脂肪干细胞移植促进脑缺血大鼠脑组织轴突生长诱向因子1(netrin-1)的表达

目的观察脑缺血损伤大鼠脑组织中轴突生长诱向因子1(netrin-1)的表达及脂肪干细胞(ADSC)移植对其表达的影响。方法健康雄性SD大鼠分为正常组、模型组和ADSC组。复制大鼠大脑中动脉栓塞模型,分离培养ADSC,ADSC组大鼠经侧脑室注射30μL含1×106个细胞的ADSC悬液,模型组注射等剂量PBS。各组大鼠分别在术后4、7、14 d处死6只并取脑组织,采用反转录PCR检测脑组织中netrin-1 mRNA的表达、Western blot法和免疫组织化学法检测脑组织中netrin-1蛋白的表达和定位。结果与正常组相比,模型组脑缺血后脑组织中netrin-1的表达增加,4 d时达高峰,在各观察时间点的表达均显著高于正常组。与模型组相比,ADSC组脑组织中netrin-1的表达进一步上升,7 d时达高峰,在各观察时间点的表达均显著高于模型组。结论脑缺血损伤后进行ADSC移植可提高脑组织中netrin-1的表达,可促进轴突的再生与修复。

电针对轴突生长导向因子-1和臂板蛋白3a在局灶性脑梗死大鼠脑皮质表达的影响

目的观察局灶性脑梗死大鼠皮质轴突生长导向因子-1(netrin-1,Ntn1)和臂板蛋白3a(semaphorin-3a,sema3a)的表达及电针干预对其表达的影响。探索Ntn1与sema3a在电针对脑梗后神经可塑性影响中的作用。方法将130只雄性SD大鼠分为正常组(n=10)、模型组(n=60)及电针组(n=60)。利用线栓法制作大脑中动脉闭塞模型。分别在术后1、3、7、14 d时,对术后大鼠进行神经功能评分(modified neurologic severity scores,mNSS),利用免疫组化检测缺血侧大脑脑皮质中Ntn1、sema3a、神经丝蛋白200(NF200)分布和表达,免疫印迹法检测缺血侧大脑皮质Ntn1和sema3a的蛋白表达。结果免疫组化结果显示在各个时相点大鼠脑皮质均表达Ntn1和sema3a,主要集中在细胞质阳性表达。Western blot检测结果显示,与正常组相比,模型组Ntn1蛋白的表达水平在脑梗死后1 d即开始明显上升(P<0.01),3 d时呈上升趋势(P<0.01),7 d时达峰值(P<0.01),14 d时仍显著高于基础水平(P<0.01),电针组与模型组相比,Ntn1蛋白表达趋势相同,但表达量明显高于模型组,术后1、3、7、14 d时有统计学差异(P<0.05,P<0.01)。与正常组相比,模型组sema3a蛋白的表达水平在术后1 d即开始上升(P<0.01),7 d时达高峰(P<0.01),14 d时仍高于基础水平(P<0.01)。同时相点电针组与模型组相比sema3a均呈现低表达,1、3 d和7、14 d时有统计学差异(P<0.05,P<0.01),峰值同样在7 d时出现。Western blot检测结果与免疫组化分析结果基本相符。7、14 d时电针组与模型组相比mNSS评分存在统计学差异(P<0.05),14 d时电针组与模型组相比NF200的表达量存在统计学差异(P<0.05)。结论局灶性脑梗死后大鼠皮质Ntn1与sema3a表达明显上调,给予电针干预后可提高Ntn1的表达并抑制sema3a的表达,促进轴突的再生与修复,这可能是电针促进脑梗死后神经功能恢复的机制之一。

