顿服与分次口服美沙拉嗪对治疗轻-中度溃疡性结肠炎疗效、安全性及依从性的Meta分析

目的系统评价顿服与分次口服美沙拉嗪对治疗轻-中度溃疡性结肠炎疗效、安全性及依从性。方法计算机检索Web of Science、Pub Med、Cochrane Library、Embase、中国知网、CBM、维普、万方数据库中顿服与分次口服治疗轻-中度溃疡性结肠炎对比的随机对照试验(RCTs),检索时间从建库到2018年3月,并追查纳入文献的参考文献。由2名研究者按照纳入与排除标准独立筛选文献、提取资料、质量评价,对同质研究使用Rev Man 5.2软件进行Meta分析。结果共纳入14个RCTs,共计4 126例患者。Meta分析结果显示:在活动期,顿服和分次口服美沙拉嗪治疗轻-中度溃疡性结肠炎缓解率差异无统计学意义(RR=1.06,95%CI:0.98~1.14,P=0.17),不良反应发生率相比,差异无统计学意义(RR=0.89,95%CI:0.74~1.07,P=0.23);在缓解期,顿服和分次口服美沙拉嗪治疗轻-中度溃疡性结肠炎缓解率差异无统计学意义(RR=1.01,95%CI:0.97~1.06,P=0.53),不良反应发生率相比,差异无统计学意义(RR=1.02,95%CI:0.95~1.09,P=0.83)。在活动期,顿服在依从性上优于分次口服美沙拉嗪治疗轻-中度溃疡性结肠炎(RR=1.17,95%CI:1.07~1.27,P=0.0003)。漏斗图结果显示,图形对称性较好,存在发表偏倚可能性小。结论顿服与分次口服美沙拉嗪治疗轻-中度溃疡性结肠炎疗效及引起的不良反应相当。顿服可提高患者服药依从性,更值得推荐。受纳入研究质量的限制,上述结论尚需开展更多高质量研究加以验证。

布地奈德治疗轻-中度溃疡性结肠炎的循证评价

目的：对布地奈德治疗轻-中度溃疡性结肠炎进行循证医学评价。方法：检索外文数据库Pubmed（建库~2014年）、中国期刊全文数据库（CNKI,1994~2014年）、中国科技期刊数据库维普资讯（1989~2014年）,搜集布地奈德治疗轻-中度溃疡性结肠炎的所有随机对照试验,由两名评价者进行文献筛选和评价,采用RevMan 5.2软件分析布地奈德治疗轻-中度溃疡性结肠炎的有效性和安全性。结果：筛选和评价后,纳入4篇高质量随机对照试验,分析显示：疗程结束后,口服6 mg或9 mg布地奈德,qd,治疗缓解率与空白组存在显著差异[OR=2.09,95%CI（1.21,3.63）P〈0.05];但与2.4 g美沙拉嗪组差异无统计学意义[OR=1.34,95%CI（0.80,2.24）,P〉0.05];布地奈德组不良反应发生率与对照组差异无统计学意义[OR=0.89,95%CI（0.71,1.11）,P〉0.05]。结论：口服6 mg或9 mg布地奈德,qd治疗轻-中度溃疡性结肠炎具有一定疗效和安全性,其疗程为4周或8周。

加味葛根芩连汤治疗轻中度溃疡性结肠炎的疗效观察及其对血清TNF-α、IL-10和肠道菌群的影响

目的:观察加味葛根芩连汤治疗轻中度溃疡性结肠炎(UC)的疗效及其对血清TNF-α、IL-10水平和肠道菌群的影响。方法:2019年5月—2022年5月本院就诊的湿热内蕴型轻中度UC患者84例,随机分成2组,每组42例。对照组采用美沙拉嗪肠溶片治疗,观察组采用加味葛根芩连汤联合美沙拉嗪肠溶片治疗,连续治疗12周后评价2组患者的疗效,治疗前后对2组患者中医症状进行评分,ELISA检测血清TNF-α及IL-10变化,检测肠道双歧杆菌及乳酸杆菌;记录2组患者治疗过程中出现的不良反应。结果:观察组治疗后总有效率为90.5%,高于对照组的69.0%(P<0.05);治疗前,2组患者中医症状评分、血清TNF-α及IL-10水平、肠道双歧杆菌及乳酸杆菌均无明显差异(P>0.05);治疗后,2组患者中医症状评分、血清TNF-α及IL-10水平、肠道双歧杆菌及乳酸杆菌指标均较治疗前改善(均P<0.05),且观察组的上述相关指标改善程度均优于对照组(P<0.05);2组患者治疗过程中不良反应发生情况无明显差异(P>0.05)。结论:加味葛根芩连汤能够改善轻中度UC患者的中医症状,降低炎性因子水平,调整肠道菌群,且使用过程中不增加患者的不良反应。

