生防菌ZF510的分离鉴定及其对白菜细菌性软腐病的防治效果研究

白菜软腐病是由巴西果胶杆菌Pectobacterium brasiliense引起的一种危害严重的细菌性病害。目前,针对蔬菜细菌性软腐病高效防治的产品较少。为了筛选对白菜细菌性软腐病具有良好拮抗效果的生防细菌,本研究从白菜根际土壤中分离到一株对细菌性软腐病菌具有显著拮抗效果的生防细菌ZF510。经过形态学特征观察、生理生化特征和多基因系统发育树分析,并通过盆栽试验验证拮抗菌株对白菜细菌性软腐病的防治效果。结果表明,菌株ZF510为东湖假单胞菌Pseudomonas donghuensis,在代谢过程中产生蛋白酶,有合成IAA能力、嗜铁能力、溶磷能力。通过抑菌谱分析,证明菌株ZF510对巴西果胶杆菌、野油菜黄单胞野油菜致病变种等7种病原细菌具有显著的拮抗效果。采用二分皿法测定其挥发性物质对立枯丝核菌、黄瓜蔓枯病菌、茄匍柄霉3种病原真菌均有抑制效果。盆栽试验结果显示,接种菌株ZF510的白菜细菌性软腐病症状明显减轻,防治效果达到44.56%。综上所述,菌株ZF510具有良好的生防潜力和应用前景。

白菜软腐病病原菌鉴定及地衣芽孢杆菌XW02对其的抑制作用

软腐病是白菜的三大主要病害之一,严重影响白菜产量和品质。利用微生物防治白菜软腐病具有绿色环保且不产生耐药性的优势,是农业健康发展的必然趋势。采用组织分离法,从大田白菜软腐病病株中分离、纯化出病原菌;利用大白菜致病性试验,对白菜软腐病的致病菌株进行筛选;利用分子生物学方法对致病菌株的16S rDNA扩增并测序,通过BLAST和GenBank比对,采用邻接法构建系统发育树确定其分类地位。结果显示,白菜软腐病的致病菌株为H3,属于胡萝卜软腐果胶杆菌(Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum)。通过双层培养法从10株地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)中筛选出对H3菌株抑制效果最好的菌株XW02,抑菌圈直径达到49.33 mm。对XW02菌株进行抑菌谱试验和盆栽防效试验,抑菌谱试验结果显示,XW02菌株对黄瓜角斑病菌、辣椒疮痂病菌、大白菜黑腐病菌和柑橘溃疡病菌均有一定的抑制作用,其中对黄瓜角斑病菌的抑菌作用最大,对辣椒疮痂病菌的抑菌作用最小;盆栽防效试验结果显示,XW02菌株对白菜软腐病具有很好的防治效果,防效为60.20%,较对照药剂春雷霉素的防效高6.12百分点。地衣芽孢杆菌XW02具有很好的生防潜力,为白菜软腐病的生物防治提供了新资源。

拮抗链霉菌26B的筛选及其在不同含水量土壤中对白菜软腐病的防病效果

为挖掘防治白菜软腐病的生防菌,本研究采用牛津杯法从38株白菜根际放线菌中筛选到一株拮抗放线菌26B,通过形态学观察和16S rRNA基因序列分析将菌株26B初步鉴定为链霉菌。该菌除菌发酵滤液对供试的白菜软腐病菌Pectobacterium carotovorum subsp.brasiliensis BC1及3种马铃薯黑胫病菌均表现较高的抑菌活性,其中对白菜软腐病菌抑菌直径达到23.97mm。萌发试验表明,白菜种子经26B除菌发酵滤液浸种后发芽势、发芽指数、根长及鲜重显著增加。采用浸根法测定菌株26B除菌发酵滤液对软腐病菌荧光标记菌株BC1-gfp在白菜根部定殖量的影响,浸根处理后48h,白菜根上BC1-gfp的数量达到2.3×109CFU/g;未从26B除菌发酵滤液与BC1-gfp菌悬液混和处理(体积比10%)的白菜根上检测到病原菌。盆栽防病试验结果表明,在含水量为14%和20%的土壤中,菌株26B除菌发酵滤液对白菜软腐病的防效分别达96.0%和89.8%。上述结果表明,链霉菌26B是一株具有潜在开发应用价值的生防菌株,将链霉菌26B应用与土壤水分管理相结合可进一步提高其防病效果。

大白菜软腐病的综台防治方法

大白菜是湖南省秋冬季主要存园蔬菜,在阴天及多雨天气情况下很易发生软腐病,常造成较为严重的损失。现将软腐病的为害特点和综合防治方法介绍如下。一、为害特点。白菜软腐病,之所以又被大家称为腐烂病、烂疙瘩、脱帮病等,就是因为该病害多由菜帮基部伤口处侵人,形成水渍状微黄色病斑,后发病区黏滑软化并腐烂(图1,图2);受害严重的植株还会由菜帮基部向根部发展。

