载脂蛋白E基因多态性与颅脑损伤后认知功能障碍的相关性研究

目的探讨载脂蛋白E(ApoE)基因多态性与颅脑损伤后认知功能障碍的关系。方法前瞻性选取2018年1月—2023年2月重庆医科大学附属巴南医院神经外科收治的57例颅脑损伤后认知功能患者为认知功能障碍组,同期收治的不伴有认知功能障碍的颅脑损伤患者51例为对照组。取患者抗凝静脉全血2~4 mL进行核酸提取,使用APOE基因检测试剂盒,采用多重荧光PCR法对提取的DNA进行APOE基因ε2、ε3和ε4位点的检测,比较两组基因型分布差异。用Logistic回归分析对两组患者一般资料及携带ε2、ε3和ε4基因进行筛选,得出颅脑损伤后认知功能障碍的基因危险因素。结果两组患者基因型分布差异有统计学意义(P<0.05),两组ε3基因携带者和ε4基因携带者占比有明显差异(P<0.05)。单因素Logistic回归分析提示,仅携带ε4为颅脑损伤后认知功能障的危险因素[P=0.005,OR=0.317(95%CI:0.142~0.711)]。把单因素Logistic回归中P值最低的5个变量(GCS、性别、损伤程度及ε3、ε4携带者)所有因素纳入多因素Logistic回归分析,发现携带ε4基因是颅脑损伤后认知功能障的危险因素[P=0.039,OR=0.379(95%CI:0.150~0.954)]。结论ApoEε4基因与颅脑损伤后认知功能障碍有关。

用酵母双杂交系统研究载脂蛋白AI(apoAI)和清道夫受体BI(SR-BI)间的相互作用

目的:利用酵母双杂交系统验证在胆固醇逆转运过程中起关键作用的大鼠载脂蛋白AI(apoAI)和清道夫受体BI- (SR -BI)间存在着相互作用,为初步筛选具有降脂活性组分提供1对新的靶点。方法:首先分别克隆了Wistar大鼠的apoAI和SR -BI基因的cDNA ,并构建了酵母表达载体,利用共转化技术观察到apoAI和SR -BI间存在着相互作用,并在酵母交配实验中证实了这个结果。结果:经共转化后的实验组与阳性对照组可在SD/ -Leu/- Trp/- His/- Ade/X -α- Gal平板上生长且菌斑呈蓝色,经测定α、β半乳糖苷酶活力可知酶活分别为8～1 2U和1 0～40U。酵母交配后的二倍体实验组、阳性对照组可在SD/- Leu/- Trp/ -His/- Ade/X -α- Gal平板上生长且菌斑呈蓝色。结论:apoAI和SR BI间的确存在相互作用。

^(18)F-FDG PET/CT摄取值及血清载脂蛋白A1、谷胱甘肽对不同运动障碍亚型帕金森病的预测价值

目的:探讨^(18)F-脱氧葡萄糖(^(18)F-FDG)正电子发射断层扫描-计算机断层扫描(PET/CT)摄取值及血清载脂蛋白A1(Apo A1)、谷胱甘肽(GSH)用于不同运动障碍亚型帕金森病的预测价值。方法:选取2020年12月至2022年12月在临沂市人民医院就诊的84例帕金森病患者,根据国际运动障碍协会统一帕金森病评定量表(MDS-UPDRS)将患者分为震颤为主型(TD)组(50例)和姿势不稳或步态障碍型(PIGD)组(34例)。比较不同运动障碍亚型帕金森病患者^(18)F-FDGPET/CT的^(18)F-FDG摄取值、血清Apo A1及GSH水平,并通过受试者工作特征(ROC)曲线分析上述3项指标联合预测不同运动障碍亚型帕金森病的价值;验证^(18)F-FDG摄取值、血清Apo A1及GSH联合检测对不同运动障碍亚型帕金森病患者预测结果与患者实际亚型的一致性。结果:TD组丘脑的^(18)F-FDG摄取值显著低于PIGD组;TD组血清Apo A1水平显著高于PIGD组、TD组血清GSH水平显著高于PIGD组,差异有统计学意义(t=3.669、2.758、2.824,P<0.05);ROC曲线下面积(AUC)分析显示,丘脑^(18)F-FDG摄取值、Apo A1及GSH联合预测不同运动障碍亚型帕金森病的AUC为0.858;^(18)F-FDG摄取值、血清Apo A1及GSH联合对不同运动障碍亚型帕金森病患者预测结果与患者实际亚型的一致性较高(Kappa=0.804)。结论:^(18)F-FDG PET/CT摄取值、血清Apo A1及GSH联合应用对不同运动障碍亚型帕金森病有较好的的预测价值。