健脾益肠散对溃疡性结肠炎大鼠NLRP3信号通路IL-1β、IL-18表达的影响

目的探讨健脾益肠散对溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠NLRP3信号通路白细胞介素(IL)-1β、IL-18表达的影响。方法从40只SD大鼠随机选取10只作为正常组,其余大鼠自由饮用5%硫酸葡聚糖溶液7 d制备UC大鼠模型,将成模大鼠随机分为模型组、柳氮磺吡啶组和健脾益肠散组,每组10只。健脾益肠散组和柳氮磺吡啶组予相应药液灌胃,正常组和模型组予等体积蒸馏水灌胃,连续14 d。观察大鼠一般状况,并进行疾病活动指数(DAI)评分,ELISA检测大鼠血清核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、胱天蛋白酶1(Caspase-l)含量,免疫组化染色、Western blot和RT-PCR检测结肠组织IL-1β、IL-18蛋白及mRNA表达。结果与正常组比较,模型组大鼠一般状况较差,DAI评分显著升高(P<0.01),血清NLRP3、ASC、Caspase-l含量显著增加(P<0.01),结肠组织IL-1β、IL-18蛋白和mRNA表达均显著升高(P<0.01);与模型组比较,健脾益肠散组和柳氮磺嘧啶组大鼠一般状况明显好转,DAI评分显著降低(P<0.01),血清NLRP3、ASC、Caspase-l含量明显减少(P<0.05,P<0.01),结肠组织IL-1β、IL-18蛋白和mRNA表达均明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论健脾益肠散可抑制NLRP3信号通路IL-1β、IL-18表达,改善结肠免疫炎症损伤,发挥治疗UC作用。

5-氨基水杨酸制剂对老年轻、中度溃疡性结肠炎患者血清IL-8和IL-10的影响

目的观察5-氨基水杨酸制剂(艾迪莎)治疗老年轻、中度溃疡性结肠炎(UC)的临床疗效并探讨其作用机制。方法62例老年UC病人随机分为艾迪莎试验组(A组)32例和柳氮磺吡啶(SASP)对照组(B组)30例,疗程均为4w。对2组患者治疗前后的临床症状、肠镜检查情况进行比较。采用ELISA法检测两组患者治疗前后和30名健康志愿者(C组)血清白细胞介素-8(IL-8)和白细胞介素-10(IL-10)的水平。结果A组总有效率为93.75%,明显高于B组83.33%(P<0.05)。A组不良反应发生率3.13%,明显低于B组26.67%(P<0.05)。A组和B组治疗前IL-8水平明显高于C组,A组治疗后IL-8的水平与C组无显著差异,而B组仍高与C组。A、B两组患者治疗前IL-10水平与C组无明显差异(P>0.05),但是在应用药物干预后与C组比较,A组IL-10水平明显升高(P<0.05);B组无显著差异(P>0.05)。结论艾迪莎治疗老年轻、中度急性发作性UC安全、有效,可能是通过下调IL-8,上调IL-10发挥其治疗作用。

3种药物治疗轻中度溃疡性结肠炎的成本-效果比较

目的比较柳氮磺吡啶、美沙拉嗪和奥沙拉秦钠治疗轻、中度溃疡性结肠炎的成本-效果。方法将62例门诊轻、中度溃疡性结肠炎患者随机分为3组,A组21例给予柳氮磺吡啶片餐后口服,每次1.0 g,q id;B组22例给予美沙拉嗪缓释颗粒剂餐中口服,每次1.0 g,q id;C组19例给予奥沙拉秦钠胶囊餐中口服,每次1.0 g,tid。疗程均为4周。并运用药物经济学原理进行成本-效果分析。结果柳氮磺吡啶、美沙拉嗪和奥沙拉秦钠治疗轻、中度溃疡性结肠炎的成本-效果比(C/E)分别为17.47,28.14和21.20;美沙拉嗪和奥沙拉秦钠的增量成本-效果比(ΔC/ΔE)分别为48.96和27.77。结论奥沙拉秦钠是溃疡性结肠炎的较佳治疗药物。

