy-cepin)的含量为指标,在发酵过程中添加油酸,邻苯二甲酸二丁酯,油酸丁酯,十六烷,液体石蜡,聚乙二醇400六种有机溶剂,建立两相培养体系,选择能够提高虫草菌素产量的有机相。结果显示油酸,邻苯二甲酸二丁酯,十六烷为适合有机相,其虫草菌素产量分别比对照组分别提高24%,51%和89%。

活性炭对轮枝拟青霉产虫草菌素的影响

实验以轮枝拟青霉(Paecilomyces verticillatus)GZ为材料,以发酵产虫草菌素为指标,在发酵过程中对其添加活性炭进行两相培养。结果显示:活性炭的最适添加量为0.4g时,培养液中虫草菌素的含量为12.465mg/L,比对照组提高了1.57倍。最适添加时间为0h(即活性炭和菌种同时添加),培养液中虫草菌素为12.465mg/L,比对照组分别提高1.57倍。

HPLC测定轮枝拟青霉菌丝体中虫草菌素含量

目的:建立轮枝拟青霉菌Paecilomyces verticillatus发酵菌丝体中虫草菌素含量测定的反相高效液相色谱方法。方法:样品用20%乙醇超声提取,采用Spheriorb C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以0.02 mol·L-1乙酸铵-甲醇(85∶15)为流动相,柱温30℃,流量1 mL·min,检测波长260 nm。结果:在上述色谱条件下,虫草菌素回收率为94.0%～98.3%,RSD为0.98%,最低检出浓度为0.01 mg·kg-1。测得菌丝体中虫草菌素含量为3.12 mg·kg-1。结论:方法简便、快速、分离效果好、准确可靠,可作为发酵生产中虫草菌素的质量控制监测手段。