新疆哈汉两民族血脂、脂蛋白(a)及载脂蛋白AI和B水平的比较与相关研究

为了探讨和了解各种脂质、脂蛋白及载脂蛋白水平在我国民族间是否也存在差异 ,对新疆地区的汉族居民 911人 (男性 46 6人 ,女性 44 5人 )及哈萨克族居民 773人 (男性 36 0人 ,女性 413人 )随机个体血总胆固醇、甘油三酯、高 /低密度脂蛋白胆固醇、脂蛋白 (a)及载脂蛋白AI和B进行测定。结果发现 ,与汉族人群比较 ,哈萨克族人群男女均有较高的高密度脂蛋白胆固醇 (P <0 .0 0 1)和载脂蛋白AI (P <0 .0 0 1)水平与较低的甘油三酯 (P <0 .0 1,P <0 .0 0 1)、脂蛋白 (a) (均P <0 .0 0 5 )、载脂蛋白B (P <0 .0 0 5 ,P <0 .0 0 1)水平及较低水平的载脂蛋白B/AI值 (P <0 .0 1,P <0 .0 0 1) ;汉族人群有 2 0 .7%的个体载脂蛋白AI低于 1.2g/L ,而哈萨克族人群中只有 9.8%的个体载脂蛋白AI低于 1.2g/L ,汉族人群有 18.6 %的个体载脂蛋白B高于 1.2g/L ,而哈萨克族人群中只有 14.3%的个体载脂蛋白B超过 1.2g/L ;多因素相关与回归分析发现 :脂蛋白 (a)、载脂蛋白AI及载脂蛋白B/AI值在两民族间有密切的相关关系。血脂、脂蛋白 (a)、载脂蛋白AI及载脂蛋白B水平存在显著的民族间的差异 ,推测遗传因素可能控制和影响着个体脂代谢过程 ,以致形成了各民族独特的脂代谢方式并最终影响其血脂及载脂蛋白水平。

中国农村地区高血压人群载脂蛋白B/载脂蛋白AI比值的影响因素

目的探讨影响农村地区高血压人群血清的载脂蛋白B/载脂蛋白AI比值的相关因素。方法选取1 038例(男384例,女654例),年龄30~75岁的连云港市农村地区高血压人群;采用西门子公司Dimensionrxl-MAX全自动生化分析仪测量载脂蛋白B、载脂蛋白AI、尿酸等生化指标。结果连云港农村地区高血压人群的载脂蛋白B/载脂蛋白AI均值水平为0.74±0.13,男性(0.76±0.14)显著高于女性(0.73±0.13)(P<0.05);多元线性回归显示血尿酸(P<0.05)、体重指数(BMI,P<0.05)与载脂蛋白B/载脂蛋白AI比值的升高正相关。结论在高血压病人中,血尿酸和BMI的增加均与载脂蛋白B/载脂蛋白AI比值升高显著相关,进一步研究这种多重危险因素聚集的现象将会为中国高血压人群心血管疾病的防治提供更多的治疗线索。

载脂蛋白ApoE的原核表达以及与PrP蛋白间相互作用的初步研究

利用RT-PCR方法从人源细胞系SH-SY5Y cDNA中扩增出载脂蛋白ApoE基因,并在pET32a载体中表达融合蛋白His-ApoE,以纯化的融合蛋白免疫实验用兔获得特异性抗体,利用ELISA及免疫共沉淀方法对ApoE及PrP之间的相互作用进行研究。结果表明,SDS-PAGE显示表达的His-ApoE蛋白的相对分子量约为54 000,所制备的抗血清ELISA效价可达到1∶406 900,并能够有效地识别重组及动物组织中的内源性ApoE蛋白。ELISA和免疫共沉淀实验均显示,原核表达的ApoE可与全长的PrP蛋白(PrP23-231)在体外发生相互作用,其作用位点可能位于PrP蛋白的N端。这些结果为TSE经血传播的机制研究提供了新思路。

