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脊索细胞促进髓核软骨样细胞增殖及表型维持 被引量:20
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作者 赵献峰 刘浩 +3 位作者 丰干均 邓力 李秀群 梁涛 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期939-943,共5页
目的分离纯化兔髓核中的细胞成分,观察脊索细胞形态及对软骨样细胞增殖及细胞表型的影响。方法6只4周龄新西兰兔胸腰段脊柱,获取髓核,0.2%Ⅱ型胶原酶消化法及不连续密度梯度法分离纯化脊索细胞及软骨样细胞。实验分为单纯软骨样细胞培养... 目的分离纯化兔髓核中的细胞成分,观察脊索细胞形态及对软骨样细胞增殖及细胞表型的影响。方法6只4周龄新西兰兔胸腰段脊柱,获取髓核,0.2%Ⅱ型胶原酶消化法及不连续密度梯度法分离纯化脊索细胞及软骨样细胞。实验分为单纯软骨样细胞培养组(A组)及脊索细胞、软骨样细胞(1∶1)共培养组(B组)。倒置相差显微镜观察两组细胞生长情况,测定两组原代及传代细胞成活率,MTT法测定两组第2代细胞增殖曲线,并以甲苯胺蓝染色和免疫细胞化学染色鉴定两组原代及传代细胞蛋白多糖及Ⅱ型胶原的表达。结果成功分离、纯化脊索细胞和软骨样细胞。细胞培养观察,原代脊索细胞直径10~15μm,胞浆内富含大小不等的囊泡;原代软骨样细胞直径4~6μm,胞浆内无囊泡。各代细胞成活率A组为89.0%~95.3%,B组为91.3%~96.3%,各代细胞成活率两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。A组细胞培养3~4d进入对数生长期,B组细胞培养2d后进入对数生长期;培养4d后,B组细胞增殖能力高于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。A组3代以内细胞表达蛋白多糖及Ⅱ型胶原,B组细胞表型维持至5代。结论脊索细胞能促进髓核软骨样细胞的增殖及表型维持;脊索细胞可能在防止椎间盘退变中具有重要意义。 展开更多
关键词 椎间盘 髓核 脊索细胞 软骨样细胞 细胞培养
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绿原酸对缺氧环境下干细胞来源软骨样细胞凋亡的影响 被引量:11
2
作者 刘哲 李士勇 +4 位作者 宋玉林 廖新根 陈伟才 顾玉荣 殷明 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期206-210,共5页
目的探讨缺氧环境下绿原酸对骨髓间充质细胞来源软骨样细胞(Chondrogenic MSCs)影响及机制。方法采用体外培养大鼠间充质干细胞,以含0.2 mg.L-1 BMP-2诱导液培养12 d使其成为软骨样细胞后进行实验。分为(A)正常对照组、(B)绿原酸组、(C)... 目的探讨缺氧环境下绿原酸对骨髓间充质细胞来源软骨样细胞(Chondrogenic MSCs)影响及机制。方法采用体外培养大鼠间充质干细胞,以含0.2 mg.L-1 BMP-2诱导液培养12 d使其成为软骨样细胞后进行实验。分为(A)正常对照组、(B)绿原酸组、(C)0.1%O2缺氧环境组、(D)绿原酸+0.1%O2缺氧环境组。检测各组Hoechst33258荧光染色检测细胞凋亡、细胞内活性氧水平;RT-PCR检测不同组软骨细胞Caspase-3和Bcl-2基因的表达。结果与正常对照组比较,0.1%O2缺氧环境12 h能明显造成干细胞来源软骨样细胞的凋亡(P<0.05),绿原酸可降低0.1%O2缺氧引起的软骨样细胞凋亡率(P<0.05),活性氧水平下降,Bcl-2表达增强,Caspase-3表达减弱。结论绿原酸可抑制0.1%O2缺氧引起的软骨样细胞凋亡,其作用机制可能与降低细胞内的活性氧水平,稳定细胞的氧化还原状态来保护线粒体膜电位,促进凋亡抑制基因Bcl-2的表达及抑制Caspase-3的表达有关。 展开更多
关键词 低氧 骨髓间充质细胞来源软骨样细胞 绿原酸 氧化还原 细胞凋亡 活性氧
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人骨髓间充质干细胞的扩增培养及向成软骨样细胞的定向诱导分化 被引量:4
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作者 邱丽燕 王金福 +1 位作者 沈丹 金洁 《浙江大学学报(理学版)》 CAS CSCD 2004年第3期337-342,共6页
