低氧诱导因子1α和轴突导向因子4D与结直肠癌临床病理学特征的相关性研究

目的探讨低氧诱导因子1α(HIF-1α)和轴突导向因子4D(Sema4D)在结直肠癌患者癌组织中的表达及其与结直肠癌临床病理学特征的关系。方法收集2015年7月至2017年7月广州军区武汉总医院手术后结直肠癌组织标本100例(病灶组)和癌旁组织标本50例(癌旁组)。通过免疫组织化学方法检测病灶组和癌旁组标本中HIF-1α、Sema4D蛋白的表达情况并分析其与患者临床病理学特征的关系。结果病灶组HIF-1α、Sema4D蛋白表达阳性率均明显高于癌旁组[58. 0%(58/100)比8. 0%(4/50)、60. 0%(60/100)比14. 0%(7/50)],差异均有统计学意义(均P <0. 01)。HIF-1α、Sema4D蛋白表达与结直肠癌Dukes分期、淋巴结转移、肿瘤分化程度有密切关系(均P <0. 05)。Spearman相关分析显示,HIF-1a和Sema4D蛋白表达呈正相关(r=0.642,P<0.01)。结论 HIF-1α、Sema4D蛋白在结直肠癌组织中高表达,并且与肿瘤的发生发展关系密切,2种蛋白联合检测可为结直肠癌的预后判断提供参考。

胃癌组织中低氧诱导因子-1α和轴突导向因子4D的表达及临床意义

目的探讨胃癌组织中低氧诱导因子(HIF)-1α和轴突导向因子(Sema)4D的表达及临床意义。方法胃癌根治术的患者97例,实时荧光定量PCR检测胃癌及癌旁组织中HIF-1α和Sema4D表达,利用Kaplan-Meier法分析HIF-1α和Sema4D表达对患者术后生存时间的影响。结果胃癌组织中HIF-1αmRNA和Sema4D mRNA相对表达量均高于癌旁组织(P<0.05);胃癌组织中HIF-1αmRNA和Sema4D mRNA相对表达量均与TNM分期、T分期、分化程度和淋巴结转移有关(P<0.05);Pearson相关分析显示,胃癌组织中HIF-1αmRNA相对表达量与Sema4D mRNA相对表达量呈正相关(r=0.607,P<0.05)。HIF-1α高表达组患者中位生存时间33.3个月,HIF-1α低表达组为48.7个月;Sema4D高表达组患者中位生存时间30.7个月,Sema4D低表达组为49.5个月,患者中位生存时间差异显著(P<0.05)。结论 HIF-1α和Sema4D在胃癌组织中高表达,可能相互协作加速胃癌浸润和转移过程,可作为判定患者预后的指标。

膀胱癌微环境中轴突导向因子4D在肿瘤相关巨噬细胞表达的研究分析

目的探讨膀胱癌微环境中轴突导向因子4D(semaphorins 4D,Sema4D)在肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAM)上的表达特点。方法膀胱癌细胞系T24与M0型巨噬细胞共培养,通过实时荧光定量PCR和酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测不同表型巨噬细胞及共培养组巨噬细胞中Sema4D表达量;收集37例膀胱癌患者的临床资料、病理肿瘤组织和10例癌旁正常组织,应用免疫组化染色法和免疫荧光双标法检测CD163、Sema4D表达量,对TAM浸润性及其Sema4D表达率进行临床验证。结果极化诱导以及共培养后,PCR结果显示M2型巨噬细胞中Sema4D的表达量明显高于M0和M1型巨噬细胞,差异均有统计学意义(P=0.0190,P=0.0180),T24+M0组巨噬细胞中Sema4D的表达量明显高于M0和M1型巨噬细胞,差异均有统计学意义(P=0.0066,P=0.0254);ELISA结果显示M2型巨噬细胞中Sema4D的表达量明显高于M0和M1型巨噬细胞,差异均有统计学意义(P=0.0052,P=0.0058),T24+M0组巨噬细胞培养上清液中Sema4D的表达量明显高于M0和M1型巨噬细胞,差异均有统计学意义(P=0.0026,P=0.0269)。肿瘤组织中CD163^(+)细胞计数高于癌旁正常组织(36.05±14.56 vs.12.10±5.70),差异有统计学意义(P<0.01);肿瘤组织中Sema4D表达高于癌旁正常组织(39.14±12.34 vs.11.00±4.65),差异有统计学意义(P<0.01),且肿瘤组织中Sema4D^(+)TAM百分比高于癌旁正常组织(67.44±13.74 vs.21.04±1.80),差异有统计学意义(P<0.0001)。肌层浸润性膀胱癌(muscle-invasive bladder cancer,MIBC)组织中CD163+细胞计数和Sema4D表达均高于癌旁正常组织(43.37±12.48 vs.28.33±11.98;48.78±10.18 vs.34.74±12.59),差异有统计学意义(P=0.0009,P=0.0258),且MIBC组织中Sema4D^(+)TAM百分比高于非肌层浸润性膀胱癌(non-muscle-invasive blad-der cancer,NMIBC)组织(70.78±11.74 vs.60.58±12.05),差异有统计学意义(P=0.0160)。TAM浸润性(CD163^(+)细胞计数)及其Sema4D表达率与肿瘤T分期均呈正相关(P=0.0025,P=0.0201),与病理分级均呈正相关(P=0.0090,P=0.0031),但与患者性别、年龄和肿瘤最大直径均无相关性(P>0.05)。结论膀胱癌微环境中,M2型巨噬细胞表达Sema4D,可能导致膀胱癌增殖和侵袭。M2型巨噬细胞浸润性及其Sema4D表达率与膀胱癌发生和肌层浸润密切相关。