美沙拉嗪联合复方谷氨酰胺治疗老年活动期轻中度溃疡性结肠炎的临床观察

目的观察美沙拉嗪联合复方谷氨酰胺治疗老年轻中度溃疡性结肠炎(UC)患者的临床效果。方法选择2020年5月—2023年5月于中国人民解放军东部战区总医院就诊的活动期轻中度老年UC患者106例,按照数表法随机分成观察组和对照组,每组53例。对照组采用美沙拉嗪治疗,观察组在与对照组相同治疗的基础上联合复方谷氨酰胺治疗。比较2组临床疗效、不良反应发生情况;比较2组治疗前、后肠道黏膜屏障功能指标值、血清氧化应激指标值[谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平]、炎性因子水平[白细胞介素-23(IL-23)、IL-17水平]。结果治疗后,观察组总有效率明显高于对照组(94.34%vs 81.13%,χ^(2)=4.496,P=0.038);2组血清D-乳酸、二胺氧化酶水平均低于同组治疗前(P<0.05),且观察组血清D-乳酸、二胺氧化酶水平均低于对照组(P<0.05);2组血清GSH-Px、SOD水平均高于同组治疗前(P<0.05),且观察组GSH-Px、SOD水平均高于对照组(P<0.05);2组血清MDA、IL-23、IL-17水平均低于同组治疗前(P<0.05),且观察组血清MDA、IL-23、IL-17水平低于对照组(P<0.05);2组治疗不良反应发生率差异无统计学意义(13.21%vs 9.43%,P>0.05)。结论相较于美沙拉嗪治疗,美沙拉嗪联合复方谷氨酰胺治疗活动期轻中度UC患者疗效更好。

miR-375、PRDX1在溃疡性结肠炎相关性结直肠癌患者中的表达及其预后价值

目的探究微核糖核酸(miR)-375、过氧化还原酶(PRDX)1在溃疡性结肠炎相关性结直肠癌(UC-CRC)患者中的表达及其预后价值。方法回顾性分析2020年8月至2023年5月期间河北北方学院附属第一医院收治的102例UC-CRC患者临床资料,并将其纳入UC-CRC组,另选取同期80例健康体检者为健康组,比较两组血清miR-375及PRDX1表达情况。出院后随访1年,根据患者预后情况分为预后良好组(n=67)与预后不良组(n=35),比较两组临床资料及血清miR-375、PRDX1表达情况;采用多因素Logistic分析miR-375及PRDX1与UC-CRC患者预后的关系;以受试者工作特性曲线(ROC)分析miR-375及PRDX1对UC-CRC患者预后不良的预测价值。结果UC-CRC组的血清miR-375水平明显低于健康组,而PRDX1 mRNA水平则明显高于健康组,差异均具有统计学意义(均P<0.05);预后良好组与预后不良组在BMI、TNM分期、miR-375以及PRDX1 mRNA水平上的比较,差异均具有统计学意义(均P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,PRDX1 mRNA水平升高,BMI、miR-375水平降低均为UC-CRC患者预后不良的独立危险因素(均P<0.05)。ROC曲线分析显示,miR-375、PRDX1 mRNA以及二者联合检测曲线下面积为0.707、0.801以及0.832(均P<0.05)。结论miR-375、PRDX1 mRNA在UC-CRC患者血清中呈明显的表达紊乱趋势;二者均可作为临床辅助诊断UC-CRC患者预后不良的有效指标,且联合检测的预测价值更高。

复方聚乙二醇电解质散清肠对轻、中度溃疡性结肠炎活动期患者血清中IL-6、CRP水平的影响

目的:探讨服用复方聚乙二醇电解质散清肠对轻、中度溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)活动期患者血清中白介素-6(interleukin-6,IL-6)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)水平的影响.方法:收集郑州大学第附属医院经确诊为轻、中度UC活动期患者23例(UC组),在肠镜检查前服用复方复方聚乙二醇电解质散清肠,服药前1 d及服药后1 d取患者外周血,使用酶联免疫吸附法观察患者血清中IL-6、CRP水平的变化.结果:清肠UC组患者IL-6、CRP水平分别为19.25 pg/m L±2.24 pg/m L、16.16 pg/m L±7.25 pg/mL,清肠后分别为12.38 pg/mL±1.25pg/m L、9.45 pg/m L±6.21 pg/m L,清肠前后UC组患者血清IL-6、CRP差异具有统计学意义(P<0.05);表明肠道准备可下调UC患者血清中IL-6、CRP水平.结论:使用复方聚乙二醇电解质散清肠可降低轻、中度UC活动期患者血清中IL-6、CRP的水平.

