轮梗霉高产花生四烯酸的诱变育种研究

利用紫外线作为诱变剂,分别通过15℃的低温和0.09mg/ml乙酰水杨酸的筛选作用,筛选到两株花生四烯酸产量有较大提高的菌株,分别为LT1.12菌株(花生四烯酸产量提高46.41%)和A1.13菌株(花生四烯酸产量提高53.15%)。通过对脂肪酸组分的分析,确定乙酰水杨酸为更加具有针对性的筛选条件。并对用乙酰水杨酸筛选到的A1.13菌株进行了传代稳定性实验,证实A1.13菌株花生四烯酸产量提高这一性状是可以稳定遗传的。

富硒轮梗霉与奶醋对小鼠降血脂和抗氧化作用的影响

84只昆明系雄性小鼠,随机均分为7组:普通对照组、高脂对照组、亚硒酸钠组、轮梗霉组、富硒轮梗霉组、奶醋组、奶醋+富硒轮梗霉组,30d后测定小鼠空腹体重量、脏器指数、血脂和抗氧化力指标水平、组织硒含量以及肝脏脂肪酸含量。结果表明:富硒轮梗霉能显著降低高脂血症小鼠的TC、TG和LDL-C,升高HDL-C,降低高脂血症小鼠MDA的水平,提高SOD、GSH-Px活性。富硒轮梗霉与奶醋复配对小鼠各检测指标的影响优于富硒轮梗霉组。亚硒酸钠组中组织硒含量显著高于对照组但低于富硒轮梗霉和奶醋富硒轮梗霉组。富硒轮梗霉组的花生四烯酸含量显著提高,含量为11.94%。富硒轮梗霉能显著提高机体降血脂和抗氧化能力,与奶醋复配后效果仍优于其他组别。

轮梗霉原生质体的制备

本文比较了酶浓度、菌龄、渗透压稳定剂以及酶解温度和时间等因素对轮梗霉原生质体得率的影响。结果基本获得了制备原生质体的适宜条件:用0.6mol/L甘露醇稳渗剂配制成的4%纤维素酶和0.5%蜗牛酶混合酶,35℃酶解培养了30h的菌丝1.0h,即可得到较高产量的原生质体。对该原生质体进行了再生实验,其再生率约为23.8%。

六种金属离子对轮梗霉生长及产花生四烯酸的影响

研究工业发酵中常见的Ca2+、Zn2+、Mn2+、Fe3+、Cu2+及Co2+对轮梗霉生长及产花生四烯酸的影响。结果表明:Ca2+浓度在10-4～10-2mol/L范围内促进菌体生长,但抑制AA产量。Mn2+浓度为5×10-4mol/L时AA产量达到最大,但对菌体生长都有抑制作用。Zn2+在3×10-6mol/L浓度时AA产量达最大,而生物量的变化不大。Fe3+浓度为5×10-5mol/L时,生物量达最大,而AA产量受其抑制,Cu2+浓度为5×10-6mol/L时菌体生物量和AA产量同时达到最大。Co2+在10-7mol/L浓度时生物量及AA产量同时达最大。

轮梗霉融合株菌粉营养价值和调节血脂的研究

分析了经与黑曲霉基因组全序列杂交改造的轮梗霉融合株D-A1菌粉的一般营养成分及其对高脂小鼠血脂的调节作用和对动脉粥样硬化的预防。结果表明:菌粉含有15.21%的蛋白质和30.34%的粗脂肪,其中含有16.75%的花生四烯酸;以1.2g/kg菌粉饲喂小鼠35d,可有效预防血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)的升高,与高脂模型组相比,低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)水平降低了70.94%,而高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)水平提高了42.58%。轮梗霉融合株菌粉营养价值高,能有效的预防高脂血症,对小鼠脂代谢紊乱具有显著的调节作用。

轮梗霉融合菌株D-A1富集硒的培养条件研究

采用轮梗霉融合株D-A1作为富硒的载体,进行轮梗霉富硒条件优化。通过单因素试验研究不同的碳源、氮源、碳源浓度、温度、转速、pH值、接种量和装液量对轮梗霉富硒的影响。并选取对轮梗霉富硒影响较大的碳源、氮源、温度和转速进行正交试验。结果表明,发酵培养基中亚硒酸钠浓度为90μg/ml时,轮梗霉在优化的发酵条件下:麦芽糖100g/L、酵母膏10g/L、温度18℃、摇床转速120r/min,菌体硒含量最终可达3266.79μg/g,细胞富集的有机态硒占总富硒量的85.08%。以不加硒处理为对照,富硒轮梗霉的不饱和脂肪酸含量提高,亚油酸的含量是对照的1.20倍,花生四烯酸含量是对照的1.24倍,二十碳五烯酸(EPA)含量是对照的1.71倍。

ω-3多不饱和脂肪酸发酵生产中两个调控指标的探讨

为了调控长链ω 3多不饱和脂肪酸的发酵 ,对用于脂肪酸发酵调控的 2个指标 18∶3(α ) /18∶2和∑C18/∑C16进行探讨。对 2个指标从化学反应平衡角度进行阐述 ,进一步证明在合适的条件下 ,头孢霉 18∶3(α ) /18∶2的变化趋势和二十二碳六烯酸变化趋势一致 ;轮梗霉∑C18/∑C16和二十碳五烯酸变化趋势一致。 18∶3(α ) /18∶2和∑C18/∑C16可以作为发酵生产二十二碳六烯酸和二十碳五烯酸的调控指标。