一氧化氮对星形胶质细胞轴突生长因子-1表达及迁移的影响

目的探讨一氧化氮(NO)对星形胶质细胞中轴突生长因子-1(netrin-1)的表达变化以及对细胞迁移的影响。方法采用硝普钠(SNP)作为NO供体处理星形胶质细胞,通过振荡培养和差速贴壁法分离纯化新生SD大鼠星形胶质细胞,接种至培养板,分为实验组和对照组,每组6个样本,实验组用50μmol/L SNP处理星形胶质细胞,通过划痕法观察细胞的迁移,并采用Western blotting和免疫细胞化学方法分别检测处理前后的星形胶质细胞中netrin-1蛋白的表达变化。结果 SNP处理后,实验组的星形胶质细胞与对照组相比,划痕区细胞明显增多,星形胶质细胞netrin-1表达随着时间的推移出现先升高后降低趋势,于48 h达到峰值(P<0.01)。结论 SNP使星形胶质细胞netrin-1表达水平发生变化和影响星形胶质细胞迁移,提示netrin-1可能通过NO的调控而影响星形胶质细胞迁移。

中重度颅脑创伤患者血清STC1 S100B和NETRIN-1的表达及对预后的预测价值

目的探讨斯钙素抗体-1(STC1)、S100钙结合蛋白B(S100B)、轴突生长诱向因子-1(NETRIN-1)在中重度创伤性颅脑损伤(TBI)术后患者血清中的表达水平及预测预后的价值。方法收集74例TBI患者及40名健康者的血清样本,使用q RT-PCR检测健康者与TBI患者术前及术后第1天、第3天、第5天、第7天的血清STC1、S100B、NETRIN-1表达水平。收集TBI患者的一般临床资料,使用扩展版格拉斯哥结局量表(EGOS)评估患者预后,根据EGOS评分将患者分为预后良好组(EGOS≥5分,n=40)及预后不良组(EGOS<5分,n=34)。分析TBI患者术后血清STC1、S100B、NETRIN-1表达水平与预后的关系。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析STC1、S100B、NETRIN-1表达水平对患者预后的预测价值,多因素Logistic分析评估引起TBI患者预后不良的因素。结果q RT-PCR分析显示,与健康者相比,TBI患者术前血清STC1、S100B水平升高,NETRIN-1水平降低,术后血清STC1、S100B水平降低,NETRIN-1水平升高(P<0.05)。TBI患者术后第1、3、5、7天血清STC1、S100B水平逐渐降低,NETRIN-1水平逐渐升高,术后第5天最显著(P<0.05)。与术后第5天预后良好组患者相比,预后不良组患者血清STC1、S100B水平显著升高,NETRIN-1水平显著降低(P<0.05)。皮尔逊相关性分析显示术后第5天TBI患者血清STC1、S100B水平与APACHEⅡ评分呈正比,NETRIN-1水平与APACHEⅡ评分呈反比(P<0.05)。ROC曲线分析发现术后第5天血清STC1、S100B、NETRIN-1水平对TBI患者预后具有预测价值,多因素Logistic回归分析显示仅STC1水平与患者预后相关(P<0.05)。结论STC1、S100B、NETRIN-1在TBI患者血清中表达水平异常,对TBI患者预后分析具有较高价值。

肝细胞癌中血管内皮生长因子、缺氧诱生因子1α和表皮生长因子的表达及临床意义

目的分析肝细胞癌(HCC)中血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱生因子1α(HIF-1α)、表皮生长因子(EGF)表达及临床意义。方法选择2014年1月-2018年12月湘南学院附属医院病理科HCC组织石蜡包埋标本63例(HCC组),距HCC组织2 cm处分别取癌旁组织63例(癌旁组),正常肝组织20例(正常组),采用免疫组织化学SABC法检测VEGF、HIF-1α及EGF表达情况,并分析其表达与临床病理特征关系。结果 HCC组VEGF、HIF-1α、EGF阳性表达率均高于癌旁组与正常组(P均<0. 01);TNM分期、分化程度、癌灶直径、静脉浸润4项指标中,仅有静脉浸润与VEGF、HIF-1α、EGF存在相关性;有静脉浸润组织VEGF、HIF-1α、EGF阳性表达率均高于无静脉浸润组织(P均<0. 05)。结论 VEGF、HIF-1α、EGF在HCC组织中呈过量表达状态,其表达与新生血管形成存在紧密联系。

