糖尿病载脂蛋白E基因缺陷小鼠动脉粥样硬化斑块炎症反应增强

目的观察伴糖尿病的载脂蛋白E基因缺陷雄性小鼠自发性动脉粥样硬化斑块形态和分子生物学特性的变化。方法链脲霉素60mg/(kg·d)腹腔注射诱导载脂蛋白E基因缺陷雄性小鼠糖尿病组,非糖尿病组给予等量缓冲液注射。饲养14周后处死小鼠,分别于建模前和处死前测定小鼠体重、血清总胆固醇、血糖、血清糖基化终产物水平。应用Westernblot检测主动脉环氧化酶2、前列腺素合成酶微粒体亚单位Ⅰ型、基质金属蛋白酶9、糖基化终产物受体表达水平。应用HE、油红O、天狼星红染色分析斑块面积、脂质、胶原含量。应用免疫组织化学检测斑块内巨噬细胞、T细胞、血管平滑肌细胞α肌动蛋白密度,环氧化酶2、前列腺素合成酶微粒体亚单位Ⅰ型、基质金属蛋白酶9、糖基化终产物受体表达水平。结果与非糖尿病组比较,糖尿病组血清总胆固醇明显增高(P<0.01),血清糖基化终产物增高(P<0.05);糖尿病组斑块面积增大,斑块内巨噬细胞密度、环氧化酶2、前列腺素合成酶微粒体亚单位Ⅰ型表达增多(P<0.05),T细胞密度、脂质含量、糖基化终产物受体、基质金属蛋白酶9表达显著升高(P<0.01),胶原含量、血管平滑肌细胞密度显著降低(P<0.01)。结论载脂蛋白E基因缺陷糖尿病小鼠较非糖尿病小鼠动脉粥样硬化更严重,斑块内炎症反应明显增强,这可能是糖尿病动脉粥样硬化斑块不稳定增加的机制之一。

肝X受体激动剂对高脂载脂蛋白E基因缺陷小鼠动脉壁一氧化氮合酶、增殖细胞核抗原和纤溶酶原激活物抑制剂1表达的影响

目的研究肝X受体激动剂3β-羟基-5α,6α-环氧胆烷酸甲酯和T-0901317对高脂载脂蛋白E基因缺陷小鼠动脉壁一氧化氮合酶、增殖细胞核抗原、纤溶酶原激活物抑制剂1表达的影响。方法以高脂饲养载脂蛋白E基因缺陷小鼠为动脉粥样硬化模型,分为无药对照组、3β-羟基-5α,6α-环氧胆烷酸甲酯干预组[10 mg/(kg.d)]和T-0901317干预组[10 mg/(kg.d)],每组6只小鼠,灌胃6周。用免疫组织化学SP法检测主动脉壁中诱导型一氧化氮合酶、内皮型一氧化氮合酶、增殖细胞核抗原、纤溶酶原激活物抑制剂1蛋白的表达。结果药物干预的两组主动脉壁中诱导型一氧化氮合酶的表达均显著低于对照组(P<0.01),而血管内皮细胞中内皮型一氧化氮合酶的表达均显著高于对照组(P<0.01)。各组增殖细胞核抗原和纤溶酶原激活物抑制剂1的表达无显著性差异(P>0.05)。结论肝X受体激动剂3β-羟基-5α,6α-环氧胆烷酸甲酯和T-0901317均可促进血管内皮细胞中内皮型一氧化氮合酶的表达,抑制动脉壁中诱导型一氧化氮合酶的表达。提示肝X受体激动剂还可通过调脂以外的其它途径,如抑制炎症反应和保护内皮功能等方面,发挥其抗动脉粥样硬化作用。