高产花生四烯酸菌的原生质体诱变育种研究

以轮梗霉紫外诱变突变株A1.13为出发菌株,制备其原生质体并连续采用紫外线、微波及硫酸二乙酯作为诱变剂进行多轮诱变,通过15℃低温和0.12g/ml乙酰水杨酸初筛及摇瓶发酵复筛,得到花生四烯酸稳定提高的突变株MW40+DES20II-4,其花生四烯酸占总脂肪酸的含量从出发株的8.034%提高到15.098%。采用5L全自动发酵罐发酵,其生物量、油脂产量和花生四烯酸产量分别达到12.252、4.307g/L和604.557mg/L,分别比对照提高了24.96%、56.39%和193.924%。通过突变株的脂肪酸组分分析,认为多轮诱变对于脂肪酸生产菌是有效的育种手段。

用豆制品废水发酵生产花生四烯酸和二十碳五烯酸

为探讨用豆制品废水生产花生四烯酸(AA)和二十碳五烯酸(EPA),研究了不同培养时间、碳源浓度、氮源浓度和黄泔水稀释倍数对轮梗霉产这两种脂肪酸的影响。研究结果表明,有利于EPA高产的条件为:黄泔水稀释6倍、添加30g/L碳源、2g/L氮源、培养8d。有利于AA高产的条件为:黄泔水稀释5倍、添加10g/L碳源、1g/L氮源、培养4d。最大生物量获得条件和产脂肪酸最佳条件不一致。进一步优化条件,有希望通过豆制品废水获得低成本的EPA和AA产品。

EPA高产菌的繁殖体诱导条件初探

研究了诱导介质、处理时间及温度等因素对高产EPA、AA等多不饱和脂肪酸的菌株———轮梗霉 (Diasporangiumsp.)产游动孢子能力的影响。结果表明 :胡萝卜片介质上、2 5℃诱导 6d ,可得到最大数量的孢子 ,同一条件下游动孢子量则在第 8d达到最高。进一步探讨孢子的萌发条件发现 :2 5℃、营养琼脂上孢子的萌发率最高。

花生四烯酸高产突变株5L罐发酵及菌丝老化研究

[目的]研究花生四烯酸高产突变株的发酵及菌丝老化特性。[方法]对1株经诱变获得的花生四烯酸高产突变株A1.13进行5L罐发酵试验,考察不同培养条件对发酵产物的影响。[结果]碳源一次性过量加入并改变培养温度,可使该菌株花生四烯酸产量提高至602.99 mg/L;发酵菌丝体在4℃条件下老化15 d后,花生四烯酸产量达885.16 mg/L。大豆油、花生油、玉米油、葵花籽油和芝麻油5种植物油均可起到消泡作用,添加浓度4%葵花籽油效果最佳,与对照相比,菌丝生物量和花生四烯酸产量分别提高了124%和22%。[结论]该研究可为突变株A1.13工业化发酵产花生四烯酸提供理论依据和现实参考。

用有机废水培养富含多不饱和脂肪酸的丝状菌

比较八种丝状菌在黄泔水中培养的脂肪酸组成,发现轮梗霉含有花生四烯酸、γ-亚麻酸和二十碳五烯酸。选择轮梗霉作为出发菌株,探讨了不同培养时间、碳源浓度、氮源浓度和黄泔水稀释倍数对轮梗霉菌丝生长和脂肪酸组分的影响。研究结果表明,有利于获得最大菌丝产量的条件为:黄泔水稀释5倍、添加20g/L葡萄糖、0g/L氮源、培养8d。多不饱和脂肪酸最大含量与最大生物量条件不完全一致。本研究为获得低成本的食用菌丝以及综合利用黄泔水提供了有益的尝试。

马铃薯早疫病晚疫病的识别与防治

马铃薯早疫病、晚疫病是马铃薯生产中危害比较严重两种病害,由于两种病害名称相近,症状相似,很容易混淆,往往在防治上陷入误区。因此正确识别早晚疫病,对马铃薯种植户及农业技术人员指导马铃薯生产具有重要意义。一、病原菌不同马铃薯早疫病主要由半知菌纲链格孢属茄链格孢引起的。马铃薯晚疫病由鞭毛菌亚门致病疫霉引起的。二、症状不同早疫病可发生在叶片上,也可侵染块茎。

山西省设施蔬菜主要病虫害综合防治(续)

(上接第9期第40页)五、疫病类1.病害症状番茄早疫病又叫轮纹病,苗期至成株期都能染病。主要为害叶、茎、花、果。叶片染病,初期为小黑点,后期发展为不断扩展的轮纹斑,叶片边缘多有浅绿色或黄色晕环,中部有同心轮纹;茎部染病,多在分枝处产生褐色至深褐色的不规则圆形或椭圆形病斑,表面生有灰黑色霉状物,即分生孢子梗和分生孢子;青果被害,从花萼附近开始。

花生四烯酸高产菌株的诱变和筛选研究

目的:选育生产性能比出发菌株显著提高的突变株。方法:用微波和化学诱变剂硫酸二乙酯(DES)对由轮梗霉制备的原生质体进行诱变育种,然后采用抗失水苹果酰肼与抗低温(15℃)相结合的方法,通过花生四烯酸产量的对比进行筛选。结果:得到一目的菌株,通过摇瓶发酵,结果生物量、油脂产量和花生四烯酸产量分别达到12.252、4.307g/L和257.557mg/L,分别比对照提高了24.96%、56.39%和193.924%。结论:通过突变株的脂肪酸组分分析,认为多轮诱变对于脂肪酸生产菌是有效的育种手段。