重组水貂生长激素pVAX1-mGH及其在小鼠肌肉组织中表达的研究

将化学合成的水貂生长激素基因mGH插入载体pVAX1,将经过PCR、酶切鉴定、测序正确的pVAX1-mGH重组质粒,注射到小鼠后肢的股四头肌,空白对照组注射PBS,于注射后5、10、20、40、60d,眼球采血,取注射部位的肌肉组织进行免疫组化研究,结果证明在胞浆中有特异性蛋白表达。

preS_2S/adw真核表达质粒构建及其表达的初步研究

目的 :针对我国乙型肝炎 (乙肝 )病毒流行的血清型 ,采用美国药品及食物鉴定委员会承认的应用于疫苗临床使用的载体 p VAX1,构建乙肝病毒 adw血清型核酸疫苗 pre S2 S的真核表达质粒 ,对其在真核细胞中的表达进行初步研究。方法 :采用 PCR法扩增 pre S2 S片段 ,插入 p VAX1载体中 ,测定 DNA序列后 ,转染 SP2 / 0细胞。抽提转染后 SP2 / 0细胞的总 RNA ,再用 RT- PCR法扩增其中的 pre S2 - S片段 ,以检测其表达的基础。结果 :测序证实了该片段为乙肝病毒 adw型 pre S2 - S基因。PCR扩增法检测出的转染细胞中存在 pre S2 S基因。结论 :获得了 adw血清型乙肝病毒 pre S2 S的真核表达质粒 。

新城疫病毒La Sota疫苗株基因组全长cDNA克隆的构建及鉴定

为构建能为新城疫病毒拯救提供直接使用的全长cDNA克隆,利用分子克隆的方法,将新城疫病毒La Sota株全基因组分成末端部分重叠的11个片段(F1～F11),按其基因组顺序克隆至改造后的真核表达载体pVAXr上,同时在全长cDNA两侧引入T7启动子和丁型肝炎病毒核酶(Rib)序列,以确保病毒基因组转录产物的两端形成精确的核酸序列。鉴定结果表明,新城疫病毒La Sota株基因组全长cDNA已成功克隆至pVAXr上,命名为pVAXr-FL。本研究为新城疫病毒的拯救及外源基因的表达奠定了基础。