从人骨髓中分离和培养间充质干细胞(MSCs),在原代和传代培养中其形态学上均为贴壁、纤维状的细胞,随着代次的增加细胞形态更加趋于一致.流式细胞仪鉴定CD45、CD34、CD117、HLA-DR阴性,CD29、CD166阳性,并随着培养代次的增加,阳性比率和... 从人骨髓中分离和培养间充质干细胞(MSCs),在原代和传代培养中其形态学上均为贴壁、纤维状的细胞,随着代次的增加细胞形态更加趋于一致.流式细胞仪鉴定CD45、CD34、CD117、HLA-DR阴性,CD29、CD166阳性,并随着培养代次的增加,阳性比率和阴性比率出现相应的上升和降低,说明细胞中MSCs纯度增加.第三代细胞大约有80%处于G0/G1期,S+G2+M期约20%,说明MSCs有强大的增殖潜能.在传代培养中的最适接种密度为5000个/cm2左右.MSCs在体外经历了滞缓期、对数生长期、平稳期3个时期,传代培养的MSCs生长速度比原代的MSCs明显快很多.采用程序降温法对MSCs进行冻存,60~90d后对冻存的MSCs进行复苏,发现MSCs仍可在体外良好生长4~6代,特定的MSCs样本可以扩增10代,说明经过冻存的细胞仍具有良好的增殖能力.对4例标本的前三代MSCs在体外利用TGF-β1和维生素C诱导两周后,用RT-PCR证明MSCs表达软骨特异性的II型前胶原的mRNA,说明培养的细胞具有向成软骨样细胞分化的潜能,由此进一步证实其为MSCs. 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 扩增培养 软骨样细胞 细胞形态
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成人骨髓多能成体祖细胞生物学性状及向成软骨样细胞的诱导分化(英文) 被引量:1
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作者 温昱 范时祥 +2 位作者 易先宏 李彬 潘骏 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2012年第27期4968-4973,共6页
背景:骨髓多能成体祖细胞具有比骨髓间充质干细胞更强的分化潜能和扩增能力并具有胚胎干细胞样的多向分化潜能,但分化为成软骨样细胞的研究目前少见报道。目的:观察成人骨髓成体多能祖细胞的体外培养条件、生物学特性及其向成软骨样细... 背景:骨髓多能成体祖细胞具有比骨髓间充质干细胞更强的分化潜能和扩增能力并具有胚胎干细胞样的多向分化潜能,但分化为成软骨样细胞的研究目前少见报道。目的:观察成人骨髓成体多能祖细胞的体外培养条件、生物学特性及其向成软骨样细胞分化的可能性。方法:观察体外培养成人骨髓成体多能祖细胞的形态、生长情况,并鉴定;以分化培养基诱导成人骨髓成体多能祖细胞向无软骨细胞分化。结果与结论: 光学显微镜下观察培养的成人骨髓多能成体祖细胞体积偏大,长多角型,数个细长伪足,细胞核大,细胞质丰富,细胞增殖能力旺盛;可见转录因子 4、阶段特异性胚胎表面抗原 1表达,未见 T 细胞表面黏附分子 CD44,CD45,CD133 和主要组织相容性抗原系统Ⅱ的表达;诱导分化后,分化细胞经甲苯胺蓝染色后呈异染性,可表达Ⅱ型胶原。证实,实验成功体外培养了成人骨髓多能成体祖细胞,骨髓多能成体祖细胞在一定诱导条件下具有向成软骨样细胞分化的潜能。 展开更多
关键词 多能成体祖细胞 骨髓 细胞培养 细胞分化 软骨样细胞 骨髓来源干细胞
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两种聚羟基乙酸支架与猪软骨样细胞体外相容性比较 被引量:1
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作者 韩志军 任华 《协和医学杂志》 2011年第1期42-45,共4页
目的观察猪软骨样细胞与2种不同聚羟基乙酸支架的体外相容性,为气管组织工程寻求合适的种子细胞载体。方法将猪骨髓间充质干细胞体外诱导分化的软骨样细胞与单纯聚羟基乙酸(polyglycolicacid,PGA)支架和胶原包埋PGA支架体外复合培养,采... 目的观察猪软骨样细胞与2种不同聚羟基乙酸支架的体外相容性,为气管组织工程寻求合适的种子细胞载体。方法将猪骨髓间充质干细胞体外诱导分化的软骨样细胞与单纯聚羟基乙酸(polyglycolicacid,PGA)支架和胶原包埋PGA支架体外复合培养,采用倒置显微镜和扫描电镜观察猪软骨样细胞在2种支架上的生长、黏附情况,MTT法测定软骨样细胞活性,并与无支架的空白对照比较。结果倒置相差显微镜和扫描电镜示软骨样细胞在胶原包埋PGA支架上吸附、生长良好,而单纯PGA支架组未见到细胞附着、生长。MTT示软骨样细胞在2种支架材料上与无支架的单纯培养软骨样细胞的活性基本相同。结论胶原包埋PGA支架材料是一种具有良好生物相容性的支架材料,可做为气管组织工程的种子细胞载体。 展开更多
