淫羊藿提取物对体外软骨器官生长的促进作用

背景:结合课题组前期的研究工作,考虑到中药中含有的多种软骨活性成分可能会对软骨细胞起到多靶点调节的作用,尝试用中药代替细胞因子,以促进软骨生长。目的:观察中药淫羊藿提取物对软骨生长和软骨细胞增殖活性的影响。设计、时间及地点:以组织为观察对象的随机配对实验,于2003-04/2007-12在河南省正骨研究院完成。材料:心叶淫羊藿Epimedium.brevicornum药材由河南省洛阳市医药公司提供;罗曼鸡胚由河南省洛阳市峪口禽业有限公司提供。方法:采用体外转管培养技术培养鸡胚股骨,实验分为2组,对照组:在培养管加入含RPMIMedium1640和体积分数为10%胎牛血清的培养液;实验组:在培养管加入含淫羊藿提取物的培养液。实验组培养液中加入不同质量浓度(0.02,0.05,0.10,0.50,1.00,5.00,10.00,20.00mg/L)的淫羊藿,观察软骨生长情况;选上述实验中的最适宜生长质量浓度1.00mg/L及质量在(4.0±0.1)mg的标本,相同培养条件下培养20d,称量每个取样时间点的样本质量;用1.00mg/L最适宜生长质量浓度按上述培养条件培养7d,进行股骨生长长度、质量测定,同时四甲基偶氮唑盐检测细胞增殖。主要观察指标:①不同质量浓度淫羊藿提取物对软骨器官生长质量的影响。②1.00mg/L淫羊藿提取物不同培养时间对鸡胚股骨生长的影响。③1.00mg/L淫羊藿提取物培养7d对鸡胚股骨生长和细胞增殖的影响。结果:①在0.02～20.00mg/L质量浓度范围内,实验组股骨标本质量均高于对照组,但仅0.05～10.00mg/L质量浓度区间内两组差异有显著性意义(P<0.05～0.01),表明淫羊藿提取物在此质量浓度范围内能够表现出明确的促进股骨生长的生物学效应。②两组的股骨质量在1.00mg/L淫羊藿提取物培养20d内均表现平稳的生长趋势,实验组股骨质量从第2天起即高于对照组(P<0.05)。③1.00mg/L质量浓度培养7d后,实验组的股骨长度、股骨湿质量、股骨干质量及细胞增殖量均高于对照组(P<0.05～0.01)。结论:淫羊藿提取物能够在体外促进软骨器官生长和细胞增殖。