软腐白菜细菌群落结构多样性与生长环境的相关性

【目的】通过对比分析不同生境白菜软腐病变组织与根系土壤相关细菌的群落结构,探讨白菜软腐细菌种群的多样性,以及与生境土壤细菌种群的相关性。【方法】样品采自河南省2个不同生态型白菜田,以成熟白菜软腐组织及病株根系土壤为目标,利用模拟原环境的培养基成分和条件,对样品中的细菌进行高通量分离培养和细胞16S rRNA基因序列比对分析,获得各样品细菌种群结构及其丰度,进而对各样品的优势菌群进行对比分析。【结果】两种不同生境白菜软腐组织细菌总量M05T为4.0×108 cell/g、Q2T为1.2×1011 cell/g,分别获得纯菌56株和85株。M05T优势菌为萎蔫短小杆菌萎蔫亚种(Curtobacteriumflaccumfaciens pv.Flaccumfaciens);Q2T优势菌为假单胞菌(Pseudomonas spp.)(栖木槿假单胞菌(P.hibiscicola)、台湾假单胞菌(P.taiwanensis)、托木尔假单胞菌(P.tuomuerensis)、莫塞尔假单胞菌(P.mosselii))。根系土壤细菌总量M05S为2.7×105 cell/g、Q2S为6.2×107 cell/g,分别获得纯菌36株和70株。M05S优势菌为巨大芽胞杆菌(Bacillus megatherium);Q2S优势菌为假单胞菌(Pseudomonas spp.)(香鱼假单胞菌(P.plecoglossicida)、栖木槿假单胞菌(P.hibiscicola)、类黄色假单胞菌(P.parafulva)、蒙氏假单胞菌(P.monteilii)、膝形假单胞菌(P.geniculata))。【结论】依据不同生境的白菜软腐组织和根系土壤细菌群落结构对比分析,认为白菜软腐菌可能具有多样性和多种致病来源,本研究为软腐病多种防治措施的制定提供基础研究和菌种资源。

铁棍山药内生菌的分离及对白菜软腐菌拮抗菌的筛选

用涂布平板法从铁棍山药(Dioscoreaopposita Thunb. CV. Tiegun)中分离得到32株内生菌菌株。用抑菌圈法测定其对白菜软腐菌(Erwiniacarotovora var. carotovora)的拮抗作用,共得到11株对该病原菌有拮抗作用的菌株,占菌株总数的34.4%。其中抑菌圈直径大于或等于10mm的菌株有4株,分别是B-2、B-5、B-6和F-8,占菌株总数的12.5%,抑菌圈直径最大的可达15mm。对具有拮抗作用的菌株进行革兰氏染色和芽孢染色,结果表明:这11株菌株全为细菌,均无芽孢;革兰氏染色阳性(G+)的有4株,革兰氏染色阴性(G-)的有7株;有3株菌株为球菌,其余为杆菌。

筛选利用生防菌防治大白菜软腐病研究

针对大白菜软腐病危害重，防治效果不理想等问题。从病区健、病株作物根际上分离到１２６株细菌，通过菌株离体拮抗性能、菌株荧光反应、菌株处理后大白菜过氧化物酶活性以及对盆栽和田间小区大白菜软腐病的防治等试验，获得了Ｂ１１、Ｂ１２、Ｊ１Ｂ等３个较理想的生防菌株。其对软腐欧氏杆菌拮抗圈半径分别为１４．５ｍｍ、１２．５ｍｍ、１７．０ｍｍ；处理大白菜后过氧化物酶活性分别比对照增加３４．１０％、２４．１２％、１３．９３％；大田小区试验防效分别为５９．８％、５０．２％、３８．８％，产量分别比对照增加２８．５％、１８．６％、２５．７％。

夏季大白菜软腐病的生物农药防治

采用块根法及盆栽试验测定了6种药剂对夏季大白菜软腐病的防治效果。块根法试验结果表明:72%农用链霉素1000mg/L、中生菌素2000mg/L、菜丰宁B13000mg/L及丰灵3000mg/L对大白菜软腐病菌的防治效果较好,防效分别为87.72%,81.06%,82.32%和83.17%。并对防效较好的药剂进行盆栽试验,结果表明:丰灵拌种加喷灌的处理对大白菜软腐病的防效最佳,其防效高达82.31%,显著优于其它药剂的防效,是防治夏季白菜软腐病的理想药剂。

康宁木霉SMF2防治大白菜软腐病研究

利用康宁木霉SMF2分生孢子制剂进行了防治大白菜软腐病的田间药效试验。结果表明:2 000 g/667m2康宁木霉SMF2分生孢子制剂防治大白菜软腐病效果最好,防治效果为82.08%,明显高于大面积推广应用的农用链霉素的防治效果69.81%,差异极显著,康宁木霉SMF2防治大白菜软腐病的持效期比农用链霉素长。

