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家蚕传染性软化病病毒(桐乡株)5′端非编码区基因的克隆及序列分析 被引量:1
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作者 李明乾 苘娜娜 +3 位作者 蔡顺风 陈孝学 金伟 鲁兴萌 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期84-89,共6页
为了探讨家蚕传染性软化病病毒的复制与翻译机制,利用cDNA 5′末端快速扩增(5′-RACE)技术获得了家蚕传染性软化病病毒桐乡分离株(Bombyxmoriinfectious flacherie virus,BmIFV-2)的5′端非编码区(non-coding region,NCR)。序列比较分... 为了探讨家蚕传染性软化病病毒的复制与翻译机制,利用cDNA 5′末端快速扩增(5′-RACE)技术获得了家蚕传染性软化病病毒桐乡分离株(Bombyxmoriinfectious flacherie virus,BmIFV-2)的5′端非编码区(non-coding region,NCR)。序列比较分析发现:BmIFV-2的5′-NCR由155个核苷酸组成,A+U含量达60.64%,其中包含1个起始密码子AUG;与坂城分离株(BmIFV-1)的5′-NCR相比,BmIFV-2的5′-NCR在5′末端缺少1个核苷酸,但核苷酸识别率为100%(即单核苷酸变异率为0),而且这个缺少的核苷酸并不影响其5′-NCR的二级结构。与已经证实具有内部核糖体进入位点(internal ribosome entry site,IRES)活性的Iflavirus属的2种病毒EoPV(Ectropis obliquapicor-na-like virus)和VDV-1(Varroa destructorvirus 1)的5′-NCR相比,BmIFV的5′-NCR可能也具有IRES活性。 展开更多
关键词 家蚕 传软性软化病毒 5′端非编码区 序列分析
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一株传染性软化病病毒的分离和鉴定 被引量:8
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作者 陆奇能 朱宏杰 +3 位作者 洪健 金伟 张凡 鲁兴萌 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期143-147,共5页
病毒性软化病是一种严重影响蚕业生产的流行病,其病原为家蚕传染性软化病病毒(Bombyx mori infectiousflacherie virus,BmIFV)。本实验室在浙江省收集到具有软化病症状的家蚕幼虫,并分离纯化获得一株病毒。电镜观察到病毒粒子为直... 病毒性软化病是一种严重影响蚕业生产的流行病,其病原为家蚕传染性软化病病毒(Bombyx mori infectiousflacherie virus,BmIFV)。本实验室在浙江省收集到具有软化病症状的家蚕幼虫,并分离纯化获得一株病毒。电镜观察到病毒粒子为直径26nm左右、无包涵体的球状颗粒。病毒添食四龄起蚕和五龄起蚕,分别在3~4d和5~7d出现明显症状和病变。纯化病毒SDS-PAGE条带与BmIFV蛋白相仿。病毒核酸鉴定为RNA,并可用套式RT-PCR扩增出特异性片段,测序发现片段序列和BmIFV日本坂城株的同源性为99.5%。由此可确定该病毒为BmIFV,这是我国首次分离到该病毒,暂命名为BmIFV-CHN001。 展开更多
关键词 家蚕 传染性软化病毒 分离鉴定
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传染性软化病病毒感染家蚕中肠上皮细胞的免疫电镜观察 被引量:2
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作者 苘娜娜 陆奇能 +2 位作者 洪健 金伟 鲁兴萌 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期602-609,共8页
家蚕传染性软化病病毒(Bombyxmoriinfectious flacherie virus,BmIFV)专一地侵染家蚕中肠上皮组织,造成中肠上皮细胞的超微结构发生病变,在染毒家蚕的中肠杯形细胞内形成特异性小泡体和电子稠密体等特异性结构。电镜观察显示,在感染早期... 家蚕传染性软化病病毒(Bombyxmoriinfectious flacherie virus,BmIFV)专一地侵染家蚕中肠上皮组织,造成中肠上皮细胞的超微结构发生病变,在染毒家蚕的中肠杯形细胞内形成特异性小泡体和电子稠密体等特异性结构。电镜观察显示,在感染早期,微绒毛膜、线粒体附近及相邻两个细胞的细胞膜和内质网中较易发现胶体金颗粒(10 nm)的吸附;其后在微绒毛中间和细胞质中,以及内质网和特异性小泡体的界限膜附近出现或较多存在,但线粒体和特异性小泡体的内部未见金颗粒的吸附。因此可以认为:家蚕传染性软化病病毒主要在染毒细胞的各细胞器膜附近出现。 展开更多
关键词 家蚕 传染性软化病毒 超微结构 免疫电镜
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家蚕传染性软化病病毒(桐乡株)VP1基因片段的克隆及序列分析
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作者 苘娜娜 陆奇能 +2 位作者 金伟 张凡 鲁兴萌 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1016-1021,共6页