莱菔子水溶性生物碱对载脂蛋白E基因缺陷小鼠胸主动脉内皮型一氧化氮合酶、核因子-кB的影响

目的探讨莱菔子水溶性生物碱对载脂蛋白E基因缺陷小鼠胸主动脉内皮型一氧化氮合酶、核因子-κB的影响。方法将载脂蛋白E基因敲除小鼠(高脂饮食)随机分为5组,为莱菔子水溶性生物碱高、中、低剂量组,血脂康组,模型组,每组6只。另设C57BL/6J小鼠组,6只。给药时间为8周。结果内皮型一氧化氮合酶:模型组140.67,C57BL/6J 102.33,高剂量组110.83,中剂量组119.33,低剂量组128.83,血脂康组110.5;核因子-κB:模型组46.99,C57BL/6J 132.17,高剂量组95.99,中剂量组119.33,低剂量组128.83,血脂康组110.5。结论莱菔子水溶性生物碱具有抗动脉粥样硬化作用。

有氧运动对载脂蛋白E基因缺陷小鼠主动脉C反应蛋白表达水平的影响

目的:本实验以载脂蛋白基因缺陷(ApoE-/-)小鼠为研究对象,观察其在动脉粥样硬化(AS)发病过程中有氧运动对脂联素和C反应蛋白(CRP)的影响,以期探讨有氧运动通过脂联素-CRP发挥抗AS作用的机制。方法:8周龄雄性ApoE-/-小鼠20只,随机分为安静组(C)10只和运动组(E)10只。两组小鼠均饲以高脂饲料,C组不训练,E组小鼠进行14周跑台运动。14周末取材比较两组小鼠主动脉管壁及斑块的病理变化,检测比较其脂肪组织脂联素mRNA表达、血清脂联素水平及主动脉CRP表达、血清CRP水平。结果:E组小鼠与C组小鼠相比,主动脉血管壁纤维弹力板和内膜较完整,AS斑块面积相对较小。E组小鼠脂肪组织脂联素mRNA表达及血清水平较C组显著增加,主动脉CRP的表达及血清水平较C组小鼠则有显著降低,且主动脉CRP的表达与脂联素mRNA表达及血清水平呈显著负相关。结论:有氧运动可以通过提高血清脂联素、脂联素mRNA表达水平的途径,有效降低血清CRP和主动脉CRP的表达,从而发挥延缓AS发展的作用,这可能是运动通过脂联素-CRP发挥抗AS作用的另一机制。

高胆固醇喂养载脂蛋白E基因缺陷小鼠的心脏超声生物显微镜成像分析及病理变化

目的应用超声生物显微镜(UBM)分析高脂饮食喂养的载脂蛋白E基因敲除(Apo E-/-)小鼠的心脏形态和功能,并观察心肌胶原的变化,以探讨胆固醇增高对心脏的影响。方法选择自8周龄起饲以高脂饮食喂养至16周龄和24周龄的Apo E-/-小鼠各6只,以16周和24周龄C57BL/6小鼠各6只为对照组。采用UBM观察并分析小鼠心脏、大血管的结构及血流频谱,对左心收缩及舒张功能进行评价。分析两组小鼠血脂水平,并观察24周龄Apo E-/-小鼠心肌的胶原改变。结果同周龄的Apo E小鼠与对照组比较,UBM显示的心脏、大血管二维径线测值及各瓣口血流脉冲多普勒测值间差异无统计学意义(P>0.05)。Apo E组小鼠血清中总胆固醇(TC)及甘油三酯(TG)水平较同周龄Apo E组小鼠明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。24周龄Apo E-/-小鼠心肌有胶原增加,Ⅰ型胶原增多。结论 UBM可很好地显示小鼠心脏及大血管,高脂饮食Apo E-/-小鼠血脂水平明显升高,24周龄Apo E-/-小鼠心肌有少量胶原,但目前的UBM观测指标难以反映小鼠心肌病理改变。