绿色木霉制剂防治大白菜软腐病田间药效试验

通过绿色木霉制剂穴施对大白菜软腐病的防治试验研究,结果表明:绿色木霉制剂对大白菜软腐病的防治效果不但明显且优于农用链霉素,其持效期长,其中以绿色木霉制剂36kg/hm2的防效最好,其次是绿色木霉制剂24 kg/hm2。用绿色木霉制剂处理的大白菜不但软腐病的发病率低,产量高,使用绿色木霉制剂36 kg/hm2的增产率可达63.33%,而且其它病害的发病程度也明显降低。

防治大白菜软腐病细菌菌株的筛选与鉴定

采用平板对峙法从江苏省南京市菜园土壤分离菌株中筛选到8株对胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种(Pectobacterium carotovorum subsp.carotovorum,简称Pcc)具有一定拮抗效果的细菌菌株。以大白菜为研究对象,在温室内采用喷雾接种法接种拮抗细菌菌株,以淋洗法接种病原菌Pcc,建立了以植株叶片软腐面积为指标的活体筛选方法。温室试验表明,菌株DQ31、DQ6、DQ23、DQ76对大白菜软腐病具有较好的防治效果,防效分别为56.62%、54.52%、50.78%、46.06%,其中DQ31的田间防效达到48.29%,为大白菜软腐病的生物防治提供了新选择。生理生化特征测定、16S rDNA及gyrB基因测序等分析表明,菌株DQ31为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。

白菜软腐病拮抗菌M-14拮抗机理和拮抗物质的初步研究

通过室内筛选得到对白菜软腐病有较强拮抗作用的菌株M-14,对其拮抗机理、拮抗物质的稳定性及抗菌谱进行了初步研究。结果表明:拮抗菌M-14对白菜软腐病菌的拮抗作用源于代谢物质而不是菌体本身;M-14酸碱稳定性极强,在pH 3～11的范围内均表现出较强的抑菌效果;拮抗菌M-14产生的拮抗物质热稳定性较强,在40℃时抑菌活性最强,10～100℃范围内均表现较强的抑菌活性;经对5种供试菌的抑菌作用测试,表现出抗菌谱广的特点。

藓类提取物对白菜软腐病菌的抑菌活性

以欧文氏菌(Erwiniacarotovora)为供试菌,对24种藓类乙醇提取物进行抑菌活性筛选。结果表明,有15种藓类提取物对欧文氏菌表现出不同程度抑菌作用,并将有较强抑菌作用的提取物对欧文氏菌进行了最低抑菌浓度MIC测定。

几种杀菌剂对黄瓜细菌性斑点病及大白菜软腐病的抑制作用

采用抑菌圈法和含毒介质法测定几种杀菌剂对黄瓜细菌性斑点病和大白菜软腐病的抑制作用。结果表明,抑菌效果较好的为农用链霉素、新植霉素和水合霉素;丙森锌对黄瓜细菌性斑点病较好,而对大白菜软腐病则较差;氢氧化铜、噻菌铜及中生菌素抑制作用一般;春雷霉素抑菌活性较差。

白菜软腐病拮抗菌M-14抗菌物质产生条件研究

通过室内筛选得到对白菜软腐病有较强拮抗性的菌株M-14,对其抗菌物质产生条件进行了初步研究。结果表明:M-14菌株发酵最佳条件为培养基初始pH值为6.0,接种量为5%,32℃培养42 h。

蛋白农药HrpNEcc防治大白菜软腐病试验

对HrpNEcc蛋白农药应用于大白菜软腐病防治的技术参数进行了研究,研究发现,HrpNEcc纯蛋白田间喷洒使用的适宜剂量为6~10 mg/m2或者使用体积分数为0.017%～0.033%稀释液为宜,对大白菜细菌性软腐病防治率可达90%左右;贮藏期间使用体积分数0.1%稀释溶液对大白菜细菌性软腐病防治率达到75.4%,可见HrpNEcc能有效防治大白菜细菌性软腐病的发生.

白菜类软腐病的发生与综合防治

白菜软腐病又叫腐烂病、脱帮等，与白菜病毒病、白菜霜霉病合称大白菜的三大病害，主要危害大白菜。白菜软腐病在全国均有发生，尤以南方发生较重，不仅发生普遍而且危害期很长。在田间、贮运期以至市场上都能引起腐烂，造成十分严重的损失。白菜类软腐病包括大白菜软腐病和普通白菜软腐病。为帮助大家更好地了解和防治白菜类软腐病，特将其发生规律与综合防治措施介绍如下。

白菜软腐病生防菌B-13最佳培养条件研究

对白菜软腐病生防菌B-13进行了最佳培养条件研究。单因子及正交试验结果表明,氮源对B-13生物活性的影响最大,其次是碳源,NaCl的影响较小;B-13发酵培养基的理想配方为:2%玉米粉+1%酵母膏+1.5%NaCl。B-13的最佳初始pH值是7.5,最适温度为35℃,最佳接种量为3%,最佳培养时间为30 h。

大白菜软腐病的发生及综合防治

阐述大白菜软腐病的发病期、发病原因及条件,并从选地、选择良种、播前浸种、改变种植模式、反复中耕、合理浇水、施肥、早发现早治疗等方面介绍其防治措施,以供大白菜种植户参考。