双歧杆菌四联活菌片对轻中度溃疡性结肠炎患者Mayo评分及hs-CRP、IL-4、IL-8的影响

目的观察双歧杆菌四联活菌片对轻中度溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)患者Mayo评分及hs-CRP、白介素(interleukin,IL)-4、IL-8的影响.方法将76例UC患者随机分为观察组和对照组,观察组予美沙拉嗪,对照组予美沙拉嗪联合双歧杆菌四联活菌片,疗程为8 wk,分别于入院时及治疗8 wk后,通过观察患者临床表现及结肠镜下表现,进行Mayo评分,运用免疫比浊法检测hs-CRP,取静脉血采用ELISA法检测IL-4、IL-8.结果经8 wk治疗后观察组Mayo评分下降5.87分±2.47分,对照组Mayo评分下降3.13分±2.17分,两组下降幅度有统计学意义(t=4.751,P<0.001),观察组与对照组hs-CRP、IL-8均下降,IL-4均上升,两组治疗前后差异有统计学意义,治疗后两组间差异也具有统计学意义(P<0.05).结论双歧杆菌四联活菌片在辅助轻中度UC患者诱导缓解治疗中有较好的疗效,适用于临床推广.

基于循证指导的中医延续护理对轻中度活动期溃疡性结肠炎的临床疗效观察

分析轻中度活动期溃疡性结肠炎通过循证指导中医延续护理实施后的影响效果。方法 挑选医院80例轻中度活动期溃疡性结肠炎患者为对象,随机分成对照组和观察组,对照组实施常规护理,观察组实施基于循证指导下中医延续护理,观察效果。结果 观察组患者康复效果高于对照组,且血管活性肠肽、P物质指标改善效果比对照组高,预后炎症性肠病生活质量评分高于对照组,P<0.05。结论 对于轻中度活动期溃疡性结肠炎患者,通过循证指导下中医延续护理方式进行干预可以促进患者病情康复,提高生活质量。

血清IL-33、TNF-α、整合素α4β7表达率与溃疡性结肠炎患者肠道菌群分布特征的关系研究

目的观察溃疡性结肠炎患者血清白细胞介素-33(IL-33)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、整合素α4β7表达率及肠道菌群分布情况,并分析血清IL-33、TNF-α、整合素α4β7表达率与肠道菌群的关系,旨在为临床相关疾病治疗提供参考。方法采用回顾性分析方法,采集2021年4月~2022年11月期间本院收治的50例活动期溃疡性结肠炎患者的基线资料纳入活动组,采集同时期50例缓解期溃疡性结肠炎患者的基线资料并纳入缓解组,对比两组患者血清IL-33、TNF-α、整合素α4β7表达率及肠道菌群分布情况,并分析上述血清指标与肠道菌群分布的关系。结果两组患者肠道菌群分布及血清TNF-α、IL-33、整合素α4β7差异有统计学意义。其中,活动组患者肠球菌(8.60±0.25)Ig CFU/g、乳杆菌(8.85±0.27)Ig CFU/g及肠杆菌(11.18±0.60)Ig CFU/g较缓解组患者[(7.85±0.22)Ig CFU/g、(7.02±0.15)Ig CFU/g、(9.40±0.20)Ig CFU/g]多,活动组双歧杆菌数量(5.80±0.48)Ig CFU/g较缓解组(7.45±0.55)Ig CFU/g少,差异有统计学意义(P<0.05);活动组患者血清TNF-α(48.25±5.14)ng/ml、IL-33(6.25±1.14)ng/L较缓解组[(9.52±2.65)ng/ml、(4.32±1.05)ng/L]高,活动组整合素α4β7表达率较低[(58.63±1.05)%vs.(70.12±1.45)%],差异有统计学意义(P<0.05);经双变量Spearman直线相关性检验结果显示,双歧杆菌与血清TNF-α、IL-33均呈负相关(r<0,P<0.05),与整合素α4β7呈正相关(r>0,P<0.05);乳杆菌、肠杆菌与血清TNF-α、IL-33均呈正相关(r>0,P<0.05),与整合素α4β7呈负相关(r<0,P<0.05)。肠球菌与血清TNF-α、IL-33、整合素α4β7无相关性(P>0.05)。结论溃疡性结肠炎患者血清TNF-α、IL-33、整合素α4β7与肠道菌群分布相关,针对血清TNF-α、IL-33高,血清整合素α4β7表达率低的患者给予针对性干预措施,可改善溃疡性结肠炎患者肠道菌群,促进患者临床预后。

