软骨细胞外基质源性微粒修复山羊负重区大面积软骨缺损

背景:随着组织工程技术的发展,使用天然的生物材料作为支架可以加快新生软骨组织的生成,有利于软骨缺损的修复。目的:探究软骨细胞外基质源性微粒修复负重区软骨大面积缺损的能力。方法:刮取山羊膝关节软骨,通过脱细胞技术制备细胞外基质源性微粒。取12只中国山羊(解放军总医院动物实验中心提供),制作右股骨内外髁负重区直径8 mm、深2 mm的全层骨软骨缺损模型,随机分为2组,实验组(n=6)于缺损处植入同种异体软骨细胞外基质源性微粒,并用纤维蛋白胶固定;对照组(n=6)仅填入纤维蛋白胶。植入3,6个月取右膝关节股骨远端样本,进行组织学及生物力学评价。结果与结论:(1)苏木精-伊红染色:对照组植入3个月时缺损基本无修复,有少量纤维组织填充,缺损区凹陷,基质无异染,两侧交界面整合差;植入后6个月缺损区仍主要为纤维组织,少量纤维软骨填充,新生组织与周围正常组织仍有明显界限。实验组植入3个月时缺损处面积较对照组小,新生组织为纤维软骨与透明软骨复合体,内部可见典型软骨陷窝,细胞排列较为有序;植入6个月时缺损区组织透明软骨比例增大,表面较为平滑,与周围正常软骨组织类似,并整合良好,放大可见典型软骨陷窝,细胞排列有序;(2)番红O-固绿染色:植入3个月时,对照组缺损区基本无蛋白多糖红染,实验组缺损区显示明显蛋白多糖着色;植入6个月时,实验组新生组织中蛋白多糖着色明显多于对照组,且实验组新生组织透明软骨比例大,与周围正常软骨类似;(3)生物力学:植入后6个月,实验组平均杨氏模量明显高于对照组(P <0.05);(4)结果表明:使用软骨细胞外基质源性微粒可促进软骨缺损的修复。

低强度脉冲超声促进人骨性关节炎软骨细胞合成细胞外基质

目的探讨低强度脉冲超声(LIPUS)对人骨性关节炎(OA)软骨细胞的细胞外基质(ECM)的影响及相关作用机制。方法取膝关节置换术后废弃软骨组织,进行软骨细胞分离、培养、鉴定;取第2代软骨细胞随机分为OA对照组、30 m W/cm2LIPUS处理的OA组、30 m W/cm2LIPUS联合5μmol/L LY294002处理的OA组,除对照组外,其他组给予LIPUS刺激20 min/d×7 d;采用实时定量PCR法检测细胞中2型胶原蛋白(Col2)、聚集蛋白聚糖(aggrecan)、基质金属蛋白酶13(MMP-13)mRNA的水平,Western blot法检测细胞中Col2、aggrecan、MMP-13、Akt及磷酸化Akt(p-Akt)蛋白的表达。结果与OA对照组相比,LIPUS处理的OA组细胞内Col2、aggrecan mRNA和蛋白水平均增高,MMP-13表达降低,p-Akt蛋白的表达显著增加,Akt的表达则与OA对照组无显著性差异;与LIPUS处理的OA组细胞相比,LIPUS联合LY294002处理的OA组细胞中Col2、aggrecan mRNA和蛋白表达均降低,MMP-13表达增高,p-Akt蛋白的表达显著降低,Akt的表达则与LIPUS处理的OA组无显著性差异。结论 LIPUS促进人OA软骨细胞合成细胞外基质,并抑制其降解。