关键词 软骨样细胞 支架 生物相容性
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GDF-5诱导hADSCs分化为软骨样细胞 被引量:1
6
作者 金长礼 李德华 +1 位作者 李洪秀 朴仁京 《中国实用医药》 2012年第1期3-5,共3页
目的分离培养人脂肪干细胞(hADSCs),用不同浓度GDF-5进行诱导,观察细胞形态变化及检测相关蛋白的表达,评价其是否具有软骨样细胞的特性。方法取人抽脂术后的无菌脂肪组织,酶消化法分离培养hADSCs,观察细胞形态,MTT法检测细胞增殖能力。... 目的分离培养人脂肪干细胞(hADSCs),用不同浓度GDF-5进行诱导,观察细胞形态变化及检测相关蛋白的表达,评价其是否具有软骨样细胞的特性。方法取人抽脂术后的无菌脂肪组织,酶消化法分离培养hADSCs,观察细胞形态,MTT法检测细胞增殖能力。用含0、50、100ng/mlGDF-5的软骨诱导液培养,观察形态变化,检测Ⅱ型胶原及GAG的表达。结果 hADSCs呈长梭形,P10以后仍具有较强的增殖能力。经GDF-5诱导的hADSCs逐渐变为圆形、多角形,部分细胞聚集生长,形成软骨样结节;诱导28d的细胞Ⅱ型胶原表达阳性,甲苯胺蓝将GAG染成蓝色,但100ng/mlGDF-5诱导组阳性表达明显高于50ng/ml诱导组。结论 hADSCs在100ng/mlGDF-5的诱导下可分化为软骨样细胞。 展开更多
关键词 脂肪干细胞 诱导 分化 软骨样细胞
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GDF-5诱导成纤维细胞分化为软骨样细胞 被引量:1
7
作者 王艳秋 高阳 +1 位作者 张曼 李德华 《中国实用医药》 2013年第9期240-242,共3页
目的原代分离培养人真皮成纤维细胞(hDFs),应用生长分化因子-5(GDF-5)进行诱导培养,观察细胞的形态,检测软骨细胞相关指标,评价其分化为软骨样细胞的能力。方法取成人除皱术后的皮肤组织,Ⅰ型胶原酶消化法分离培养hDFs,观察细胞形态,MT... 目的原代分离培养人真皮成纤维细胞(hDFs),应用生长分化因子-5(GDF-5)进行诱导培养,观察细胞的形态,检测软骨细胞相关指标,评价其分化为软骨样细胞的能力。方法取成人除皱术后的皮肤组织,Ⅰ型胶原酶消化法分离培养hDFs,观察细胞形态,MTT法检测细胞增殖活性,免疫细胞化学染色检测Ⅰ型胶原的表达。用100ng/ml GDF-5的成软骨诱导液培养,观察细胞形态变化,检测Ⅱ型胶原蛋白表达及分泌GAG的能力。结果 hDFs呈长梭形,P10以后仍保持较强的增殖潜能,Ⅰ型胶原表达阳性。诱导后的hDFs逐渐成为圆形、多角形,并聚集生长形成软骨样结节;诱导第21 d的细胞Ⅱ型胶原蛋白表达阳性,GAG被甲苯胺蓝染成蓝色。结论 hDFs经100ng/ml的GDF-5诱导培养可分化为软骨样细胞。 展开更多
关键词 成纤维细胞 生长分化因子-5 软骨样细胞
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腺病毒介导BMP-2/7共表达转染兔滑膜MSCs体外向纤维软骨样细胞分化的研究 被引量:10
8
作者 符培亮 张雷 +4 位作者 吴海山 丛锐军 陈松 丁喆如 胡凯猛 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期345-352,共8页
目的通过使用腺病毒介导BMP-2/7共表达载体转染兔滑膜MSCs(synovial-derived MSCs,SMSCs),观察其在体外向纤维软骨样细胞分化的可行性。方法取3月龄新西兰大白兔6只,雌雄不限,体重(2.1±0.3)kg;取滑膜组织分离纯化SMSCs后,进行形态... 目的通过使用腺病毒介导BMP-2/7共表达载体转染兔滑膜MSCs(synovial-derived MSCs,SMSCs),观察其在体外向纤维软骨样细胞分化的可行性。方法取3月龄新西兰大白兔6只,雌雄不限,体重(2.1±0.3)kg;取滑膜组织分离纯化SMSCs后,进行形态学观察及免疫细胞荧光染色、流式细胞仪、细胞周期鉴定,并检测其成脂、成骨、成软骨多向分化潜能。同时包装pAdTrack-BMP-2-内部核糖体进入位点(internal ribosome entry site,IRES)-BMP-7腺病毒载体,转染SMSCs后进行增殖动力学、核型分析、流式细胞仪检测细胞DNA含量、致瘤性分析等安全性鉴定。体外在不完全成软骨培养基中培养,观察其分化状态,并行RT-PCR检测、免疫荧光染色及甲苯胺蓝染色检测。结果从兔滑膜组织中分离出的SMSCs,其细胞形态、表面标记、多向分化潜能等均符合MSCs的特点。pAdTrack-BMP-2-IRES-BMP-7转染SMSCs的转染率约为70%。安全性鉴定结果显示转染后的SMSCs倍增时间、染色体数目及DNA含量均正常,且无致瘤性。体外不完全成软骨培养基诱导培养21 d后,RT-PCR检测示SMSCs的Ⅰ、Ⅱ型胶原表达明显增加,以Ⅱ型胶原为主;软骨分化信号分子RhoA与Sox-9的表达经诱导后也明显增加。免疫荧光染色及甲苯胺蓝染色结果亦显示转染后的SMSCs向纤维软骨样细胞分化。结论使用腺病毒载体安全有效,可在体外定向诱导兔SMSCs向纤维软骨样细胞分化。 展开更多