IL-6/JAK2/STAT3通路中葛花解酲汤对脾虚湿热型溃疡性结肠炎“炎-癌转化”的预防作用

目的:探讨葛花解酲汤对脾虚湿热型溃疡性结肠炎“炎-癌转化”(UC-UCAC)小鼠结肠组织IL-6/JAK2/STAT3信号通路的影响。方法:80只SPF级C57BL/6雄性小鼠随机选出10只作为空白组,其余70只为造模组。造模组在建立脾虚湿热模型后随机分为模型组(第1、2、3周期)、葛花解酲汤高、中、低剂量组、美沙拉嗪组,10只/组,以氧化偶氮甲烷(AOM)/葡聚糖硫酸钠(DSS)继续建立UC-UCAC转化模型。各组给予相应药物治疗4周。观察小鼠一般状态;统计小鼠疾病活动指数(DAI)评分;HE染色观察小鼠结肠黏膜组织病理;Western blot、IHC和RT-q PCR检测小鼠结肠组织EGFR、IL-6、JAK2、STAT3、 p-STAT3蛋白和基因表达。结果:与空白组相比,模型组(第3周期)小鼠一般状态较差,结肠黏膜组织出现癌变,DAI评分、各目标蛋白及基因表达显著升高(P<0.01);与模型组(第3周期)相比,各治疗组小鼠一般状态有所恢复,结肠组织病理不同程度改善,除葛花解酲汤低剂量组外,其他各治疗组各目标蛋白及基因表达显著下降(P<0.01)。结论:葛花解酲汤可能通过抑制IL-6/JAK2/STAT3信号通路激活破坏肿瘤炎症微环境,修复受损结肠黏膜组织,延缓UC-UCAC进程,预防UCAC。

从网络药理学分析马齿苋-地锦草药对配伍治疗溃疡性结肠炎作用机制

目的运用网络药理学技术探讨马齿苋-地锦草药对治疗溃疡性结肠炎(UC)作用机制。方法通过TCMSP数据库获取马齿苋-地锦草的有效活性成分,利用Uniprot3.7.2数据库预测活性成分作用靶点,通过Gene-Cards数据库、OMIM数据库获取疾病基因,将药物与疾病基因取交集后利用STRING数据库研究二者相关性,并根据结果分析其潜在作用机制。结果经过筛选得到目标药对关键靶点蛋白61个和分子信号通路169条,基因本体(GO)功能富集分析显示主要有炎症反应、凋亡过程的负调控、脂多糖的细胞反应等生物过程;京都基因和基因组百科全书(KEGG)富集分析显示马齿苋-地锦草治疗UC主要通过肿瘤坏死因子(TNF)信号通路、核因子κB信号通路、Toll样受体信号通路、NOD样受体信号通路等发挥作用。结论马齿苋-地锦草药对治疗UC具有多靶点、通路复杂、层次分明的特点,马齿苋-地锦草潜在作用机制为日后临床治疗UC提供理论依据,并拓展了临床运用中医药治疗UC的思路。