蒙成药额日敦-乌日勒水提取物对OGD诱导SH-SY5Y细胞氧化应激损伤的保护作用

目的蒙成药额日敦-乌日勒水提取物对氧糖剥夺(OGD)诱导人神经母细胞瘤系(SH-SY5Y)细胞氧化损伤的保护作用。方法建立OGD诱导SH-SY5Y细胞凋亡模型。利用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测每组细胞的存活率,确定最佳药物浓度及给药时间。确定最佳药物浓度及给药时间后,利用乳酸脱氢酶(LDH)检测最佳药物浓度和给药时间后各组细胞的损伤抑制率,利用Real-Time PCR和Western印迹法检测每组细胞的神经轴突生长抑制因子受体(NgR)1、Ras同源基因家族成员(Rho)A mRNA和蛋白的表达变化。结果与OGD模型组相比,额日敦-乌日勒10μg/ml组24、48 h和15μg/ml组12、24、48 h的细胞存活率明显提高(P<0.01)。LDH检测结果:与对照组相比,OGD模型组LDH释放显著增高(P<0.01);与OGD模型组相比,实验组LDH释放显著降低(P<0.01)。与对照组相比,OGD模型组和实验组细胞NgR1和RhoA mRNA及蛋白表达均显著增加(P<0.01);与模型组相比,实验组细胞NgR1和RhoA mRNA及蛋白表达显著下降(P<0.01)。结论蒙成药额日敦-乌日勒对OGD诱导SH-SY5YS细胞氧化损伤具有保护作用,其机制可能是通过抑制细胞内氧化应激,下调抗凋亡蛋白NgR1、RhoA的高表达,从而减少神经细胞凋亡。

TNF-α和IL-1β对HaCaT细胞诱生型一氧化氮合酶表达的影响

目的 探讨炎症性细胞因子肿瘤坏死因子 α(tumornecrosisfactor α ,TNF α)协同白细胞介素 1β(inter leukin 1β ,IL 1β)对体外培养角质形成细胞 (keratinocye ,KC)株HaCaT细胞诱生型一氧化氮合酶 (induciblenitricoxidesyn thase ,iNOS)mRNA和蛋白表达的调节作用 ,以及地塞米松对TNF α和IL 1β作用的影响。 方法 用RT PCR、Westernblotting和免疫组织化学 (SP)方法检测HaCaT细胞iNOSmRNA和蛋白表达情况。结果 正常培养HaCaT细胞iNOS微弱表达或不表达 ,TNF α协同IL 1β显著上调HaCaT细胞iNOSmRNA和蛋白表达 ,地塞米松可显著抑制TNF α和IL 1β的作用。结论 推测TNF α和IL 1β可能通过上调角质形成细胞表达iNOS合成释放的一氧化氮 (niricoxide ,NO)参与皮肤免疫和炎症反应 ;地塞米松的治疗效应可能部分与其能抑制iNOS表达有关。

netrin-1及其受体在非神经系统中的作用

轴突生长导向因子-1(netrin-1)是netrins家族中研究最广泛的成员。netrin-1最初被认为是胎儿发育过程中轴突引导的调节因子,与其经典受体非协调5(uncoordinated-5,UNC5)与结直肠癌缺失基因(deleted in colorectal cancer,DCC)共同介导轴突的吸引或排斥。随着更多netrin-1受体的发现,如唐氏综合征细胞粘附分子(down syndrome cell adhesion molecule,DSCAM)、整合素α6β4(integrinα6β4,Inα6β4)和整合素α3β1(integrinα3β1,Inα3β1)、腺苷A2B受体(A2B adenosine receptor,A2BAR)和CD146等的发现,扩展了netrin-1在非神经系统的功能,如调控血管生长,肿瘤生长,细胞凋亡,炎症发展。本文就netrin–1及其受体在非神经系统中的作用的研究进展进行概述。

