四川大白菜细菌性软腐病新病原菌Pectobacterium versatile的鉴定

为明确引起四川理县大白菜软腐病的病原菌种类,从理县梭罗沟村田间采集具有典型软腐症状的大白菜病样,采用组织分离、致病力测定、生理生化分析、形态学和分子生物学方法进行鉴定。结果表明,分离获得的5株细菌在NA培养基上形成的菌落呈圆形、半透明、乳白色、中心突起、边缘平滑,在半选择性培养基CVP上培养48 h后产生凹陷。5株菌均能使大白菜、胡萝卜、马铃薯和芹菜的离体组织腐烂,接种于白菜苗后叶片呈湿腐萎蔫症状。通过大白菜叶柄接种部位形成的病斑长径来比较菌株致病力强弱,各菌株的致病力有显著差异。基于看家基因pgi、rpoS、mdh、proA、mtlD和icdA(NCBI登录号为OL963562~OL963571)的多基因联合系统发育树,分离菌株与Pectobacterium versatile聚为一簇,dnaX-leuS-recA(NCBI登录号为OL963572~OL963576)的多位点序列分析(MLSA)进一步支持以上结果,且准确性更高。分离菌株的生理生化特征与P.versatile模式菌株一致,综上将其鉴定为P.versatile。这是我国首次报道P.versatile引起大白菜软腐病。

3株生防菌对猕猴桃软腐病的作用

为探究生防菌对猕猴桃软腐病的作用,选用前期获得的3株生防菌(贝莱斯芽孢杆菌P2-1、耐盐芽孢杆菌PL7和多黏芽孢杆菌NL4)进行室内抑菌试验、猕猴桃软腐病接种和自然发病防治试验,并研究了3株生防菌对猕猴桃果实病程相关基因表达的影响。试验结果表明,菌株P2-1、PL7和NL4对猕猴桃软腐病菌(Botryosphaeria dothidea)菌丝生长的抑制率分别为83.49%、74.82%和49.33%,P2-1的抑制效果最好,PL7次之,NL4最差;3株生防菌对接种猕猴桃软腐病均具有抑制作用,其中以P2-1的效果最好,PL7次之,NL4最差;3株生防菌均能显著降低猕猴桃软腐病自然发病率,其中以P2-1处理的发病率最低;3株生防菌处理均对猕猴桃果实品质无影响;3株生防菌处理猕猴桃果实后,果实中基因PR1、PR5和SOD的表达显著上调。研究结果可为菌株P2-1、PL7和NL4开发为防治猕猴桃软腐病的生物制剂提供参考。

生防菌ZF510的分离鉴定及其对白菜细菌性软腐病的防治效果研究

白菜软腐病是由巴西果胶杆菌Pectobacterium brasiliense引起的一种危害严重的细菌性病害。目前,针对蔬菜细菌性软腐病高效防治的产品较少。为了筛选对白菜细菌性软腐病具有良好拮抗效果的生防细菌,本研究从白菜根际土壤中分离到一株对细菌性软腐病菌具有显著拮抗效果的生防细菌ZF510。经过形态学特征观察、生理生化特征和多基因系统发育树分析,并通过盆栽试验验证拮抗菌株对白菜细菌性软腐病的防治效果。结果表明,菌株ZF510为东湖假单胞菌Pseudomonas donghuensis,在代谢过程中产生蛋白酶,有合成IAA能力、嗜铁能力、溶磷能力。通过抑菌谱分析,证明菌株ZF510对巴西果胶杆菌、野油菜黄单胞野油菜致病变种等7种病原细菌具有显著的拮抗效果。采用二分皿法测定其挥发性物质对立枯丝核菌、黄瓜蔓枯病菌、茄匍柄霉3种病原真菌均有抑制效果。盆栽试验结果显示,接种菌株ZF510的白菜细菌性软腐病症状明显减轻,防治效果达到44.56%。综上所述,菌株ZF510具有良好的生防潜力和应用前景。

