兔半月板纤维软骨组织缺损的体外修复实验

目的：探讨体外培养条件下半月板组织的修复能力。方法：将纤维蛋白填入兔半月板纤维软骨组织缺损区，体外条件下培养１，２，３，４，８周，组织学及电镜观察纤维软骨细胞在纤维蛋白支架结构中的生长情况。结果：培养１～４周纤维软骨细胞能逐渐长入纤维蛋白支架结构，４至８周发现纤维软骨细胞在其中的生长呈现相对停滞趋势。结论：纤维软骨细胞具备再生修复能力，能够启动半月板组织的修复。

功能性纳米自组装多肽KLPP凝胶修复软骨缺损的实验研究

目的探讨功能性纳米自组装多肽KLPP凝胶对关节软骨缺损的修复作用。方法培养人骨髓间充质干细胞(BMSCs),将BMSCs分为BMSCs-KLD-12组(BMSCs与KLD-12凝胶共培养)和BMSCs-KLPP组(BMSCs与KLPP凝胶共培养),分别行软骨诱导分化培养,MTT法检测细胞的增殖活性。将人软骨组织分为软骨-KLPP组(制作软骨缺损区并填充KLPP凝胶进行培养)、软骨-KLD-12组(制作软骨缺损区并填充KLD-12凝胶进行培养)、软骨组(仅制作软骨缺损区)。Calcein-AM/PI双染法检测BMSCsKLD-12组及BMSCs-KLPP组的细胞毒性。培养49 d后,收集软骨组、软骨-KLD-12组、软骨-KLPP组的软骨组织进行切片,并行阿尔新蓝染色。Western blot法检测各组中Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、Ⅱ型胶原(Col-Ⅱ)、Ⅹ型胶原(Col-Ⅹ)的表达。结果与BMSCs-KLD-12组比较,BMSCs-KLPP组培养1 d、3 d、7 d的细胞增殖率均明显增加(P<0.05),且Col-Ⅰ、Col-Ⅱ、Col-Ⅹ的相对表达水平明显增加(P<0.05)。Calcein-AM/PI双染色检测表明BMSCs-KLPP组和BMSCs-KLD-12组细胞活性基本一致,KLPP凝胶无细胞毒性。与软骨-KLD-12组比较,软骨-KLPP组软骨修复作用更明显(P<0.05),且Col-Ⅰ、Col-Ⅱ、Col-Ⅹ的相对表达水平更高(P<0.05)。结论功能性纳米自组装多肽KLPP凝胶对关节软骨缺损具有良好的修复作用。

脂肪干细胞在软骨组织工程中的应用研究进展

关节软骨损伤是由创伤、肥胖、退行性变等原因导致的关节软骨破坏[1]。据估计,全球超过25%的成年人有不同程度的关节软骨损伤,但由于关节软骨缺乏血管、神经和淋巴管,自我修复能力差,增殖活性和再生能力低等原因,关节软骨损伤后自行愈合非常困难,尤其是较大面积的软骨缺损,最终可能引起骨关节炎[2]。近年来,软骨组织工程的发展为软骨组织缺损的治疗提供了新的思路。软骨组织工程主要由三大部分组成:有效的软骨形成因子、充足的软骨形成祖细胞及种子细胞、良好的生物相容支架[3]。研究显示,骨髓干细胞(bone marrow stem cell,BMSC)作为理想的种子细胞,在不同的诱导条件下可以向成软骨、成骨和成脂等方向分化,但其存在来源有限、取材困难、产量低、容易引起软骨骨化和诱导分化不完全等缺点,从而限制了BMSC的应用[4-5]。脂肪干细胞(adipose derived stem cell,ADSC)与BMSC有相似的特性,且其具有组织来源丰富、取材方便、免疫原性低、增殖速度快和具有多向分化潜能等优点,现已成为软骨组织工程研究的热点[6-7]。基于ADSC具有成软骨分化的特性,其可作为软骨组织工程的种子细胞,为软骨缺损治疗提供新的方案。本文将从ADSC的起源和特点、不同的生长因子及软骨组织工程支架等诱导ADSC成软骨分化的作用等方面作一综述。