关键词 腺病毒载体 BMP-2 7 滑膜MSCs 纤维软骨样细胞
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低频脉冲电磁场诱导大鼠骨髓间充质干细胞软骨样细胞分化 被引量:7
9
作者 邱飞远 何学令 +4 位作者 姚晓琳 李凯 况薇 吴文超 李良 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第3期501-507,共7页
骨髓间充质干细胞(BMSCs)是一类具有多向分化潜能的细胞。低频脉冲电磁场(LEPEMFs)治疗可导致哺乳动物细胞水平的生物化学变化,加速组织修复。因此,我们假设LFPEMFs可以促进体外大鼠骨髓间充质干细胞(rBMSCs)向软骨样细胞分化。实验分为... 骨髓间充质干细胞(BMSCs)是一类具有多向分化潜能的细胞。低频脉冲电磁场(LEPEMFs)治疗可导致哺乳动物细胞水平的生物化学变化,加速组织修复。因此,我们假设LFPEMFs可以促进体外大鼠骨髓间充质干细胞(rBMSCs)向软骨样细胞分化。实验分为3组:1)LFPEMFs组,rBMSCs暴露于50Hz、1mT低频脉冲电磁场,30min/d;2)成软骨诱导组,采用软骨诱导介质培养rBMSCs;3)对照组,采用完全培养介质培养rBMSCs。通过倒置相差显微镜逐日连续观察rBMSCs的生长状况和形态特征。分别于实验第10、15和20d收集各组rBMSCs标本,采用实时荧光定量PCR方法检测Ⅱ型胶原(ColⅡ)和聚集蛋白聚糖(aggrecan)mRNA表达,采用组织化学与免疫组化方法检测aggrecan和ColⅡ的蛋白表达。结果表明:在各时间点,LFPEMFs组与成软骨诱导组的ColⅡ、ag-grecan mRNA表达和蛋白表达明显高于对照组(P<0.05)。本实验提示,LFPEMFs可以促进rBMSCs向软骨样细胞分化。 展开更多
关键词 低频脉冲电磁场 大鼠骨髓间充质干细胞 二型胶原 聚集蛋白聚糖 软骨样细胞分化
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软骨仿生基质体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为软骨细胞样细胞 被引量:4
10
作者 吴江怡 王富友 +1 位作者 杨柳 廖瑛 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1502-1505,1510,共5页
目的探讨含2型胶原蛋白(Col2)、硫酸软骨素(CS)和(或)透明质酸(HA)的软骨仿生基质材料,在体外条件下对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)分化为软骨细胞样细胞的影响。方法体外培养BMSC,分别接种于对照材料、含Col2、Col2-CS、Col2-HA、Col2-C... 目的探讨含2型胶原蛋白(Col2)、硫酸软骨素(CS)和(或)透明质酸(HA)的软骨仿生基质材料,在体外条件下对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)分化为软骨细胞样细胞的影响。方法体外培养BMSC,分别接种于对照材料、含Col2、Col2-CS、Col2-HA、Col2-CS-HA的软骨仿生基质材料。诱导7、14、21、28 d后,采用CCK-8法检测各复合基质对BMSC增殖、分化活性的影响;采用反转录PCR技术检测软骨细胞标志物Col2、Y染色体性别决定区相关高迁移率组基因9(SOX9)及聚集蛋白聚糖(aggrecan)的mRNA水平,免疫荧光技术检测Col2、SOX9及aggrecan的蛋白水平。结果 CCK-8法检测结果显示,以Col2为基础的基质材料都能作为BMSC生长的良好细胞外基质,CS和HA使BMSC的增殖活性逐渐增加;各复合基质材料均能在体外有效诱导BMSC向软骨细胞样细胞分化;Col2-CS-HA包被能够最大程度上调Col2、SOX9及aggrecan mRNA及蛋白的水平。结论以Col2为基础的仿生基质材料可在体外有效诱导大鼠BMSC分化为软骨细胞样细胞,其中以复合Col2-CS-HA基质材料效率最高。 展开更多