运动影响载脂蛋白E基因缺陷小鼠抗氧化和抗动脉粥样硬化的机制

目的探讨有氧运动对载脂蛋白ApoE基因缺陷小鼠动脉粥样硬化斑块形成、血清一氧化氮(NO)浓度、血清及肝脏超氧化物歧化酶(SOD)活性以及胸主动脉脂质过氧化的影响,以及有氧运动调节血脂代谢以外的抗动脉粥样硬化的可能机制。方法10周游泳运动后,测定动脉粥样硬化斑块面积,血清NO浓度,血清及肝脏SOD活性;应用冷Schiff组织化学法结合计算机模拟图像定量分析法检测胸主动脉的脂质过氧化反应,脂质过氧化阳性反应区呈紫红色。常规HE染色;胸主动脉矢状面油红-O大体染色。结果运动组ApoE基因缺陷小鼠动脉粥样硬化斑块平均面积小于对照组(P<0.01);血清NO浓度(P<0.01)及SOD活性(P<0.05)高于对照组,但肝脏SOD活性与对照组相比没有显著性差异(P=0.056);胸主动脉的脂质过氧化程度显著低于对照组(P<0.01);血管壁及内膜损伤程度相对较轻。结论有氧运动通过增强机体抗氧化能力,提高生物活性形式的NO浓度及SOD活性,改善血管内皮功能,延缓动脉粥样硬化斑块的发生发展,可能属独立于血脂调节作用以外的其他抗动脉粥样硬化机制。

氯沙坦对载脂蛋白E基因缺陷小鼠氧化应激及动脉粥样硬化斑块稳定性的影响

目的观察血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂氯沙坦对载脂蛋白E基因缺陷小鼠氧化应激及主动脉粥样斑块中血管平滑肌细胞、巨噬细胞数量影响,探讨氯沙坦稳定斑块的作用及可能机制。方法27只8周龄雄性载脂蛋白E基因缺陷小鼠随机等分三组:对照组、氯沙坦低剂量组[5 mg/(kg.d)]及氯沙坦高剂量组[25 mg/(kg.d)],20周后处死动物。常规生物化学法测定血清一氧化氮含量、超氧化物歧化酶活性、丙二醛及血脂水平;采用HE染色法观察小鼠主动脉粥样硬化病变形成;免疫组织化学法分析粥样斑块中血管平滑肌细胞和巨噬细胞数量。结果三组间血脂水平无显著性差异;与对照组相比,氯沙坦低、高剂量组血清一氧化氮水平和超氧化物歧化酶活性均明显升高(P<0.01)、丙二醛水平显著减低(P<0.05和P<0.01),且氯沙坦低剂量和高剂量组间也有明显差异(P<0.01);氯沙坦干预后动脉粥样斑块纤维帽厚,脂质核心小;氯沙坦治疗组斑块中平滑肌细胞数量显著增加(P<0.01)、巨噬细胞数量明显降低(P<0.01),且氯沙坦高剂量组较低剂量组作用更明显(P<0.01)。结论氯沙坦在不影响血脂水平情况下,可通过减轻载脂蛋白E基因缺陷小鼠氧化应激,增加斑块中平滑肌细胞数量,降低巨噬细胞数量,可能起到稳定粥样斑块作用,且随剂量增加作用增强。

氯沙坦对载脂蛋白E基因缺陷小鼠动脉粥样硬化的影响

目的观察血管紧张素II 1型受体拮抗剂氯沙坦对载脂蛋白E基因缺陷小鼠主动脉粥样硬化病变形成的影响。方法27只雄性载脂蛋白E基因缺陷小鼠随机分成3组,每组9只:对照组、氯沙坦低剂量组[5 mg/(kg.d)]及氯沙坦高剂量组[25 mg/(kg.d)],灌胃,1次/d,0.3 m l,16周后处死动物。酶法测定血脂水平,比色法测定血清一氧化氮含量、超氧化物歧化酶活力和丙二醛水平;透射电镜观察主动脉病理形态学结构;采用HE染色法,计算机图像扫描、定量分析主动脉斑块大小及斑块占管腔面积之比。结果3组间血脂水平无显著性差异;与对照组比较,氯沙坦低、高剂量组血清一氧化氮水平和超氧化物歧化酶活力均显著升高(P<0.01)、丙二醛水平显著减低(P<0.05和P<0.01),且两治疗组间也有显著差异(P<0.01);氯沙坦干预后主动脉内皮损伤明显轻于对照组;氯沙坦组主动脉斑块面积及斑块面积与管腔面积之比值均显著低于对照组(P<0.01),且高剂量组较低剂量组作用更显著(P<0.01)。结论氯沙坦可通过增强载脂蛋白E基因缺陷小鼠抗氧化能力减轻主动脉粥样硬化的程度,且高剂量较低剂量作用更明显,而与其调节血脂代谢作用无关。