新洋葱伯克霍尔德氏菌YM12的分离鉴定及其对黄瓜软腐病的防治效果

黄瓜软腐病是由巴西果胶杆菌Pectobacteriumbrasiliense引起的一种细菌性病害,该病害发生严重且难防难控,以筛选具有高效抑菌作用的生防微生物为目的,本研究在黄瓜根际土壤中分离得到了一株对巴西果胶杆菌具有显著抑制效果的菌株YM12。经形态学观察、生理生化特征测定及多基因系统发育树分析,鉴定其为新洋葱伯克霍尔德氏菌Burkholderia cenocepacia;抗生素合成基因检测结果表明,菌株YM12具有产生硝吡咯菌素pyrrolnitrin与藤黄绿脓菌素pyoluteorin的能力;其他生防性状分析表明,YM12具有溶磷能力,还可产生蛋白酶及嗜铁素。经抑菌谱分析,菌株YM12能够抑制5种病原细菌及3种病原真菌的生长。盆栽试验结果表明,菌株YM12对黄瓜软腐病具有明显的防治效果,防效可达62.84%,优于对照药剂春雷霉素。综上,菌株YM12是目前首次报道的对细菌性软腐病具有良好生防效果的新洋葱伯克霍尔德氏菌。

高效防治半夏软腐病生防菌的筛选及其生物防治效果研究

[目的]本研究旨在从实验室现有的生防细菌菌库中筛选对半夏软腐病具有较高防治效果的生防菌株,为半夏软腐病的绿色防控技术提供新的菌株资源。[方法]通过平板拮抗从实验室保存的300株具有生防潜力的菌株中,筛选对半夏软腐病具有拮抗效果的菌株。进一步测定拮抗菌株的水解酶活性和透明圈半径,通过对抑菌圈和透明圈半径进行统计赋值得到对半夏软腐病较高防治效果的复筛菌株。通过离体及温室防效试验验证复筛菌株对半夏软腐病的防治效果。[结果]初筛得到20株对半夏软腐病具有生防潜力的菌株,测定抑菌圈、透明圈半径大小,按照统计结果对20株菌株进行赋值,结果显示5YN8、XZ231和7Ze3赋值分数最高,分别为11.0、11.0和10.5。经离体防效验证得到20株初筛菌株对半夏软腐病腐烂程度的不同影响,对比赋值大小及半夏块茎的腐烂程度发现建立的赋值体系与菌株的生防效果具有较好的相关性,即赋值分数越高,半夏块茎的生防效果越好。将筛选得到的赋值分数最高的3株生防菌株5YN8、XZ231与7Ze3进行温室防效验证,发现它们对半夏软腐病防治效果分别为85.01%、79.55%和79.62%。通过16S rRNA基因测序比对发现5YN8为贝莱斯芽胞杆菌(Bacillus velezensis),XZ231和7Ze3均为枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)。[结论]5YN8、XZ231与7Ze3三株生防菌株能够有效防治半夏软腐病,具有潜在的应用价值。

‘红阳’猕猴桃软腐病病原菌细极链格孢菌的基因组组装与功能分析

以‘红阳’猕猴桃软腐病病原菌细极链格孢菌为材料,利用三代结合二代测序技术对其进行基因组测序。结果表明,组装的细极链格孢菌基因组大小为33.87 Mb,N50长度为6.8 Mb,GC含量为50.87%。基因组的组装共产生10条scaffolds,其中5条scaffolds两端包含端粒重复序列(TTAGGG),而另外5条仅一端有端粒重复序列。预测的11726个基因包括34个ncRNAs、118个tRNAs、25个rRNAs和11549个编码基因。对编码基因进行COG、GO和KEGG功能注释,表明碳水化合物的转运和代谢相关基因发挥重要功能。此外,发现有569个碳水化合物活性酶(CAZymes)基因。这些结果可为解析细极链格孢菌的致病机制提供基础数据。