兔软骨基质支架与脂肪干细胞的生物相容性

背景:软骨基质主要为Ⅱ型胶原和葡萄糖胺聚糖,它是软骨细胞分化和发育的先天环境,能促进干细胞向软骨细胞分化。目的:观察兔软骨基质支架与同种异体脂肪干细胞在体外的生物相容性。设计、时间及地点:观察实验,于2007-12/2008-05在遵义医学院珠海校区中心实验室完成。材料:取兔新鲜耳郭软骨组织在蛋白酶抑制剂苯甲基磺酰氟的保护下利用低渗透压和TritonX-100脱去细胞成分制备软骨基质。脂肪干细胞由新西兰大白兔颈部脂肪组织经剪碎、Ⅰ型胶原酶消化并离心后获得。方法:将2×l07L-1的脂肪干细胞悬液0.2mL滴在软骨基质支架表面,置于37℃、体积分数为0.05CO2饱和湿度的培养箱中静置4h后加入含体积分数为0.1胎牛血清的DMEM培养液培养。主要观察指标:采用倒置相差显微镜、扫描电镜观察细胞在支架上的黏附、生长及增殖情况,同时计算细胞黏附率,并采用二甲氧唑黄比色法检测细胞增殖趋势。结果:扫描电镜和倒置显微镜观察到脂肪干细胞在软骨基质支架上黏附和变形,其黏附率为93.7%;苏木精-伊红染色见细胞向支架深层生长;二甲氧唑黄比色法测定细胞生长曲线表明细胞在支架上有增殖的趋势。结论:兔软骨脱细胞基质与同种异体脂肪干细胞在体外具有良好的生物相容性。

透骨消痛胶囊含药血清对软骨细胞外基质表达的影响

背景:软骨细胞代谢异常引起细胞外基质降解和修复失衡是骨性关节炎的重要病理变化。透骨消痛胶囊具有补肾柔肝、活血祛风的功效,临床实验证实其对防治骨性关节炎有较好疗效。目的:观察透骨消痛胶囊含药血清对软骨细胞外基质表达的影响。方法:取SD大鼠膝关节软骨建立体外培养的软骨细胞,第3代软骨细胞同步化后进行干预。50只SD大鼠抽签法随机分为5组,用药量按照人体与动物药物等效剂量换算,空白组:生理盐水进行灌胃;对照组:壮骨关节丸水溶液灌胃;实验组:透骨消痛胶囊水溶液按0.145,0.290,0.580mg/(g·d)进行灌胃。各组均连续给药3d,采血前禁食12h,末次给药1h后腹主动脉采血,制备血清。结果与结论:Ⅱ型胶原免疫组织化学染色可见透骨消痛胶囊实验组Ⅱ型胶原表达强于空白组及对照组;透骨消痛胶囊实验组CollagenⅡ、蛋白聚糖、Aggrecan mRNA基因表达明显升高(P<0.01),Cathepsin K mRNA基因表达明显降低(P<0.01)。提示透骨消痛胶囊含药血清能上调软骨细胞CollagenⅡ、蛋白聚糖、Aggrecan mRNA基因表达,下调Cathepsin K mRNA基因表达,促进细胞外基质合成,调控细胞外基质和软骨细胞之间的动态平衡。

微粒软骨脱细胞基质复合纤维蛋白凝胶构建软骨组织工程支架材料的研究

目的:应用异体微粒软骨脱细胞基质与纤维蛋白凝胶结合作为可注射性支架材料,进行体内构建良好可塑性和生物特性的组织工程化软骨。方法:制备普通家猪耳廓软骨微粒脱细胞基质,与体外扩增的小型实验猪第二代软骨细胞结合,以纤维蛋白凝胶为支架材料,利用其可注射性回植于实验猪自体腹壁外侧皮下,8周后取财进行大体及组织学检测,并与不含微粒脱细胞软骨基质实验组相比较。结果:培养出的组织工程化软骨组织细胞生长良好,具有分泌软骨基质功能,含微粒脱细胞软骨基质实验组表现出更佳的生物学性能。结论:将异体微粒软骨脱细胞基质与纤维蛋白凝胶结合,可以作为良好的可注射性复合支架材料应用于组织工程化软骨的构建。