关键词 仿生基质 骨髓间充质干细胞 软骨细胞细胞
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透明质酸凝胶中肌源性干细胞与透明软骨联合培养的实验研究
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作者 沈兆亮 梅晰凡 +3 位作者 袁亚江 李全双 郭占鹏 张赫 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期224-227,共4页
目的探讨肌源性干细胞与软骨细胞混和培养体外成软骨的可行性。方法分离培养、扩增传代兔MDSCs及关节软骨细胞,二者按一定比例混和,6×1010/L密度接种于5%浓度的透明质酸凝胶为共培养组,以相同密度的单纯MDSCs和单纯软骨细胞作为阴... 目的探讨肌源性干细胞与软骨细胞混和培养体外成软骨的可行性。方法分离培养、扩增传代兔MDSCs及关节软骨细胞,二者按一定比例混和,6×1010/L密度接种于5%浓度的透明质酸凝胶为共培养组,以相同密度的单纯MDSCs和单纯软骨细胞作为阴性与阳性对照。倒置相差显微镜下观察,10 d后行甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫细胞化学检测,RT-PCR检测Ⅱ型胶原和aggrecan的mRNA表达。结果 5 d后镜下见共培养组MDSCs形态由梭形向多边多角形转化,10 d后细胞甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫组织化学检测与阳性对照组相同,RT-PCR检测Ⅱ型胶原和aggrecan mRNA呈阳性表达。阴性对照组在体外培养过程中未分化为软骨细胞。结论软骨微环境在MDSCs成软骨分化过程中具有重要作用,软骨细胞能有效地诱导MDSCs向软骨样细胞分化,透明质酸凝胶可以作为软骨组织工程的良好载体。 展开更多
关键词 肌源性干细胞 软骨样细胞 共同培养 透明质酸凝胶
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大鼠血浆血清对软骨细胞纤维化转变的影响
12
作者 贺自克 丁道芳 +3 位作者 王上增 薛艳 郑昱新 王学宗 《医学研究杂志》 2018年第12期31-36,共6页
目的观察大鼠的血清和血浆对大鼠软骨细胞的增殖,形态改变,基质蛋白及基质调控基因的表达变化。方法取出生24h SD大鼠关节处软骨,Ⅱ型胶原酶多次消化后获得软骨细胞,取P1代细胞进行实验。软骨细胞分别培养于含10%大鼠血浆(rat plasma,RP... 目的观察大鼠的血清和血浆对大鼠软骨细胞的增殖,形态改变,基质蛋白及基质调控基因的表达变化。方法取出生24h SD大鼠关节处软骨,Ⅱ型胶原酶多次消化后获得软骨细胞,取P1代细胞进行实验。软骨细胞分别培养于含10%大鼠血浆(rat plasma,RP)和10%大鼠血清(rat serum,RS)的DMEM低糖培养基中,分别为血浆组和血清组。分别培养24h,镜下观察细胞形态变化,CCK8方法检测24h、48h和72h软骨细胞增殖(A_(450))。细胞免疫荧光、Western blot和定量PCR检测软骨指标Sox9、Ⅱ型胶原、MMP13、Col2a1、A-can、ADAMTS5、MMP9、MMP3的表达。结果培养于大鼠血清和血浆的培养基中,24h后血清组的软骨细胞由鹅卵石样排列的多角形变成长梭形。血清组24h(0.67±0.01),48h(1.29±0.05)和72h(1.92±0.03)A_(450)值,明显高于血浆组24h(0.43±0.01),48h(0.72±0.01)和72h(1.27±0.04)A_(450)值,差异均有统计学意义(P<0.01)。血清组软骨细胞MMP13和Col1a1表达显著上调,Ⅱ型胶原和Sox9的表达显著下调。PCR结果表明,血清组A-can(0. 24±0. 01)和Sox9(0.56±0.04)基因表达相对于大鼠血浆组Sox9(1.00±0.05)和A-can(1.00±0.08)表达明显降低,而血清组ADAMTS5(34.51±2.25)和MMP3(40.33±2.43)表达相对于大鼠血浆组ADAMTS5(1.02±0.21)和MMP3(1.00±0.11)表达明显增强,两组间基因表达差异均有统计学意义(P<0.01)。结论血清促进软骨细胞转变成纤维样软骨细胞。 展开更多
关键词 血清和血浆 软骨细胞 细胞增殖 形态改变 成纤维软骨细胞
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脊索细胞特异性标志物研究进展