基于天枢与上巨虚穴经皮神经电刺激观察对溃疡性结肠炎模型大鼠结肠组织TLR9/MyD88/NF-κB蛋白表达的影响

目的基于“合募配穴”原则观察经皮神经电刺激(transcutaneous electrical nerve stimulation,TENS)对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)模型大鼠结肠组织Toll样受体9(toll-like receptor 9,TLR9)/髓样分化因子88(myeloid differentiation factor88,MyD88)/核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路相关蛋白表达的影响,探讨TENS治疗UC的相关机制。方法从48只SPF级成年SD大鼠中随机抽取12只作为空白组。其余36只通过2-4-6三硝基苯磺酸(2-4-6 trinitrobenzene sulfonic acid,TNBS)/乙醇法制备UC大鼠模型,成模后再次随机分为模型组、TENS组、阳性药物组,每组12只。成模后第1天开始干预:模型组仅行捆绑固定;TENS组捆绑固定后刺激天枢、上巨虚两穴;阳性药物组用225 mg/kg剂量的柳氮磺胺吡啶混悬液灌胃。以上各组干预均每天1次,共10次。观察记录各组大鼠每天食量和体质量。干预结束后,HE染色观察各组大鼠结肠组织病理学变化;ELISA法检测结肠组织白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)炎性因子的含量;Western blot法检测结肠组织TLR9、My D88、NF-κB蛋白的表达量变化。结果(1)与空白组相比:模型组大鼠结肠组织出现明显溃疡面,上皮细胞大面积萎缩,炎性因子大量浸润,IL-6、TNF-α炎性因子含量升高(P<0.05);TLR9、MyD88、NF-κB蛋白表达量上调(P<0.05)。(2)与模型组相比:TENS组和阳性药物组结肠组织损坏情况较轻,上皮细胞黏液较充分,腺体分支较少,炎性细胞浸润面积小;IL-6、TNF-α含量减少(P<0.05);TLR9、NF-κB蛋白表达量降低(P<0.05)。(3)与阳性药物组相比:TENS组TNF-α、IL-1β的含量及TLR9、MyD88、NF-κB蛋白表达量相对较高(P<0.05)。结论TENS能够保护肠道上皮细胞,减轻肠道炎症,其机制可能与降低结肠细胞促炎因子水平,抑制TLR9/MyD88/NF-κB信号通路蛋白的过表达有关。

白芍-炙甘草配伍下调铁死亡的抗溃疡性结肠炎机制研究

目的 探讨白芍、炙甘草及白芍-炙甘草药对的抗葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate-sodium, DSS)诱导的溃疡性结肠炎(ulcerative colitis)的药效,以及对铁死亡的调控作用。方法 将60只C57BL/6小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、阳性对照组、白芍给药组、炙甘草给药组以及白芍-炙甘草配伍给药组。除空白对照组外,其余各组均给予3.5%DSS造模建立结肠炎模型,并按照分组给予不同药物灌胃干预,连续给药7天,实验期间记录小鼠体重。第8天处死小鼠提取结肠组织,测量结肠长度、疾病活动指数(disease activity index, DAI),通过苏木素-伊红(haematoxylin-eosin, HE)染色观察结肠组织病理学改变;通过透射电镜观察组织中线粒体的形态变化,生化试剂盒检测结肠组织中Fe^(2+)、还原型谷胱甘肽(glutathione, GSH)、丙二醛(malonaldehyde, MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)和过氧化氢酶(catalase, CAT)的含量,蛋白免疫印迹法检测结肠组织谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathion peroxidase, GPX4)、溶质载体家族7成员11(solute vector family 7 members 11,SLC7A11)蛋白表达水平。结果 与空白对照组比较,模型组小鼠体重降低,DAI评分升高,结肠长度明显缩短;模型组结肠组织中,线粒体膜皱缩,线粒体嵴模糊;同时,Fe^(2+)、MDA含量增加以及GPX4、SLC7A11蛋白表达均明显降低(P<0.05);与模型组比较,各给药组小鼠体重下降、结肠长度缩短以及DAI评分上升得到明显改善。白芍、炙甘草和白芍-炙甘草药对组Fe^(2+)、MDA含量显著减少(P<0.05),GPX4、SLC7A11蛋白表达升高(P<0.05和P<0.01),GSH和SOD含量显著增加(P<0.05),且白芍-炙甘草药对的调控作用明显强于白芍和炙甘草。结论 白芍-炙甘草药对抗溃疡性结肠炎的作用较单味药相比显著增强,且机制与其抑制溃疡性结肠炎小鼠结肠组织铁死亡水平有关。