关节软骨细胞外基质/人脐带Wharton胶复合多孔支架的制备及评估

背景:软骨组织工程主要包括种子细胞、支架材料、细胞因子及生物反应器等,其中支架材料是构建组织工程软骨的关键环节。目的:制备关节软骨细胞外基质/人脐带Wharton胶复合多孔支架,评估其理化特性及细胞相容性。方法:采用物理法分别制备猪关节软骨细胞外基质及人脐带Wharton胶,然后以冻融干燥法制备关节软骨细胞外基质/人脐带Wharton胶复合多孔支架,检测支架的孔隙率、吸水率、组织成分及纵向压缩弹性模量,并进行组织学染色。将关节软骨细胞外基质/人脐带Wharton胶复合多孔支架与兔软骨细胞共培养7 d,进行扫描电镜观察、活-死细胞染色及苏木精-伊红染色;分别采用关节软骨细胞外基质/人脐带Wharton胶复合多孔支架浸提液与细胞培养液培养兔软骨细胞6 d,MTT法检测细胞增殖。结果与结论:(1)关节软骨细胞外基质/人脐带Wharton胶复合多孔支架横断面为均匀的多孔网状结构,孔壁上密布软骨纤维,纵断面为垂直管状结构,支架苏木精-伊红红染、番红O及甲苯胺蓝染色均呈阳性,含有胶原和糖胺多糖成分,支架的吸水率、孔隙率和纵向压缩弹性模量分别为(17.418 8±0.909 0)%、(81.495 1±6.621 0)%和(2.833 3±0.456 4)k Pa;(2)共培养7 d,兔软骨细胞在支架上黏附和增殖,并均匀长入支架孔隙内;(3)关节软骨细胞外基质/人脐带Wharton胶复合多孔支架浸提液对软骨细胞无毒性;(4)结果表明,关节软骨细胞外基质/人脐带Wharton胶复合多孔支架的理化性能及生化成分与天然软骨相似,具有良好的细胞相容性。

猪脱细胞软骨基质生物相容性及细胞毒性评价系统的建立

背景:相对于其他用于支架材料的高分子化合物,脱软骨细胞基质能够模拟出更接近原生理状态下的细胞外环境,由其制备的椎间盘支架弹性模量也更加接近软骨组织。目的:制备脱细胞软骨基质,并从细胞和活体两方面评价其生物相容性。方法:将猪软骨粉碎后,经胰酶、核酶及TritonX-100处理得到脱细胞软骨基质。(1)细胞毒性实验:将脱细胞基质溶于醋酸,制备成脱细胞基质膜。将SD大鼠腰椎终板软骨干细胞接种于脱细胞基质膜上,培养1-5 d,采用CCK-8检测软骨干细胞在基质膜上的增殖情况,评价细胞毒性分级;(2)动物体内毒性实验:将含有脱细胞基质的醋酸(实验组)与醋酸(对照组)分别注射至SD大鼠背部皮下,形成皮丘,注射后36 h内观察大鼠体温与皮丘直径变化。结果与结论:(1)细胞毒性实验:倒置显微镜下可见,腰椎终板软骨干细胞接种于脱细胞基质膜2 d即贴壁,呈梭形生长,接种5 d内的细胞相对增殖率均在80%以上,细胞毒性分级为0至1级;(2)动物体内毒性实验:注射后即刻,两组大鼠背部均可见皮丘形成,注射36 h内皮丘内溶液被完全吸收,并且对照组吸收速度快于实验组,两组皮丘边缘均无红肿现象;注射36 h内,实验组与对照组大鼠体温均未超过37.5℃;(3)结果表明:脱细胞软骨基质具有很好的生物相容性,符合生物支架选材标准。

细胞外基质的免疫原性及组织相容性研究进展

组织工程与修复再生医学旨在实现对器官和组织的功能性再生,目前的研究热点是如何采用不同的人工与生物材料通过与自身组织细胞或者干细胞整合来实现组织修复与器官再生的个体化[1]。虽然各类生物材料的自体及异体移植在整形外科和修复重建领域运用已比较广泛,但目前正在大力研发的用于组织工程支架的细胞外基质异体移植的可行性尚较少得到关注。细胞外基质是组织内常驻细胞的“自制产物”,是细胞分泌到细胞外的富含胶原和多糖的大分子网状物;不仅是支撑组织、细胞生长的支架,还能诱导和调控细胞的黏附、生长、增殖和分化[2]。

人关节软骨脱细胞基质制备实验(英文)