载脂蛋白E基因缺陷小鼠动脉粥样硬化斑块面积与血清抗氧化低密度脂蛋白的抗体水平(英文)

背景:低密度脂蛋白的氧化是动脉粥样硬化发生和发展过程中关键的影响因素,血清抗氧化低密度脂蛋白抗体的检测方法对动脉粥样硬化斑块的评估价值如何?目的:探讨载脂蛋白E基因缺陷小鼠血清抗氧化低密度脂蛋白抗体的检测方法,并分析血清抗氧化低密度脂蛋白抗体水平对载脂蛋白E基因缺陷小鼠动脉粥样硬化斑块面积的评估价值。设计:单因素方差分析(分组对照实验)。单位:一所大学的营养与代谢性疾病实验室。对象:apoE基因缺陷小鼠作为阳性组(品系C57BL/6J,n=15),正常小鼠作为对照组(品系C57BL/6J,n=15)。干预:两组实验小鼠在层流架中分笼喂养,自由饮水摄食,16周后自小鼠眼眶静脉采血,分离小鼠血清。分离载脂蛋白E基因缺陷小鼠和正常小鼠血清,用酶联免疫吸附法检测血清氧化低密度脂蛋白抗体水平;用油红O染色法和图像分析法测量小鼠动脉粥样硬化斑块面积。主要观察指标:载脂蛋白E基因缺陷小鼠和正常小鼠小鼠氧化低密度脂蛋白的水平和动脉粥样斑块面积。结果:apoE基因缺陷小鼠血清抗氧化低密度脂蛋白的水平显著高于正常小鼠的水平(0.079±0.028)%,(0.012±0.001)%,F=10.666,P<0.01;载脂蛋白E基因缺陷小鼠的动脉粥样硬化斑块面积(26.25±9.20)%也显著高于正常小鼠(0%),且二者之间呈显著性相关,r=0.638,P<0.01。

内皮脂酶在载脂蛋白E基因缺陷小鼠主动脉粥样斑块中的表达

目的内皮脂酶（endothelial lipase，EL）与动脉粥样硬化的发生、发展有密切关系。本研究探讨高脂喂养和apoE基因缺陷（apoE-，-）小鼠EL表达的差异。方法取apoE-/-小鼠作为研究对象，以普通饲料和高脂喂养正常小鼠为时照组，测定各组小鼠主动脉壁斑块的变化，免疫组化检测EL在主动脉的表达。结果正常喂养的apoE-/-小鼠的主动脉形成明显的斑块，高脂喂养小鼠没有形成斑块，但血管壁平滑肌细胞出现增殖；免疫组化检测显示普通饲料喂养的apoE-/-小鼠EL有明显表达，而高脂和普通饲料组喂养的正常小鼠没有表达。结论血管壁粥样斑块中EL的表达可能是促进apoE-/-小鼠动脉粥样斑块形成的主要原因。

