甜瓜蔗糖磷酸合成酶基因全克隆及工程载体的构建

蔗糖磷酸合成酶在甜瓜果实蔗糖合成途径中起关键性的调节作用,克隆该基因并导入甜瓜低糖自交系,可改良甜瓜果实品质创新优良种质。从甜瓜幼苗叶片提取总RNA,利用RT-PCR与Southern blot方法相结合,重组子质粒经限制性内切酶酶切和PCR验证以及测序同源性比较,克隆到基因的5’(2859bp)和3’(852bp)。应用高保真Taq聚合酶PCR拼接蔗糖磷酸合成酶完整cDNA序列3692bp,该片段与GenBank中其它植物基因序列具有97%￣99%的同源性,登录号DQ364058。应用BamHⅠ、KpnⅠ、BglⅡ限制性酶切获得植物双元表达载体pROK2及基因的线性片段,通过T4连接酶反应,构建了以CaMV35S为启动子,以Tnos为终止子的工程载体pROK-SPS,该载体含有Npt-II选择标记基因。

纤维蛋白用做骨组织工程载体并修复骨缺损

[目的]研究将纤维蛋白用做骨组织工程的载体材料。[方法]将兔骨髓基质干细胞(BMSCs)在体外大量培养扩增后,与同种兔纤维蛋白制成凝胶复合物,对复合物进行成骨性诱导培养,观察细胞增殖与分化情况。进而将含自体BMSCs的复合物填充于兔桡骨节段性缺损区,观察其对骨缺损的修复效果。[结果]BMSCs与纤维蛋白复合物在体外培养条件下可保持完整形状、细胞大量增殖,并发生成骨性分化和分泌钙盐。植入复合物的骨缺损区修复效果显著优于植入单纯纤维蛋白。[结论]纤维蛋白可为BMSCs提供良好的增殖与分化环境,二者复合物可用于组织工程法修复骨缺损。

富含血小板血浆凝胶结构用于组织工程载体可能性的扫描电镜观察

目的:富含血小板血浆中含有较高浓度的生长因子,对骨的再生和修复都有一定的促进作用。通过大体和扫描电镜两种方法观察富含血小板血浆凝胶的结构,探索其用于组织工程载体的可能性。方法:实验于2004-01/03在第四军医大学口腔医学院动物中心完成。①制备牛凝血酶溶液:作为使富含血小板血浆结固成凝胶的催化剂。②制备富含血小板血浆液:将清洁级新西兰兔4只,解剖颈内静脉,抽取静脉血10mL,离心后将红细胞与血浆分离,再将血浆离心,使富含血小板血浆与乏血小板血浆分开,得到富含血小板血浆。③制备富含血小板血浆凝胶:将富含血小板血浆与牛凝血酶溶液按体积比6∶1充分混合为凝胶。④冻干及观察:将富含血小板血浆凝胶冻干,进行大体观察和扫描电子显微镜检查。结果:①富含血小板血浆凝胶大体观察结果:可见大量的纤维彼此细密交织。②富含血小板血浆凝胶扫描电子显微镜观察结果:材料内大量的纤维交织,形成支架,其间含有大量的孔隙,孔隙彼此相通,孔径为200～1000μm,孔隙率80%。结论:富含血小板血浆凝胶呈典型的多孔性结构,孔径大小、孔隙率均比较符合骨组织工程支架材料的要求,而且又含有丰富的、对成骨有利的生长因子,提示富含血小板血浆可用作骨组织工程支架材料。

以工程图纸为载体推行项目教学和案例教学——中职建筑类专业课程与教材改革探索

本文分析了建筑类专业在实训教学中存在的一些问题,在此基础上论述了以工程图纸为载体,创设情境,化整为零进行项目教学和案例教学的必要性和可行性。通过对教学内容的重新构建,结合理论与实践研究,本文探索出以学生为主体、教师为主导的实施"做中教、做中学"的中职建筑类专业课程与教材改革方法。

甲病毒作为基因工程载体的研究进展

披盖病毒科的甲病毒用作基因工程载体有许多特殊的优点,在疫苗制备和基因治疗方面有巨大的应用潜力。最近已证明该系统可用于阻断虫媒病毒的传播,从而开辟了一个全新的研究领域。该系统可能特别适用于制备高效而安全的核酸疫苗。

一种靶向肿瘤或炎症组织的新载体——工程巨噬细胞载体

近年 ,人们利用组织内的巨噬细胞 (macrophages ,M)具有聚集于炎症及肿瘤缺氧区的生物学特性 ,开发了一类新载体———工程M载体。M经携带治疗基因的重组病毒稳定转染 ,并以细胞因子或细菌脂多糖激活后 ,静脉注入体内 ,可靶向炎症组织和肿瘤组织 ,并不断产生和分泌重组病毒 ,有效介导治疗基因的转导 ,为肿瘤。