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作者 刘卓超 孟祥超 张兴凯 《国际骨科学杂志》 2016年第5期299-303,共5页
椎间盘退变(尤其是其中髓核改变)与腰背痛密切相关。合适的标志物可以准确地将脊索细胞与椎间盘内其他细胞进行区分,以便于对其起源分化及形态结构进行深入了解并探索其在椎间盘退变治疗中的应用。目前发现在脊索细胞内特异性表达且对... 椎间盘退变(尤其是其中髓核改变)与腰背痛密切相关。合适的标志物可以准确地将脊索细胞与椎间盘内其他细胞进行区分,以便于对其起源分化及形态结构进行深入了解并探索其在椎间盘退变治疗中的应用。目前发现在脊索细胞内特异性表达且对其生存有重要作用的特异性标志物包括低氧诱导因子-1(HIF-1)、葡萄糖转运因子-1(GLUT-1)、Shh蛋白、Brachyury蛋白、角蛋白(KRT)-8/18/19及CD24。此外,通过基因芯片技术检测到可能的脊索细胞特异性标记物,由于其作用尚未被证实,故仅可作为备选标志物。该文就脊索细胞特异性标志物研究进展作一综述。 展开更多
关键词 脊索细胞 椎间盘退变 髓核细胞 软骨样细胞 标志物
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山羊颞下颌关节盘细胞类型及分布表征在组织构建中的设计意义: 被引量:3
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作者 舒维娜 康宏 +2 位作者 张卫平 李欣 包广洁 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2009年第46期9022-9026,共5页
背景:颞下颌关节盘的细胞分型分布尚无定论,对细胞的描述使用的名称也不统一。目的:表征山羊颞下颌关节盘中细胞的分型及分布。设计、时间及地点:单一样本观察,于2007-03/05在兰州大学细胞与分子生物学实验中心、电镜中心完成。材料:颞... 背景:颞下颌关节盘的细胞分型分布尚无定论,对细胞的描述使用的名称也不统一。目的:表征山羊颞下颌关节盘中细胞的分型及分布。设计、时间及地点:单一样本观察,于2007-03/05在兰州大学细胞与分子生物学实验中心、电镜中心完成。材料:颞下颌关节盘取自两只新鲜屠宰的1月龄健康山羊。方法:完整切取山羊双侧颞下颌关节盘,按长轴(内外侧向)及短轴(前后向)分别等分为3部分和两部分,将关节盘分为6份。标记后用体积分数为10%中性甲醛固定24h,石蜡包埋。主要观察指标:苏木精-伊红染色观察关节盘各带细胞类型及数目的不同,甲苯胺蓝染色,Ⅰ型胶原免疫组织化学检测胶原的分布,透射电镜观察细胞超微结构。结果:颞下颌关节盘由不均分布的细胞和胶原纤维组成。胶原几乎都为Ⅰ型,胶原纤维一般表现为波浪形或卷曲状,纤维大致平行,而细胞散在胶原纤维基质中。细胞有成纤维细胞样细胞和软骨细胞样细胞两种,其中前者占优势,两者比例约为2.05∶1。细胞类型和分布在各区没有显著性差异。电镜超微结构显示成纤维细胞样细胞核大,梭形或不规则形,细胞器很少。软骨细胞样细胞胞核圆形或椭圆形,周围有电子透射区,细胞囊不明显,伪足少见。结论:1月龄山羊颞下颌关节盘内各个区域的细胞类型、数目与排列差异没有显著性意义。其中成纤维细胞样细胞较软骨细胞样略占优势。 展开更多
关键词 1月龄山羊 颞下颌关节盘 成纤维细胞细胞 软骨细胞细胞 组织工程
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山羊颞下颌关节盘细胞透射电镜观察 被引量:3
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作者 舒维娜 康宏 《现代口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期612-614,共3页
目的用透射电镜的方法对两只1月龄健康山羊四只颞下颌关节盘的细胞及胶原结构进行了观察。方法切取山羊双侧颞下颌关节盘,经组织学处理后行透射电镜观察细胞和胶原超微结构特征。结果颞下颌关节盘由不均分布的细胞和胶原纤维组成,细胞... 目的用透射电镜的方法对两只1月龄健康山羊四只颞下颌关节盘的细胞及胶原结构进行了观察。方法切取山羊双侧颞下颌关节盘,经组织学处理后行透射电镜观察细胞和胶原超微结构特征。结果颞下颌关节盘由不均分布的细胞和胶原纤维组成,细胞有成纤维细胞样细胞和软骨细胞样细胞两种,其中成纤维细胞样细胞较软骨细胞样细胞占优势。成纤维细胞样细胞表现有细长的突起,核大,梭形或不规则形,细胞器较少。软骨细胞样细胞胞核呈圆形或椭圆形,周围少有电子透射区,细胞膜不明显,胞突少见。胶原纤维由平行排列的有周期性横纹特征的胶原原纤维组成。结论颞下颌关节盘细胞有成纤维细胞样和软骨细胞样细胞两种,前者占优势,胶原原纤维表现有周期性横纹特征。这为颞下颌关节盘组织工程研究中细胞来源及表型分析奠定了一定基础。 展开更多