冠状动脉内干细胞灌注对载脂蛋白E基因缺陷小鼠离体心脏血液动力学影响的实验研究

目的探讨冠状动脉内干细胞灌注对载脂蛋白E基因缺陷小鼠离体心脏血液动力学的影响。方法设计Langendorff离体心脏灌注模型,比较接受低剂量（1.0×10~6）、高剂量（2.5×10~6）干细胞灌注时及灌注后5 min、15 min、30 min两组载脂蛋白E基因缺陷小鼠（低剂量组、高剂量组）和两组WT小鼠心脏（低剂量对照组、高剂量对照组）的血流动力学指标。同时比较注射后5 min、15 min、30 min时,两组心脏细胞的血流动力学指标。结果四组T1~T4时刻的心率均显著低于T0时刻差异有统计学意义（P〈0.05）;且高剂量组的心率变化最明显。四组在进行细胞灌注后,LVEDP水平均显著升高,＋dp/dt和-dp/dt水平均显著降低,且均以高剂量组的上升或下降幅度最为显著。细胞灌注后,四组的冠脉流量均较灌注前显著降低差异有统计学意义（P〈0.05）;且以高剂量组的降低幅度最明显,与其他三组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。灌注后30 min,四组的漏出液细胞含量均达到了60%以上。结论冠脉内干细胞灌注会对载脂蛋白E基因缺陷小鼠离体心脏的血流动力学产生不良影响,并且灌注剂量越大,不良影响越显著。

高热量饮食和年龄对载脂蛋白E基因敲除小鼠脑功能的影响

目的探讨高热量饮食和年龄对载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠脑功能的影响。方法选取8月龄成年ApoE^(-/-)小鼠和18月龄老年ApoE^(-/-)小鼠共20只,随机分为正常饮食成年组、正常饮食老年组、高热量饮食成年组、高热量饮食老年组,每组5只。正常饮食成年组、正常饮食老年组小鼠喂食实验室标准饲料,高热量饮食成年组、高热量饮食老年组小鼠喂食高脂饲料,干预8周。用体质量监测和葡萄糖耐量实验测试小鼠体质量、血糖变化,核磁共振波谱检测海马和下丘脑N-乙酰天冬氨酸(NAA)、胆碱(Cho)含量,Y迷宫和旷场实验检测认知功能,Western blot检测脑组织突触体相关蛋白25(SNAP-25)、突触素(synaptophysin)、突触后致密蛋白95(PSD-95)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞介素1β(IL-1β)表达。结果与正常饮食成年组比较,高热量饮食成年组海马NAA、下丘脑Cho和NAA、自发交替率、SNAP-25、synaptophysin、PSD-95表达降低,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),iNOS、IL-1β表达升高,差异有统计学意义(P<0.01);与正常饮食成年组比较,正常饮食老年组海马NAA、下丘脑Cho、SNAP-25、synaptophysin、PSD-95表达降低(P<0.05,P<0.01),iNOS、IL-1β表达升高(P<0.01);与正常饮食老年组比较,高热量饮食老年组海马和下丘脑Cho和NAA、中心路程/总路程、SNAP-25、synaptophysin、PSD-95表达降低(P<0.05,P<0.01),iNOS、IL-1β表达升高(P<0.01);与高热量饮食成年组比较,高热量饮食老年组海马NAA、中心路程/总路程、平均速度、synaptophysin表达降低(P<0.05,P<0.01),iNOS、IL-1β表达升高(1.61±0.10 vs 1.35±0.13,2.04±0.08 vs 1.54±0.11,P<0.05,P<0.01)。结论高热量饮食导致ApoE^(-/-)小鼠代谢障碍和神经炎症,抑制突触蛋白表达引起认知功能障碍;长期高热量饮食和年龄增加促进ApoE^(-/-)小鼠脑功能衰退。