以首株在中国分离到的家蚕传染性软化病病毒(Bombyx moriinfectious flacherie virus,BmIFV)BmIFV-CHN001基因组为模板,扩增了编码主要结构蛋白的VP1基因。克隆测序后得到VP1基因片段906bp。该序列与已发表的日本毒株相比,核苷酸序列的... 以首株在中国分离到的家蚕传染性软化病病毒(Bombyx moriinfectious flacherie virus,BmIFV)BmIFV-CHN001基因组为模板,扩增了编码主要结构蛋白的VP1基因。克隆测序后得到VP1基因片段906bp。该序列与已发表的日本毒株相比,核苷酸序列的相似性为99.3%,编码氨基酸的相似性为100%,证明该毒株与家蚕传染性软化病病毒日本株的同源性较高。把BmIFV-CHN001的VP1序列与同属的另外6个昆虫小RNA病毒的结构蛋白进行序列比对,构建系统发育树,对其进化关系进行了初步分析,结果显示这7种病毒具有相近的亲缘关系,而BmIFV-CHN001与蜜蜂囊雏病毒的亲缘关系最近。 展开更多
关键词 家蚕 传染性软化病毒 VP1基因片段 结构蛋白 克隆 序列分析
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家蚕传染性软化病病毒荧光定量PCR检测技术及浙江省流行病学调查
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作者 董强 鲁兴萌 吴姗 《中国蚕业》 2016年第4期45-49,共5页
荧光定量PCR检测技术可实现对病原微生物的早期或快速检测,根据家蚕传染性软化病病毒(BmIFV)的RNA序列,设计了具有物种特异性的引物和探针,建立了荧光PCR检测BmIFV的方法。将设计的引物和探针同时对BmIFV、家蚕微孢子虫(Nb)、家蚕核型... 荧光定量PCR检测技术可实现对病原微生物的早期或快速检测,根据家蚕传染性软化病病毒(BmIFV)的RNA序列,设计了具有物种特异性的引物和探针,建立了荧光PCR检测BmIFV的方法。将设计的引物和探针同时对BmIFV、家蚕微孢子虫(Nb)、家蚕核型多角体病毒(BmNPV)、家蚕浓核病病毒(BmDNV)和桑叶进行特异性验证,结果显示只有BmIFV得到阳性结果。该方法对含BmIFV目标片段质粒的检测灵敏度达10^(-3)ng/μL,对目标病毒的检测灵敏度为3.4ng/μL。同时,对浙江省嘉兴市秀洲区、湖州市南浔区、嘉兴市桐乡市、嘉兴市海宁市、杭州市淳安县5个蚕区家蚕感染BmIFV情况进行了流行病学调查,结果显示这5个蚕区BmIFV感染率约为3.6%,为浙江省家蚕传染性软化病防治提供参考。 展开更多
关键词 家蚕 家蚕传染性软化病毒 荧光定量PCR 引物和探针 流行病学
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茶尺蠖小RNA病毒全长cDNA克隆的构建 被引量:1
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作者 林美娟 谢键 +2 位作者 张珈敏 叶姗 胡远扬 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期818-823,共6页
为了初步研究茶尺蠖小RNA病毒(Ectropis oblique picorna-like virus,EoPV)的复制机制,从被EoPV感染致死的茶尺蠖幼虫中分离并纯化病毒粒子,提取病毒RNA,根据已公布的EoPV核苷酸序列,利用基因组上单一的酶切位点,设计特异性引物,应用RT-... 为了初步研究茶尺蠖小RNA病毒(Ectropis oblique picorna-like virus,EoPV)的复制机制,从被EoPV感染致死的茶尺蠖幼虫中分离并纯化病毒粒子,提取病毒RNA,根据已公布的EoPV核苷酸序列,利用基因组上单一的酶切位点,设计特异性引物,应用RT-PCR扩增出5个覆盖全长的片段。随后采用融合PCR将5个片段拼接,最终将全长定向克隆到低拷贝质粒载体上,成功构建cDNA全长克隆p-EoPV。双酶切及测序鉴定证明全长克隆构建成功。与原序列比较发现,该克隆在氨基酸水平上有8个突变和1个缺失。本研究为深入探讨EoPV病毒生物学特性、病毒复制机理等奠定了基础。 展开更多
关键词 茶尺蠖小RNA病毒 全长CDNA克隆 传染性软化病毒 反向遗传学
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家蚕浓核病病毒 被引量:2
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作者 川濑茂实 鲁兴萌 《国外农学(蚕业)》 1990年第3期9-13,共5页
前言十几年前,人们以为在引起养蚕欠收的主因素软化病中,属病毒性的只有传染性软化病(IFV)一种(山崎,1960),但是后来发现从长野县伊那郡欠收农户收集到的病蚕,病症和对蚕品种的感受性与IFV绝然不同,报告中称之为软化病病毒伊那株(清水,1... 前言十几年前,人们以为在引起养蚕欠收的主因素软化病中,属病毒性的只有传染性软化病(IFV)一种(山崎,1960),但是后来发现从长野县伊那郡欠收农户收集到的病蚕,病症和对蚕品种的感受性与IFV绝然不同,报告中称之为软化病病毒伊那株(清水,1975)。其后的研究(渡部,1976;川濑, 展开更多
关键词 家蚕 浓核病病毒 病毒 软化病毒
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ApIV 3C蛋白酶抑制剂的虚拟筛选及活性测定 被引量:4
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作者 史艳丽 刘宇博 +3 位作者 吴思晋 刘亚军 张嘉宁 李文利 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2018年第4期701-707,共7页
运用Discovery Studio 4.5软件,通过同源建模及分子动力学优化获得柞蚕小吐白水软化病毒(Ap IV)3C蛋白酶的3D结构;通过分子对接对天然产物库进行虚拟筛选,得到1个Ap IV 3C蛋白酶的有效抑制剂3',4',5,7-四羟基异黄酮(Orobol).分... 运用Discovery Studio 4.5软件,通过同源建模及分子动力学优化获得柞蚕小吐白水软化病毒(Ap IV)3C蛋白酶的3D结构;通过分子对接对天然产物库进行虚拟筛选,得到1个Ap IV 3C蛋白酶的有效抑制剂3',4',5,7-四羟基异黄酮(Orobol).分子对接和分子动力学(MD)模拟结果进一步证明Orobol能稳定结合于Ap IV 3C蛋白酶的结合口袋处.体内外的Ap IV病毒抑制实验结果表明,Orobol具有良好的抗病毒活性. 展开更多