关键词 1月龄山羊 颞下颌关节盘 透射电镜 成纤维细胞细胞 软骨细胞细胞
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细胞移植修复椎间盘的新视角与新进展 被引量:3
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作者 刘亭亭 韩长旭 王国强 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第1期154-158,共5页
背景:目前对椎间盘退变的治疗仅限于姑息治疗或积极的外科干预,但均不能减缓或逆转其进程,远期疗效也不满意。近年来随着组织工程与再生医学的不断发展,运用细胞疗法修复退变椎间盘得到了越来越多的研究者关注。目的:总结目前临床上细... 背景:目前对椎间盘退变的治疗仅限于姑息治疗或积极的外科干预,但均不能减缓或逆转其进程,远期疗效也不满意。近年来随着组织工程与再生医学的不断发展,运用细胞疗法修复退变椎间盘得到了越来越多的研究者关注。目的:总结目前临床上细胞移植治疗椎间盘退变的现状,为以后的研究提供一些理论基础和实验依据。方法:通过计算机在CNKI、万方数据库、PubMed数据库中检索相关文献,检索时限为2001年1月至2019年1月。检索的中文主题词为“椎间盘退变,细胞治疗,干细胞,细胞移植”;英文主题词为“stem cell,intervertebral disk degeneration”,筛选内容与干细胞治疗椎间盘退变相关的文献,着重选取最新的实验及临床研究成果。结果与结论:椎间盘退变主要以髓核细胞的活力和数量减少、蛋白多糖合成减少、髓核脱水以及代谢废物增多引起的。不断深入了解探索细胞移植促进髓核再生的治疗机制,不仅能够对椎间盘的发病及修复机制有更为详尽的认识,更能够对其他相关疾病的预防与细胞治疗提供新的思路与策略。 展开更多
关键词 细胞移植 椎间盘退变 髓核细胞 胚胎干细胞 诱导多能干细胞 间充质干细胞 软骨细胞细胞 椎间盘衍生细胞
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还原型谷胱甘肽对人脐带间充质干细胞成软骨诱导的影响 被引量:4
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作者 罗二梅 宇丽 +1 位作者 张家文 柳菁 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期1-8,共8页
目的:探讨还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)对人脐带间充质干细胞(humanumbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)的成软骨诱导是否有促进作用。方法:分离培养人脐带间充质干细胞并鉴定其特异性。在生长因子(tansformin... 目的:探讨还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)对人脐带间充质干细胞(humanumbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)的成软骨诱导是否有促进作用。方法:分离培养人脐带间充质干细胞并鉴定其特异性。在生长因子(tansforming growth factor beta 1,TGF-β1)存在的条件下,用500μmol/L GSH诱导hUC-MSCs向软骨样细胞分化。倒置相差显微镜观察诱导前后细胞的形态变化;甲苯胺蓝染色及免疫荧光反应分别检测Ⅱ型胶原(COL2A1)、葡萄糖胺聚糖(GAG)(蛋白水平定性);阿利新蓝法及羟脯氨酸法分别检测COL2A1、GAG含量(蛋白水平定量);qPCR在分子水平检测COL2A1、GAG mRNA表达,观察诱导前后细胞的基质分泌情况。结果:GSH连续诱导培养21d后,基本诱导培养基组(B组)、基本诱导培养基+0.5%二甲基亚砜(dimethylsulfoxide,DMSO)组(BD组)及基本诱导培养基+0.5%DMSO+500μmol/L GSH组(BDG组)细胞甲苯胺蓝染色及免疫荧光反应均呈阳性;BDG组GAG和COL2A1含量及mRNA表达量均要高于B组、BD组,具有显著的统计学差异(P<0.05)。结论:GSH可促进hUC-MSCs向软骨样细胞诱导分化。 展开更多
关键词 还原型谷胱甘肽 人脐带间充质干细胞 软骨样细胞 蛋白多糖 Ⅱ型胶原