载脂蛋白E基因缺陷(C57BL/6J-ApoE)小鼠血脂及病理组织学观察

目的观察我部饲养的不同年龄、不同性别的载脂蛋白E基因缺陷小鼠的血脂及病理组织学状况。方法选取2月龄和6月龄C57BL/6J-ApoE小鼠,以C57BL/6J小鼠为对照组,测定血清中甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白和载脂蛋白B的含量;小鼠全心脏液氮骤冷,冰冻切片,油红O染色,观察动脉粥样硬化斑块的形成。结果C57BL/6J-ApoE小鼠血清中总胆固醇和低密度脂蛋白的含量显著高于同龄同性别C57BL/6J小鼠,高密度脂蛋白的含量显著低于同龄同性别C57BL/6J小鼠;不同性别、年龄的C57BL/6J-ApoE小鼠血脂变化差异显著;ApoE小鼠血清中载脂蛋白B水平显著高于同龄同性别C57BL/6J小鼠,且随年龄增长显著升高。6月龄ApoE小鼠主动脉切面可见脂质斑块。结论该模型小鼠较C57BL/6J小鼠血清中总胆固醇和低密度脂蛋白含量明显升高,高密度脂蛋白含量明显降低;血脂变化与年龄性别有关。6月龄时已形成脂质斑块,是研究动脉粥样硬化等心血管疾病较佳的动物模型。

有氧运动对载脂蛋白E基因缺陷小鼠颈动脉粥样硬化斑块易损性的影响

目的探讨有氧运动对载脂蛋白E（ApoE）基因缺陷小鼠颈动脉粥样硬化斑块易损性及斑块内基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶-14（MMP-14）水平变化的影响。方法将80只雄性载脂蛋白E基因缺陷小鼠随机分为有氧运动组（n=40）及对照组（n=40），2组小鼠均通过颈动脉套管术构建颈动脉粥样硬化动物模型。造模成功4周后，有氧运动组开始进行电动跑台有氧运动训练，每日1次，每次1h，持续训练8周，对照组限制活动8周。造模成功12周后，测量2组小鼠的血脂水平，评价颈动脉粥样硬化斑块形态结构，测量斑块面积和纤维帽厚度，对颈动脉斑块进行脂质含量、胶原含量检测，计算斑块易损指数。并通过免疫组织化学方法检测斑块内MMP-9、MMP-14水平。逆转录一多聚酶链反应（RT—PCR）检测MMP-9、MMP-14mRNA的表达量。免疫印记Westernblot检测斑块内MMP-9、MMP-14蛋白表达。结果经血液学检测，2组间血脂水平差异无统计学意义（P〈0．05）；经病理学检测2组间的斑块面积差异无统计学意义（P〈0．05），而有氧运动组纤维帽厚度、帽／核比值、胶原含量均明显增加，与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。另，2组间的斑块破裂率和斑块易损指数差异亦有统计学意义（P〈0．05）。有氧运动组斑块内MMP-9和MMP-14的表达量均显著低于对照组（P〈0．05）；有氧运动组斑块内MMP-9mRNA和MMP-14mRNA的表达量亦显著低于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）；有氧运动组颈动脉斑块组织中MMP-9蛋白和MMP-14蛋白的表达量显著低于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论有氧运动降低ApoE基因缺陷小鼠颈动脉粥样硬化斑块内MMP-9，MMP-14表达，通过增强斑块稳定性，减弱易损性，起到抗动脉粥样硬化作用。

