成年关节软骨碎块化后MT1-MMP表达与软骨细胞迁移的关系

背景:许多课题研究已基本证实,关节软骨碎块化处理后,软骨损伤区域的修复效应增强,但对于其具体机制仍不清楚。目的:研究成年关节软骨经碎块化处理后,MT1-MMP表达与软骨细胞迁移的关系,进一步探讨软骨经碎块化后,修复效应增强的机制。方法:通过无菌操作从78只成年家兔双后腿膝关节(156膝)获取碎块关节软骨颗粒(约1 mm×1 mm×1 mm)和块状软骨(直径约5 mm,厚度约2 mm),复合明胶海绵碎屑及纤维蛋白胶制作体外培养模型。分组:碎块组和整块组均采用普通细胞培养液进行培养;MT1-MMP抑制剂组:采用添加外源性MT1-MMP抑制剂进行干预培养;各组经体外培养2,4,6周进行激光共聚焦显微镜观察细胞迁移,苏木精-伊红染色切片并进行组织半定量评分、碎块组与整块组标本进行MT1-MMP免疫组织化学检测并计算MT1-MMP阳性细胞百分率。结果与结论:(1)激光共聚焦显微镜观察见碎块组、整块组经体外培养2,4周均可见软骨细胞边集现象,碎块组显著,且4,6周时可见大量软骨细胞释放;MT1-MMP抑制剂组在各时间观察点均未见边集及细胞释放;(2)组织半定量评分与MT1-MMP阳性细胞表达率在碎块组、整块组中随体外培养时间延长而增长,相同培养时间,碎块组得分及MT1-MMP阳性细胞百分率高于整块组;MT1-MMP抑制剂组均未见细胞边缘聚集及碎块愈合现象;(3)结果表明,成年家兔关节软骨经碎块化处理后其修复效应增强;同时成年家兔关节软骨经碎块处理后,MT1-MMP表达增高,软骨细胞迁移能力增强;抑制MT1-MMP功能,能有效抑制软骨细胞迁移及阻碍碎块愈合,在一定程度上可推测,MT1-MMP的表达增强是碎块化软骨损伤修复效应增强的可能机制。

关节软骨和半月板组织碎块移植研究进展

关节软骨和半月板无血运区损伤后不能自然愈合,软骨组织碎块移植为之修复提供了新思路。体外和体内实验研究均证实,关节软骨及半月板无血运区切成碎块后细胞能有效地从碎块组织释放,与周围支架材料复合或直接导致组织修复。自体软骨植入系统(CAIS)及同种异体幼年关节软骨碎块移植物(DeNovo NT),已应用于临床。该文就关节软骨及半月板组织碎块移植的基础研究及临床应用研究及其进展作一综述。

骨髓间充质干细胞复合脱细胞软骨和富血小板血浆的体内成骨实验

目的:研究骨髓间充质干细胞(BMSCs)和富血小板血浆(PRP)复合物中加入脱细胞软骨碎块(DCM)后的成骨能力。方法:全骨髓贴壁法分离培养兔BMSCs;采集兔新鲜动脉血制备PRP;剪取新鲜兔耳碎化后用化学法脱细胞制备DCM,将BMSCs与PRP和DCM混合后注射到裸鼠皮下,8周后取材观察成骨情况。结果:体外实验显示本实验分离培养的BMSCs有较强的成骨、成脂分化能力,软骨碎块脱细胞效果理想,8周裸鼠体内结果取材苏木精-伊红染色(HE)和改良Massons染色显示类骨质和骨质较多,甲苯胺蓝(TB)染色显示剩余软骨成分较少。结论:BMSCs-PRP-DCM复合物诱导软骨内成骨。