APOE4通过Calpain/p35-p25/Cdk5增加tau蛋白磷酸化

目的:探究载脂蛋白APOE4对小鼠海马组织中tau蛋白磷酸化的作用.方法:采用6月龄人载脂蛋白APOE3,APOE4转基因纯合小鼠,用Western Blot检测小鼠海马组织中tau蛋白的磷酸化程度及Calpain蛋白、p35/25、CDK5等蛋白表达水平.使用脑立体定位术向小鼠侧脑室注射Ca^(2+)螯合剂EGTA或二甲基亚砜DMSO两次,给药时间间隔4小时,第二次给药结束后两小时内处死小鼠.检测海马中Calpain蛋白、CDK5、p35/25及tau蛋白的磷酸化的变化情况.结果:①与野生型小鼠和APOE3-TR小鼠相比,APOE4-TR小鼠海马中tau蛋白在Ser396,Thr181及Thr231位点的磷酸化均显著性增高,同时Calpain2、p35/25和CDK5的表达水平也增加.②使用Ca^(2+)螯合剂EGTA后,与对照DMSO给药组相比,Ca^(2+)螯合剂EGTA给药组小鼠海马组织中tau蛋白在Ser396位的磷酸化显著下降,但未检测到tau蛋白在Thr181及Thr231位点的磷酸发生显著性变化,同时Calpain 2蛋白、p35/25和CDK5的表达水平降低.结论:人载脂蛋白APOE4引起小鼠海马tau蛋白磷酸化异常增高,并且可能是通过Cal-pain/p35-p25/CDK5信号通路调控tau蛋白Ser396位点磷酸化.