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软骨母细胞瘤样骨肉瘤穿刺标本免疫组化H3F3B、IMP3、Clusterin联合H3F3B基因突变检测的意义
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作者 徐园园 毛荣军 +5 位作者 曾敏 陈增伟 韩福兰 吴燕杏 谢乐 黄颖欣 《医学信息》 2022年第17期60-63,共4页
目的 探讨免疫组化H3F3B、IMP3、Clusterin联合H3F3B基因突变检测在软骨母细胞瘤样骨肉瘤诊断及鉴别诊断中的应用价值。方法 收集佛山市中医院病理科2008年1月-2020年12月确诊的22例软骨母细胞瘤样骨肉瘤及25例软骨母细胞瘤的穿刺标本... 目的 探讨免疫组化H3F3B、IMP3、Clusterin联合H3F3B基因突变检测在软骨母细胞瘤样骨肉瘤诊断及鉴别诊断中的应用价值。方法 收集佛山市中医院病理科2008年1月-2020年12月确诊的22例软骨母细胞瘤样骨肉瘤及25例软骨母细胞瘤的穿刺标本及对应的手术切除标本,应用免疫组化方法行H3F3B、IMP3及Clusterin检测,观察它们在肿瘤细胞的表达情况,对H3F3B阳性的软骨母细胞瘤样骨肉瘤行H3F3B基因突变检测,分析其突变情况。结果 IMP3在22例软骨母细胞瘤样骨肉瘤呈弥漫阳性,在25例软骨母细胞瘤均呈阴性;H3F3B在21例软骨母细胞瘤样骨肉瘤中呈阴性或散在弱阳性,1例为弥漫阳性;H3F3B在25例软骨母细胞瘤呈弥漫阳性;H3F3B阳性的软骨母细胞瘤样骨肉瘤均无H3F3B基因突变;Clusterin在22例软骨母细胞瘤样骨肉瘤及25例软骨母细胞瘤中呈灶状阳性或阴性。结论 H3F3B阴性、IMP3弥漫阳性支持软骨母细胞瘤样骨肉瘤的诊断;H3F3B弥漫阳性、IMP3阴性支持软骨母细胞瘤的诊断;H3F3B及IMP3均阳性更倾向软骨母细胞瘤样骨肉瘤的诊断。基因突变检测及免疫组化检测在H3F3B阳性的软骨母细胞瘤样骨肉瘤中缺乏一致性。 展开更多
关键词 H3F3B IMP3 CLUSTERIN 软骨细胞骨肉瘤 软骨细胞 免疫组化 基因突变
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牙龈卟啉菌感染对髂动脉血管钙化的影响
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作者 张明珠 李超伦 +2 位作者 姜云涛 姜崴 梁景平 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期582-585,共4页
目的:研究牙龈卟啉菌感染在动脉血管钙化中的影响。方法:建立牙龈卟啉菌感染的兔髂动脉硬化模型,通过HE染色观察受损内膜病理变化,通过免疫组化染色检测软骨样细胞Sox9、CollagenⅡ,α-SMactin、巨噬细胞RAM11的染色情况。结果:发现实... 目的:研究牙龈卟啉菌感染在动脉血管钙化中的影响。方法:建立牙龈卟啉菌感染的兔髂动脉硬化模型,通过HE染色观察受损内膜病理变化,通过免疫组化染色检测软骨样细胞Sox9、CollagenⅡ,α-SMactin、巨噬细胞RAM11的染色情况。结果:发现实验组的2只动物受损髂动脉内膜中存在软骨样细胞,软骨样细胞Sox9、CollagenⅡ和α-SMactin染色阳性,巨噬细胞RAM11的染色阴性。结论:牙龈卟啉菌感染可能和血管钙化有关,软骨样细胞来源于平滑肌细胞。但是样本数量少,不能说明两者之间存在必然联系。 展开更多
关键词 牙龈卟啉菌 软骨样细胞 血管钙化
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右侧髂窝包块1例超声诊断分析
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作者 刘慧 付勇 李明星 《泸州医学院学报》 2013年第1期76-76,共1页
病员吴某,男,39岁,因“发现右髂窝部肿块并疼痛20^+天”入院:患者于20^+天前扪及右侧髂窝包块,自觉疼痛,肿胀且逐渐加重.针吸涂片检查示“抽出粘稠物,涂片见大量无结构蓝染物及一些软骨样细胞”.为进一步治疗于2011年3月29... 病员吴某,男,39岁,因“发现右髂窝部肿块并疼痛20^+天”入院:患者于20^+天前扪及右侧髂窝包块,自觉疼痛,肿胀且逐渐加重.针吸涂片检查示“抽出粘稠物,涂片见大量无结构蓝染物及一些软骨样细胞”.为进一步治疗于2011年3月29日入院。 展开更多
关键词 超声诊断 髂窝 包块 右侧 自觉疼痛 涂片检查 软骨样细胞 部肿块
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