贝莱斯芽孢杆菌防治甜樱桃采后软腐病的效果和机理

为探索贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)抑制甜樱桃软腐病的作用机理,实验分析贝莱斯芽孢杆菌KT对匍枝根霉(Rhizopus stolonifer)LC-7的体外和甜樱桃果实体内抑制效果,以及贝莱斯芽孢杆菌KT菌株对甜樱桃果实相关防御酶活力的影响,并通过转录组学解析在与匍枝根霉互作期间,贝莱斯芽孢杆菌KT菌株中与次级代谢物合成和生物防治相关基因的表达情况。结果表明,1×10^(9) CFU/mL贝莱斯芽孢杆菌KT菌悬液对匍枝根霉LC-7菌丝抑制率达87.12%,此时孢子萌发率和胚芽管长度分别为21.54%和11.45μm。在甜樱桃果实上,1×10^(9) CFU/mL贝莱斯芽孢杆菌KT菌悬液处理48 h后,果实软腐病发病率约为20%,比对照组降低了约80%,并且贝莱斯芽孢杆菌KT菌悬液能抑制甜樱桃果实多酚氧化酶和脂氧合酶活力,诱导过氧化物酶、苯丙氨酸解氨酶、几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶活力增加,提高果实抗氧化和抗病能力。扫描电子显微镜观察发现,经与贝莱斯芽孢杆菌KT菌株共培养后,匍枝根霉LC-7菌丝和孢子形态扭曲,贝莱斯芽孢杆菌KT对匍枝根霉LC-7具有明显的致畸作用。转录组学分析结果表明,贝莱斯芽孢杆菌KT菌株中抗生素合成基因簇bacillaene中的pksIJ和糖醛酸磷壁酸合成基因簇中的tuaAGE基因表达上调,此外发现,表达差异显著的基因主要富集在生物学过程中的核糖核蛋白复合体组装和亚基组成及核糖体组装等一系列与核糖体活动相关的过程。贝莱斯芽孢杆菌可能通过营养和空间竞争以及分泌抑菌活性物质直接抑制匍枝根霉LC-7,还可诱导甜樱桃果实的抗病性。贝莱斯芽孢杆菌对由匍枝根霉引起的甜樱桃软腐病有良好的控制作用,具有开发成生防菌剂的潜力。

蔬菜软腐病菌广谱拮抗细菌菌株筛选鉴定及防效研究

为获得广谱高效拮抗蔬菜软腐病菌的生防菌株,本研究以白菜软腐病菌Pectobacterium carotovorum BC2、圆葱软腐病菌Burkholderia gladioli YC1、娃娃菜软腐病菌Pseudomonas sp.WWC2为靶标,采用梯度稀释法及抑菌圈法从蔬菜根际土中分离筛选拮抗菌株。通过形态、生理生化和16S rDNA序列分析对菌株进行鉴定,明确生防菌株种属地位,并研究了菌株生长特性,利用牛津杯法测定生防菌株对3株软腐病菌及3株人源性病原细菌抑菌作用,采用平板对峙法测定其对8株植物病原真菌的抑菌作用,采用针刺接种法测定其对蔬菜离体叶片和田间的防效,并利用X-gal显色法测定其对白菜软腐病菌群体感应信号因子的降解活性。通过研究菌株生长特性、对白菜软腐病菌群体感应信号因子的降解活性、抑菌谱以及对白菜软腐病的田间防效。结果表明,从20个土样分离的1012个细菌中,筛选出18株拮抗菌,其中筛选出1株对3种软腐病菌YC1、BC2、WWC2均有抑菌活性的生防菌株DJ1,其抑菌圈直径分别为(10.60±0.20)mm、(6.92±0.56)mm和(3.92±0.16)mm。经鉴定菌株DJ1为贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis。菌株DJ1最适生长温度为30℃,具有较好的耐盐性,能在1%-5%NaCl条件下生长,具有一定降解白菜软腐病菌群体感应信号因子的能力,能够抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和8种植物病原真菌生长,1×10^(8) CFU/mL菌液浓度对白菜、圆葱、娃娃菜软腐病离体防效分别为84.30%、60.21%和69.96%,对白菜软腐病田间防效为79.91%。因此,贝莱斯芽孢杆菌DJ1在防治蔬菜软腐病方面具有潜在应用潜能。