血清Omentin-1、FGF4、Nogo-A水平与急性脑出血患者NIHSS评分的相关性

目的探讨血清网膜素-1(Omentin-1)、成纤维细胞生长因子4(FGF4)、轴突生长抑制因子A(Nogo-A)水平与急性脑出血患者美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分的相关性及对其动态监测的指导意义。方法选取96例急性脑出血患者作为研究对象,根据入院时NIHSS评分将患者分为轻度组(0~7分,29例)、中度组(8~15分,42例)、重度组(>15分,25例)。比较3组患者入院时血清Omentin-1、FGF4、Nogo-A水平,分析入院时血清Omentin-1、FGF4、Nogo-A水平与NIHSS评分相关性,比较预后良好和预后不良患者(入院时、治疗1周后、治疗2周后)血清指标水平,偏回归分析急性脑出血患者预后不良的影响因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清各指标水平联合检测对急性脑出血患者预后不良的预测价值。结果入院时,血清Omentin-1水平轻度组>中度组>重度组,血清FGF4、Nogo-A水平轻度组<中度组<重度组,差异有统计学意义(P<0.05);入院时NIHSS评分与血清Omentin-1水平呈负相关,与血清FGF4、Nogo-A水平呈正相关(P<0.05);与预后不良患者比较,治疗1、2周后预后良好患者血清Omentin-1水平较高,FGF4、Nogo-A水平较低,差异有统计学意义(P<0.05);logistic回归分析可知,治疗1周后血清FGF4(>196.30 ng·L^(-1))、Nogo-A(>39.01μg·L^(-1))、Omentin-1(≤122.30μg·L^(-1))水平,治疗2周后血清FGF4(>133.27 ng·L^(-1))、Nogo-A(>26.88μg·L^(-1))、Omentin-1(≤155.28μg·L^(-1))水平是急性脑出血患者预后不良的危险因素(P<0.05);ROC曲线显示,血清Omentin-1、FGF4、Nogo-A水平联合预测急性脑出血患者预后不良敏感性与特异性偏高(P<0.05)。结论急性脑出血患者血清Omentin-1水平呈高表达,血清FGF4、Nogo-A水平呈低表达,其血清水平变化可反映病情状况,且联合应用时预测预后效果的敏感性与诊断性较高。

参附注射液对缺血再灌注大鼠肠粘膜NF-κB、ICAM-1、TNF-α、iNOS表达的影响

目的 研究参附 (人参、附子 )注射液 (Shen Fuinjection ,SF)对缺血再灌注大鼠肠粘膜内核转录因子 -κB(NF κB)、细胞间粘附分子 1(ICAM 1)、肿瘤坏死因子 α(TNF α)、诱生型一氧化氮合酶 (iNOS)表达的影响。方法 选择健康成年雄性SD大鼠 3 6只 ,随机分入IR +NS组、IR +SF组和C组。采用钳闭大鼠肠系膜上动脉缺血再灌注模型。用免疫组织化学技术检测肠组织NF κB、ICAM 1、iNOS的表达和分布 ;用酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测肠组织和血浆中TNF α的含量。结果 SF能明显减轻缺血再灌注导致的小肠组织的病理损害 (P <0 .0 1) ;抑制缺血再灌注后肠组织NF κB的活化 (P <0 .0 1) ;抑制缺血再灌注后肠组织ICAM 1、iNOS表达 (P <0 .0 1) ;抑制血浆和肠组织中TNF α的含量 (P <0 .0 1)。结论 参附注射液能抑制肠组织中NF κB的活化 ,减少ICAM 1、iNOS和TNF

