绵羊Myostatin基因敲除载体的构建

根据Myostatin基因突变可导致肌肉量激增而产生"双肌"表型的特点,构建绵羊Myostatin基因置换型敲除载体。利用LA-PCR技术成功地扩增得到绵羊Myostatin基因同源臂序列,其中同源长臂4.9 kb,包括全部的exon1,intron1,exon2及部分启动子和大部分intron2;同源短臂1.1 kb,包括部分exon3和3′非翻译区序列,将二者连入PloxpII正负筛选敲除骨架载体,利用骨架载体上Neo基因替代Myostatin基因的exon3,从而成功构建专门针对Myostatin第3外显子区域缺失的置换型敲除载体PloxpⅡ-OVIS-MSTN。酶切和测序鉴定证明载体构建正确,为后续获得绵羊Myostatin基因缺失型体细胞株奠定试验基础。

黄瓜花叶病毒cDNA载体在烟草细胞中表达外源基因

为了探讨利用黄瓜花叶病毒 (CMV )构建表达载体的可行性 ,分离了山东株 (SD)CMVRNA 3的全长cDNA。测定其全序列后 ,采用定点突变的方法在衣壳蛋白 (CP)基因起始密码子处改造出一个NsiⅠ位点 ,可将外源基因引入NsiⅠ位点和CP基因终止密码子上游附近的XhoⅠ或SalⅠ位点而置换掉CP基因。分别用绿色荧光蛋白 (GFP)基因、β 葡糖醛酸酶 (GUS)基因以及小鼠二氢叶酸还原酶 (DHFR)基因 3种报告基因置换CP基因。将Fny株CMVRNA 1、RNA 2和SD CMV嵌合RNA 3的cDNA分别插入pCass载体的 35S启动子和终止子之间 ,将构建的置换型载体直接以质粒的方式转染烟草原生质体 ,表达了

经典国货品牌跨界设计表现方式研究

探究跨界设计在经典国货品牌创新中的表现方式及运用研究。通过对"跨界设计"概念的界定及其在经典国货品牌创新中的意义,结合经典国货跨界设计的实际案例,从视觉符号、载体置换、情景构建等方面分析跨界设计在经典国货品牌创新中的表现方式。得出经典国货品牌跨界设计发展趋势。跨界设计在经典国货品牌创新中从消费者的用户体验出发,使经典国货品牌成为消费者精神文化消费的新载体,从视觉符号、载体置换、情景构建等方面分析和归纳跨界设计在经典国货品牌创新中的表现方式,为经典国货品牌发展提供新思路。