骨和软骨组织工程中载体的研究进展

骨与软组织工程学的研究近年来进展较快。其中 ,载体的研究已成为研究热点之一。本文对目前各种载体的特点 。

乳酸杆菌基因工程载体的应用

乳酸杆菌属于乳杆菌属、乳杆菌科,因发酵糖产生大量乳酸而得名的一群杆状或球状的革兰氏阳性细菌,是存在于机体内有利于宿主健康的微生物,乳酸杆菌的生物学功能与动物机体的生命活动息息相关。乳酸杆菌适合生存在p H为5.5~6.0酸性环境中,但在p H3.0~4.5时仍能存活。1乳酸杆菌的生物学功能乳酸杆菌在自然界中广泛分布,目前人们已从动物的口腔、胃、肠道和粪便等部位分离到了多种乳酸杆菌。

柞蚕核多角体病毒基因工程载体的研究——Ⅰ柞蚕核多角体病毒DNA限制性内切酶图谱

1983年,美国Smith及Summers首次用苜蓿丫纹夜蛾（Autographa ealifornice）核多角。体病毒（Nucleic polyhedrosis Virus NPV）作载体,通过昆虫细胞培养,表达人的β-干扰素取得成功。1985年日本Maeda（前田）等用家蚕核多角体病毒（BmNPV）作载体,在家蚕幼虫体内表达人的α-干扰素、近年来利用昆虫杆状病毒载体成功地生产近20种外源基因产物,包括白细胞间素-2及3,类胰岛素生长因子,乙型肝炎疫苗及艾滋病病毒gP41蛋白疫苗等。最近,我国储瑞银等用BmNPV载体表达了肝炎病毒的表面抗原。

载体桩工程的质量事故分析与应对策略

结合载体桩工程的施工实际,分析载体桩工程施工质量的产生原因,有针对性的提出了施工质量的加强措施以及需要注意的问题。

生长抑素基因工程活载体疫苗对肉兔生长性能的影响

选择30日龄左右体重相近、健康的新西兰肉兔36只,分为2组(试验组和对照组),每组18只肉兔(公母相等)。试验组注射激生1号(按产品标准剂量),对照组注射等量生理盐水。连续饲养35d。试验结果表明:激生1号可以使新西兰肉兔增重提高23.74%,采食量提高9.36%,发病率和料肉比明显降低。

人类腺病毒分子生物学及用作基因工程载体的特性

首先从分类地位、毒粒结构、基因组结构、基因组转录调节及复制繁殖周期等方面对人类腺病毒分子生物学进展作了概述,然后论述了人类腺病毒用作基因工程载体的特性。人类腺病毒不仅是用作研究真核基因表达调控机制的良好模型,而且是基因工程的重要载体。人类腺病毒载体除具有组建多价重组口服活疫苗的前景外,还可以作为一种表达载体获得高水平的外源蛋白,研究组织特异性表达和建立稳定的细胞系,以及在机体组织中转移表达报告基因以治疗疾病等。

江苏省发展改革委关于印发《省创业投资企业竞争力提升行动计划及创业投资示范载体建设工程认定管理暂行办法》的通知

苏发改规发[2019]1号各设区市发展改革委、省属有关单位:根据省政府《关于促进创业投资持续健康发展的实施意见》(苏政办发[2017]101号),以及省发展改革委《全省创业投资企业竞争力提升行动计划及创业投资示范载体建设工程实施方案》(苏发改财金发[2018]1216号).

论工程审计内容

基于经典审计理论,提出一个体现工程特征的工程审计内容理论框架。工程审计内容关注的是审计什么,它是由工程审计对象、工程审计主题、工程审计业务类型、工程审计标的和工程审计载体组成的多层级体系。工程审计对象是工程类经管责任,包括工程财务责任和工程业务责任,工程类经管责任可以落实到工程财务信息、工程业务信息、工程行为和工程制度这四类审计主题上;工程审计业务类型是以工程审计主题为基础形成的,单个审计主题形成单项性审计业务,多个审计主题组合形成综合性审计业务;工程审计标的是工程审计主题的分解;工程审计载体是工程审计主题和标的的记录。

应用于兽用疫苗研发的病毒载体研究进展

对应用于兽用疫苗研发的病毒载体,包括痘病毒载体、疱疹病毒载体、腺病毒载体、杆状病毒载体、副粘病毒载体、弹状病毒载体、甲病毒载体、冠状病毒载体、反转录病毒载体、黄病毒载体等DNA和RNA病毒载体的研究进展进行了综述,以期为我国基因工程活载体疫苗研发工作提供参考。