UA联合sFIt-1、LKN-1检测对慢性肾小球肾炎的诊断价值

目的探讨尿酸(UA)联合可溶性Fms样络氨酸激酶-1(sFIt-1)、趋化因子白细胞诱素-1(LKN-1)检测对慢性肾小球肾炎的诊断价值。方法选取2019年9月至2020年9月该院收治的肾小球肾炎患者75例为肾小球肾炎组,进一步分为急性肾小球肾炎组、慢性肾小球肾炎组2个亚组。选取同期体检健康者75例为对照组。检测各组UA、sFIt-1、LKN-1等水平并进行比较,对UA、sFIt-1、LKN-1联合检测的诊断价值及与肾功能、疾病分期的相关性进行分析。结果相比于对照组和急性肾小球肾炎组,慢性肾小球肾炎组血清尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、24 h尿蛋白定量(24 h Upro)、UA、sFIt-1、LKN-1水平较高(P<0.05)。相比于Ⅰ、Ⅱ期患者,Ⅲ期慢性肾小球肾炎患者血清UA、sFIt-1、LKN-1水平较高(P<0.05)。UA、sFIt-1、LKN-1水平与慢性肾小球肾炎患者BUN、SCr、24 h Upro、疾病分期呈正相关(P<0.05)。与UA、sFIt-1、LKN-1单项检测相比,3项联合检测对慢性肾小球肾炎的诊断价值较高(P<0.05)。结论UA、sFIt-1、LKN-1联合检测对慢性肾小球肾炎患者的诊断具有重要意义。

不同麻醉方式对腹腔镜子宫次切术围术期GRO-1、IP-10的影响

目的观察不同麻醉方式围术期对血浆趋化因子GRO-1、IP-10的变化,研究不同麻醉方式围术期对腹腔镜下子宫次切术患者免疫功能和肿瘤转移的影响。方法选择ASAⅠ～Ⅱ级腹腔镜下子宫次切术患者60例,随机分为3组:全凭静脉麻醉组(A组),静吸复合麻醉组(B组),全麻联合硬膜外阻滞组(C组),每组各20例。在麻醉前(T0)、术毕(T1)、术后24h(T2)、术后48h(T3)和出院前2h(T4)观察各时点MAP、HR、RR、SpO2,采集外周静脉血测定趋化因子GRO-1、IP-10浓度。结果患者血浆GRO-1、IP-10浓度术后均有不同程度的降低,其中B组T1时较A、C组降低更加明显;3组各时点间差异均无显著性意义。结论不同麻醉方式对围术期腹腔镜下子宫次切术患者免疫功能和肿瘤转移的影响无显著性差异,均可安全应用于腹腔镜下子宫次切术患者的麻醉。

氯沙坦钾联合复方石韦颗粒治疗慢性肾小球肾炎的临床疗效及对患者血清炎症因子水平的影响

目的探究氯沙坦钾联合复方石韦颗粒治疗慢性肾小球肾炎的临床疗效及对患者血清炎症因子[白细胞诱素-1(LKN-1)、白细胞介素-33(IL-33)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平的影响。方法选取2019年1月至2020年12月衡阳市中心医院收治的95例慢性肾小球肾炎患者作为研究对象,按照随机数字表法分为观察组(n=47)与对照组(n=48)。对照组单用氯沙坦钾治疗,观察组采用氯沙坦钾联合复方石韦颗粒治疗,比较两组临床疗效、治疗前后尿常规指标[尿红细胞计数(RBC)、24 h尿蛋白定量(24 h Upro)、尿β_(2)-微球蛋白(β_(2)-MG)]和血清炎症因子水平及急性生理学及慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)、健康状况调查简表(SF-36)评分。结果观察组治疗总有效率为95.74%,明显高于对照组的72.92%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组RBC、24 h Upro、β_(2)-MG水平均明显低于治疗前,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组血清LKN-1、IL-33及TNF-α水平均明显低于治疗前,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组APACHEⅡ评分均明显低于治疗前,SF-36评分均明显高于治疗前,且观察组APACHEⅡ评分低于对照组,SF-36评分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗过程中均未发生明显不良反应。结论氯沙坦钾联合复方石韦颗粒治疗慢性肾小球肾炎效果显著,能改善患者肾功能,降低血清LKN-1、IL-33及TNF-α水平,提高患者健康状况及生命质量。