背景:对天然的细胞外基质进行处理,剔除其抗原成分,保留了组织结构的完整性,这种材料具有良好的生物相容性,能为细胞创造尽可能接近体内的培养环境,因此应是组织工程中细胞培养支架的首选。目的:制备人关节软骨脱细胞基质,为进一步研究关节软骨基质作为细胞外支架材料提供方法学资料。设计:以骨组织标本为实验对象,单一样本研究。单位:解放军总医院骨科研究所。材料:实验于2004-01/05在解放军总医院骨科研究所完成。材料来自因股骨颈头下型骨折行关节置换而切除的股骨头。方法:切取人关节软骨,剪裁成3.5mm×4.5mm×2.0mm大小共10块,冻干处理12h,采取化学去污剂TritonX-100及DNA酶和RNA酶等试剂制备脱细胞的人关节软骨。用苏木精-伊红、番红O及软骨蛋白聚糖免疫组化染色等方法进行关节软骨脱细胞定性检测。主要观察指标:脱细胞关节软骨的组织学观察以及软骨蛋白聚糖免疫组织化学染色结果。结果:①苏木精-伊红染色、番红O染色均显示细胞陷窝内已无细胞结构。②软骨蛋白聚糖免疫组织化学染色阳性,提示脱细胞关节软骨基质内仍存在软骨蛋白聚糖。结论:人关节软骨冻干后,经去污剂-酶等处理方法可脱去软骨的细胞成分,成功制备人关节软骨脱细胞基质。其中保留的软骨蛋白聚糖可能仍存在原有的耐压特性。

可降解高分子丙交酯-乙交酯共聚物(PLGA)三维支架的细胞相容性和鼻软骨组织工程

目的探讨可生物降解丙交酯-乙交酯共聚物(PLGA)(80∶20)三维多孔支架生物相容性及用于构建组织工程鼻软骨可行性,为临床鼻软骨缺损的修复提供新来源。方法体外分离培养新生兔关节软骨细胞,采用计算机形态分析和MTT法检测兔软骨细胞在PLGA膜和支架表面粘附、扩展和增殖情况。将培养扩增的兔软骨细胞,按6×106cells/ml浓度接种于预加工的人鼻软骨外形PLGA多孔支架内,抗坏血酸体外诱导培养4周,形成软骨样组织,倒置显微镜、组织切片、扫描电镜观察人工软骨的组织形态结构。结果培养开始阶段,软骨细胞在PLGA膜表面粘附较差,以后逐渐增高,24小时接近于对照组;MTT法结果显示,软骨细胞在PLGA支架内培养7天时细胞绝对数量明显增加,而相对增殖率逐渐下降。肉眼观察,培养物为人鼻软骨外形的透明软骨样组织,具有一定弹性和硬度,表面有大量软骨基质形成;倒置显微镜下可见人工软骨周围有大量软骨细胞聚集和细胞外基质形成。组织切片及扫描电镜分析,多孔支架材料的网孔不完整,孔内有大量软骨细胞和细胞外基质,可见典型软骨陷窝样结构。结论可生物降解PLGA制备的三维多孔支架具有较好生物相容性和可塑性,可用于组织工程鼻软骨体外构建,具有潜在的临床应用价值。

脱细胞半月板细胞外基质对半月板细胞的影响

目的探讨脱细胞半月板细胞外基质(dMECM)对传代半月板细胞增殖、细胞活性以及细胞表型的影响。方法用CCK-8法检测dMECM对半月板细胞增殖的影响;将P3代的内侧半月板纤维软骨细胞种植在d MECM修饰盖玻片上,以未修饰盖玻片为对照,体外培养7、14d后进行细胞活性检测,糖胺多糖、胶原分泌含量测定并用RT-PCR检测半月板细胞特异性基因mRNA表达变化。结果 CCK-8结果证实,与对照组比较,生长在dMECM修饰盖玻片上的P3代兔半月板纤维软骨细胞具有更好的细胞增殖特性(P<0.05);细胞死/活染色结果证实dMECM组可维持更好的细胞活性;糖胺多糖和胶原定量检测结果证实dMECM组在第7、14天时,比对照组分泌更多的糖胺多糖和胶原(P<0.05)。RT-PCR的检测结果证实体外培养7、14 d时,dMECM组II型胶原mRNA表达显著上调(P<0.05)。结论 dMECM可以很好地促进半月板纤维软骨细胞的增殖、分化以及细胞活性的维持,可能是未来半月板组织工程领域非常有前景的支架材料之一。

骨性关节炎软骨细胞的凋亡和中药干预

骨关节病（osteoarthritis，OA）是关节炎中最常见的一种，在美国30岁以上人群中，仅膝关节OA的发病率就为6％，是老年人疼痛和致残的主要原因之一，占残疾成人的17％。1995年国际OA专题会议提出了OA的最新定义：认为骨性关节炎是力学和生物学因素共同作用下导致软骨细胞、细胞外基质以及软骨下骨三者降解和合成正常偶联失衡的结果。目前研究表明软骨细胞凋亡与OA进程密切相关。