拮抗链霉菌26B的筛选及其在不同含水量土壤中对白菜软腐病的防病效果

为挖掘防治白菜软腐病的生防菌,本研究采用牛津杯法从38株白菜根际放线菌中筛选到一株拮抗放线菌26B,通过形态学观察和16S rRNA基因序列分析将菌株26B初步鉴定为链霉菌。该菌除菌发酵滤液对供试的白菜软腐病菌Pectobacterium carotovorum subsp.brasiliensis BC1及3种马铃薯黑胫病菌均表现较高的抑菌活性,其中对白菜软腐病菌抑菌直径达到23.97mm。萌发试验表明,白菜种子经26B除菌发酵滤液浸种后发芽势、发芽指数、根长及鲜重显著增加。采用浸根法测定菌株26B除菌发酵滤液对软腐病菌荧光标记菌株BC1-gfp在白菜根部定殖量的影响,浸根处理后48h,白菜根上BC1-gfp的数量达到2.3×109CFU/g;未从26B除菌发酵滤液与BC1-gfp菌悬液混和处理(体积比10%)的白菜根上检测到病原菌。盆栽防病试验结果表明,在含水量为14%和20%的土壤中,菌株26B除菌发酵滤液对白菜软腐病的防效分别达96.0%和89.8%。上述结果表明,链霉菌26B是一株具有潜在开发应用价值的生防菌株,将链霉菌26B应用与土壤水分管理相结合可进一步提高其防病效果。

魔芋软腐病致病菌Pectobacterium aroidearum的特征及贝莱斯芽孢杆菌的生防效果

从云南富源、楚雄以及四川宜宾等魔芋产区的发病植株中分离到3株魔芋软腐病致病菌MY7、MY11和MY18,通过对形态、致病性和分子特征的分析,明确了其生物学特性和系统分类,并评价了贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)对魔芋软腐病的生防效果。结果表明,菌株MY7、MY11和MY18均能产生果胶酶,属有运动性的革兰氏阴性杆菌,其特异引物PCR扩增结果与Pectobacterium aroidearum KC20一致;基于16S rDNA和pmrA基因序列系统发育分析,这3株菌株与已知的P.aroidearum菌株聚在一个分支;在Pectobacterium属内,这3株菌株之间及其与P.aroidearum PC1和KC20菌株全基因组之间平均核苷酸同源性(ANI)值均高于同种的阈值(95%~96%),因此这3株菌株被鉴定为P.aroidearum。Biolog GENⅢ平板碳源利用分析和生理生化测试结果显示,MY7、MY11、MY18与P.aroidearum SCRI 109T及P.aroidearum KC20对碳源的利用和生理生化特性的表现基本一致。人工接种MY18可感染多种蔬菜和观赏植物;平板拮抗试验结果表明,参试的7株贝莱斯芽孢杆菌(B.velezensis)均能抑制其生长;温室盆栽条件下,B.velezensis BPC16和W2-7对MY18引发的魔芋软腐病防效分别为43.01%和31.99%,说明B.velezensis在对魔芋软腐病的生物防控中具有应用潜力。