干扰Netrin-1促进视网膜母细胞瘤对顺铂的敏感性

目的探讨Netrin-1在视网膜母细胞瘤(RB)中的表达情况以及其干预是否会影响RB对顺铂的敏感性。方法收集24例RB患者的肿瘤组织,其中19例为初治者,5例为复发者,采用Real-time PCR和Western blotting检测Netrin-1基因(在多种肿瘤中高表达)的表达情况。利用慢病毒干扰RB细胞系Y79中Netrin-1的表达,并检测细胞的增殖情况以及顺铂处理后的细胞凋亡情况。结果Netrin-1在RB患者肿瘤组织中呈高表达(P<0.05),且在复发患者中的表达水平明显高于初治者(P<0.05);干扰Netrin-1可抑制RB细胞的增殖(P<0.05),还可增加肿瘤对顺铂的敏感性(P<0.05)。结论Netrin-1可能在RB的形成和耐药机制中发挥重要作用。

血清IP-10、HO-1及Nrf2对急性百草枯中毒预后的预测价值及影响因素分析

目的分析血清干扰素诱生蛋白-10(IP-10)、血红素氧合酶-1(HO-1)及核因子E2相关因子2(Nrf2)对急性百草枯中毒预后的预测价值及影响因素。方法选择急性百草枯中毒患者105例,收集并记录其年龄、性别、服毒剂量等一般资料;采用ELISA法测定入院时患者血清IP-10、HO-1、Nrf2水平。随访30天患者生存和死亡情况,分析影响患者预后的因素以及IP-10、HO-1、Nrf2对预后的预测价值。结果随访期间共32例患者死亡(30.48%)。死亡组入院时血清IP-10、HO-1、Nrf2、百草枯水平高于生存组。服毒剂量、序贯器官衰竭估计评分(SOFA)、急性生理学与慢性健康状况评分系统(APACHEⅡ)、IP-10、HO-1、Nrf2、入院时百草枯水平均为预后的影响因素(P<0.05),IP-10、HO-1、Nrf2可预测患者的预后(P<0.05)。结论IP-10、HO-1、Nrf2为急性百草枯中毒预后的影响因素,IP-10、HO-1、Nrf2水平可辅助预测患者的预后。

TIMP-1/MMP-9、HPA、Nogo-A对高血压脑出血病情评估及手术预后预测的价值

目的探究基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)/基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、乙酰肝素酶(HPA)、轴突生长抑制因子A(Nogo-A)对高血压脑出血病情评估及手术预后预测的价值。方法选取2018年2月—2021年2月116例高血压脑出血作为研究对象,均行手术治疗,根据术后1个月的格拉斯哥预后量表(GOS)评分将患者分为预后不良组36例与预后良好组80例。比较两组血清TIMP-1/MMP-9、HPA、Nogo-A水平,以及不同病情严重程度患者血清TIMP-1/MMP-9、HPA、Nogo-A水平。分析各血清指标与病情严重程度及手术预后的关系,并采用受试者工作特征(ROC)曲线评价各血清指标预测手术预后的价值。结果预后不良组血清TIMP-1/MMP-9、HPA、Nogo-A水平高于预后良好组(P<0.01);重度损伤和中度损伤高血压脑出血患者血清TIMP-1/MMP-9、HPA、Nogo-A水平高于轻度损伤患者,且重度损伤患者高于中度损伤患者(P<0.05)。血清TIMP-1/MMP-9、HPA、Nogo-A与病情严重程度呈正相关(P<0.01),且与手术预后独立相关(P<0.05)。血清TIMP-1/MMP-9、HPA、Nogo-A联合预测手术预后的ROC曲线下面积为0.903,敏感度为86.11%,特异度为87.50%,明显高于各指标单独预测。结论血清TIMP-1/MMP-9、HPA、Nogo-A与高血压脑出血病情严重程度具有相关性,检测上述指标可为临床评估病情、预测手术预后提供参考。