CTLA-4Ig融合蛋白对ApoE基因缺陷小鼠动脉粥样硬化的抑制作用

【目的】探讨CTLA-4Ig融合蛋白对高脂饮食饲养的载脂蛋白E基因缺陷小鼠(ApoE-/-)动脉粥样硬化病变的抑制作用。【方法】25只10周龄ApoE-/-小鼠,高脂饮食饲养4周后,随机取5只验证AS病变(对照组);剩余20只随机分为4组(每组5只),继续高脂饮食饲养,分别采用CTLA-4Ig、PBS、IgG1腹腔注射,第4组不予处理;8周后取小鼠主动脉进行病理学检查,检测AS相关指标,包括斑块面积/管腔面积比、血管内膜/中膜厚度比,斑块内脂质、胶原和平滑肌细胞含量。【结果】高脂饮食饲养4周后,出现明显AS病变。继续高脂饮食饲养8周,形成典型AS斑块,CTLA-4Ig组、PBS组、IgG1组和空白组的斑块面积/管腔面积比分别为0.27±0.08、0.40±0.08、0.43±0.08和0.46±0.10,较4周时(0.05±0.01)明显增加(P<0.05),4组的血管内膜/中膜厚度比分别为2.6±0.6、6.0±0.9、5.7±0.8和5.9±0.6,高于对照组(0.5±0.1,P<0.05),4组斑块内脂质含量(%)分别为26.0±3.0、40.8±5.7、40.6±3.0和43.2±5.7较4周时明显增加(7.2±1.4,P<0.05)。采用CTLA-4Ig进行干预后,其斑块面积/管腔面积比、血管内膜/中膜厚度比和斑块内脂质含量显著低于PBS、IgG1和空白处理组(P<0.05),而后3组间上述指标的差异无统计学意义(P>0.05);CTLA-4Ig组斑块内胶原含量(16.0±1.1)%高于其他3组[(8.6±1.2)%、(9.2±1.5)%和(9.0±1.3)%,P<0.05)],其斑块内平滑肌细胞含量(11.8±1.0)%明显高于其他3组[(7.8±0.8)%、(7.5±0.9)%和(7.3±0.7)%,P<0.05)],另外3组间上述指标的差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】CTLA-4Ig融合蛋白能够阻抑高脂饮食饲养的ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化进程,其增加斑块内血管平滑肌细胞生成胶原作用有助增加AS斑块的稳定性。

血脂康对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响

观察血脂康对载脂蛋白E基因敲除小鼠高脂血症及动脉粥样硬化的影响。 16只 6周龄载脂蛋白E基因敲除小鼠随机分为高脂血症组 (n =8)和血脂康组 (n =8) ,相同遗传背景的同龄正常C5 7BL/ 6J小鼠为正常对照组 (n =8)。血脂康组每只灌服血脂康 4mg/d ,高脂血症组、正常对照组每只灌服生理盐水 0 .4mL/d。连续灌胃 14周后下腔静脉取血测血脂 ,再用 10 %福尔马林灌注后 ,取主动脉进行形态学观察及图像分析。结果发现 ,高脂血症组血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇水平明显高于正常对照组 (P <0 .0 5 ) ,但血脂康组血清总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白水平与高脂血症组相比则明显下降 (P <0 .0 5 )。图像分析结果发现 ,高脂血症组动脉粥样硬化病变显著 ,与正常对照组相比斑块总面积明显增加 (P <0 .0 5 ) ;光镜下多为粥样硬化期 ,管壁厚薄不均 ,可见由大量泡沫细胞形成的脂纹脂斑期病变和由大量泡沫细胞及胆固醇结晶形成的粥样斑块期病灶 ;血脂康组病变较高脂血症组明显减轻 ,血脂康组与高脂血症组相比斑块总面积明显减小 (P <0 .0 5 ) ,主要为早期粥样硬化 ,管壁厚薄较均匀 ,未见明显脂纹脂斑及粥样斑块期病灶 ;正常对照组为正常动脉壁 ,厚薄均匀 ,无动脉粥样硬化病灶。结果提示 。