拮抗菌枯草芽孢杆菌1151及其所产抗菌肽对辣椒采后软腐病的控制作用

软腐病是导致辣椒采后贮运期间腐烂损失最严重的细菌性病害。为了降低辣椒因软腐病而造成的损失,该研究从腐烂辣椒中分离病原菌并筛选拮抗菌以控制该病原菌引起的软腐病。结果显示腐烂辣椒中分离的病原菌XC1为胡萝卜软腐病果胶杆菌巴西亚种(Pectobacterium carotovorum subsp.brasiliense,Pcb),Pcb XC1具有强致病能力,104 CFU/mL及以上浓度在室温条件下(25℃)3 d内能够导致辣椒100%腐烂。进一步,采用双层琼脂平板法筛选出一株拮抗菌1151,经16S rDNA鉴定为枯草芽孢杆菌。体外抑菌结果表明枯草芽孢杆菌1151菌体及所产抗菌肽均对Pcb XC1有抑制作用。辣椒体内控病结果表明枯草芽孢杆菌1151菌体及所产抗菌肽均能降低辣椒的腐烂率并减小病斑直径,其中抗菌肽处理效果更佳。抗菌肽能够减少辣椒体内99%的Pcb XC1数量。扫描电镜结果也表明抗菌肽处理后的辣椒表面软腐病症更少,无明显细胞壁降解引起的褶皱和碎片。一方面从蛋白层面,经LC-MS/MS鉴定到了BHP、SP-B和Hb 98-114共3个抗菌肽。另一方面从基因层面,经BAGEL4数据库从枯草芽孢杆菌1151基因组中鉴定到了一个细菌素基因簇,含有2个细菌素(Subtilosin A和Subtilosin Sbox)。该研究表明枯草芽孢杆菌1151能够减轻辣椒由软腐病引起的腐烂损失,其所产抗菌肽发挥了重要作用,对辣椒采后的贮藏保鲜方法具有重要参考意义。

植物乳杆菌LAB2对辣椒软腐病的控制作用及辣椒贮藏品质的影响

细菌性软腐病是辣椒采后主要病害之一,该研究旨在探究拮抗乳酸菌控制辣椒软腐病的应用潜力。胡萝卜软腐病果胶杆菌CBJ3(Pcc CBJ3)致病性分析表明25℃(≥3 lg CFU/mL)和4℃(8 lg CFU/mL)贮藏下,均可致辣椒软腐率达100%,致腐性极强。从辣椒上筛选出一株对Pcc CBJ3有强抑菌活性的拮抗菌LAB2,经16S rDNA鉴定为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。L.plantarum LAB2所产细菌素以及无细胞发酵液(cell-free fermentation supernatant,CFS)对Pcc CBJ3均有体外抑菌活性。通过基因组草图序列在数据库比对鉴定到了4个细菌素:plantaricin_E、plantaricin_F、plantaricin_N和plantaricin_J。体内控病试验表明L.plantarum LAB2所产细菌素和CFS对辣椒软腐病均有控制效果,且CFS控病能力更强,显著降低了软腐病发病率和病斑直径(P<0.05)。扫描电镜显示,CFS处理可维持辣椒表皮结构的完好性。微生物计数结果表明,CFS处理可显著降低辣椒上的病原菌数量(P<0.05)。进一步研究结果显示,CFS处理可显著延缓辣椒贮藏期的硬度下降、失水、可溶性固形物含量流失、丙二醛的积累(P<0.05)。该研究为辣椒采后贮藏保鲜生物防治技术应用提供参考。

广东炭步芋头软腐病病原菌的分离鉴定与生物防治

为明确为害广东炭步槟榔香芋软腐病的病原菌种类,研究配套生物防治技术,为其防治提供参考。采用组织研磨法进行病原菌分离,基于科赫氏法则进行致病性测定,根据形态学观察、16S rDNA序列与系统进化树分析及生物学特性测定明确致病菌种类,并将芋脱毒种苗与微生物菌剂及生物炭相结合进行芋软腐病的防治研究。结果表明,经组织研磨法分离到3株分离物,柯赫氏法则验证和菌落形态特征、16S rDNA序列与系统进化树的分析结果表明,菌株T2202为广东炭步芋头软腐病致病菌,属胡萝卜软腐果胶杆菌;菌株S1905和S1910属假单胞菌,可导致芋头内部空洞、干燥发黑。胡萝卜软腐果胶杆菌菌株T2202最佳生长的pH皆为7.0,可在5.0%的NaCl培养液和37℃下生长,氧化酶反应和吲哚反应呈阳性,明胶液化呈阴性,可发酵葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、甘露醇、乳糖产酸,可产H2S。使用脱毒种苗进行栽培,在栽培基质中适量添加生物炭,并在定植前就开始施用微生物菌剂,定植后再定期施用,对芋软腐病可以起到很好的防治作用。