载脂蛋白AI基因多态性与冠心病和血脂关系的研究

目的 :探讨冠心病患者载脂蛋白(apo)AI基因多态性及其对血脂的影响。方法:应用聚合酶链反应对196例正常人和240例冠心病患者apoAI基因启动子多态性进行分析,扩增含apoAI基因启动子 -75bp 和第一内含子 +83bp的DNA片段,限制性内切酶MspI酶切此片段,琼脂糖凝胶电泳分离基因多态性。结果:2组apoAI基因 -75bp 位点均为G/G基因型占优势,但冠心病组中A/A基因型显著低于对照组(P<0.05) ,2组间 -75bp 位点A、G等位基因频率差别无统计学意义。在男性冠心病患者中 ,A/A基因型携带者血清高密度脂蛋白(HDL)水平显著低于G/G基因型携带者(P<0.05)。2组 +83bp 位点中基因型与等位基因频率差别均无统计学意义。结论:apoAI基因启动子( -75bp)MspI酶切位点的突变与冠心病有一定关联,在冠心病男性患者中,A/A基因型携带者与血清HDL的降低有一定相关性。

载脂蛋白AI对HDL生成影响的研究新进展

载脂蛋白AI(apolipoprotein A-I,apoA-I)是高密度脂蛋白(high-density lipoprotein,HDL)的主要蛋白成分,其中两性α-螺旋是apoA-I相应功能的结构基础。ApoA-I分子N-端是动态的四螺旋束结构,C-端形成无规则的螺旋结构,是介导蛋白质与磷脂结合的功能域。两分子apoA-I呈反向平行的双带结构环绕磷脂双分子层形成圆盘状HDL,而球状HDL表面的apoA-I分子则形成三叶草结构。ATP结合盒转运蛋白A1(ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1)介导apoA-I与磷脂及胆固醇相互作用形成新生HDL,参与胆固醇的逆向转运过程。ApoA-I、HDL作为抗动脉粥样硬化的主要作用靶标,深入了解其分子结构与功能、构象变化和相互作用及其影响脂质代谢平衡的机制对抗动脉粥样硬化药物的研发及其应用具有重要意义。

肾病综合征患者中血清铁与载脂蛋白AI和载脂蛋白B的相关性分析

目的探讨肾病综合征患者血清铁与载脂蛋白AI和载脂蛋白B之间的关系。方法分别用比色法检测正常对照组和肾病综合征组血清铁以及血脂（总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇）水平，用免疫比浊法检测载脂蛋白AI、载脂蛋白B和脂蛋白（a）。结果对照组与肾病综合征组间，除血清铁差异无统计学意义外（P〉0．05），其余血脂各项指标差别均有统计学意义（P〈0．01）。对照组中，血清铁与脂蛋白（a）具有相关关系（r=0．277，P〈0．05），差异有统计学意义；肾病综合征组中血清铁与载脂蛋白AI（r=0．628，P〈0．01）和载脂蛋白B（r=0．48，P〈0．05）具有相关性，差异有统计学意义外，与其余诸项血脂指标无相关性，差异无统计学意义。结论肾病综合征患者中血清铁的水平可能与载脂蛋白AI和载脂蛋白B的紊乱有关系，其生物学意义尚待进一步研究。

载脂蛋白B/载脂蛋白AI比值与冠状动脉严重程度的相关性

目的探讨载脂蛋白B与载脂蛋白AI比值与冠状动脉严重程度的相关性及其临床意义。方法选择本院收治的临床诊断为冠心病的患者(冠心病组)与非冠心病者(对照组)各200例,采用免疫比浊法测定其载脂蛋白B、AI,并计算比值。对冠心病患者行冠状动脉造影检查,冠状动脉病变严重程度采用Gensini评分。结果冠心病组载脂蛋白AI含量显著低于对照组,载脂蛋白B及B/AI比值显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论冠心病患者血清载脂蛋白B/AI比值与冠状动脉病变严重度积分呈显著正相关,对临床诊断冠心病及预测冠心病严重程度具有重要的意义。

人血清载脂蛋白AI的大量分离、纯化及鉴定

采用正常人血清为原料，利用硫酸右旋糖酐浓缩血清、密度梯度区带离、脱脂和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１５０柱层析技术，获得人血清载脂蛋白ＡＩ的纯品，经十二烷基磺酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳、等电聚焦电泳、分子量测定等证明，所提取的载脂蛋白ＡＩ为纯品，分子量为２８１８０。本方法的优点是，通过浓缩血清，减少了离心次数，缩短了制备时间，且分离效果好，为大量制备纯净的载脂蛋白ＡＩ提供了一种新的方法。