低氧诱导因子-1α和轴突导向因子4D在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的比较低氧诱导因子-1α（HIF-1α）和轴突导向因子4D（Sema4D）在结直肠癌组织和正常组织中的表达，探讨两者之间的相关性及临床意义。方法采用免疫组织化学SP法检测86例结直肠癌组织和52例正常组织中HIF-1α和Sema4D的表达，并分析其与结直肠癌临床病理特征及预后的关系。结果结直肠癌组织中HIF-1α和Sema4D蛋白阳性表达率显著高于正常组织[分别为58．1％（50／86）比7．7％（4／52），X2=34．624，P〈0．01；60．5％（52／86）比11．5％（6／52），x2=31．839，P〈0．01]。HIF-1α和Sema4D蛋白与结直肠癌组织分化程度（P／0．003，P=0．010）、TNM分期（P=0．003，P=0．017）和淋巴结转移（P=0．003，P=0．020）明显有关；且两者表达呈正相关（r=0．567，P〈0．01）。全组患者5年生存率为37％。其中HIF-1α蛋白阳性和阴性表达者的5年生存率分别为24％和56％（P=0．003）；Sema4D蛋白阳性和阴性表达者的5年生存率分别为23％和59％（P=0．001）。Cox多因素分析显示，Sema4D表达是结直肠癌患者的独立预后因素（P=0．026），而HIF-1α表达不是其独立预后因素（P=0．501）。结论HIF-1α和Sema4D具有协同关系，两者蛋白的联合检测，可为预测结直肠癌的预后判断提供参考。

血清kallistatin、Netrin-4与早发型子痫前期患者外周血HMGB1-RAGE信号通路的关系及对妊娠结局的影响

目的探讨血清人激肽释放酶抑制剂(kallistatin)、轴突导向因子4(Netrin-4)水平与早发型子痫前期(EOPE)患者外周血高迁移率族蛋白1(HMGB1)-晚期糖基化终末产物受体(RAGE)信号通路的关系及对妊娠结局的影响。方法选取2019年9月至2021年8月该院产科收治的EOPE患者(EOPE组,182例)及健康孕妇(对照组,91例)。比较两组血清kallistatin、Netrin-4、HMGB1、RAGE、核因子-κB p65(NF-κB p65)水平并进行相关性分析。根据EOPE患者的妊娠结局分为不良组(52例)和良好组(130例),并对不良妊娠结局的危险因素进行Logistic回归分析法。结果EOPE组患者血清kallistatin、Netrin-4水平低于对照组,HMGB1、RAGE、NF-κB p65水平高于对照组(P<0.05);血清HMGB1、RAGE、NF-κB p65水平与kallistatin、Netrin-4水平呈负相关(P<0.05)。EOPE组不良妊娠结局发生率为28.57%,单因素及多因素Logistic回归分析法结果显示,孕前高体质量指数(BMI)、24 h尿蛋白定量高水平、血肌酐高水平、D-二聚体高水平、血清kallistatin低水平、Netrin-4低水平均是EOPE患者发生不良妊娠结局的独立危险因素(P<0.05)。结论EOPE患者血清kallistatin、Netrin-4与HMGB1-RAGE信号通路蛋白表达呈负相关,孕前高BMI、24 h尿蛋白定量高水平、血肌酐高水平、D-二聚体高水平、血清kallistatin低水平、Netrin-4低水平是导致EOPE患者发生不良妊娠结局的独立危险因素。