北京欧文氏菌4个糖基转移酶活性测定及蛋白相互作用分析

北京欧文氏菌(Erwinia beijingensis)可引起刺芹侧耳细菌性软腐病,为明确该病原菌中糖基转移酶的功能,以糖基转移酶基因为研究对象,构建重组表达载体进行表达纯化;并测定蛋白活性,分析蛋白间相互作用。结果表明,成功构建了原核表达载体,获得4个可溶性蛋白。经亲和层析柱纯化获得MshA、WbnH2、EpsH及TuaG蛋白,活性测定显示4个蛋白均可以利用UDP-糖,并优先利用UDP-半乳糖。GST pull down证实WbnH2及TuaG蛋白分别与MshA及EpsH蛋白在体外具有相互作用。以上研究结果为进一步研究北京欧文氏菌糖基转移酶基因功能奠定了基础。

软腐菌识别侵染魔芋根部影响因子的研究

魔芋(Amorphophallus Konjac)软腐病频发已成为制约魔芋种植业发展的瓶颈。目前对其病原、发病规律及防治方法等进行了一些研究,加深了对魔芋软腐病的认识,取得了一定进展,但对魔芋软腐病的侵染和发病机制缺乏系统而深入的研究。通过测定软腐菌(Pectobacterium carotovora subsp.carotovora)在魔芋根表吸附量和根部侵入量,研究不同温度、p H、接种浓度、LPS和EPS对软腐菌在魔芋苗根部吸附和侵入过程的影响。结果表明,软腐菌在魔芋苗根部吸附侵入的最适温度条件是30℃、p H 6.0,随接种浓度增加吸附和侵入量增加;菌体LPS是魔芋软腐欧文氏菌对寄主根表的吸附所不可缺少的成分,而EPS预处理对吸附侵入量影响较小。本研究明确不同外界因子(温度、p H、接种浓度)和细菌识别子(EPS和LPS)在软腐菌吸附识别魔芋根际中的作用,从源头上了解软腐菌对魔芋根系的侵染机制,为研究病害循环和制订防治策略提供新的启示,从根本上有效控制魔芋病害的发生,并为魔芋的抗病育种提供新思路。

一株新的胡萝卜软腐欧文氏菌的分离和鉴定

从大白菜软腐组织中分离出一株软腐病细菌BC1,经过形态观察、生理生化特性分析、致病性检测和 16SrDNA序列分析 ,该分离物被鉴定为胡萝卜软腐欧文氏菌胡萝卜亚种 (Erwiniacarotovorasubsp .carotovora ,Ecc)的一个新菌株 ,编号为BC1。这是首次从 16SrDNA序列水平上对在我国分布的软腐欧文氏菌进行鉴定。EccBC1的 16SrDNA序列与其它软腐欧文氏菌株的 16SrDNA序列之间同源性达 98 7%～ 99 3% ,而且在系统发育树中独立于Ecc其它菌株。序列分析结果表明 ,EccBC1具有至少 2种不同的 16SrDNA序列 ,它们都在第 4 5 9位和 4 73位 (相对于大肠杆菌 16SrDNA序列 )发生碱基突变 ,同一基因中两个突变位点之间彼此互补 ,处于 16SrRNA螺旋H17颈部 ,而且这两处碱基变异只存在于BC1菌株中。通过与其它软腐欧文氏菌亚种和菌株 16SrDNA序列进行比对分析 ,还进一步鉴定出一些BC1菌株特异的 16SrDNA碱基突变位点。本文报道的EccBC1两个 16SrDNA序列在GenBank中的登录号分别为AY30 90 6 8和AY30 90 6 9。