低强度脉冲超声对人骨性关节炎软骨细胞的影响

目的探讨低强度脉冲超声(low-intensity pulsed ultrasound,LIPUS)对体外原代培养的人骨性关节炎(osteoarthritis,OA)软骨细胞凋亡和细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的影响。方法取人膝关节置换术后废弃软骨分离培养软骨细胞,经甲苯胺蓝染色与Ⅱ型胶原细胞免疫化学染色鉴定,分别用流式细胞仪、q PCR技术及Western blot技术检测不同超声强度(0、30、60、90 m W/cm^2)条件下软骨细胞的凋亡率和Ⅱ型胶原(COL2α1)、蛋白聚糖(aggrecan)、基质金属酶13(matrix metalloproteases 13,MMP13)在mRNA及蛋白水平的表达差异。结果流式细胞学检测显示,30、60、90 m W/cm2组的细胞凋亡率[(7.75±0.79)%、(8.52±0.91)%、(11.38±0.85)%]均较对照组低[(18.13±0.83)%,P<0.05];30、60、90 m W/cm2组细胞的COL2α1和蛋白聚糖在mRNA及蛋白水平均高于对照组(P<0.05),MMP13 mRNA及蛋白表达水平低于对照组(P<0.05),但各处理组之间不呈强度依赖性。结论LIPUS能够抑制体外单层培养的OA软骨细胞的凋亡,促进软骨ECM的合成,抑制软骨ECM的分解,可用于OA的治疗并延缓其发展。

介导软骨细胞相关机制调控骨性关节炎的长链非编码RNA

背景:作为在软骨中发现的唯一一种细胞,软骨细胞在骨性关节炎中的作用受到了广泛的关注。越来越多的研究发现长链非编码RNA能够通过影响软骨细胞的各种基本细胞特征从而参与骨性关节炎的发病机制。目的:综述长链非编码RNA在骨性关节炎软骨细胞中的研究进展,为骨性关节炎寻找更多的诊断和治疗靶标。方法:通过中国知网及PubMed数据库,以“骨性关节炎,长链非编码RNA,软骨细胞,自噬”为中文关键词;以“osteoarthritis;non-coding RNAs;long non-coding RNAs;chondrocytes;chondrocytes proliferation;chondrocytes autophagy;chondrocytes inflammation;chondrocytes extracellular matrix”为英文关键词,搜索2007-2022年在骨性关节炎中与长链非编码RNA有关的文献,排除重复研究、可信度低及无参考意义文献,共纳入62篇文献进行分析、归纳、总结。结果与结论:①长链非编码RNA能够通过调节软骨细胞增殖、自噬、炎症反应和细胞外基质合成等机制进而影响骨性关节炎的发展;②长链非编码RNA有可能成为骨性关节炎诊断或治疗的潜在生物标志物。

基质刚度介导软骨细胞衰老过程

目的随着骨性关节炎的发展,软骨细胞外基质的硬度存在力学变化。近期研究指出,软骨细胞衰老与其修复效率相关。对细胞外基质硬度对软骨细胞衰老状态的影响进行初步研究。方法制造模拟软骨细胞周细胞基质(PCM)到细胞外基质(ECM)的系列具有不同硬度的PDMS软胶,在其上培养细胞,并进行相应生化学检测,以研究基质硬度对软骨细胞衰老的影响。结果随着基质刚度从504 kPa降低到28 kPa,衰老的软骨细胞比例显著下降,衰老相关基因p16INK4A下降了94倍。

软骨细胞与异体软骨微粒脱细胞基质体外相容性的研究

目的探索以异体软骨微粒脱细胞基质为支架构建组织工程化软骨。方法多步骤酶法将绵羊关节软骨制成微粒脱细胞基质,行大体、光镜(苏木素伊红、胶原、甲苯胺蓝染色)、扫描电镜观察,同时测定微粒的胶原、氨基葡聚糖、DNA含量。异体绵羊关节软骨细胞分离、体外扩增,并与软骨微粒脱细胞基质混合体外培养0～35d,倒置显微镜及扫描、透射电镜观察,同时测定羟脯氨酸,氨基葡聚糖,DNA含量及细胞黏附率。结果软骨微粒脱细胞基质只含有基质成分,直径0.100～0.154mm,胶原,氨基葡聚糖及DNA含量分别为204.4±3.1μg/mg,18.3±2.0μg/mg和0.042±0.013μg/mg。异体软骨细胞紧紧围绕于异体软骨微粒脱细胞基质四周,二者形成的复合物中胶原、氨基葡聚糖及DNA含量于第7d与0d相比具有统计学意义(P<0.05),分别与14d(胶原、DNA)和21d(氨基葡聚糖)达高峰,随后维持在高水平。细胞黏附率为92%。结论软骨细胞与异体软骨微粒脱细胞基质有良好的生物相容性,为组织工程方法再造软骨提供又一支架材料。