关键词 柞蚕 柞蚕吐白水软化病毒 3C蛋白酶 抑制剂 虚拟筛选
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家蚕传染性软化病病毒的冷冻电子显微镜三维重构
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作者 谢礼 张勤奋 +4 位作者 鲁兴萌 戴兴红 李鲲鹏 洪健 周雪平 《中国科学(C辑)》 CSCD 北大核心 2009年第8期768-774,共7页
应用冷冻电子显微镜三维重构技术获得了家蚕传染性软化病病毒(Infectious flacherie virus,IFV)衣壳的三维立体结构.重构最终结果使用了5047个病毒粒子的数据.FSC曲线显示该重构结果的分辨率为18?.IFV的衣壳直径为302.4?,遵循拟T=3(P=3... 应用冷冻电子显微镜三维重构技术获得了家蚕传染性软化病病毒(Infectious flacherie virus,IFV)衣壳的三维立体结构.重构最终结果使用了5047个病毒粒子的数据.FSC曲线显示该重构结果的分辨率为18?.IFV的衣壳直径为302.4?,遵循拟T=3(P=3)二十面体对称.衣壳为单层,厚度15?,表面光滑致密,无明显突起或凹陷,无孔洞贯穿.将IFV衣壳结构与昆虫的类小RNA病毒-蟋蟀麻痹病毒(Cricket paralysis virus,CrPV)以及人小RNA病毒-人鼻病毒14(human rhinovirus14,HRV14)的衣壳进行比较,发现IFV衣壳结构与CrPV更为接近.与CrPV一样,IFV衣壳表面也缺少"Rossmann峡谷".同时预测了IFV结构蛋白VP2和VP3的肽链折叠拓扑结构,并对亚基在衣壳表面的分布位置进行了推测. 展开更多
关键词 家蚕传染性软化病毒(Infectious FLACHERIE virus) 冷冻电子显微镜 三维重构 肽链折叠
原文传递
Malakoplakia of the esophagus caused by human papillomavirus infection
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作者 Ya-Li Yang Yu-Cheng Xie +3 位作者 Xiao-Ling Li Jing Guo Tao Sun Jing Tang 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2012年第45期6690-6692,共3页
Malakoplakia is a rare granulomatous disease probably caused by infection and characterized histologically by Michaelis-Gutmann bodies.We report a more rarely seen case esophageal malakoplakia in a 54-year-old woman.S... Malakoplakia is a rare granulomatous disease probably caused by infection and characterized histologically by Michaelis-Gutmann bodies.We report a more rarely seen case esophageal malakoplakia in a 54-year-old woman.She presented with coughing while eating and drinking.Gastroscopy showed yellow nodules in the esophagus,and endoscopic ultrasonography showed a space-occupying lesion in the substratum of the esophageal mucosa.All findings highly resembled esophageal cancer.Histopathological examination finally indentified this space-occupying lesion as malakoplakia and not cancer.Immunohistochemistry showed that she had human papillomavirus(HPV) infection in the esophagus,which indicates that infection was responsible for the malakoplakia.This is believed to be the first case of malakoplakia in the esophagus,and more importantly,we established that HPV infection was the initiator of esophageal malakoplakia. 展开更多
关键词 MALAKOPLAKIA ESOPHAGUS Michaelis-Gut- mann bodies Human papillomavirus infection
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教您怎样识别病蚕(一)
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作者 周贤满 《广西蚕业》 2007年第A02期18-18,共1页
关键词 空头性软化 蚕服 病毒软化 病蚕 添食
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