魔芋软腐病菌分子鉴定与遗传多样性

通过对分离的魔芋软腐病菌株和其它参试菌株的致病性测定、选择性培养基培养性状观察和16S-23S rDNA转录间隔区PCR(ITS-PCR)分析,将测试的33株软腐病菌株主要分为3个组群。第1组群为胡萝卜软腐欧文氏杆菌胡萝卜软腐亚种(Erwinia carotovorasubsp.carotovora,E.c.c.);第2组群为菊欧文氏杆菌(Erwinia chrysanthemi,E.ch.);还有一组未能确定的菌株。利用细菌基因组重复序列通用引物BOX和J3进行Rep-PCR特异性扩增,引起软腐病的菌株E.c.c.和E.ch.(ITS-PCR鉴定)种内的Rep-PCR指纹存在明显的遗传分化,经聚类分析,在0.1水平上把E.c.c.13株区分为5个类群。

镧对软腐欧文氏菌生长及其胞外酶活性的影响

研究了镧对软腐细菌（Ｅｒｗｉｎｉａｃｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｉ，Ｅｃｈ）生长及胞外酶活性的影响。结果表明，Ｌａ３＋浓度为５０、１００、１５０、２００、２５０、３００和３５０ｍｇ／Ｌ时，固体培养中对Ｅｃｈ生长均呈抑制作用，且随浓度提高，抑制作用加强，表现为菌落出现时间比对照延长，７ｄ后的菌落直径比对照减小。液体培养中，浓度＜２００ｍｇ／Ｌ，Ｌａ在２４ｈ内对Ｅｃｈ生长有轻微刺激作用；但随着浓度提高和培养时间的延长，Ｅｃｈ生长明显受到抑制。当Ｌａ３＋浓度＞３５０ｍｇ／Ｌ，Ｅｃｈ生长基本处于停止状态；浓度为２００ｍｇ／Ｌ，对Ｅｃｈ产生胞外酶能力有一定影响，其中对纤维素酶活性增强最明显，其次是蛋白酶，而对果胶酶活性有减弱作用。经稀土处理的无细胞滤液对马铃薯块茎组织的浸离力降低。

铁棍山药内生菌的分离及对白菜软腐菌拮抗菌的筛选

用涂布平板法从铁棍山药(Dioscoreaopposita Thunb. CV. Tiegun)中分离得到32株内生菌菌株。用抑菌圈法测定其对白菜软腐菌(Erwiniacarotovora var. carotovora)的拮抗作用,共得到11株对该病原菌有拮抗作用的菌株,占菌株总数的34.4%。其中抑菌圈直径大于或等于10mm的菌株有4株,分别是B-2、B-5、B-6和F-8,占菌株总数的12.5%,抑菌圈直径最大的可达15mm。对具有拮抗作用的菌株进行革兰氏染色和芽孢染色,结果表明:这11株菌株全为细菌,均无芽孢;革兰氏染色阳性(G+)的有4株,革兰氏染色阴性(G-)的有7株;有3株菌株为球菌,其余为杆菌。

德国鸢尾(Iris germanica L.)细菌性软腐病病原物初步鉴定

从德国鸢尾(Iris germanicaL.)栽培品种软腐病感病植株上分离到2株病原细菌,经回接试验证明为鸢尾软腐病病原细菌;同时还对2株细菌进行了形态观察、致病性测定、染色反应、培养性状观察和生理生化反应等研究,并将该病原细菌初步鉴定为欧文氏菌菊欧软腐致病型(Erwinia chrysanthemiBurkhdder,Mc Fadden&Di-mock)。