雌二醇对雌性大鼠血清载脂蛋白AI和B含量的影响

为观察雌二醇对大鼠血清载脂蛋白AI和B含量的影响，用免疫比浊法和放射免疫分析法检测了性周期雌性大鼠、去卵巢大鼠和去卵巢注射雌二醇大鼠的血清雌二醇、载脂蛋白AI和B的水平。结果发现，在大鼠性周期中，血清雌二醇与载脂蛋白AI水平均呈周期性波动，两者的变化趋势一致。大鼠卵巢摘除后15天，血清雌二醇与载脂蛋白AI含量较未摘除卵巢大鼠显著降低（分别为0．82±0．32ng／L和0．51±0.11g／L），而注射雌二醇大鼠两者的含量又明显增加（分别为116．94±38．91ng／L和1．80±0．21g／L，P＜0.01）。但是，在性周期中、摘除卵巢和注射雌二醇大鼠血清中载脂蛋白B的含量无明显变化。提示，雌二醇可能调节雌性大鼠血中载脂蛋白AI的含量。

2型糖尿病患者中载脂蛋白M与脂蛋白a、载脂蛋白AI的关系研究

目的研究2型糖尿病患者中载脂蛋白M(apolipoprote in M,apoM)与脂蛋白及其他载脂蛋白的相关关系。方法用dot-b lotting法检测73例2型糖尿病患者(36男37女)血浆中apoM的水平,酶法及比浊法检测糖尿病患者血浆中载脂蛋白AI(apoAI)、载脂蛋白B(apoB)、脂蛋白a[Lp(a)]、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)以及空腹血糖(G lu),ELISA法测定血浆中瘦素的含量,对apoM与其它脂蛋白、载脂蛋白、瘦素的关系作相关性分析。结果男性病例中,apoM负相关于甘油三酯(r=-0.364 8,P=0.028 7),但与年龄成正相关(r=0.375 2,P=0.026 4)。女性病例中apoM负相关于血浆Lp(a)水平(r=-0.442 0,P=0.007 0),正相关于apoAI/apoB(r=0.458 3,P=0.004 3)。男女病例混合分析发现,apoM负相关于Lp(a)(r=-0.338 5,P=0.003 0),正相关于apoAI(r=0.232 1,P=0.046 6)、瘦素(r=0.247 1,P=0.032 6)和年龄(r=0.242 0,P=0.035 2)。结论apoM负相关于Lp(a),正相关于apoAI、apoAI/apoB,提示了apoM可能是抑制动脉粥样硬化的保护因子。如果体内apoM与apoAI同时升高,可能会降低体内Lp(a)水平。

载脂蛋白AI、B与糖尿病视网膜病变关系的研究

目的了解载脂蛋白AI(apoAI)、载脂蛋白B(apoB)与糖尿病视网膜病变的关系。方法用火箭免疫电泳法对24例2型糖尿病视网膜病变(DR)患者,28例2型糖尿病眼底正常者(DM)和50名健康者血液进行了载脂蛋白AI、载脂蛋白B的测定。结果DR组的apoAI,apoAI/apoB值均低于DM组( P <0.05及<0. 01),apoB值高于DM组( P <0.01)。结论载脂蛋白AI、载脂蛋白B代谢异常可能是糖尿病视网膜病变的致病因素之一。

鸡血清载脂蛋白AI浓度单向免疫扩散测定法的研究

介绍一种特异、灵敏、简便的蛋鸡血清载脂蛋白AI(apoAI)浓度单向免疫扩散测定法。用磷钨酸镁反复沉淀制备得高密度脂蛋白,经纯化、B radford法蛋白定量后(3.208 mg/mL),作为新西兰白兔的免疫原及载脂蛋白AI测定的标准。本室免疫所得兔抗鸡apoAI抗血清制成免疫琼脂板,加样培养进行单向免疫扩散测定。本法的标准曲线相关性良好,可信性、重复性满意。