肾素血管紧张素系统在溃疡性结肠炎小鼠肠-血屏障损伤中的调控作用

本研究旨在探讨肾素血管紧张素系统(renin-angiotensin system, RAS)在溃疡性结肠炎小鼠肠-血屏障损伤中发挥的作用。选取16只ICR小鼠,随机分为正常对照组(Control组)和葡聚糖硫酸钠盐处理组(DSS组),等体积灌胃生理盐水。试验至第4天,DSS组小鼠在饮用水中添加DSS(终浓度为4%)制造小鼠溃疡性结肠炎模型。期间每天记录小鼠体重、粪便性状和粪便隐血情况,并计算疾病活跃指数(disease activity index, DAI)。DSS饮用至第8天,所有小鼠采血后剖检,量取结肠长度,取结肠组织等样品。进行如下试验:1)HE染色观察结肠组织病理变化;2)ELISA法检测血液中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGFA)及结肠组织中Ang1-7和AngⅡ的含量;3)Western blot检测结肠组织中血管紧张素转化酶2(angiotensin-coverting enzyme 2, ACE2)、血管紧张素转化酶(ACE)和质膜膜泡关联蛋白(plasmalemma vesicle associated protein, PLVAP)的表达;4)斯皮尔曼相关性分析ACE2、ACE与PLVAP表达变化的相关性以及Ang1-7、AngⅡ和VEGFA含量变化的相关性。结果显示:1)成功建立了DSS诱导小鼠溃疡性结肠炎模型,小鼠表现为体重下降、DAI极显著升高(P<0.01)、结肠极显著缩短(P<0.01)和结肠组织出现明显的病理变化;2)与对照组相比,DSS组小鼠表现肛门明显出血,结肠组织中PLVAP和VEGFA蛋白表达均极显著升高(P<0.01);3)与对照组相比,DSS组小鼠结肠组织中ACE2和ACE表达均极显著上调(P<0.01),Ang1-7和AngⅡ含量分别显著(P<0.05)和极显著(P<0.01)升高;4)相关性分析显示,ACE2、ACE的表达变化和PLVAP表达变化呈正相关,Ang1-7、AngⅡ含量变化与VEGFA含量变化也呈正相关。以上结果表明,DSS致小鼠结肠炎症过程中小鼠结肠血管屏障受损,结肠局部RAS均处于激活状态,ACE/AngⅡ通路的激活占优势,提示:AngⅡ参与了结肠炎小鼠肠-血屏障的损伤过程。通过激活ACE2或过表达ACE2,增强其对AngⅡ的降解作用以缓解肠-血屏障的损伤,可能是治疗或缓解溃疡性结肠炎的一个新的思路或途径。

针刺联合参苓白术散调控Nrf2/HO-1通路对溃疡性结肠炎大鼠炎症及氧化应激反应的影响

目的观察针刺联合参苓白术散正调控核因子相关因子2(Nuclear factor erythroid 2related factor 2,Nrf2)/血红素加氧酶-1(Heme oxygenase-1,HO-1)通路对溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)大鼠炎症及氧化应激反应的影响。方法将60只SPF级健康雄性SD大鼠分为对照组10只和造模组50只,对照组不做特殊处理,造模组采用TNBS/乙醇灌肠法进行UC造模,造模成功后采用随机数字表法分为模型组、针刺组、参苓白术散组、联合组和西药组,每组各10只。治疗14 d后,评价疾病活动指数(Disease activity index,DAI)和结肠大体形态损伤指数(Colon macroscopic damage index,CMDI),检测肠黏膜组织中肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-18(Interleukin-18,IL-18)、活性氧簇(Reactive oxygen species,ROS)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)的含量及Nrf2、HO-1的表达水平。结果模型组大鼠的DAI、CMDI、肠黏膜组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-18、ROS、MDA的含量高于对照组,肠黏膜组织中GSH-Px、SOD的含量及Nrf2、HO-1的表达水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);针刺组、参苓白术散组、联合组和西药组大鼠的DAI、CMDI、肠黏膜组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-18、ROS、MDA的含量低于模型组,肠黏膜组织中GSH-Px、SOD的含量及Nrf2、HO-1的表达水平模型组,差异有统计学意义(P<0.05),且联合治疗组的上述改善较针刺组、参苓白术散组、西药组更为明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论针刺联合参苓白术散改善UC大鼠的炎症及氧化应激,其作用机制可能与正调控Nrf2/HO-1通路有关。

苓桂术甘汤调控miR-140-5p/TLR4/NF-κB信号通路对溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜屏障及免疫平衡的影响