解毒活血配伍方药对载脂蛋白E基因敲除小鼠血清超敏C反应蛋白的影响

目的观察解毒活血配伍方药对载脂蛋白E基因敲除[apolipoprotein E gene knock-out,ApoE(-/-)mice]小鼠血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)的影响。方法13周龄110只ApoE(-/-)小鼠分为高脂饲料组(98只,给予高脂饲料),普通饲料组(12只,给予普通饲料),同时设13周龄C57BL/6J小鼠作为正常对照组(12只,给予普通饲料)。19周后随机抽取高脂饲料ApoE(-/-)小鼠2只确认易损斑块形成后,剩余96只随机分为8组(模型组、解毒组、活血组、解毒活血配伍高、中、低剂量组、洛伐他汀组和血脂康组),每组12只。造模成功后每天给予药物干预,解毒组予虎杖提取物26·6mg/kg;活血组予芎芍胶囊110mg/kg;配伍高剂量组予虎杖提取物53·2mg/kg,芎芍胶囊220mg/kg;配伍中剂量组给予虎杖提取物26·6mg/kg,芎芍胶囊110mg/kg;配伍低剂量组给予虎杖提取物13·3mg/kg,芎芍胶囊55mg/kg;洛伐他汀组给予洛伐他汀3·3mg/kg;血脂康组给予血脂康0·2g/kg;以上药物根据剂量蒸馏水溶解,混匀后灌胃,每次0·4mL。模型组、普通饲料组、C57BL/6J小鼠对照组均灌服生理盐水0·4mL。用药17周后,下腔静脉取血,全自动酶标仪检测血清hs-CRP浓度。结果模型组血清hs-CRP水平显著高于正常对照组和普饲组(P<0·05,P<0·01);各给药组中,洛伐他汀组、解毒组和配伍高剂量组hs-CRP水平下降,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0·01);配伍高剂量组hs-CRP水平低于洛伐他汀组、血脂康组、单纯解毒或活血组及配伍中、低剂量组;解毒组hs-CRP水平低于活血组(P<0·01)。结论解毒活血配伍方药可降低ApoE(-/-)小鼠血清hs-CRP水平。

载脂蛋白E基因敲除小鼠不同周龄动脉粥样硬化的病理变化

目的研究载脂蛋白E基因敲除小鼠不同时间段的动脉粥样硬化的病理进展,探讨不同饮食对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化进展的影响。方法采用6周龄40只载脂蛋白E基因敲除小鼠,20只给予高脂膳食饲料,20只给予普通饮食,分别于15周龄、19周龄、24周龄、28周龄、36周龄5个时间段各取4只麻醉处死做病理检测。结果随着时间进展,载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化程度逐渐加重,经历了从脂质条纹到粥样斑块形成典型的动脉粥样硬化病理过程;高脂饮食组比普通饮食组的载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化病理改变严重。结论载脂蛋白E基因敲除小鼠是研究动脉粥样硬化的可靠模型,高脂饮食可以加速载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化的病理进程。

解毒活血中药配伍对载脂蛋白E基因敲除小鼠主动脉NF-κB与MMP-9表达的调控作用

目的观察解毒活血中药配伍对载脂蛋白E基因敲除小鼠[apolipoprotein E knocked-out mice, ApoE(-/-)mice]主动脉核因子-κB(NF-κB)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达水平的调控作用。方法13周龄ApoE(-/-)小鼠分为高脂组(给予高脂饲料)和普通饲料组(给予普通饲料),同时设13周龄C57 BL/6J小鼠对照组(给予普通饲料)。19周后进行干预,普通饲料模型组、C57BL/6J小鼠对照组灌服生理盐水,高脂组随机分为解毒组[灌服虎杖苷26．6 mg／(kg·d)],活血组[灌服芎芍胶囊110 mg／(kg·d)],解毒活血配伍高剂量组[灌服虎杖提取物53．2 mg／(kg·d),芎芍胶囊220 mg／(kg·d)];解毒活血配伍中剂量组[灌服虎杖提取物26．6 mg／(kg·d),芎芍胶囊110 mg／(kg·d)];解毒活血配伍低剂量组[灌服虎杖提取物13．3 mg／(kg·d),芎芍胶囊55 mg／(kg·d)],洛伐他汀组[灌服洛伐他汀3．3 mg／(kg·d)],高脂饲料模型组(灌服生理盐水)。17周后,取主动脉做常规石蜡切片,免疫组化观察其NF-κB和MMP-9表达的程度。结果模型组ApoE(-/-)小鼠主动脉及粥样斑块NF-κB和MMP-9表达明显增加,虎杖苷、芎芍胶囊、洛伐他汀及解毒活血配伍治则的虎杖苷与芎芍胶囊配伍均可降低其主动脉NF-κB和MMP-9表达(P<0．01),且以解毒活血配伍高剂量组疗效最好(P<0．01)。结论解毒活血配伍可降低ApoE(-/-)小鼠主动脉NF-κB和MMP-9表达,且优于单纯解毒和活血组。