哈萨克族原发性高血压患者载脂蛋白B/载脂蛋白AI比值的影响因素

目的探讨影响哈萨克族原发性高血压患者血清载脂蛋白B/载脂蛋白AI(ApoB/ApoA1)比值的相关因素。方法随机选取2013年8月至2015年3月在新疆沙湾县流行病学调查的217例哈萨克族原发性高血压患者,按血清ApoB/ApoA1比值水平分为≥0.9组(89例)与<0.9组(128例),收集两组患者的血压、体质量指数(BMI)、尿酸(UA)、同型半胱氨酸(Hcy)等资料。相关性分析采用Pearson直线相关分析,多因素分析采用Logistic回归分析。结果≥0.9组患者的UA、Hcy、舒张压(DBP)、腰围(WC)、BMI均高于<0.9组,差异均有统计学意义(P<0.05)。ApoB/ApoA1比值与UA、Hcy、腰身比(WHt R)、WC、BMI呈正相关(r分别为0.216、0.217、0.219、0.259、0.162,P<0.05)。Logistic回归分析显示:Hcy、BMI是ApoB/ApoA1比值升高的独立危险因素(OR值分别为1.055、1.133,P<0.05)。结论在哈萨克族原发性高血压患者中,Hcy和BMI与ApoB/ApoA1比值的升高密切相关。

高糖膳食对载脂蛋白AI基因-75 G/A多态性不同基因型健康青年血脂及载脂蛋白比值的影响

目的探讨高糖膳食对载脂蛋白AI基因(APOA1)启动子区-75 G/A多态性不同基因型健康青年血脂及载脂蛋白比值的影响。方法给予56名平均年龄为(22.89±1.80)岁的健康青年7 d平衡膳食和6 d高糖膳食。平衡膳食的热量组成为15%蛋白质、31%脂肪和54%碳水化合物;高糖膳食的热量组成为15%蛋白质、15%脂肪和70%碳水化合物。于膳食干预的第1天、第8天和第14天清晨抽取12 h空腹静脉血,测定血脂及载脂蛋白浓度,计算甘油三酯(TG)/高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、总胆固醇(TC)/HDL-C、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)/HDL-C及载脂蛋白B100(APOB100)/载脂蛋白AI(APOAI)的比值。提取全基因组DNA,聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性法分析APOA1-75 G/A多态性。结果基础值时,血脂及载脂蛋白比值在男性基因型之间的差异无统计学意义(P>0.05);在女性中,A等位基因携带者LDL-C/HDL-C显著高于GG基因型受试者(P<0.05)。高糖膳食后,TC/HDL-C在各性别和基因型分组中均显著降低(P<0.01)。LDL-C/HDL-C在男性各基因型中显著降低(P<0.05);在女性中,LDL-C/HDL-C仅在A等位基因携带者中显著降低(P<0.01),在GG基因型受试者中差异无统计学意义(P>0.05)。结论 APOA1-75 G/A多态性A等位基因可能对其女性携带者的LDL-C/HDL-C比值有一定的影响。

利用大肠杆菌高效表达人载脂蛋白AI及其性质分析

载脂蛋白AI(apolipoproteinAI,apoAI)是高密度脂蛋白HDL的主要组成成分 ,流行病学研究表明apoAI的含量决定血浆中HDL的高低 ,而HDL具有胆固醇逆向转运的功能 ,起到降低冠心病发生概率的作用。通过大肠杆菌表达系统来生产apoAI的蛋白原proapoAI,蛋白的表达形式为包涵体 ,通过疏水柱进行柱上复性。同时在proapoAI和apoAI之间设计一个酸水解位点 ,通过将蛋白原proapoAI进行酸水解来得到成熟蛋白apoAI。最终得到的成熟蛋白apoAI在结构分析和脂结合特性上都与天然的apoAI相似 ,从而为该蛋白的工业生产上提供了一个良好的基础。

激活巨噬细胞抑制载脂蛋白AI促细胞胆固醇流出能力

为探讨巨噬细胞活化对载脂蛋白ＡＩ促胆固醇外流能力的影响，用炎症诱发剂活化鼠腹腔巨噬细胞，３Ｈ标记乙酰低密度脂蛋白作泡沫细胞诱导物，巨噬细胞衍化的泡沫细胞与载脂蛋白ＡＩ孵育一段时间后，测定由细胞释放入培养基中的３Ｈ标记胆固醇量。结果发现，载脂蛋白ＡＩ浓度为２０ｍｇ／Ｌ时，从被活化的细胞释放至基质中的３Ｈ标记胆固醇量［（４．１５±０．４１）×１０－１ｄｐｍ／ｇ细胞蛋白］显著低于未被活化的细胞［（５．６９±０．１２）×１０－１ｄｐｍ／ｇ细胞蛋白］（Ｐ＜０．０１），但高密度脂蛋白清除细胞胆固醇能力两组细胞无显著差异。提示巨噬细胞活化可显著抑制载脂蛋白ＡＩ促细胞胆固醇外流能力。