三阴性乳腺癌中Sema4D与c-met表达及其与微淋巴管密度和各项临床病理特征的关系

目的:探讨三阴性乳腺癌Sema4D与c-met表达及其与微淋巴管密度(LMVD)和各项临床病理特征的关系。方法:采用免疫组化方法检测95例三阴性乳腺癌组织中Sema4D与c-met表达,检测微淋巴管密度(LMVD),依据不同临床病理特征分组并进行组间比较,同时以78例非三阴性乳腺癌及22例正常乳腺组织标本做对照。结果:三阴性乳腺癌组织中,Sema4D与c-met阳性表达率均明显高于其在非三阴性乳腺癌及在正常乳腺组织中的阳性表达率;Sema4D与c-met的表达具有正相关性(r=0.713,P<0.05)。三阴性乳腺癌组织中LMVD明显高于非三阴性乳腺癌及正常乳腺组织(P<0.05);Sema4D、c-met阳性表达组的LMVD明显高于阴性表达组(P<0.05);Sema4D表达在肿瘤大小、淋巴结转移数目及是否远处转移间比较,差异有显著性意义(P<0.05)。c-met表达在淋巴结转移数目及是否远处转移间比较,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:Sema4D与c-met的高表达可能促进三阴性乳腺癌淋巴管的新生、淋巴道转移及远处转移,相关抑制剂的研究有可能成为预防和治疗三阴性乳腺癌淋巴道转移和远处转移的新方法。

miR-214负向调控结肠癌细胞株LoVo中Sema4D的表达

目的:观察miR-214对人结肠癌细胞株LoVo中轴突导向因子4D(semaphorin 4D,Sema4D)表达水平的影响,探讨miR-214对Sema4D的调控作用.方法:设计并合成miR-214模拟物(miR-214mimics),miR-214抑制剂(miR-214 inhibitor),二者对照序列(mi-control,in-control),分别与以脂质体lipofectamine 2000包裹后转染人结肠癌细胞株LoVo.RT-PCR检测转染24 h后各细胞株内miR-214的表达及Sema4D mRNA的表达变化,并用Western blot检测Sema4D蛋白的表达变化.结果:LoVo细胞株转染miR-214 mimics、mi-control,inhibitor、in-control 24 h后miR-214的相对表达量为8.003±0.651,3.464±0.332,0.740±0.088,2.620±0.166,mimics组miR-214表达较其对照组升高,inhibitor组表达较其对照组降低(P<0.05).Sema4D mRNA的相对表达量为:0.420±0.027,0.851±0.062,1.243±0.087,0.660±0.042;Sema4D蛋白/β-actin分别为:0.163±0.037,0.550±0.038,1.137±0.112,0.457±0.046.Sema4D mRNA及蛋白mimics组表达较其对照组降低,inhibitor组较其对照组升高(P<0.05).结论:人结肠癌细胞株LoVo中,Sema4D受miR-214的调控,miR-214可负向调控Sema4D mRNA的表达水平进而影响其蛋白的表达,miR-214可能作为结肠癌治疗的新靶点.

乳腺癌组织HIF-1α和Sema 4D表达及其与淋巴管密度和各临床病理指标的关系

目的通过检测HIF-1α和Sema 4D在乳腺癌组织表达,探讨其与淋巴管密度（LVD）和临床病理指标的关系。方法采用免疫组化SP法检测110例乳腺癌组织标本HIF-1α和Sema 4D表达,检测微淋巴管密度（LVD）,依据不同临床病理特征分组并进行组间比较,并与乳腺纤维腺瘤组织标本对照。结果乳腺癌组织HIF-1α和Sema 4D阳性表达率分别为72.72%（80/110）和77.27%（85/110）;HIF-1α与Sema 4D表达呈正相关性（r=0.691,P〈0.01）。乳腺癌组织LVD显著高于纤维腺瘤组（P〈0.01）,淋巴结转移组LVD显著高于无淋巴结转移组（P〈0.01）;p TNMⅠ~Ⅱ期组、淋巴结无转移组癌组织HIF-1α和Sema 4D表达阳性率明显低于p TNMⅢ期组、有淋巴结转移组（P〈0.05,P〈0.01）,不同年龄、组织学分级、肿块大小组之间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论乳腺癌组织HIF-1α、Sema 4D高表达,可能与淋巴管的增生、转移侵袭有密切关系。