目的:探讨苓桂术甘汤调控miR-140-5p/Toll样受体4(toll like receptor 4,TLR4)/核转录因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)信号通路对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠肠黏膜屏障及免疫平衡的影响。方法:取SD大鼠用2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrobenzenesulfonic acid solution,TNBS)诱导建立UC模型,随机分为5组:模型组、苓桂术甘汤低剂量组、苓桂术甘汤高剂量组、NC-miR-140-5p(miR-140-5p阴性对照)组、苓桂术甘汤高剂量组+miR-140-5p antagomir(miR-140-5p抑制剂)组,每组10只,另取10只大鼠作对照组,分组干预后检测大鼠结肠黏膜损伤指数(colonic mucosal injury index,CMDI)评分与结肠长度;透射电镜观察各组大鼠结肠黏膜屏障超微结构;流式细胞实验检测各组大鼠外周血Treg、Th17细胞比例及Treg/Th17比值;ELISA检测大鼠血清免疫炎症相关因子白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-17、IL-10、转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)水平;采用实时荧光PCR及免疫印迹法检测大鼠结肠黏膜组织miR-140-5p/TLR4/NF-κB信号相关因子表达。结果:与对照组比较,模型组大鼠结肠黏膜屏障超微结构损伤严重,CMDI、Th17细胞比例、血清IL-6与IL-17水平、结肠黏膜组织TLR4 mRNA、蛋白表达与p-NF-κB p65/NF-κB p65显著升高(P<0.05),结肠长度、Treg细胞比例、Treg/Th17比值、血清IL-10与TGF-β1水平、结肠黏膜组织claudin-1、claudin-4蛋白表达与miR-140-5p表达显著降低(P<0.05)。与模型组比较,苓桂术甘汤低剂量组、苓桂术甘汤高剂量组大鼠结肠黏膜屏障超微结构损伤均减轻,CMDI、Th17细胞比例、血清IL-6与IL-17水平、结肠黏膜组织TLR4 mRNA、蛋白表达与p-NF-κB p65/NF-κB p65均降低(P<0.05),结肠长度、Treg细胞比例、Treg/Th17比值、血清IL-10与TGF-β1水平、结肠黏膜组织claudin-1、claudin-4蛋白表达与miR-140-5p表达均升高(P<0.05);NC-miR-140-5p组大鼠各指标差异无统计学意义(P>0.05);高剂量苓桂术甘汤作用更强。下调miR-140-5p可减弱高剂量苓桂术甘汤对UC模型大鼠各指标的作用。结论:苓桂术甘汤可通过上调miR-140-5p而抑制TLR4/NF-κB信号激活,进而促使Treg/Th17免疫平衡向Treg偏移,抑制免疫炎症,减轻UC大鼠肠黏膜屏障损伤。

基于miR-155调控JAK2/STAT3信号通路探讨溃结宁膏穴位敷贴对溃疡性结肠炎大鼠的抗炎机制

目的观察溃结宁膏穴位敷贴对“虚、瘀”状态下溃疡性结肠炎大鼠的疗效,以微小核糖核酸-155(miR-155)调控Janus激酶2(JAK2)/信号转导与转录激活因子3(STAT3)信号通路为切入点,探讨溃结宁膏穴位敷贴减轻肠道炎症反应的作用机制。方法将SD大鼠随机分为正常组和造模组。造模组采用番泻叶、腺嘌呤分阶段灌胃结合外因干预,并予2,4,6-三硝基苯磺酸与乙醇复合物灌肠建立“虚、瘀”状态UC大鼠模型,造模成功后再将大鼠随机分为模型组、非穴位敷贴组、穴位敷贴组及柳氮磺胺吡啶(SASP)组。穴位敷贴组予溃结宁膏穴位敷贴足三里、天枢、肾俞、脾俞、大肠俞、膈俞,非穴位敷贴组予溃结宁膏敷贴于臀部肌肉丰厚处,SASP组予SASP溶液灌胃,正常组和模型组予等体积生理盐水灌胃,每日1次,干预28d。观察大鼠一般情况、结肠黏膜损伤程度、结肠组织病理学改变;RT-qPCR法检测结肠组织miR-155及JAK2、STAT3、SOCS1 mRNA的表达量;免疫组化法及蛋白质免疫印迹法检测结肠组织JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3及SOCS1蛋白的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠结肠黏膜损伤严重,结肠长度显著缩短(P<0.01);结肠组织中miR-155及JAK2、STAT3 mRNA的表达量明显增加,SOCS1 mRNA表达量减少(P<0.01);p-JAK2、p-STAT3蛋白表达明显增多,SOCS1蛋白表达明显减少(P<0.01)。与模型组比较,穴位敷贴组和SASP组大鼠结肠黏膜损伤减轻,结肠长度均有所恢复;穴位敷贴组大鼠结肠组织中miR-155及JAK2、STAT3 mRNA的表达量明显减少,SOCS1 mRNA表达量增加(P<0.01);穴位敷贴组大鼠结肠组织中p-JAK2、p-STAT3蛋白表达显著减少,SOCS1蛋白表达明显增多(P<0.01)。结论溃结宁膏穴位敷贴可能通过下调miR-155的表达,减弱对SOCS1 mRNA靶向抑制作用,进而增加SOCS1蛋白的合成,负反馈调节JAK2/STAT3信号通路的激活,抑制炎症信号的转导,进而控制UC肠道炎症的发展和持续,发挥治疗作用。