骨性关节炎相关基因甲基化的研究进展

骨性关节炎（osteoarthritis，OA）是最常见的老年性关节退行性疾病，是由多种因素综合作用而发生的一种复杂的病理过程，常起源于关节软骨，软骨下骨和滑膜的病变，多表现为关节疼痛、骨质增生、活动受限。目前还没有根治OA的方法，只能对症治疗，缓解症状，改善功能。既往对OA的研究认为，细胞外基质降解和基质合成受抑制而导致的软骨的退变以及软骨细胞的凋亡在该病发生发展中起着主要作用，并已经有大量的相关实验研究及疾病干预方法的尝试。

淫羊藿苷治疗骨性关节炎过程中对关节软骨、软骨下骨、滑膜等影响的机制

背景:淫羊藿苷是具有补肾强筋健骨功效的淫羊藿的主要有效成分,近年来大量的研究发现淫羊藿苷在治疗骨性关节炎方面有着显著作用。目的:综述淫羊藿苷治疗骨性关节炎的分子机制研究进展。方法:第一作者应用计算机以"Icariin、Osteoarthritis、Cartilage、Subchondral bone、Synovial membrane、Synovium、Inflammation"及"淫羊藿苷、骨关节炎、骨性关节炎、软骨、软骨下骨、滑膜、炎症"作为主题词检索PubMed、中国知网、万方、维普等数据库相关文献,按入选标准及排除标准进行筛选,最终纳入42篇文献进行分析。结果与结论:淫羊藿苷通过促进骨髓间充质干细胞的成软骨分化及增强软骨细胞和成骨细胞的增殖,抑制软骨细胞外基质的降解、降低破骨细胞的活性和减轻炎症因子所致的滑膜炎症反应来有效的治疗骨性关节炎。但其最佳有效剂量及浓度安全性仍需要大量实验研究,目前绝大部分实验仍停留在动物及组织细胞等基础实验,尚需要大量临床研究,继续完善其具体机制,以期为淫羊藿苷治疗骨关节炎提供循证医学证据。

从基质黏弹性和钙信号深入理解骨性关节炎发病机制

近年来,科学家们普遍认为细胞外基质(extracellular matrix, ECM)力学特性是调控细胞力学生物学行为的一个重要影响因素。几乎所有的活组织和ECM都具有显著的黏弹性特征。大量研究证实,细胞能够感受和响应ECM力学特性。细胞通过基于整合素的黏附、力敏感离子通道激活以及下游信号通路的激活来感受基质力学特性的变化[1]。软骨细胞周围是以VI型胶原为主、厚度约2μm的细胞周基质(pericellular matrix, PCM),其在软骨发育、生物物理信号转导和骨性关节炎(osteoarthritis, OA)中发挥关键作用。OA的显著特征是关节软骨受力异常引起的软骨结构改变,其最终影响整个关节生物力学特性。关节软骨机械负荷引起一系列软骨细胞敏感的物理刺激,其中包括PCM力学特性。早期研究已证实,软骨细胞PCM从微/纳米尺度定义了软骨细胞生物力学和生物化学的基质微环境,其生物物理特性调控软骨细胞与基质之间相互作用[2]。这种相互作用最终影响基因表达和蛋白合成的变化,从而实现物理信号向软骨细胞生理响应转化这一关键力转导过程。软骨细胞与基质之间生物化学和生物物理信号的复杂相互作用决定着软骨组织的健康与疾病。OA发展涉及多种蛋白酶的分泌,这些蛋白酶的分泌能彻底改变软骨ECM的结构和组成,从而使ECM对机械应力和应变刺激呈现出时间依赖性的黏弹性响应。ECM黏弹性力学特性调控软骨细胞增殖、基因表达和表型[3-4]。