血清Sema4D、BMP-4、AFU与乙肝相关肝癌患者临床病理特征及预后的关系

目的研究乙肝相关原发性肝癌(PHC)患者血清轴突导向因子4D(Sema4D)、骨形成蛋白4(BMP-4)、α-L-岩藻糖苷酶(AFU)水平与临床病理特征及预后生存情况的关系。方法选取青海省海西自治州人民医院2015年1月至2017年1月收治的乙肝相关PHC患者120例、乙肝肝硬化患者60例、慢性乙肝患者60例及健康志愿者60例为对照组,比较4组的血清Sema4D、BMP-4、AFU水平,采用受试者工作特征曲线(ROC)分析Sema4D、BMP-4、AFU诊断乙肝相关PHC的临界值,分析血清Sema4D、BMP-4、AFU水平与乙肝相关PHC患者临床病理特征及预后生存时间的关系。结果对照组、慢性乙肝组、乙肝肝硬化组、乙肝相关PHC组的血清Sema4D、AFU水平呈逐级升高趋势(P<0.05);对照组的BMP-4水平高于乙肝肝硬化组和乙肝相关PHC组,低于慢性乙肝组,乙肝相关PHC组的BMP-4水平低于乙肝肝硬化组(P<0.05)。ROC曲线显示,Sema4D、BMP-4、AFU诊断乙肝相关PHC具有较好的临床价值,根据Sema4D、BMP-4、AFU诊断乙肝相关PHC的临界值9.5 ng/ml、31.4 pg/ml及67.2 U/L,将分为高水平组和低水平组,两组性别、年龄、肿瘤直径、肿瘤数目、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阳性率差异无统计学意义(P>0.05);两组TNM分期、Child-Pugh分级、是否侵犯血管、有无腹水差异有统计学意义(P<0.05)。不同性别、年龄、肿瘤直径、肿瘤数目、HBsAg阳性乙肝相关PHC患者的中位生存时间(MST)比较差异无统计学意义(P<0.05);不同TNM分期、Child-Pugh分级、是否侵犯血管、有无腹水及血清Sema4D、BMP-4、AFU水平乙肝相关PHC患者的MST比较差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Cox回归分析显示,TNM分期Ⅲ、Ⅳ期、Child-Pugh分级B级、侵犯血管、血清Sema4D、AFU水平异常升高及BMP-4水平异常降低为乙肝相关PHC患者预后生存的独立危险因素(P<0.05)。结论PHC患者血清Sema4D、AFU水平升高、BMP-4水平降低,Sema4D、BMP-4、AFU与肿瘤发生发展存在密切关系,并可作为PHC患者的预后评估指标。

HER-2、PGⅡ及Sema4D蛋白在胃癌中的表达及与病情、预后的关系

目的分析胃癌组织中人表皮生长因子受体-2(HER-2)、胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)及轴突导向因子4D(Sema4D)表达情况及与病情、预后的关系。方法收集本院2018年10月—2020年12月收治的104例胃癌临床资料。比较癌组织及癌旁正常组织HER-2、PGⅡ及Sema4D表达情况,分析胃癌组织HER-2、PGⅡ及Sema4D表达与病理学特征的关系,并分析影响患者预后的因素。结果胃癌组织HER-2、Sema4D阳性表达率明显高于癌旁正常组织,PGⅡ阳性表达率低于癌旁正常组织(P<0.01)。低分化、有淋巴结转移、临床分期Ⅲ~Ⅳ期者HER-2、Sema4D阳性表达率显著高于中高分化、无淋巴结转移及临床分期Ⅰ~Ⅱ期者,PGⅡ阴性表达率高于中高分化、无淋巴结转移及临床分期Ⅰ~Ⅱ期者(P<0.05,P<0.01)。经1年随访,患者死亡21例,生存83例;死亡组中HER-2、Sema4D阳性表达率明显高于生存组,PGⅡ阳性表达率低于生存组(P<0.05,P<0.01)。淋巴结转移、临床分期Ⅲ~Ⅳ期、低分化、HER-2阳性表达、PGⅡ阴性表达及Sema4D阳性表达为胃癌患者预后的独立危险因素(P<0.01)。结论HER-2、PGⅡ及Sema4D在胃癌组织中异常表达,其表达与肿瘤恶性生物学行为有关,三者有望成为评估患者病情、预后的标志物。

胃癌组织中HIF-1α,CD68及Sema4D蛋白的表达及临床意义

目的比较低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)标记抗原CD68和轴突导向因子4D(Sema4D)在胃癌组织和癌旁组织中的表达,探讨三者之间的相关性及临床意义。方法采用免疫组织化学SP法检测86例胃癌组织和癌旁正常组织中HIF-1α,CD68和Sema4D的表达,并分析其与临床病理特征的关系。结果胃癌组织中HIF-1α,CD68及Sema4D蛋白阳性表达率显著高于正常组织(分别为58.1%%VS 23.3%,72.1%VS 23.3%,74.4%VS 29.1%;P均<0.01)。HIF-1α,CD68及Sema4D蛋白与胃癌组织分化类型、TNM分期和淋巴结转移明显有关(P<0.05),且三者表达均呈正相关(r HIF-1α/CD68=0.418,r HIF-1α/Sema4D=0.367,r CD68/Sema4D=0.467,P均<0.01)。结论胃癌组织中HIF-1α,CD68及Sema4D表达明显增高,且三者的表达均呈正相关,三者的联合检测可作为胃癌早期诊断的辅助指标。